中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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蝉翼藤对大鼠免疫功能的调节作用
背景:临床以环抱素A为代表的免疫抑制药,多数应用于器官移植后抗排斥反应时缺乏选择性和特异性,对初次免疫应答反应的抑制作用较强,对再次免疫应答反应抑制作用较弱.目的:采用环抱素A免疫抑制剂加入脾淋巴细胞中建立免疫功能低下细胞模型,观察中药含蝉翼藤的大鼠血清对免疫抑制淋巴细胞免疫功能的调节效应.设计:随机对照中药血清药理学实验.时间及地点:实验于2007-06/09在广西医科.大学医学科学实验中心完成.材料:健康成年Wistar大鼠40只制备含蝉翼藤血清,健康成年昆明小鼠脾细胞为受药对象.蝉翼藤水煎液由玉林制药厂惠赠,水煎煮浓缩备用.刀豆蛋白为瑞士Fluka公司产品,环孢素A100 mg/L为华北制药集团产品.方法:将Wistar大鼠随机分为4组,每组10只,分别灌胃高中低剂量蝉翼藤10.0,5.0,2.5 g/(kg·d)和等量的生理盐水(空白对照组),共7 d,制备含蝉翼藤大鼠血清.向96孔培养板中分别加入20 mg/L刀豆蛋白(50 μL/孔)、蝉翼藤药物血清(50μL/孔)、环孢素A(10μL/孔)、脾细胞悬液(100μL/孔).设未加药血清为对照组.主要观察指标:96孔板加样后孵育68 h,加入MTT再孵育4h后,用酶标仪测定样本吸光度值(A值).结果:空白血清+刀豆蛋白组较空白血清组A值高(P<0.01),含药血清+刀豆蛋白组比空白血清+刀豆蛋白组的A值高(P<0.01),高剂量含药血清组为显著.空白血清+刀豆蛋白+环孢素A组较空白血清+刀豆蛋白组A值低(P<0.01),但比空白血清组的A值高(P<0.05),高中剂量含药血清+刀豆蛋白+环孢素A组较空白血清+刀豆蛋白+环孢素A的A值高(P<0.05).结论:蝉翼藤可以增强正常小鼠的免疫功能,拮抗环抱素A引起的免疫功能1氐下,起到免疫正向调节作用,且以高剂量含药血清组为著.
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深圳汉族人群HLA-Cw,-DQB1基因座等位基因的多态性
背景:HLA复合体是极其复杂的遗传系统,对其多态性的研究在法医学个体识别和亲权鉴定、群体遗传学、移植免疫、疾病相关等医学领域有重要的应用价值.目的:了解HLA-Cw,-DQBI,基因座的等位基因在深圳汉族人群中的分布规律.设计、时间及地点:样本基因型的统计学分析.于2007-01/2008-06深圳市血液中心免疫遗传研究窒完成.材料:样本来自中国造血干细胞捐献者资料库深圳地区志愿捐献者,使用EDTA-K2抗凝管采集外周血.方法:采用聚合酶链式反应.序列测定方法对深圳地区226名无关供者HLA-Cw,-DQBI基因座的2,3外显子进行序列测定与分析.等位基因频率采用直接计数法计算,Hardy-Weinberg平衡检验采用x2检验.主要观察指标:样本HLA-Cw,-DQBI基因座的基凶型.结果:226个样本中共检测到25个Cw等位基因.其中Cw*0102,Cw*0702的频率高(0.1881),其他频率较高的等位基因依次为Cw*0304,Cw*0302,Cw*0401及Cw*0801,Cw*0303,Cw*0602.该位点基凶犁观察值与期望值经x 2榆验符合Hardy-Weinberg平衡定律(x2=116.00,u=1.78,F=91,P>0.05).226个样本中共检测到17个DQB1等位基因.其中DQBI8*0301占绝对优势,其基因频率为0.2124.其他频率较高的等位基凼依次为DQB1*0303,DQB1*0601,DQB1*0502,DQB1*0602,DQB1*0302,DQB1*0401.该位点基因基观察值与期望值经x2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律(x2=101.34,u=0.78,v=91,P>0.05).经计算HLA-Cw位点的杂合度为0.887 8,个体识别力为0.976 9,非父排除率为0.773 1,多态性信息含量为0.875 7;HLA-DQBI位点的杂合度为0.8894,个体识别力为0.9762,非父排除率为0.753 3,多态性信息含量为0.965 9.结论:深圳汉族人群HLA-Cw及DQBl基因座是高度杂合、具有较高鉴别力和丰富信息含量的遗传标记,能较好地反映群体遗传特征.
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同种异体下颌骨移植修复犬颞颌关节、下颌骨缺损的免疫学观察
背景:同种异体骨移植后的免疫排斥是异体骨移植必须面对的重要问题.目前关于大段同种异体下颌骨移植重建下颌骨缺损以及移植造成的免疫研究报道很少见.目的:建立犬自体,同种异体下颌骨移植重建颞下颌关节、下颌骨缺损的动物模型,观察动物骨移植前后外周血白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6水平,了解异体下颌骨移植引起的免疫反应.设计:动物模型建立为随机对照动物实验,白细胞介索水平测定为自身对照.实验于2004-03/2005-04在解放军总医院动物实验中心完成,检测工作在解放军总医院第二附属医院核医学科完成.材料:健康杂种犬18只制作包括髁突在内的下颌骨升支部分缺损的杂种犬动物模型.健康成年比格供体犬头18具,随机分成2组,每组9块,分别进行冷冻和冻干处理.方法:取杂种受体犬18只制作包括髁突在内的下颌骨升支部分缺损的杂种犬动物模型,随机分成3组:自体骨移植组、异体冷冻骨移植组、异体冻干骨移植组,每组6只.主要观察指标:术前,术后2,4,8,16,24周检测外周血白细胞介素2,白细胞介索4、白细胞介素6水平.结果:移植术后所有动物均顺利存活,伤口愈合良好.自体骨移植组术后2周的白细胞介素2水平明显高于术前(P<0.05):异体冷冻骨移植组术后2周的白细胞介素2、白细胞介素6水平明显高于术前(p<0.05),术后2,4,8周白细胞介素4水平明显低于术前(P<0.05):异体冻干骨移植组术后2周的白细胞介素2、白细胞介素6的水平明显高于术前(P<0.05),其余时间与术前无明显差别.结论:犬冷冻/冻干异体下颌骨移植可以达到临床愈合,不会引起外周血白细胞介素水平的持续异常.
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精原干细胞和睾丸组织的同种异体移植
背景:精原干细胞作为精子发生过程的基础和前提,其自我更新和分化途径目前仍不完全清楚.目的:观察非免疫缺陷动物新生Wistar大鼠的精原干细胞和睾丸组织移植丁去势成年Wistar大鼠后的成活及生长发育情况.设计、时间及地点:组织细胞形态学水平的随机动物对照实验,于2007-04/08在广西医科大学实验动物中心外科实验室完成.材料:选用健康新生7-9 d雄性Wistar大鼠为供体,受体为经过严格检疫合格的8-12周的成年雄性Wistar大鼠,体质量180-220 g.方法:取新生雄性大鼠睾丸,采用两步法组合酶顺序消化制备大鼠精原干细胞悬液,以Percoll不连续密度梯度离心法初步纯化精原干细胞.取10只成年雄性大鼠,切除双侧睾丸肜成去势大鼠,按随机数字表法分为2组,每组5只.精原干细胞悬液移植组将制取好的1 mL精原于细胞恳液在5 min内注射至受体背部皮下.睾丸组织块移植组将制备好的已剖开的睾丸组织植入受体背部皮下,每个受体移植2个睾丸4块睾丸组织.主要观察指标:移植物的生长发育情况,移植8周末移植物的组织学特点及C-kit免疫组化定性分析结果.结果:精原干细胞悬液移植后,移植物未见成活生长.睾丸组织块移植后移植物部分成活,移植8周末组织学检查可见特征性的精曲小管和细胞结构,可见精于细胞,部分生精小管退化;睾丸间质中可见淋巴细胞浸润;免疫组化鉴定可见睾丸组织内C-kit阳性细胞表达.结论:同种异体异位移植于非免疫缺陷鼠中,新生睾丸组织块可以成活并能形成精子细胞,而精原干细胞悬液移植后未见移植物生长.
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毛囊单位移植促进创面愈合
背景:皮肤创伤后毛囊真皮鞘细胞可能直接参与真皮损伤的修复或者转化为成纤维细胞参与皮肤修复.目的:建立大鼠毛囊单位创面移植模型,对创面愈合过程中真皮成分的生长进行组织学和超微结构观察和分析,拟探索毛囊组织参与创而真皮愈合的潜力.设计、时间及地点:对照动物实验,于2007-09/2008-04在复旦大学附属中山医院完成.材料:体质量为200-250g的18只SD大鼠用于制备毛囊单位创面移植模型及微粒表皮移植模型.方法:剪取毛囊单位创面移植组大鼠单侧鼠须垫皮肤,伤口原佗缝合,用锐器分割鼠须垫毛囊,切取带有毛囊乳头、毛囊周围组织及部分表皮的毛囊单位复合组织.将毛囊单位植入制备好的创面上,每个创面放入5~7个毛囊单位:切取微粒表皮移植组大鼠全层皮肤中剪切取表皮和部分真皮层皮肤,并修剪成约3 mm×3 mm大小,原位植入创面中,每个创面放入5-7个微粒皮片.主要观察指标:第2,3,4,5周取创面标本,行苏木精-伊红染色、苦味酸天狼猩红染色,制作碱性水处理的扫描电镜标本,在偏振光显微镜和扫描电镜下观察.用图像软件处理并分析.结果:创面愈合的初期,两组的创面分泌的胶原基质的类型与量均无明显差异.但随着创面愈合的进行,创面中胶原基质发生重塑性的改变,两者创面中基质的Ⅲ型胶原开始减少,I型胶原相应增加.在创面形成后第5周时观察到毛囊单位移植组与微粒表皮移植组的I型Ⅲ和型胶原的比值均有不同程度增加,对照组增加更明显,二者差异显著(P<0.05).用碱性水处理的扫描电镜方法对晚期创面基质的观察也发现毛囊单位移植的创面基质中胶原纤维由粗细不等的纤维交织而成,胶原纤维的排列较致密有序,仍保持了一定的方向性.结论:在创面形成后期毛囊单位移植的愈合创面中胶原比值更接近正常皮肤,胶原排列更整齐有序,提示毛囊单位创面移植提高刨面愈合的长期效果好.
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小鼠骨髓树突状细胞的培养扩增及生物学特性分析
背景:树突状细胞是目前已知功能强的专职性抗原递呈细胞,但树突状细胞在体内分布广泛且数量较少,获得大量的树突状细胞是研究树突状细胞特性和功能的前提.目的:建立小鼠骨髓源树突状细胞体外培养和扩增方法,观察其形态和相关特征.设计、时间及地点:树突状细胞形态学观察实验,于2006-08/2007-05在中山大学中山眼科中心实验室完成.材料:健康雌性C57BL/6小鼠.方法:在无菌条件下提取C57BL/6鼠骨髓细胞,分离单个核细胞,以小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4协同诱导下培养,加用磷酸脂多糖刺激,分成磷酸酯多糖-树突状细胞和单纯树突状细胞组,前者在培养加入磷酸酯多糖,后者不加.主要观察指标:应用光镜和电镜下观察树突状细胞的形态,流色细胞仪检测鉴定其生物学特征.结果:体外培养2刷后具有典型的树突状细胞形态,光镜下显示细胞表面不规则,呈树突状突起,电镜下可见培养的细胞具有典型树突状细胞的形态特征,流式细胞鉴定为髓系树突状细胞,高表达MHCⅡ类分子及共刺激分子(MHC Ⅱ,CD80,CD83,CD11 c).单纯树突状细胞组的细胞中度表达MHCⅡ类分子,低水平表达共刺激分子,刺激T细胞增殖的能力较弱;磷酸酯多糖-树突状细胞组细胞高水平表达MHCII类分子和其刺激分子.结论:实验所采用的树突状细胞体外原代培养的方法能在体外培养出大量的未成熟树突状细胞,具有典型树突状细胞的形态特征及较高的纯度.
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碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带的早期血管生成:组织学表现
背景:以往实验已证实碱性成纤维细胞生长因子在体内外均有促新生血管形成的作用.冻干法可以减低移植物的抗原性,经冻干处理后的移植物保存时间长并且运输方便,更容易商品化.冻干肌腱补充活性细胞生长因子有望加速新血管的牛成.目的:拟验证碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带后早期血管的生成作用.设计、时间及地点:对照观察动物实验,于2006-06/20017-06在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成.材料:选用健康成年家犬14只.方法:取2只犬,无菌手术取其双下肢伸趾长肌腱16条,冻干处理后供实验用.将其余12只犬左、右侧膝关节分别移植单纯冻干肌腱和复合100 u g/L碱性成纤维细胞生长因子后冻干肌腱重建前交叉韧带.主要观察指标:分别于移植后1, 2,3,4,5,6 周取材,每次取2只.进行苏木精-伊红染色,通过图像分析仪定性观察新生血管的生成情况.结果:复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组移植后两三周出现新生血管,四五周达到高峰;单纯冻干肌腱组移植后四五周出现新生血管.复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组新血管长入肌腱的时间先于对照组,深度深于对照组.结论:复合100 u g/L碱性成纤维细胞生长因子的冻干肌腱移植重建前交叉韧带后,在新血管形成的时间及长入肌腱的深度方面均优于单纯冻干肌腱.
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嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植修复受损视神经
背景:有研究已初步证明了甲泼尼龙对受损视网膜节细胞的早期保护作用.目的:观察甲泼尼龙联合嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植大鼠受损视神经纤维及其髓鞘的形态学及计数变化.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-09/2006-03于北京大学医学部神经斛剖实验室完成.材料:选取成年雄性SD大鼠40只,取其中4只做形态学正常对照.方法:其余36只大鼠按随机数字表法分为6组,即视神经损伤模型组、甲泼尼龙组、嗅神经鞘细胞移植组、嗅神经鞘细胞移植+甲泼尼龙组、坐骨神经移植组、坐骨神经移植+甲泼尼龙组,每组6只.主要观察指标:取视神经,制作冰冻切片,移植后14,21 d分别从各组切片中随机抽取10张载玻片,对生物素标记的葡聚糖胺染色的视神经纤维及甲苯胺蓝染色的视神经髓鞘进行形态学观察,电镜下对视神经纤维髓鞘进行计数.结果:顺行追踪剂生物索标记的葡聚糖胺在视神经中的染色结果主要表现为嗅神经鞘细胞移植+甲泼尼龙组、坐骨神经移植+甲泼尼龙组,与视神经损伤模型组相比,神经纤维排列较整齐,发生中晚期溃变的纤维比例较小.移植后14,21 d,甲泼尼龙组视神经纤维髓鞘数量均显著高于视神经损伤模型组(P<0.05.0.01).坐骨神经移植+甲泼尼龙组均显著高于坐骨神经移植组(P<0.05).嗅神经鞘细胞移植+甲泼尼龙组均显著高于嗅神经鞘细胞移植组(P<0.05).结论:形态学结果表明嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植与甲泼尼龙的联合作用能激发并增强受损中枢神经的自我保护及修复作用,对视神经纤维及其髓鞘溃变速度有延缓作用.
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带神经血管肌束分点植入后失神经肌肉形态学改变
背景:失神经支配的肌萎缩一直是临床治疗的难点,目前仍没有突破性的研究成果.目的:观察带神经血管的肌束分点植入后对失神经支配肌肉形态学影响,探求一种失神经支配肌萎缩研究的新思路.设计、时间及地点:同体对照动物实验,于2006-07/2007-12在南京鼓楼医院手外科完成.材料:清洁级健康Wistar大白鼠30只,雌雄不限,体质量250g左右.方法:建立大鼠双下肢腓肠肌外侧头失神经支配模型.其中右侧在腓肠肌外侧头肌腹中远1/3处做两切口,用比目鱼肌作成带神经血管肌束,分点植入失神经支配肌肉内,作为实验组.左侧只切断腓肠肌外侧头肌支作为对照组.分别于术后4,8,12周取材.主要观察指标:观察肌肉外观、超微结构变化,测定肌纤维周径及截面积、胶原纤维含量.结果:①实验侧的腓肠肌饱满、有弹性、色泽好、切之出血多.对照组肌肉萎缩变细、色泽灰白、切之出血少.②备时间点实验组肌细胞周长和肌肉纤维横截面积测量值大于对照组(P均<0.01);胶原纤维含量低于对照组(P<0.01).⑨实验组细胞核基本正常,肌膜光滑,肌纤维间距小,线粒体数量多、嵴完整.对照组肌肉细胞核变形、空泡化,肌膜呈乳突样改变,肌纤维明显变细,间距增大,线粒体数量少、出现空泡化及絮状化,脂滴增多.结论:带神经血管肌柬分点植入法是一种延缓失神经支配肌肉萎缩的有效方法.
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黄芪对豚鼠体外膀胱逼尿肌条收缩活动的影响
背景:黄芪具有显著的利尿作用,作用时间长,并且对肾炎有一定的对抗作用.目的:观察黄芪对豚鼠离体膀胱逼尿肌条收缩活动的影响,并初步探讨其作用机制.设计、时间及地点:随机对比观察实验,于2005-08/2006-02在兰州大学基础医学院生理学与心理学研究所完成.材料:实验动物选片j普通级医学实验动物三色毛豚鼠,雌雄不拘,体质量350~450 g.方法:猛击豚鼠头部致昏.迅速取出豚鼠膀胱,切取2条6 mm×2 mm纵行肌条置于灌流肌槽中,一端与肌肉张力换能器连接,记录肌条的等长收缩活动.待肌条白发活动平稳后加入药物.黄芪采刚累计加药法,累计浓度依次为1%,3%,10%,30%,100%,200%,加药间隔2 min;加入阻断剂2 min后再累计加入不同浓度的黄芪,加入的阻断剂分别为维拉帕米、酚妥拉明、阿托品、六烃季铵.主要观察指标:黄芪及拮抗剂加黄芪对豚鼠离体膀胱逼尿肌条收缩活动的影响.结果:黄芪剂量依赖性增加膀胱逼尿肌条的张力、收缩波平均振幅(r=0.928.0.962,P<0.01),较高浓度时增加收缩频率(P<0.01).维拉帕米使黄芪增加逼尿肌条收缩张力的作用明显减弱,但不影响黄芪增加逼尿肌条收缩波平均振幅和收缩频率的作用.酚妥拉明使黄蓖增加逼尿肌条收缩张力和收缩频率的作用明显减弱,但不影响黄芪增加逼尿肌条收缩波平均振幅的作用.阿托品使黄芪增加逼尿肌条收缩张力、收缩波平均振幅和收缩频率的作用明显减弱.六烃季铵基本不影响黄芪对于膀胱逼尿肌条的作用.结论:黄芪呈剂量依赖件增加膀胱逼尿肌条张力的作用可能是通过激动L-电压依赖性钙通道、a受体和M受体实现的;剂量依赖性增加收缩波平均振幅的作用可能是通过激动M受体实现的;较高浓度时增加收缩频率的作用可能是部分通过激动M受体和a受体实现的.
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非生物型人工肝技术辅助治疗慢性重型肝炎
背景:血置换既能机械性被动去除患者体内毒素,又能人为补充白蛋白、凝血因子等生物活性物质,部分替代正常肝脏功能,渐被临床用于各种原因所致的严重肝功能损害的替代治疗.目的:拟验证观察非生物型人工肝技术-血浆置换治疗慢性重型肝炎的疗效.设计、时间及地点:人工肝治疗前后临症状演变和血液实验室指标变化的自身对照观察,于2001-03/2007-12在广西桂林市第二人民医院完成.对象:慢性重型肝炎患者121例,男105例,女16例,年龄25~50岁,全部为乙型肝炎患者,其中乙型戊型混合感染2例.方法:患者在恒温治疗室内,常规行血管穿刺插管建立体外循环通路.应用日本松和韶华公司Plasauto-IQ型全自动血浆净化装置及相应配套的管路、模型血浆分离器,按要求进行体外循环管路和血浆分离器的无菌生珲盐水冲洗,再用肝素生理盐水预冲管路.每次置换前常规应用地塞米松5 mg静推预防过敏反应.术中每次血浆置换量3 000 mL,血液泵流速60~100 mL/min,术中常规补充葡萄糖酸钙,并酌情应用地塞米松、盐酸异丙嗪等抗过敏处理.术前、术中肝素负荷总用量为50-80 mg,术后患者使用肝素封管.121例患者共进行183次治疗,平均每例1.5次,根据病情间隔2~4 d进行1次,其中1次81例,2次28例,3次6例,4次3例,5次2例,6次1例.至首次血浆置换治疗开始算起,治疗后4周为疗程结束.主要观察指标:治疗前后及疗程结束时患者的临床症状、肝功能、由凝血酶原时间计算凝血酶原活动度及乙形肝炎病毒血清标志物,HBV-DNA改变情况.结果:慢性重型肝炎患者121例经183次血浆置换治疗后,临床症状出现不同程度改善,表现为食欲增加,体力增进,精神状态好转,腹胀减轻,血清总胆红素、直接胆红素、谷氨酸丙酮酸转氨酶、谷氢酸草酰乙酸转氨酶、清蛋白、球蛋白、肌酐等生化指标较治疗前明显下降,凝血酶原活动度明显升高.183例次治疗过程中,出现低血钙、血浆过敏、血压下降等反应共180例次,总发生率为98.3%.临床好转率为64.5%,其中早期83.8%,中期46.9%,晚期6.7%,同时1次与多次人工肝治疗临床好转率比较后者明显高于前者,两者比较差异显著.结论:人工肝治疗对早期慢性重型肝炎患者疗效好,多次人工肝治疗比1次治疗为佳.
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环氧化酶2在兔自体移植静脉模型中的表达
背景:已经证实移植静脉狭窄远期表现为血管的粥样硬化,而血管的粥样硬化是一种慢性炎症反应的过程.环氧化酶2则是与炎症反应密切相关的酶,其表达程度可能与移植静脉的狭窄相关.目的:观察环氧化酶2在兔自体移植静脉血管中的表达情况.设计、时间及地点:组织形态学水平的动物对照实验,于2007-04/2008-01在解放军第二军医大学长海医院心胸外科实验室完成.材料:选择健康成年新西兰大白兔24只,雌雄不限,体质量2.2-2.5 kg.方法:以"cuff"技术建立新两兰大白兔单侧自体颁外静脉-颈总动脉移植模型.主要观察指标:在静脉移植后2,8,12周分别取8只兔,收集移植静脉及对侧颈外静脉作自身对照,以免疫组化及实时定量聚合酶链反应方法检测血管中环氧化酶2表达的差异.结果:免疫组化染色结果显示,正常静脉内膜及中膜薄,由数层细胞排列而成,未见明显环氧化酶2阳性染色.在静脉移植后2,8,12周,各移植静脉内膜及中膜均明显增厚,出现环氧化酶2强阳性染色.在静脉移植后2,8,12周,移植静脉中环氧化酶2mRNA的表达水平均明显高于正常静脉(P<0.01).结论:环氧化酶2在动脉化的移植静脉血管中出现明显的表达增高.
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臀上皮神经营养血管筋膜皮瓣移植的应用解剖特点
背景:臀上皮神经营养血管筋膜皮瓣是一类以皮神经血供为其成活摹础的新型皮瓣,皮神经周围的营养血管在营养神经的同时发支营养其周围的筋膜皮肤.此皮瓣可以用小的剐损伤修复骶部压疮,并且皮瓣有感觉.目的:拟通过对臀上皮神经筋膜皮瓣进行应用解剖学分析,为臀上皮神经筋膜移植皮瓣及其旋转点的精确设计提供解剖学依据.设计、时间及地点:应用解剖学实验,于2006-03/05在大连医科大学解剖教研室及大连大学医学院解剖教研室完成.对象:选取31侧用红色乳胶灌注、经甲醛崮定的中国成人人体臀部标本.方法:解剖成人人体臀部标本臀上动脉的肌皮穿支并测鼙其外径,解剖臀上皮神经和第4腰动脉后支观察其在深筋膜穿出点的位置,测量臀上皮神经中支的长度及第4腰动脉后支的外径.主要观察指标:臀上皮神经筋膜移植皮瓣的解剖学数据.结果:臀上皮神经中支长度(15.1±1.4)cm(n=31).臀上皮神经中支支配区有效长度(13.3±1.5)em(n=31).臀卜皮神经、第4腰动脉后支出肌点距髂嵴上缘距离(8.5±1.1)mm(n=31).臀上皮神经、第4腰动脉后支出肌点距后正中线距离(7.1±1.6)cm(n=31).第4腰动脉后支外径(1.0±0.3)mm(n=31).臀上动脉上支的肌皮穿支外径:第1支(0.52±0.22)mm(n=15),第2支(0.42±0.18)mm(n=10).结论:臀上皮神经筋膜皮瓣的旋转点设计应距后正中线(7.1±1.6)cm,距髂嵴上缘(8.55:1.1)mm.臀上皮神经筋膜皮瓣宜以长度(13.3±1.5)cm,蒂部宽度3.5 cm为宜.
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儿童全厚植皮供皮区的优化选择及切口设计
背景:儿童与成人皮肤的生理特点存在差异,有必要制定适合儿童个体皮肤特点的全厚植皮供皮区的优化选则及切口设计方案.目的:探讨儿童全厚植皮供皮区的优化选择及切口设计的佳方案.设计、时间及地点:病例分析,于2005-01/2007-12在重庆医科大学儿童医院烧伤整形科完成.对象:181例患儿,瘢痕挛缩畸形114例,先天性畸形37例,外伤皮肤缺损等30例.男105例,女78例,年龄4个月-14岁.方法:对181例行全厚植皮术的患儿,针对皮肤缺损的部位、面积,结合患儿的年龄、性别等特点选择佳的供皮区:①切口部位应尽可能隐蔽.②供皮后的供区创口应能完全缝合.③供皮区皮肤的质地应与受区相近.④受区条件欠佳时尽量选择皮肤较薄的供皮区.⑤供皮区创口要便于护理.⑥修复大面积创面可由多部位同时供皮.⑦分次手术皮源紧张时可由原供皮区二次供皮.并针对儿童不同部位供皮区的个体特点进行切口设计:①切口形状应能保证获取足够面积的皮片.②缝合后的切口形状应尽量呈曲线,并顺应皮纹或皮肤张力线.⑨应避免切口缝合后使临近器官或皮肤体表标志变形,移位.④切口应避开体毛生长区.主要观察指标:移植皮片的存活率及存活后皮片的质量.供皮区切口的隐蔽性、瘢痕性状,局部皮肤的正常生理特点有无破坏.结果:171例移植皮片完全存活,32例发生表皮坏死,经换药痊愈,供皮区伤口均一期愈合.术后随访3个月-3年,移植皮肤性状良好,供皮区创痕呈线状,部位隐蔽.结论:针对儿童个体特点进行全厚植皮供皮区选择及切口设计,可在保证切取皮片面积足够的前提下,使皮片质地尽可能与受区接近,且供区创口隐蔽,美观,符合生理及美容的要求.
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骨髓种植人工血管在静脉系统血管损伤中的应用
背景:自从机械法搔刮自体静脉获取内皮细胞种植人工血管的方法获得成功后,为寻找更好的血管代用品指明了一个新的方向,但因可用的静脉较少,以致内皮细胞的数量、质量均明显不够.目的:观察骨髓种植的人工血管应用于静脉系统后血管腔面的内皮化情况.设计、时间及地点:随机对照动物实验,干2007-03/2008-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成.材料:新两兰大白兔8只,随机分成实验组和对照组各4只.针织涤纶叔绒人工血管由美国MeadoxMedicalsInc提供.方法:实验组采用自体骨髓种植的涤纶双绒人工血管置换肾下段下腔静脉,对照组则采用单纯自体血浆预凝人工血管.术后10 d获取人工血管标本.主要观察指标:观察移植人工血管通畅情况;光镜下观察新生内膜厚度,电镜下观察新生内膜表面内皮化情况:放射免疫学检测血栓素A2的代谢产物水平.结果:动物8只均进入结果分析.实验组全部移植人工血管通畅,对照组2条通畅,另外2条人工血管内充满血栓.光镜下实验组的内膜厚度明显薄于对照组(P<0.01):电镜发现实验组人工血管达到完全内皮化,而对照组表面则无成片内皮细胞存在.血栓索A2的代谢产物水平实验组低于对照组(P<0.05).结论:骨髓种植的人工血管在静脉系统10d时能实现人工血管腔面的快速完全内皮化,新生内皮细胞具有抑制新生内膜增生和抗血栓形成的能力.
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超声显像对创伤性脾破裂自体移植脾生长与存活的监测
背景:目前,在处理创伤性脾破裂的同时多主张作脾组织块自体移植,对自体移植脾的监测,已有核素检查及免疫学检查等方面的文献,利用超声显像进行随访的报道较少.目的:探讨超声显像监测自体移植脾存活与生长的价值.设计、时间及地点:回顾性病例分析.于2000-01/2004-12在深圳市第二人民医院超声科完成.对象:选择本院行脾切除加自体脾组织移植创伤性脾破裂患者18例,男13例,女5例,年龄20~42岁.方法:取自体未损伤的脾组织,制成面积[(2~4)cm×(1~3)cm]及厚度≤0.5 cm薄片,移植于脾切除者大网膜血管丰富区,自下而上折叠成直径为5 cm两侧缝严的袋中.18例自体脾组织移植患者,分别于二移植后3,6及12个月行超声检查,并于12个月时行99Tcm-_热变性红细胞显像.主要观察指标:核素检查监测脾组织的存活及生长情况.结果:18例中14例自体移植脾片存活并逐渐牛长,移植脾呈与正常脾相似的低回声.轮廓规则,边界清楚,内部可见血流信号.4例存在副脾者未见脾片生长.结论:超声显像可成为自体移植脾存活与生长情况准确监测的方法之一.
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同种异体单肺移植7例报告
总结7例同种异体单肺移植资料的移植方案、肺保存及移植后管理监测情况.7例同种异体单肺移植患者中特发性肺纤维化3例,慢性阻塞性肺病2例,双侧矽肺、肺气肿1例,双肺结核右毁损肺1例.7例供体均为脑死亡者,供肺均采用Euro,Colins液或低钾右旋糖酐液灌注并良好保存.受体与供体血型匹配,5例患者行右侧单肺移植,2例行左侧单肺移植.肺支气管、肺动脉为端端吻合,肺静脉为心房-心房吻合.移植前后均常规应用抗牛素和免疫抑制剂.肺移植后进行全面指标监测,包括心肺功能、抗生素使用及免疫抑制药物的调整.7例患者均未出现支气管、肺动静脉吻合口并发症.5例移植后2个月内死亡,1例存活近1年,另1例存活近2年.死亡者中4例死于肺感染导致多脏器功能衰竭,1例死于多曲霉菌感染致严重肺出血.6例移植后出现排斥反应,其中1例出现3次.肺移植手术适应证的选择、供肺的选择和保存、肺移植操作以及移植前后的管理已逐渐成熟,移植前心肺功能差者、移植后使用免疫抑制药物同时合并严重感染者病死率仍很高.
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肾移植后移植肾输尿管梗阻:一项单中心回顾性分析
背景:移植.肾输尿管梗阻是肾移植后常见尿路并发症之一,严重危及移植肾功能,甚至患者生命.目的:回顾不同尿路重建方式输尿管梗阻的发生情况,并对其原因及处理方法进行总结分析.设计、时间及地点:单中心回顾性病例分析,于1993-12/2007-04在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科完成.对象:选择1223例次同种异体肾移植患者.方法:根据供肾输尿管情况及受者下尿路情况,尿路重建采用输尿管膀胱黏膜下隧道吻合法948例次,输尿管输尿管端端吻合法275例次.移植肾输尿管梗阻可根据不同原因采用相应处理方法,主要为开放性手术及内镜下治疗.主要观察指标:输尿管梗阻原因,治疗后患者尿量、血肌酐变化及输尿管扩张或肾盂积水恢复情况,记录移植肾3年存活率.结果:1223例次肾移植发生输尿管梗阻35例(2.9%),开放性手术处理20例(57%).移植后1个月内发生梗阻8例,其中4例为髂窝血肿压迫,2例为血凝块堵塞,2例为小结石.移植1个月后发生梗阻27例,13例为输尿管膀胱吻合口狭窄,6例为输尿管-自体输尿管吻合口狭窄,8例为尿路结石.所有患者肾功能均得到恢复.输尿管梗阻患者治疗后24 h,尿量明显增加(P<0.01),血肌酐水平显著下降(P<0.01).平均随访52个月,B超或磁共振泌尿系统水成像等影像学检查提示梗阻均得到解决,并且均无复发.发生输尿管梗阻的移植肾3年存活率为82.5%,未发生输尿管梗阻的移植肾3年存活率为84.6%,差异无显著性意义(P>O.05).结论:肾移植后输尿管梗阻病因复杂,外科手术是解除梗阻的主要方法,处理得当,对移植肾功能的恢复及远期存活无明显影响.
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流式细胞技术检测肾脏移植受者pp65抗原血症的意义
背景:临床对pp65抗原的检测主要采用免疫荧光技术,但是该方法步骤繁琐,需要对标本进行人工计数,在检测过程中受人为的影响因素较多.目的:探讨使用简便的流式细胞技术检测人巨细胞病毒pp65抗原血症的可行性及其特点.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-09/2008-03在解放军总医院附属二院器官移植中心完成.材料:肾脏移植受者外周血标本145份.方法:分离人外周血白细胞,分别采用免疫荧光技术与流式细胞技术对人巨细胞病毒pp65抗原检测.主要观察指标:流式细胞仪在激发波长为488 nm处的吸收峰判断阳性检出.结果:对肾脏移植受者进行免疫荧光技术检测,在15例受者的25份标本中出阳性,检出的特异性为76.0%:对肾脏移植受者进行流式细胞技术检测,在5例受者的11份标本中检出阳性,检出的特异性为54.5%.使用Fisher确切概率法对两种不同检测方法检出的效果进行检验,结果两种检测方法的检出效果差异无显著性意义(P>0.05).结论:免疫荧光技术和流式细胞技术两种pp65抗原检测方法的检出效果无差异,因此可以通过流式细胞技术对pv65抗原进行检测,并且结果更加客观.
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静脉滴注免疫球蛋白对肾移植患者群体反应抗体的影响
背景:很多方法可降低群体反应抗体致敏患者的群体反应抗体水平,其中血浆置换或免疫吸附法脱敏法是比较常用的,但这些方法副作用较多.目的:拟观察肾移植前静脉滴注免疫球蛋白对肾移植患者血清群体反应抗体的影响.设计、时间及地点:以2003-01/2006-11重庆医科大学附属第一医院肾移植中心的57例等待肾移植的群体反应抗体致敏患者为对象的前后对照,病例分析.对象:群体反应抗体致敏患者57例,年龄21~65岁,群体反应抗体值平均(46.7±29.5)%.方法:所有患者在接受肾移植前以5g/d剂量静脉滴注免疫球蛋白,2周为1个疗程.2个疗程之间间隔1周.在给予静脉滴注免疫球蛋白前和疗程结束立即应用酶联免疫吸附反应方法各检测1次血清群体反应抗体水平.主要观察指标:血清群体反应抗体水平.结果:应用免疫球蛋白后群体反应抗体降为非致敏84%(48157),完全未降5%(3/57),部分下降11%(6/57).用药后群体反应抗体下降0-61%,平均(38.4±16.3)%.57例患者肾脏移植前淋巴细胞毒试验<10%,均未出现超急性排斥反应.结论:静脉滴注免疫球蛋白预治疗是理想的降低肾移植致敏性的方法,且副作用小.
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神经钙蛋白阻滞剂减量联合西罗莫司治疗慢性移植肾肾病
背景:西罗莫司具有明确的抗增殖特性而无肾毒性,可能在慢性移植肾肾病的防治方面发挥作用,但以其为基础的免疫抑制方案治疗慢性移植肾肾病尚无统一标准.目的:探讨神经钙蚩白阻滞剂减量联合两罗莫司治疗慢性移植肾肾病的效果.设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2005-05/2007-05在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所完成.对象:选取同期收治的经病理学检测证实的慢件移植肾肾病患者69例,免疫抑制剂方案为他克莫司+霉酚酸脂+强地松19例,环孢索+霉酚酸脂+强地松43例,环孢素+硫唑嘌呤+强地松7例,其中他克莫司用量1.0-4.0 mg/d,环孢素用量100-325 mg/d,霉酚酸脂用量500~1 500mg/d,强地松用量2.5-15 mg/d.西罗莫司为美国惠氏制药公司产品,批号H20050066.神经钙蛋白阻滞剂他克莫司为日本藤泽药品工业株式会社产品,批号X980596:环孢素为杭州中美华东制药有限公司产品,批号 H10960122.方法:将他克莫司或环孢素剂晕减少2/3,加用西罗莫司2 mg/d,根据血药浓度监测调整西罗莫司用量达到常规目标谷浓度的1/2,其余免疫抑制剂霉酚酸脂、硫唑嘌呤及醋酸泼尼松用量维持不变,随访6个月.主要观察指标:24 h尿量、血清肌酐、内生肌酐清除率、24h尿蛋白的变化:部分患者移植肾再次活检病理学表现.结果:与使用前比较,69例患者使用西罗莫司6个月后24 h尿量、内生肌酐清除率明显升高(P<0.05或0.01),血清肌酐值、24h尿蛋白含量显著下降(P<O.01).使用西罗莫司6个月后4例患者接受再次穿刺活检,病理学上可见以间质炎性细胞浸润为特点的排斥反应减轻,而以微动脉管壁增厚和玻璃样变性为特点的神经钙蛋白阻滞刺肾毒性反应变化不大.结论:神经钙蛋白阻滞剂减量联合西罗莫司治疗慢件移植肾肾病是一种安全有效的方法,其原因可能与两者联合应用后产生的协间性免疫抑制作用及减少神经钙蛋白阻滞剂肾毒性有关.
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原位肝移植后胆管损伤的病理学改变
背景:肝移植术后胆道损伤引起的并发症是临床上诊治的难点,是抑制肝移植发展的瓶颈.目的:在成功应用胆道内镜治疗肝移植术后胆道并发症的同时,对胆管的损伤进行观察记录并取活检病理,分析不同胆管损伤、组织病理学类型与肝移植术后胆管并发症的关系.设计、时间及地点:病例分析,于2001-07/2005-10在大连市肝胆外科研究所,友谊医院肝胆外科完成.对象:将19例肝移植术后患者根据胆管并发症发生情况分为3组:正常组4例,胆管损伤组12例,肝动脉损伤组3例.方法:利用内镜技术,分别对3组患者进行胆管观察、记录.内镜下取活检进行病理分析.对于无T管者,应用子母胆道镜观察、取活检.主要观察指标:应用胆道内镜观察T管造影、肝内外胆管黏膜外观及病理学检查结果、供-受体胆管吻合口的愈合情况.胆管损伤组经内镜取石、狭窄扩张治疗后行上述指标的复查.结果:①正常组患者肝内外胆管解剖正常,无狭窄、瘢痕,胆管黏膜颜色正常,供-受体胆管吻合口愈合佳.病理学检查均可见修复性的黏膜组织,被覆上皮完整.②胆管损伤组患者胆管内有各种类型的单发、多发及铸型结石,胆管均有不同程度损伤,经内镜取净结石、解除梗阻后,胆管黏膜均有不同程度的修复,造影检查胆树恢复正常.⑨肝动脉损伤组患者胆管壁缺血坏死,丧失胆管的组织结构,明显充血,胆泥和结石完全灌满供体胆树,Ⅲ级胆管间断具有胆管的组织结构;病理学检查发现胆管壁弥漫坏死,结构不清,大量胆汁渗入,可见增生的肉芽组织和化脓灶.结论:在原位肝移植中胆管均有不同程度的损伤,冷保存/再灌注损伤是导致胆管树损害重要的始动因素,胆管周围血管丛的损伤和微循环障碍可能是胆管损伤的途径之一.
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肾移植后贫血的改善
背景:肾移植后随着肾功能的逐渐恢复,大部分患者移植成功后贫血能够得到纠正.目的:观察肾移植前后受者血清促红细胞生成素、铁蛋白、血红蛋白、铁水平的变化,并分析其与移植后贫血改善的关系.设计、时间及地点:病例对照观察,于2005-05/12在中南大学湘雅三医院移植中心完成.对象:纳入肾移植患者20例,根据血清铁蛋白值分为2组,铁正常组(血清铁蛋白≥100 u g/L)11例,低铁组(血清铁蛋白<100 ug/L)9例.另外选择20例同期健康体检者作为对照.方法:肾移植前1 d、移植后3,5,7d,第2,3,4周测定血清促红细胞生成素、铁蛋白、血红蛋白、铁水平,所有患者在移植后1个月内未予铁剂治疗.主要观察指标:以放射免疫法测定血清促红细胞生成素含量,以免疫浊度法测定转铁蛋白含量,以酶联免疫法测定血清铁蛋白含量,按标准实验室方法测定血红蛋白、血清铁水平.结果:肾移植后患者血清促红细胞生成素水平逐渐上升,并在移植后3周达到高峰,明显高于移植前及正常对照组(P<0.01).低铁组肾移植患者血清铁、血清铁蛋白含量明显低于铁正常组(P<0.05,0.01).低铁组患者贫血纠正时间比铁正常组显著延长(P<0.01).6例患者出现急性排斥反应,并出现肾功能恢复、血清促红细胞生成素高峰及贫血纠正延迟.结论:肾移植后贫血的纠正可能与移植后血清促红细胞生成素、铁代谢水平及移植肾功能恢复情况有关.
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他克莫司处理供者树突状细胞在诱导大鼠同种心脏移植免疫耐受中的作用
背景:诱导供者特异性免疫耐受被认为是终克服器官移植后排斥反应的有效途径,近年来关于未成熟树突状细胞在诱导免疫耐受中的重要作用日益受到关注.目的:观察他克莫司处理的供者未成熟树突状细胞对大鼠同种异体心脏移植免疫耐受的影响,分析未成熟树突状细胞诱导免疫耐受的作用途径.设计:随机对照动物实验.材料:实验于2006-04/2006-12在青岛大学医学院附属医院动物实验中心完成.以45只Wistar大鼠为供体,45只SD大鼠为受体,行颈部心脏移植45例次.按随机数字表法分为3组,每组15例次,进行不同的预处理.方法:对照组、未经他克莫司处理组及他克莫司处理组移植前7 d分别经尾静脉注射生理盐水、供者未成熟树突状细胞和他克莫司处理的未成熟树突状细胞.分别测定移植后SD大鼠与Wistat 大鼠及第3品.系Lewis大鼠的单向混合淋巴细胞反应.主要观察指标:各组受体大鼠移植心脏存活时间、心肌病理及血清白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素10、Y-干扰素含量变化.结果:①未经他克莫司处理组大鼠的移植心脏存活时间较对照组明显延长(P<0.01),他克莫司处理组大鼠的移植心脏存活时间进一步延长(P<0.05).②混合淋巴细胞培养结果显示为供者特异性.③各组大鼠血清白细胞介素2、Y-干扰素、白细胞介素4、白细胞介素10含量差异具有显著性意义(P<0.01).代表Th1的白细胞介素2、Y-干扰素水平明显降低,代表Th2的白细胞介素4、自细胞介素10水平明显增高.结论:未成熟树突状细胞能够诱导同种异体大鼠心脏移植免疫耐受;他克莫司处理的未成熟树突状细胞能够加强这种免疫耐受,且这种耐受是供者特异性的.其可能主要通过调节T细胞免疫应答类型(Th1至Th2的免疫偏移)、诱导调节性T细胞和诱导T细胞失能等途径来参与免疫耐受的形成.
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同种肾组织移植改善慢性肾功能衰竭贫血:红细胞质量和数量验证
背景:既往通常采用的反复输血和重组人类促红细胞生成素纠正慢性肾功能衰竭后贫血,但由于多种副作用使其临床应用受到很大限制.目的:通过动物实验.以现代医学公认的治疗慢性肾功能衰竭后贫血的药物重组人类促红细胞生成素作为阳性对照,从红细胞数量、质量方面验证同种肾组织移植的治疗效果.设计、时间及地点:混合模型重复测量资料的方差分析,随机分组动物实验于2004-06/2005-03在山西医科大学生理实验室完成.材料:选用成年健康雄性Wistar大白鼠80只作为受体,成年受体大鼠尾静脉每天一次注射盐酸阿霉素6.5mg/kg,每周3次,共6周.然后切除右肾建立慢性肾功能衰竭模型.供肾组织移植用Wistar新生鼠20只.出生三四天,雌雄不拘.实验用主要试剂重组人类促红细胞生成素:2×106U/L,由山东阿华医药公司提供(批号99435).方法:取20只大鼠为正常对照组,无特殊干预;其余60只大鼠制备慢性肾功能衰竭模型后,随机分为3组,每组20只:肾组织移植组,将取处新生鼠的肾组织块多点植入受体肾包膜下;促红细胞生成素治疗组,每次按30 U/kg剂量腹腔注射重组人促红细胞生成素,每周3次,连续6周;模型组.不给予其他干预.主要观察指标:以SABC法检测促红细胞生成素在肾组织和移植物的表达及分布.取大鼠内眦静脉血,以ELISA法直接测定血清促红细胞生成素水平,常规方法测定血红蛋白水平,以相应的试剂盒测定红细胞膜Na+-K+ATP酶、超氧化物歧化酶活力,以及丙二醛水平.结果:①促红细胞生成素抗原阳性反应在正常对照组内表达呈强阳性.而在模型组呈弱阳性或不表达,在移植组中呈强阳性,模型组与其他两组比较,差异有显著性意义(P<0.01).②实验30,45,60 d时促红细胞牛成素治疗组、肾组织移植组血清促红细胞生成素水平和血红蛋白和红细胞计数比模型组显著升高(p<0.05-0.01),实验60 d时促红细胞生成素治疗组血清促红细胞生成素水平高于肾组织移植组(P<0.05).③实验30,45,60 d时促红细胞生成素治疗组、肾组织移植组红细胞膜丙二醛含量低于模型组(P<0.05),促红细胞生成素治疗组与肾组织移植组比较,差异无显著性意义(P>0.05).红细胞膜超氧化物歧化酶和Na+-K+ATP酶活力组间差异与丙二醛相反.结论:肾组织移植可提高慢性肾功能衰竭贫血大鼠红细胞数量和质量,作用与重组人类促红细胞生成素基本相当.
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诱导血红素加氧酶1高表达对减体积肝移植大鼠生存的影响
背景:血红素加氧酶1在防止和减轻缺血再灌注损伤方面扮演着重要角色,成为目前肝移植领域的研究热点.目的:构建重组腺病毒Ad5-血红素加氧酶1,对肝移植供体进行预处理来诱导供肝血红素加氧酶1高表达,进一步观察其对减体积肝移植大鼠生存时间及肝功能的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2003-09/2005-03 在重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所完成.材料:选用SD大鼠74只,制备原位减体积肝移植模型.方法:利用分子牛物学方法构建携带有血红素加氧酶1基因的重组腺病毒Ad5-血红素加氧酶1,对供体进行预处理.将74只大鼠按不同处理疗案分组如下:生理盐水组(n=12)、诱导剂原卟啉钴组(n=13)、Ad5-血红素加氧酶1组(n=13)、Ad5-绿色荧光蛋白组(n=12)、Ad5-血红素加氧酶1+抑制剂原卟啉锌组(n=12)分别于取肝前注射生理盐水、诱导剂原卟啉钴、Ad5-血红素加氧酶1、Ad5-绿色荧光蛋白及Ad5-血红素加氧酶1+抑制剂原卟啉锌,取肝后HTK液4℃保存24 h后植入.对照组(n=12)取肝前48 h静脉注射生理盐水,取肝后马上植入.主要观察指标:各组肝移植人鼠的存活率,肝功能指标测定,彩色多普勒超声监测移植后2 h门静脉血流变化,应用常规苏木精-伊红染色法规察移植肝组织病理学变化,肝组织血红索加氧酶1活性测定,应用免疫组织化学染色法检测血红素加氧酶1、肿瘤坏死因子a,bcl-2,bax 在移植肝组织中的表达,从分子水平检测血红索加氧酶1、肿瘤坏死因子a,bcl-2,bax mRNA 的表达变化.结果:Ad5-血红索加氧酶1组大鼠肝移植后1,7,21 d的生存率显著高于生理盐水组(P<0.05).与生理盐水组、Ad5-绿色荧光蛋白组及Ad5-血红素加氧酶1+抑制剂原卟啉锌组比较,Ad5-血红素加氧酶1组移植肝的谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05),移植后2 h内门静脉血流量明显增加(P<0.05),血红素加氧酶l活性显著升高(P<0.05),反转录-聚合酶链反应和免疫组化检测中血红素加氧酶1、Bcl-2表达水平增高(P<0.05),Bax、肿瘤坏死因子a表达水平降低(P<0.05).结论:构建重组腺病毒Ad5-血红素加氧酶1可以诱导供肝血红索加氧酶1高表达,显著增加大鼠减体积肝移植后2 h内门静且脉血流,促进移植肝功能的恢复,从而延长肝移植后的生存时间.
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慢性阻塞性肺疾病4例单肺移植
回顾性分析4例慢性阻塞性肺病单肺移植患者的临床资料,均接受尸体供肺移植,双肺弥漫性肺气肿1例接受右肺移植;弥漫性肺气肿并部分相互融合成肺大疱3例接受左肺移植,此3例分别于移植术中(1例)和移植后(2例)接受右肺减容术.移植后采用他克莫司、霉酚酸酯及泼尼松预防排斥反应.同时给予达利珠单抗或抗胸腺细胞球蛋白进行诱导治疗.4例移植手术经过顺利,1例移植后第5天发生急性排斥反应,经甲泼尼龙冲击治疗逆转.2例受者顺利出院,1例存活已超过2年;2例分别于肺移植后第74,77天死亡.
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肝移植过程中肺动脉高压的处理
背景:严重肝功能损害时可出现肺动脉压升高,而肝移植过程中特别是新肝开放时的血流动力学波动也会直接导致肺动脉压力的改变.目的:观察肝移植过程中肺动脉压力的变化,以及出现肺动脉高压时的处理.设计、时间及地点:选择2004-06/2006-06解放军第一八一医院进行肝移植手术的患者为观察对象进行前后对照观察.对象:择期行同种异体肝移植的终末肝病患者13例,均为男性,年龄19-53岁.方法:全身麻醉后应用有创技术及漂浮导管连续监测患者术中平均动脉压、中心静脉压、肺动脉压、肺动脉楔压,通过有效的呼吸管理和持续泵注小剂量硝酸甘油0.1-5.0u g/(kg·min),间断给予前列腺素E11.0-2.0 u g/次,以降低术中门静脉开放时升高的肺动脉压及肺动脉楔压.主要观察指标:平均动脉压和肺动脉压变化.结果:13例肝移植患者移植过程中门静脉开放时均发生不同程度平均动脉压下降,肺动脉压、肺动脉楔压在门静脉开放后5,15 min明显高于开放前(P<0.05).运用硝酸甘油及前列腺素E1后肺动脉压、肺动脉楔压30 min左右恢复到开放前水平.结论:肝移植过程中合理应用硝酸甘油、前列腺素E1能明显缓解门静脉开放时的肺动脉高压.
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肝细胞体外培养技术的研究与进展
目前肝细胞体外培养技术主要有以下几种:单层培养法、胶原凝胶三明治培养法、微载体黏附培养法、微囊包裹培养法、球形聚集培养法、中窄纤维培养法.胶原凝胶三明治培养法制备简单,培养效果明确,但是所培养的细胞数量有限,难于大规模工业化培养;中空纤维培养法能为细胞生长提供了三维空间,增加了肝细胞与培养体系的接触面积,有利于物质代谢与交换,但存在管上细胞分御欠均匀、细胞团块易堵塞半透膜孔隙影响物质交换等弊端:球形聚集培养法不需构建载体,但球体大小不易控制,易造成球体中心肝细胞坏死;微囊包裹培养能提供一个较好的免疫阻隔环境,能在免疫阻隔要求较高的环境下使用.微载体黏附培养法能够在单位体积内培养多数量的肝细胞,能对肝细胞的黏附、生长和分泌提供较好环境,目前微载体的直径和孔径还未达到理想的培养要求,单位体积肝细胞的培养数量还有很大的提升空间.同时培养液配方与共同培养技术的不断改良,必将使体外培养的肝细胞数量与功能达到肿细胞移植所需.
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肝移植后急性排斥反应的诊断及防治
肝移植后急性排斥反应的诊断指标众多.有肝脏功能指标、D二聚体、血清中趋化因子IP10和外周血淋巴细胞CXCR3,HSP70等.肝移植术后急性排斥反应的防治措施除了经典的免疫抑制治疗外,大黄索、雷公藤多甙、受体骨髓间质干细胞等都有可能是有前途的治疗药物或方法.肝移植术后急性排斥反应常见,早期诊断、综合防治是降低其危害的有效手段.了解肝移植术后急性排斥反应的诊断指标和方法,分析肝移植患者手术后预防治疗急性排斥反应的方法对肝移植术后的恢复起到至关重要的作用.