中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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兔骨性关节炎模型构建及早中晚期的特点
背景:传统的骨性关节炎动物模型因复制时间长、稳定性差、成功率差异大且对骨性关节炎的病程未加详细分析从而限制了其应用.目的:以改良的Hulth造模方式观察膝骨性关节炎不同时期的临床及病理特点,界定膝骨性关节炎模型的分期.方法:无菌条件下暴露兔膝关节内侧纵切口长约2 cm,显露膝关节,然后切断前后交叉韧带及内侧副韧带,完整切除内侧半月板,保留关节软骨面.术后不固定伤肢,自由活动,术后1周内均给予80万单位青霉紊预防感染.30 min/d分2次驱赶,连续12周.以不做任何处理兔膝关节为正常对照.造模后4,6,8,10,12周时Mankin评分及电镜、光镜观察股骨内髁的病理特点.结果与结论:模型组4,6周可见早期骨关节炎的改变,表现为滑膜充血增生,关节渗出增多,软骨表层不平整,基质染色轻染,Mankin评分为3.5～3.8分;8周可见骨关节炎中期改变,表现为滑膜增生明显,滑液少,软骨裂隙形成达表层,软骨细胞排列紊,基质染色不均,Mankin评分为8～9分;12周可见骨关节炎晚期改变,表现为滑膜严重结节样增生滑液少而浑浊,骨赘形成严重,软骨下骨暴露,软骨细胞减少,基质染色大部分失染,Mankin评分为12～14分.电镜下观察结果与组织学观察结果相符.结果提示以改良hulth法制作骨性关节炎模型,造模后6周为早期改变,8周为中期,12周为晚期,此模型比较全面地反映了骨性关节炎软骨退变从早期的代偿性增生到失代偿后软骨细胞和基质减少,软骨变软到剥脱缺失为特点的晚期改变的全过程.
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黄芪调控体外培养大鼠成骨细胞I型胶原蛋白的表达
背景:Ⅰ型胶原是体外培养成骨细胞所分泌的特异性胶原蛋白,所形成的网状结构也是成骨细胞矿化功能实现的前提,也是反映成骨细胞骨形成能力的重要指标.诸多报道反映了应用单味黄芪促进成骨细胞增殖的功能,但缺少有关黄芪促进Ⅰ型胶原分泌及表达的研究.目的:观察黄芪注射液对体外培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖及分泌Ⅰ型胶原能力的影响.方法:体外分离培养大鼠成骨细胞.分为用含小牛血清的MEM培养液培养的对照组,分别加入相应体积分数黄芪注射液培养的黄芪组,于培养1,3,5,7,9 d以四甲基偶氮唑盐法观察成骨细胞增殖的影响;以Real-time PCR方法检测黄芪注射液干预6 h后成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白а1 mRNA的表达情况,并用in cell western方法测定培养6 d时成骨细胞I型胶原蛋白的分泌.结果与结论:从培养3 d开始直至培养9 d,与对照组比较,各体积分数的黄芪注射液均能促进成骨细胞的增殖(P＜0.05),这一趋势在培养7 d时达到高峰.不同体积分数的黄芪注射液均能促进COLLа1 mRNA的表达,尤其以15%的黄芪作用明显.以15%和10%的黄芪注射液培养的成骨细胞Ⅰ型胶原的表达量明显高于对照组(P＜0.05).结果证实,黄芪可以促进体外培养的成骨细胞的增殖和分泌Ⅰ型胶原的能力,但具有一定的量效趋势.
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OX40L在C57BL/6与BALB/c小鼠组织的差异性表达及分析
背景:有研究发现C57BL/6小鼠对动脉粥样硬化易感,而BALB/c小鼠却对动脉粥样硬化不易感.OX40L的表达情况与动脉粥样硬化的狭窄程度和心肌梗死的严重度相关,其在两种品系小鼠中是否存在表达差异?目的:分析0X40L在BALB/c和C57BU6小鼠心脏、大脑、肾脏、骨骼肌和脾脏组织的表达差异.方法:取C57BL/6和BALB/c小鼠心脏、大脑、肾脏、骨骼肌和脾脏组织,以Trizol提取总RNA, RIPA Buffer提取组织总蛋白.采用RT-PCR和Westem Blot方法检测两种品系小鼠心脏、脑、肾脏、脾脏和骨骼肌的OX40LmRNA和蛋白的表达.OX40L在两种品系小鼠不同器官间的表达差异.结果与结论:RT-PCR结果显示,C57BL/6小鼠心脏OX40LmRNA表达显著高于BALB/c小鼠(P＜0.05),脾脏OX40LmRNA表达明显低于BALB/c小鼠(P＜0.05),两种品系小鼠大脑、肾脏及骨骼肌OX40LmRNA表达差异无显著性意义;Western Blot结果显示,两种品系小鼠OX40L的蛋白表达均在心脏高;C57BL/6小鼠心、脑及肾OX40L蛋白表达均显著高于BALB/c小鼠(P＜0.05),两种品系小鼠骨骼肌和脾脏OX40L蛋白表达差异无显著性意义.两个品系小鼠OX40L mRNA的表达水平与蛋白表达水平不完全一致.C57BL/6小鼠心脏中OX40L mRNA转录水平较BALB/c高,但在脾脏中表达量较后者低;C57BL/6小鼠心脏、大脑和肾脏OX40L蛋白水平均较BALB/c小鼠高;两种品系小鼠之间的表达差异提示OX40L可能与C57BL/6小鼠易感动脉粥样硬化有关.
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大鼠局部肌肉萎缩实验模型的设计与建立
背景:目前研究肌肉与骨骼关系的常用动物模型均存在不足.已经有研究表明A型肉毒素可以使局部肌肉萎缩,而不影响周围其他的肌肉.目的:尝试是否可以用局部肌肉注射A型肉毒素的方法建立一种较为理想的肌肉萎缩的动物实验模型.方法:4月龄雄性Wistar大鼠25只,采用氯胺酮(0.2 mL/kg)和速眠新(0.2 mL/kg)肌注麻醉,在股骨背侧中部做-0.5 cm切口,暴露股四头肌,右侧股四头肌肌注2 U(0.2 mL)注射用A型肉毒毒素,左侧股四头肌注射等量生理盐水作为对照.分别于模型建立后的1,2,4,6和8周各取5只做肌肉大体、组织学观察.结果与结论:肌肉大体观察发现:与生理盐水侧对照组相比,注射A型肉毒素侧股四头肌体积明显缩小、质量明显降低(P＜0.01);肌肉组织学观察发现:注射A型肉毒素侧股四头肌较生理盐水侧明显萎缩、肌纤维变细、肌纤维细胞核聚集、肌纤维与肌纤维之间间距变小.肉毒素侧1周和2周出现肌肉质量突降,4,6,8周之间肌肉质量增加缓慢,而各时间点生理盐水侧肌肉质量呈显著增加的趋势.通过对局部肌肉注射A型肉毒素可以理想地建立单个目的肌肉萎缩的实验模型,此模型操作性强、重复性好、特异性高,可应用于肌肉与骨骼关系的相关研究.
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新型骨形态发生蛋白2反转录病毒载体的构建及活性检测
背景:骨形态发生蛋白是一种具有潜在活性的蛋白质,当骨组织损伤时其迅速增加并活性的增强,与载体复合能修复动物骨缺损,但将其用做基因治疗的研究未见报道.目的:构建表达重组人骨形态发生蛋白2基因的重组反转录病毒载体,探讨其在成骨细胞中的生物学作用.方法:根据Genbank中人骨形态发生蛋白2基因序列设计并合成骨形态发生蛋白2特异性引物,高保真PCR扩增骨形态发生蛋白2基因,同源重组法将骨形态发生蛋白2 PCR片段连接与克隆载体pDNR-CMV,构成pDNR-CMV-BMP2,经酶切、PCR和测序鉴定后,将重组质粒pDNR-CMV-BMP2和反转录病毒空质粒pLP-LNCX以loxP位点进行同源重组,构成反转录病毒载体pLP-LNCX-BMP2,转染入包装细胞PT67进行病毒包装,并用NIH3T3细胞进行病毒滴度测定;将反转录病毒感染人成骨细胞,四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长变化,转染48 h后Western blotting检测骨形态发生蛋白2蛋白表达.结果与结论:pDNR-CMV-BMP2质粒Sall和EcoRI双酶切、PCR及测序结果均正确,重组质粒pLP-LNCX-BMP2经氯霉素及蔗糖筛选得到的阳性克隆骨形态发生蛋白2 PCR结果阳性,酶切产物与预期相一致;病毒载体pLP-LNCX-BMP2转染PT67后,G418筛选可得到稳定细胞克隆,其上清液中病毒滴度可达到5×10~8pfu;四甲基偶氮唑盐检测中反转录病毒组与正常对照组相比,72 h细胞抑制率无明显差别(P＞0.05),转染48 h后Western blotting可见骨形态发生蛋白2蛋白高表达.结果说明,实验成功克隆了骨形态发生蛋白2基因并构建其反转录病毒表达载体.
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胰岛素与硒联合作用糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号转导通路中PI3K和GLUT4蛋白的表达
背景:PI3K是骨骼肌中胰岛素信号转导途径级联反应中关键的蛋白分子之一,其表达异常可影响GLUT4的合成、分泌、移位等变化,从而使血糖升高.目的:通过检测胰岛素和硒联合应用对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号转导通路有关蛋白激酶(PI3K、GLUT4)表达的影响.方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、糖尿病组、糖尿病+胰岛素组、糖尿病+亚硒酸钠组、糖尿病+胰岛素+亚硒酸钠组.除正常组外,其余4组大鼠腹腔注射链尿佐菌素50 mg/kg复制大鼠糖尿病模型.正常组和糖尿病自由进水和进食;糖尿病+胰岛索组按1 U/(kg·d)皮下注射胰岛素,糖尿病+亚硒酸钠组按180 μg/(kg·d)管饲亚硒酸钠,糖尿病+胰岛素+亚硒酸钠组两药联合用药持续4周;应用免疫印迹和免疫组织化学法检测各实验组骨骼肌胞浆中PI3K和胞膜上GLUT4蛋白表达.结果与结论:免疫组织化学方法所得结果与免疫印迹一致.胰岛索和硒联合应用能明显增加骨骼肌细胞胞浆中PI3K和胞膜上GLUT4蛋白的表达量,说明胰岛索和硒联合应用是通过PI3K途径和增加骨骼肌组织GLUT4蛋白的表达来增强胰岛素信号转导.
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脂质体介导化学合成siRNA转染原代心肌细胞:筛选理想浓度
背景:siRNA转染是完成RNA干扰的关键一步.目前用于心肌细胞的RNA干扰技术多以质粒为载体转染长链shRNA,其步骤复杂.脂质体转染化学合成短链siRNA是一种操作简便,低毒高效的转染方法,将其应用于心肌细胞转染,有利于RNA干扰技术的推广应用.目的:筛选脂质体介导化学合成siRNA转染原代心肌细胞的佳浓度,以及简单高效的RNA干扰操作方法.方法:应用脂质体siPORT~(TM)>NeoFX~(TM)转染试剂介导5,10,20,30 nmol/L的CY3-Negative siRNA转染心肌细胞,同时设立空白对照组,转染24 h后分别应用荧光显微镜,流式细胞仪检测转染效率和细胞凋亡率,筛选优浓度.根据优化浓度转染PHB siRNA,48 h后检测蛋白表达验证转染效果.结果与结论:随CY3-Negative siRNA浓度的增加,在荧光显微镜下观察到激发出红色荧光的细胞比例随之增加,流式细胞仪检测出各组平均转染效率也依次增高(P＜0.05),其中30 nmol/L组转染效率高(P＜0.05),而各实验组与空白对照组之间的细胞凋亡率差异无显著性意义(P＞0.05).将心肌细胞转染30 nmol/L的PHB siRNA,48 h后PHB蛋白表达平均下降74.11%(P＜0.05).实验结果表明,脂质体转染试剂siPORT~(TM) NeoFX~(TM)介导化学合成siRNA转染原代心肌细胞的理想浓度是30 nmol/L.
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降脂壮骨中药对食饵性高脂血症大鼠骨组织骨形态发生蛋白2、雌激素受体表达的影响
背景:研究表明活性骨形态发生蛋白2水平的降低可导致严重的类骨质疏松症状,并发现成骨细胞、破骨细胞及骨髓基质细胞上有雌激素受体的存在,认识到雌激素对骨组织具有直接作用.目的:观察降脂壮骨中药对食饵性高脂血症诱发骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白2、雌激素受体表达的影响.方法:健康SD大鼠27只,随机分为3组:正常对照组:上午和下午灌胃生理盐水5 mL/kg;高脂血症诱发骨质疏松模型组:上午灌胃高脂饮食5 mL/kg,下午灌胃生理盐水5 mL/kg;降脂壮骨中药组:上午灌胃高脂饮食5 mL/kg,下午灌胃降脂壮骨中药水提液5 mL/kg.持续干预8周后采用免疫组织化学方法,对其骨组织中骨形态发生蛋白2、雌激素受体的表达水平进行检测,应用原位杂交方法对骨组织中雌激素受体的mRNA水平进行检测.结果与结论:与模型组比较,降脂壮骨中药组骨组织中骨形态发生蛋白2、雌激素受体表达显著增强(P＜0.01),雌激素受体的mRNA表达水平增高.证实降脂壮骨中药能够使食饵性高脂血症诱发骨质疏松大鼠成骨细胞骨形态发生蛋白2、雌激素受体的表达水平增高,起到改善骨质疏松的作用.
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血管内皮生长因子在激素性骨坏死过程中的变化特点
背景:动物实验显示,激素可导致股骨头内毛细血管明显充盈不良,单位面积内毛细血管密度明显下降,软骨下松质骨内微血管数明显减少,但具体机制尚不清楚.目的:观察激素诱导骨坏死过程中血管内皮生长因子的表达变化.方法:将中国大耳白兔以抽签法随机分马血清加甲基强的松龙组与单纯甲基强的松龙组.参考Matsui的方法制备典型的兔骨坏死动物模型,马血清加甲基强的松龙组经耳缘静脉注射马血清10 mL/kg,间隔2周后,再次相同剂量及方法注射马血清,间隔2周后腹腔注射甲基强的松龙45 mg/(kg·d),连续5 d.对照组腹腔注射甲基强的松龙45 mg/(kg·d),连续5 d.采用RT-RCR技术检测两组用药前、用药后7,14 d,第1次用激素后1,3,7,21,35,49 d骨组织中血管内皮生长因子基因表达,并进行微血管计数.结果与结论:使用马血清后7 d血管内皮生长因子明显增高,此后呈缓慢回落状态,在应用激素后1 d回落到正常用药前水平,随着应用激素时间的延长,血管内皮生长因子mRNA的表达量逐渐减低,以第7,21天为显著(P＜0.05),以后逐渐回升,但不能达到正常水平;微血管计数数量逐渐减少,在21 d时减少明显,与血管内皮生长因子表达量呈正相关.结果提示糖皮质激素抑制了骨组织中血管内皮生长因子的表达,从而抑制了骨内新生血管的形成,使骨组织局部缺血、缺氧状态难以修复重建:血管内皮生长因子的表达与骨组织微血管数量及骨坏死程度密切相关.
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葛根对睾丸切除骨质疏松模型小鼠骨密度和骨构造的作用
背景:研究证实,葛根不仅能够预防卵巢切除雌激素不足骨质疏松模型小鼠骨密度及骨量的下降,而且能够改善骨微细构造,可用于女性闭经后骨质疏松症的预防与治疗.其对男性骨质疏松的治疗是否具有相似的疗效?目的:课题以更接近应用为目的,观察未经提取的植物药葛根对雄激素不足骨质疏松模型小鼠骨密度和骨构造的影响.方法:8周龄雄性ddY小鼠48只,体质量32～35 g,随机数字表法分为假手术组,模型组,低、中、高剂量葛根组和雌二醇组,每组8只.假手术组暴露睾丸与附睾,切除周围脂肪组织:其余各组小鼠摘除双侧睾丸.术后假手术组、模型组和雌二醇组都给予普通饲料,低、中、高剂量葛根组给予含有5%,10%和20%葛根粉的饲料.雌二醇组1713-雌二醇通过体内小渗透泵自动给药0.03 μg/d.饲料给予均为4.0 g/d.4周后,检测精囊质量,以双能X射线骨密度测定仪检测股骨骨密度,显微CT分析股骨远端干骺端海绵骨微细构造.结果与结论:模型组股骨全体骨密度下降了10.9%,这种下降被低剂量葛根完全抑制,被中剂量葛根抑制进一步加强,但两者差异无显著性意义;高剂量葛根组骨密度较模型组、假手术组分别高出26.1%,12.4%,作用强度与雌二醇相当.低剂量葛根完全抑制了雄激素缺乏导致的股骨骨小梁数目下降以及骨小梁间距增大,中剂量葛根抑制作用更强,但两组之间差异无显著性意义;高剂量葛根组抑制作用强,能够增加骨量和骨小梁数目达到显著高于假手术组水平.葛根各剂量对精巢无刺激作用.提示葛根在不刺激精囊的条件下,低、中剂量葛根可完全抑制雄激素缺乏所致的骨密度和骨量下降,改善骨构造,高剂量效果更显著,与雌二醇作用相当.
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躯干等速向心屈伸运动时屈伸肌肌力的变化:脊柱易受损伤的角度范围
背景:目前对躯干肌肌力的研究主要集中于腰痛患者肌力变化方面,而对脊柱容易损伤的角度范围的研究不多.目的:探讨躯干等速向心屈伸动作时屈伸肌肌力变化的特征及脊柱容易损伤的角度范围.方法:苏州大学2005/2007级研究生,健康男性14名,自愿参加测试.选用瑞士产CON-TREX人体肌力评估和训练系统,测量受试者等速向心运动时的屈伸肌肌力及脊柱角度.测试速度分别为30,60,90,120,180(°)/s,每种速度下,受试者尽自己大力量屈伸躯干4次,组间休息5 min.主要观察:①受试者躯干运动的关节活动范围.②等速向心运动屈伸峰值力矩、屈伸肌峰值力矩比及到达峰值力矩的平均角度的变化.③等速向心运动屈伸肌总功、平均功率.结果与结论:①等速向心运动时,伸肌的峰值力矩值随角速度的增加而减少(P＜0.05),屈肌峰值力矩值未见规律性的变化;屈、伸肌的峰值力矩比随角速度的加快而增大,但差异无显著性意义(P＞0.05).②慢速等速向心运动时,不同角速度下屈、伸肌到达峰值力矩角度分布离散,30(°)/s时为-48.56°,90(°)/s时为-46.18°;快速运动时,屈、伸肌出现大峰值力矩角度基本接近,120(°)/s时分别为-48.71°,-51.61°, 180(°)/s分别一54.86,-53.11°.⑨等速向心运动时,在不同角速度下,屈、伸肌的总功均随角速度的增加而减少,伸肌总功大于屈肌,伸肌总功的变化差异有显著性意义(P＜0.05);屈、伸肌的平均功率随角速度的增加呈线性上升,屈肌平均功率始终小于伸肌(P＜0.01).结果提示:①等速向心运动时,躯干屈伸肌群的肌力随角速度的增加而减小,躯干在慢速屈伸运动时稳定性较好.②快速等速向心运动时,突受外力打击后容易引起肌肉损伤和脊柱不稳.③等速运动时屈伸肌做功随运动速度下降而降低,但肌肉的爆发力随运动速度的增快而加大.
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去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因与血管平滑肌细胞增殖
背景:线粒体融合素2基因作用于血管平滑肌细胞Ras蛋白,通过胞外信号调节蛋白激酶1/2通路抑制细胞增殖.线粒体融合素2基因氨基酸序列第442位丝氨酸为蛋白激酶A磷酸化位点,与其磷酸化状态密切相关,能参与其功能调控.目的:观察大鼠线粒体融合素2基因在去除蛋白激酶A磷酸化位点后对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其相关信号通路.方法:利用已构建的携带绿色荧光蛋白基因、线粒体融合素2基因和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因的3种重组腺病毒,感染大鼠主动脉血管平滑肌细胞,将其传代培养3～10代后以抽签法随机分为4组:①不加干预的对照组.②感染携带绿色荧光蛋白的对照组(Adv-GFP组).⑨感染携带线粒体融合素2基因的实验组(Adv-Mfn2组).④感染携带去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因的实验组(Adv-Mfn2-PKA(△)组).激光共聚焦显微镜观察完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在细胞中的定位.Westernblot检测p-ERK1/2表达水平及完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在血管平滑肌细胞中的表达.MTT法绘制细胞生长曲线.结果与结论:完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在血管平滑肌细胞中均表达蛋白特异性条带.两种基因表达产物都主要分布于线粒体外膜.与对照组和Adv-GFP组相比,Adv-Mfn2组吸光度值在第3,4,5,6天都显著降低(P＜0.01＝,Adv-Mfn2-PKA(△)组吸光度值无明显变化.与对照组和Adv-GFP组相比,Adv-Mfn2组p-ERK1/2表达水平显著降低(P＜0.01＝,Adv-Mfn2-PKA(△)组无明显变化.提示去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因定位于线粒体外膜,对血管平滑肌细胞的增殖无拮抗作用,对胞外信号调节蛋白激酶1/2通路无抑制作用.
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脊髓背角核因子κB表达与佐剂关节炎大鼠的痛觉过敏
背景:核因子kB作为炎症反应的启动因子,可刺激损伤部位或炎症局部基因的转录,促进炎性因子的产生,导致疼痛的发生,但其在参与慢性炎性疼痛脊髓机制中的作用目前研究甚少.目的:制备稳定的油包水剂型完全弗式佐剂单关节炎大鼠模型,并对大鼠疼痛行为学痛觉过敏及脊髓背角核因子KB表达进行观察和探讨.方法:24只大鼠被随机分为假手术对照组、完全弗氏佐剂组,每组12只.大鼠右踝关节腔内注射含灭活结核杆菌的黏稠油包水型完全弗式佐剂,假手术组注射50 μL生理盐水至大鼠右踝关节腔内,观察大鼠完全弗式佐剂注射前2 d,注射后4,7,14,21,28 d的机械压痛、辐射热痛、关节肿胀周径(内外踝下缘周长)及脊髓背角核因子kB表达的变化.结果与结论:①注射3 h,大鼠右踝关节出现明显肿胀,但局部红、热不明显,注射24 h,右踝关节红肿显著且波及足跖面,并持续4周.②注射4 d～4周,大鼠右踝关节周径在较对侧及注射前显著增加(P＜0.01).⑨与注射前及假手术组相比,完全弗氏佐剂组机械压痛阈值在注射后4 d明显下降,注射后21 d降至低值(P均＜ 0.01);注射4 d,与注射前相比,完全弗氏佐剂组大鼠息侧辐射热痛阈值明显下降,7 d降至低点后逐渐稳定,并持续4周(P均＜0.01).④完全弗氏佐剂组大鼠患侧腰段脊髓背角Ⅰ～Ⅵ层核因子KB表达明显高于假手术组(P＜0.01).证实关节腔内注射油包水型完全弗式佐剂可获得稳定的单关节炎疼痛模型,大鼠关节致炎后出现明显的辐射热及压痛痛觉过敏,且持续时间长,痛敏阈值稳定,脊髓背角Ⅰ～Ⅵ层核因子kB表达明显升高.
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神经生长因子对瘢痕成纤维细胞生物学特征的影响
背景:神经生长因子由多种细胞分泌合成,如炎性细胞、修复细胞等,其生物学作用呈多样性,与创伤修复过程密切相关,但其作用机制尚不明了.目的:观察神经生长因子对瘢痕成纤维细胞生物学特征的影响.方法:8份临床手术切除标本,其中5份为面颈部增生性瘢痕或瘢痕疙瘩标本,未接受过任何治疗;3份为包皮环切术切的包皮标本(正常组织).采用组织块法培养瘢痕及正常皮肤成纤维细胞,消化法传代.取3～6代对数生长期瘢痕组织及正常组织成纤维细胞,接种于96孔培养板中,设置实验组(瘢痕成纤维细胞组)和对照组(正常皮肤成纤维细胞组):每组设两个平行孔,分别加入3.33,0.33 mg/L神经生长因子各50 μL.采用倒置显微镜观察成纤维细胞形态.培养24.48,72 h后,MTT测定各孔的吸光度.流式细胞术分析成纤维细胞DNA含量及细胞凋亡情况.结果与结论:成纤维细胞为贴壁生长型细胞,瘢痕和正常皮肤组织块在接种后4～6 d可见细胞从组织块中游出,逐渐向周围扩展开.与正常皮肤成纤维细胞相比,病理性瘢痕成纤维细胞体积较大,形态和排列不规则.MTT结果显示,神经生长因子可促进正常及瘢痕成纤维细胞的增长,后者更为明显.流式细胞术测定结果显示,加入神经生长因子后,瘢痕成纤维细胞增殖期S-G_2-M细胞百分数高于对照组,且凋亡水平降低.提示神经生长因子对正常及瘢痕皮肤成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,对瘢痕皮肤的作用更明显.
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微波热凝后骨骼肌体积及功能的变化
背景;微波利用其热效应在医学领域得到广泛应用,经微波热凝作用后造成局部组织凝固性坏死,坏死部位由纤维组织修复.但是微波热凝是否能产生缩容效果运用于口腔临床,目前经检索国内外尚未见报道.目的:观察微波热凝骨骼肌后肌肉体积和功能的改变,探讨微波热凝用于骨骼肌体积缩小的可能性.方法:20只新西兰大白兔暴露双侧胫骨前肌,采用2 450 MHz微波治疗仪以70 W微波热凝-侧胫骨前肌20 s,另一侧不做微波热凝作对照.分别于热凝后24,48 h和1,8周,随机各处死5只兔,测量双侧胫前肌体积变化,8周处死动物前,行肌电生理检测双侧胫前肌的肌动力.结果与结论:微波热凝后24,48 h骨骼肌体积增大[(5.82±0.93),(6.04±0.47)mL],48 h体积大,1周后肌肉体积开始缩小[(4.90±0.80)mL],8周后体积[(4.27±0.67)m L]缩小23.6%;肌电生理检测显示对照组与热凝组潜伏期分别为(1.765±0.393),(1.760±0.394)ms,波宽分别为(6.273+0.808),(6.259±0.773)ms,两组之间传导速度及波宽差异无显著性意义(P＞0.05).结果证实微波热凝后48 h内肌肉体积增大,随后体积减小,骨骼肌可保持肌功能.
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强直性脊柱炎患者外周血可溶性CD146的表达及意义
背景:研究发现在炎症因子的刺激下内皮细胞和活化的T细胞表面表达CD146显著增加,故推测CD146可能参与了组织的炎症反应.目的:观察强直性脊柱炎患者外周血可溶性CD146的表达水平和临床意义.方法:选择上海交通大学附属第六人民医院住院的强直性脊柱炎患者62例,分为两组.活动期组46例,非活动组16例.同时选择同期医院健康职工和大学生20名为对照组.在强直性脊柱炎患者初诊时评估BASDAI、BASFI、强直性脊柱炎患者总体评分(PGA)、夜间痛、总体背痛评分、晨僵时间并测定红细胞沉降率、C-反应蛋白水平.应用ELISA法检测62例强直性脊柱炎患者与20例正常人外周血可溶性CD146的表达水平、魏氏法测定血沉及免疫比浊法测定C-反应蛋白.对强直性脊柱炎患者可溶性CD146与各项检测指标相关分析.结果与结论:强直性脊柱炎患者的外周血清可溶性CD146的表达水平较正常对照组显著增高(P＜0.05):活动期强直性脊柱炎患者可溶性CD146的表达水平较非活动期和正常对照组显著增高(P＜0.05);强直性脊柱炎患者血清可溶性CD146的表达水平与BASDAI呈正相关(P＜0.05);累及外周关节型者血清可溶性CD146较单独中轴型强直性脊柱炎患者和正常对照组显著增高(P＜0.05).结果表明,外周可溶性CD146表达水平的增加与强直性脊柱炎患者疾病的活动性有关,其可能参与了强直性脊柱炎的发病过程.
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肩袖损伤模型兔持续被动活动对骨-肌腱界面早期修复的影响:MRI不同时点影像证实
背景:肩袖损伤中以冈上肌腱损伤为多见,其修复的难点在于骨一肌腱界面的重建,目前缺乏合适的动物模型以及确切的治疗方法.目的:建立兔肩袖损伤修复的实验动物模型,通过MRI观察持续被动活动对肩袖骨-肌腱界面损伤重建术后骨-肌腱界面早期修复的作用,为肩袖损伤修复术后康复制定一个合适的康复程序.方法:8月龄雄性新西兰大白兔16只,构建双侧冈上肌腱急性损伤模型后重建其在肱骨大结节上的止点,随机分为自由活动组(n=4)和持续被动活动组(n=12).持续被动活动模型与重建组运动术后第2天开始应用自制兔肩关节持续被动活动器,以2,4,10(°)/s不同持续被动活动速度进行屈伸75°～75°运动.分别在术前和术后第1,2,4周观察各组动物一般情况及不同持续被动活动速度时兔肩袖骨-肌腱界面的MRI影像学变化.结果与结论:大体观察可见重建2周后切口愈合良好,拆线后未见切口感染、血肿、裂开等;MRI检查结果显示:术后各组肩袖骨-肌腱界面逐渐愈合,术后第1,2,4周不同时间点与自由活动组相比,持续被动活动组在不同屈伸角度下骨-肌腱界面修复迅速,每屈伸75°～75°运动速度为4(°)/s时,骨一肌腱界面的修复明显好于自由活动组.证实该动物模型能够很好的满足实验的需要,兔冈上肌腱损伤重建术后第2天开始,不同速度持续被动活动屈伸运动,可促进骨一肌腱界面的修复,以4(°)/s的持续被动活动速度佳.
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血管冻干工艺过程中升华界面移动特性的微CT实验
背景:前期实验发现冻干过程中物料内部的孔隙分部、空隙连通度等对内部传热传质影响较大,但对于干燥过程热质迁移的机制未阐明.目的:在前期实验基础上,以微CT为分析工具,尝试对冷冻干燥过程中升华界面移动特性进行实验观察分析,希望对血管冻干工艺提供参考.方法:以新鲜猪主动脉为材料使用微CT扫描仪的扫描成像、图像重构及灰度值分析技术对血管在冻干时升华过程进行观察分析. 结果与结论:冻干温度曲线斜率初期较大,升华速率较快,由血管的二维横截面重构图像中可以看出冻干区与冰晶区的灰度值差别较大,升华界面明显,升华是在物料的外表面和内表面同时进行,界面移动明显.随着时间推移,温度曲线斜率变小,升华速率也随之变慢,界面移动逐渐不明显.对于竖直放置的血管在底部进行加热的干燥过程,升华是在外表面和内表面同时进行的.升华界面逐渐向血管壁面中心移动.冻干过程随时间推移热质传递阻力增大,升华速率减慢.
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体外培养人晶状体上皮细胞HSP27的表达
背景:晶状体独特的解剖位置使其长期暴露于应激环境中.但环境应激能否引起人晶状体上皮细胞中热休克蛋白表达增加?并且这种合成的增加是发生在转录水平,还是在翻译水平,至今尚不知.目的:观察在高温、氧化应激条件下,HSP27在人晶状体上皮细胞中的表达和定位情况.探讨白内障的发病机制.方法:体外培养人晶状体上皮细胞,分别在高温(45℃)、氧化(50 mmol/LH_2O_2)条件下培养30min后,恢复至正常条件.于0,2,4,6,16,24 h不同时间段,采用免疫细胞化学、RT-PCR法检测HSP27的表达情况.结果与结论:晶状体上皮细胞在生理和应激情况下均有HSP27的表达.热休克和氧化应激后2 h导致HSP27mRNA和蛋白表达明显增加,6 h达高峰,16 h仍维持在较高水平.应激导致的HSP27蛋白阳性颗粒由胞浆转移至胞核,并随着时间逐渐转移回胞浆.证实晶状体上皮细胞中存在HSP27.应激情况下,诱导HSP27合成增加,其作为一种对抗应激的蛋白质可能对晶状体上皮细胞起着重要的保护作用.
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自体肋间神经联合酸性成纤维细胞生长因子移植治疗高位脊髓损伤
背景:酸性成纤维细胞生长因子具有调节细胞增殖、移行、分化和生存的作用,也可以下调已知轴突再生的抑制因子如蛋白聚糖等,帮助轴突克服这些抑制因子,对神经纤维再生有重要作用.目的:观察酸性成纤维细胞生长因子联合周围神经移植治疗大鼠高位脊髓损伤的可行性及效果.方法:健康成年雌性SD大鼠108只随机抽签法分为自体神经组、自体神经联合生长因子组、高位脊髓横断组.咬除大鼠T_(8-10)棘突、椎板,显露硬膜囊,水平切断高位脊髓并切除3 mm,显微镜下确认无神经纤维相连.自体神经组、自体神经联合生长因子组取双侧第8～10对肋间神经各2 cm,将肋间神经交叉移植入高位脊髓缺损处(近端白质与远端灰质、远端白质与近端灰质),分别以纤维蛋白凝胶、含有酸性成纤维细胞生长因子的纤维蛋白凝胶固定植入的肋间神经,缝合硬膜.高位脊髓横断组断端间旷置.术后90 d,行体感诱发电位及运动诱发电位检测观察神经电生理恢复情况.术后76 d,生物素葡聚糖胺顺行神经示踪观察运动传导束恢复情况.术后60 d,后肢BBB运动功能评分观察肢体运动恢复情况.结果与结论:高位脊髓横断组大鼠均未引出体感及运动诱发电位波形.自体神经组、自体神经联合生长因子组均可引出体感及运动诱发电位,自体神经联合生长因子组体感诱发电位及运动诱发电位的平均潜伏期和波幅、BBB评分均明显优自体神经组(P＜0.01).自体神经组和自体神经联合生长因子组在损伤区有较多生物素葡聚糖胺标记阳性神经纤维通过,明显多于高位脊髓横断组(P＜0.01),自体神经联合生长因子组多于自体神.经组(P＜0.01).示自体周围神经移植酸性成纤维细胞生长因子能更好地恢复高位脊髓损伤后大鼠肢体运动功能.
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无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经修复坐骨神经缺损
背景:作者前期已经成功将无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经,并证明可以促进周围神经再生.目的:构建组织工程人工神经,观察和验证桥接大鼠坐骨神经缺损后的神经功能恢复情况.方法:成年雄性SD大鼠60只构建大鼠坐骨神经15 mm缺损模型.随机分成3组,每组20只.桥接大鼠坐骨神经缺损,实验组采用组织工程人工神经,空白对照组采用无细胞组织工程神经支架,自体神经对照组采用自体神经移植.桥接后12周通过大体观察、胫骨前肌湿质量、组织学等方法分析坐骨神经组织学及功能恢复情况.结果与结论:桥接术后12周:实验组大鼠肢体可以支撑着地,钳夹大鼠手术侧足底皮肤出现逃避反射,足底皮肤s.100蛋白染色呈阳性反应.实验组与自体神经移植组胫骨前肌湿质量比差异无显著性意义(P＞0.05).实验组辣根过氧化物酶逆行示踪实验显示脊髓、后根神经节均可见数量不等的辣根过氧化物酶标记阳性细胞.实验组移植物与自体神经移植组有髓神经纤维数、髓鞘厚度、神经组织面积比较差异无显著性意义.实验结果验证了无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经修复大鼠坐骨神经缺损,可以促进神经组织学的修复重建和功能的恢复.
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软骨细胞、胶原纤维及蛋白多糖在家兔不稳定膝关节软骨退变进程中的变化
背景:膝关节外伤可引起膝关节不稳定,其运动轨迹发生改变,继而可致关节软骨损伤,关节软骨中的主要成分软骨细胞、胶原纤维及蛋白多糖早期将发生变化.目的:比较研究两种家兔不稳定膝动物模型软骨退变进程中软骨细胞、胶原纤维、蛋白多糖变化,探讨早期不稳定膝关节软骨退变的发生机制.方法:取大耳白兔50只,随机分为3组前交叉韧带切除组、内侧副韧带+半月板切除组分别切除右后肢前交叉韧带、右后肢内侧副韧带和半月板,正常对照组不干预,分别在建模1,2,3,4和5周后分批于膝股骨内髁软骨取材,进行软骨组织大体和组织学观察、软骨损伤程度Markin评分;测定软骨组织蛋白多糖及软骨基质中胶原纤维含量.结果与结论:不同时期的不稳定膝关节软骨有程度不一的软骨细胞凋亡.除前交叉韧带切除组第1周外,各时间点两手术组Mankin评分均高于正常对照组(P＜0.05),以术后5周组为显著.前交叉韧带切除组术后3,4周软骨细胞变性,蛋白多糖丢失,术后第5周软骨退变更加显著,内侧副韧带+半月板切除组变化较前交叉韧带切除组严重.前交叉韧带切除组3,4,5周及内侧副韧带+半月板切除组2,3,4,5周软骨胶原纤维明显低于正常对照组(P＜0.05).结果表明,膝骨关节不稳定,早期关节软骨退变的程度与软骨细胞数目的减少、胶原纤维网的破坏和蛋白多糖的丢失有关,软骨退变过程中存在软骨修复.
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不同处理方法同种异体半月板移植修复兔膝关节软骨的远期效果比较
背景:目前尚无理想的材料来替代半月板,半月板移植就成为半月板损伤保留半月板功能较为可行的治疗方法.目前移植半月板的保存方法主要是新鲜半月板、低温保存的半月板和冻干保存的半月板.目的:观察经不同方法处理后的兔半月板移植后的远期效果差异.方法:成年新西兰大白兔70只,其中30只作为供体取出半月板.将原有的半月板切除制成半月板缺失模型.随机将大白兔分为4组,每组10只.①半月板缺失组作为对照.②新鲜半月板组移植新鲜半月板.③低温半月板组移植低温保存的半月板.④冻干半月板组移植冻干保存的半月板.30个供体其中10个行新鲜移植,另20个分别行低温保存、冻干保存1周后移植.术后12个月处死兔取标本,进行动物一般观察.半月板大体观察和组织学观察.结果与结论:移植兔切口均愈合好,无死亡.大体观察:新鲜半月板移植组外形、质地和弹性均接近正常半月板.胫骨平台覆盖好,胫骨平台和股骨髁软骨无额外磨损.低温保存、冻干保存半月板移植组半月板边缘愈合好,但是体积缩小,弹性差.胫骨平台有部分没有半月板覆盖.病理观察:新鲜移植半月板切片显示胶原纤维排列、软骨细胞的形态、数量和分布,均与正常半月板相近,而低温保存、冻干保存半月板移植组的半月板切片显示胶原纤维稀疏,数量较新鲜移植的半月板少.结果表明,同种异体半月板移植能够成活,并且能具有一定的结构和功能,防止膝关节退变.但是以新鲜移植的半月板效果好.低温保存和冻干保存的半月板术后1年出现不同程度的退变和体积缩小.
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转染碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞复合小肠黏膜下层构建的组织工程皮肤
背景:研究证实,小肠黏膜下层不存在免疫原性,不会引起异种移植中常见的排斥反应,是一种比较理想的人工真皮替代物.目的:通过基因转染的方法将碱性成纤维细胞生长因子基因转染至骨髓间充质干细胞,并复合猪小肠黏膜下层构建组织工程皮肤.方法:日本大耳兔骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增后,通过pCDNA3.1质粒将碱性成纤维细胞生长因子基因转染至生长状态良好的骨髓间充质干细胞,并将转染后的细胞接种于制备好的猪小肠黏膜下层上,进行体外联合培养,构建组织工程皮肤.观察细胞生长情况,流式细胞术检测骨髓间充质干细胞表型,WesternBIot检测pCDNA-bFGF真核表达载体转染兔骨髓间充质干细胞的结果,并观察组织工程皮肤的结构.结果与结论:传代后骨髓间充质干细胞生长迅速,呈长梭形,形态良好.细胞的表面抗原CD90、CD44有阳性表达,而CD45为阴性.碱性成纤维细胞生长因子基因转染入兔骨髓基质干细胞并能稳定表达,转染后的骨髓间充质干细胞在猪小肠黏膜下层中生长良好,可体外构建组织工程皮肤.
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兔胫骨骨延长模型在低强度脉冲超声刺激条件下的骨再生与成熟
背景:实验证实,低强度脉冲超声有促进骨折愈合的作用.但低强度脉冲超声对骨折愈合早期骨质再生成熟的影响及其相关的作用机制仍不十分清楚.目的;创新性提出低强度脉冲超声能够在兔胫骨骨延长动物模型牵拉成骨早期骨再生成熟中发挥正效效应的理论假设,并期望以超声干预与不干预进行对照比较予以验证. 方法:36只成年健康新西兰兔随机数字表法分为超声治疗组和对照组,每组18只.所有动物均行胫骨中段截骨,以Orthofix M103型迷你外固定架延长器固定,术后7 d以0.5 mm/12 h延长10 d,总延长长度为10 mm,超声治疗组在延长完成后以低强度脉冲超声骨折治疗仪治疗,20 min/d,1次/d,对照组不给予低强度脉冲超声治疗.治疗4,8,12周后,X射线评定胫骨骨折断端愈合程度,采用Image J图像分析软件分析计算骨痂生成率;延长区新骨作苏木精-伊红染色、Masson三色染色、VG染色后光镜下组织学分析,并在显微镜下测新骨占总骨痂的面积.结果与结论:36只兔均进入结果分析.治疗4周后对照组仅见外骨痂连接形成骨桥,骨痂区密度低,还可见部分骨痂缺如:超声治疗组骨早期再生成熟优于对照组,表现在两断端骨痂影密度增高,数量增多,骨痂影由两端向中央生长,被密度高的骨痂取代,外骨痂已开始被吸收,骨痂充满延长区,密度增高增粗,骨折处皮质骨密度接近正常皮质骨,骨痂生成率明显提高(P＜0.05),与8,12周无差异.组织学分析显示,超声治疗组治疗4,8,12周时新骨形成早于对照组,治疗4周新骨占总骨痂面积的百分比大于对照组,治疗8,12周后两组新骨占总骨痂面积的百分比无差别.提示低强度脉冲超声可促进新骨形成,增加骨痂面积,在兔胫骨骨延长动物模型牵拉成骨后的骨再生成熟中有促进作用.
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牵张成骨对唇腭裂继发颌骨畸形修复效果的Meta分析
背景:牵张成骨对唇腭裂继发颌骨畸形的修复效果尚不清楚.目的:评估牵张成骨对唇腭裂继发颌骨畸形的修复效果.方法:通过系统检索1998/2009中国期刊网全文数据库、万方数据库、中文科技期刊全文数据库、CBM文章库、Medline(ovid)、science direct、ISI以及手工检索国内国外学者公开发表的牵张成骨矫治唇腭裂继发颌骨畸形方面的文献.有关牵张成骨矫治唇腭裂继发颌骨畸形的临床研究,要求研究方法和测量指标的赋值方式相似,必须包括研究目的、设计、具体统计方法,其研究结果均可提供加权均数差及95%CI或可以换算成OR值及95%C/的基础数据,样本量不少于3例,以患者治疗前后颌面部变化作自身对照.运用Meta分析对牵张成骨前后唇腭裂患者颌面部前后向、垂直向X射线头影测量的软硬组织指标上下牙槽座角、前牙覆盖、颅底-上牙槽座角和鼻唇角进行综合定量分析.根据资料异质性检验,上下牙槽座角、前牙覆盖指标合并效应量加权均数差采用随机效应模型,其余指标均采用固定效应模型.计算其合并效应量加权均数差及其95%C/.结果与结论:共纳入文献9篇,患者123例.资料的异质性检验结果显示,上下牙槽座角、覆盖的研究具有异质性,而颅底一上牙槽座角、鼻唇角的研究具有同质性.漏斗图示纳入的文献不存在发表偏倚.Meta分析结果显示,上下牙槽座角、覆盖、颅底一上牙槽座角、鼻唇角的合并效应量加权均数差均小于0,结果均具有显著性意义.此次Meta分析在一定程度上证实了口外支持式前牵张对唇腭裂继发颌骨畸形修复疗效,可为临床医师选择矫治颌骨畸形术式提供一定的指导.分析结果认为,唇腭裂继发颌骨畸形患者经Le Fort Ⅰ截骨、口外支持式前牵张后可有效延长前徙上颌骨,使颅底-上牙槽座角、上下牙槽座角角度增大,上唇曲度变平,鼻唇角趋向增大,矫正反覆盖情况,恢复正常的咬合覆盖关系.
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软骨组织工程基因转染技术中目的基因的研究与进展
目的:阐述软骨组织工程中的基因转染技术及其应用的研究现状,对目的基因的种类和选择进行,并提出其进一步应用的前景.方法:以cartilage tissue engineering,gene transfer为检索词,检索Science Direct数据库(2003-01/2009-04)i以软骨组织工程,基因转染为检索词,检索CNKI数据库(2003-01/2009-04).文献检索语种限制为英文和中文.纳入与软骨组织工程基因转染相关的内容,包括临床和基础研究;排除重复研究和明显不符合标准的文章.观察软骨细胞的分化情况及基因表达情况.结果:计算机初检得到90篇文献,根据纳入排除标准,对软骨组织工程中的基因转染技术和基因的种类和选择进行分析.基因转染技术在软骨组织工程领域有着广阔的应用前景.选择哪些与软骨修复相关的基因作为转染的目的基因,是软骨组织工程中亟待解决的课题.目前用于研究的目的基因主要分为刺激软骨细胞增殖分化和基质形成、抑制软骨细胞肥大和成骨分化、抗炎性反应、抑制衰老和抑制凋亡这几大类.结论:选择适当的目的基因,并用安全的基因转染方法进行软骨修复具有特别重要的意义.基因转染技术能否应用于临床将取决于是否能构建出安全有效的载体、目的基因和转染系统.
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低氧训练对骨骼肌结构和功能的影响
背景:低氧训练配合运动训练来增加机体的缺氧程度,以调动体内的技能潜力,抵抗缺氧生理反应并积极适应,从而达到提高运动成绩的目的.目的:总结低氧训练对骨骼肌结构和功能的影响,为低氧训练提供理论依据和指导作用.方法:以"hypoxic training,skeletal muscle,function,structure"为检索词,检索PubMed数据库(1990/2009-03);以"低氧训练、骨骼肌、功能、结构"为检索词,检索CNKI数据库(2000/2009-05).文献检索语种限制为英文和中文.纳入低氧训练对骨骼肌结构和功能影响相关的内容,排除重复性研究.结果与结论:计算机初检得到144篇文献,根据纳入排除标准,对文献进行分析.低氧训练避免传统高原训练所引起的弊端,可以根据机体的低氧适应能力,调节低氧环境,保证正常的训练,使骨骼肌获得有益的生理适应.与单纯的低氧刺激相比,不同的低氧形式刺激和不同的训练方法结合成为不同的低氧训练模式,对骨骼肌功能和结构的影响机制更为复杂.低氧训练对骨骼肌功能和结构的影响,主要在于低氧和训练的结合形式.实验的研究对象和测试方法的不同都有可能左右实验的结论,会影响低氧训练对骨骼肌作用的机制探讨.
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线粒体DNA多态性在人类学研究中的应用
背景:线粒体DNA具有多拷贝数、母系遗传、突变率高、极少发生重组等特性,在分子生态学、分子遗传学、法医学和人类学研究上都有重要的意义. 目的:综合分析线粒体DNA研究方法的发展,探讨其在人类学研究方面的应用.方法:以mitochondrial DNA,polymorphism,haplogroup为检索词,检索Pubmed数据库(1999-01/2009-04).文献检索语种限制为英文.纳入人类学相关的内容,排除动物实验.结果与结论:计算机初检得到235篇文献,33篇符合纳入标准.线粒体DNA具有多拷贝数、母系遗传、突变率高、极少发生重组等特性,通过分析变异及其分布范围与频率等信息,来推断不同人群体之间的关系以及重建群体事件.线粒体DNA变异信息的提取方法经历了低分辨率RFLP、高分辨率RFLP、测序和RFLP与高变区测序相结合的变迁.线粒体DNA多态性在推断不同人群亲缘关系、不同人群族源和不同人群迁移路线3个方面的应用具有极其重要的意义.世界范围内各个群体的线粒体DNA数据库不完整制约着其在人类学方面的应用.改进现有的数学统计模型并且建立、丰富全球范围内各个群体的线粒体DNA数据库是今后研究的主要方向.线粒体DNA在分子生态学、分子遗传学、法医学和人类学以及组织工程研究上都有重要的意义,特别是在研究人类起源和比较不同人群亲缘关系方面更具有重要的辅助作用.
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胰岛素样生长因子与运动性心肌肥大
背景:胰岛素样生长因子1对心脏具有重要的生物学效应,可以促进心肌和血管平滑肌的生长和代谢.目的:综述胰岛素样生长因子1的生物学效应,以期明确其对运动性心肌肥大的发生机制.更好地利用运动对IGF1的影响来实现心脏适应性肥大.方法:以"exercise-induced cardiac hypertrophy.insulin-like growth factor,exercise"为检索词,检索Pubmed数据库(1990-01/2009-04);以运动性心肌肥大,胰岛素样生长因子,运动为检索词,检索CNKI数据库(1990-01/2009-04).文献检索语种限制为英文和中文.纳入与胰岛素样生长因子联系紧密的动物实验研究和临床应用研究;排除内容陈旧的文献和Meta分析.结果与结论:计算机初检得到41篇文献,根据纳入排除标准,对其中31篇文献进行分析.胰岛素样生长因子与其他生长因子一起协同促进多种细胞的分化成熟.现有资料表明血清及心脏局部胰岛素样生长因子1对心肌肥大的发生具有重要作用.文章采用文献资料法,分析了循环和心肌胰岛素样生长因子的产生和作用机制,探讨了心脏局部胰岛素样生长因子的功能以及运动对其的影响;得出了运动能改变循环和心肌胰岛素样生长因子的表达以及心脏局部胰岛素样生长因子与运动性心肌肥大的形成有关.
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脂肪间充质干细胞在组织工程中的应用
背景:脂肪间充质干细胞与骨髓间充质干细胞具有相似的形态学及生物学特性,可作为组织工程的种子细胞来源.目的:深入认识脂肪间充质干细胞的生物学特性,对其在组织工程中的研究进展及临床应用、基础研究前景进行探讨.方法:以adipose tissue-derived stem cell,tissue engineering,stem cells为检索词,检索Pubmed数据库(1999-01/2009-06).以脂肪间充质干细胞,组织工程为检索词,检索CNKI期刊全文数据库(1999-01,2008-12).文献检索语种限制为英文和中文.以脂肪间充质干细胞成骨和软骨的能力以及脂肪间充质干细胞和基因转染技术联合治疗疾病的效果为评价指标.纳入大鼠脂肪和骨髓来源间充质干细胞成骨分化比较的体外研究,排除重复性研究及目的与本文不相关的研究.结果与结论:脂肪间充质干细胞取材方便,来源丰富,可在体外稳定增殖传代,与骨髓间充质干细胞具有相似的形态学及生物学特性,在一定诱导条件作用下可以定向分化为中胚层及内、外胚层组织细胞.脂肪间充质干细胞联合组织工程学支架在一定程度上可以修复骨、关节软骨的缺损,但新生软骨的质量与周围软骨的连接、生物力学强度、未来退化等都与正常的软骨有一定差距,尚需深入研究.随着人们对成体间充质干细胞研究的不断深入,发现因间充质干细胞具有自我扩增和分化潜能,使导入的"外源基因"能够有效扩散;获取和体外扩增比较容易,可在体外对其进行基因改造和修饰,且其易被外源基因转染.因此,脂肪来源的间充质干细胞可以结合基因工程学,应用于基因治疗.但是在当前研究方面,尚存在基因载体潜在致癌性,转染后对人体及干细胞是否产生不良影响等问题尚未阐明.
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关节软骨的损伤与修复:自体移植、基质诱导、内置支架及组织工程化培养
背景:由于缺乏血管和淋巴分布,关节软骨组织的自我修复能力较差.目的:概述自体软骨细胞移植的研究进展,介绍基质诱导自体软骨细胞移植、内置支架、以及应用于软骨损伤修复的组织工程技术:并对自体软骨细胞移植未来的发展方向做出展望.方法:以articular cartilage,transplantation,stem ceils,tissue engineering为检索词,检索ISI Web of Knowledge,PubMed数据库(1979/2009-02);以关节软骨、修复、组织工程为检索词,检索CNKI数据库(1979/2009-02).文献检索语种限制为英文和中文.纳入自体软骨细胞移植、基质诱导的自体软骨细胞移植、内置支架技术和相关组织工程技术的内容.排除关节软骨损伤的医学成像观察、细胞信号转导路径、基因治疗等研究.结果与结论:计算机初检得到824篇文献.根据纳入排除标准,对自体软骨细胞移植、基质诱导自体软骨移植、内置支架及相关的组织工程技术进行分析.自体软骨细胞移植是过去10年中临床修复关节软骨损伤的佳方案.近年来,传统的软骨细胞移植出现了很多改进和发展,其中基质诱导自体软骨移植、内置支架技术和相关组织工程技术是目前发展得相对成熟的几个方面,但仍然存在一些亟待解决的问题.基质诱导自体软骨移植目前正在逐步取代传统的自体软骨移植,但其长期效果还需要进一步的临床研究和确认.新的内置支架技术和相关组织工程技术也从材料学、细胞生物学及分子遗传生物学的方向,推动了关节软骨损伤修复的发展.
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同种异体腱Tibial-inlay技术重建膝关节后交叉韧带31例
背景:文献报道采用双束重建后交叉韧带是较好的选择,但Tibial-inlay技术与之并无明显差别.目的:评估同种异体腱Tibial-inlay技术重建膝关节后交叉韧带的效果.方法:选择2006-02/2008-05承德医学院附属医院骨科收治的,经关节镜检查证实为后交叉韧带断裂患者31例,交通事故伤14例,重物砸伤9例,运动损伤8例,均于关节镜下行同种异体腱(带骨块)Tibial-inlay重建后交叉韧带.术中尽量多保留原后交叉韧带残迹,制备后交叉韧带股骨侧隧道.应用两端带骨块的异体膑腱或一端带骨块的异体跟腱,将侧骨块修整成宽1.0～1.5 cm,长2 cm的梯形块状,即移植骨块与骨槽间除靠摩擦力固定外,还可产生压应力,增加其稳定性.剥离后交叉韧带胫骨附丽点,在止点处依骨块大小制梯形骨槽,将异体腱骨块嵌入骨槽,然后将另一端通过牵引线经关节引入股骨隧道,前抽屉位拉紧后由外向内拧入挤压螺钉固定肌腱或骨块.术前、随访时均记录膝关节后抽屉试验不稳定程度、关节活动度、膝关节Lysholm功能评分.结果与结论:术后早期患者均未发生严重血管神经损伤、排异反应、感染等并发症.31例患者均获得随访,随访12～24个月.术前全部病例后抽屉试验均＞2+,其中3+、4+占84%;术后后抽屉试验结果为:0(正常)4例,1+为17例,2+为9例,3+为1例,显示后移程度较术前明显改进(P＜0.05);术后随访Lysholm膝关节功能评分较术前明显提高(P＜0.05),关节活动度较术前明显提高(P＜0.05).说明Tibial-inlay技术重建膝关节后交叉韧带创伤小,固定可靠,技术相对简捷,治疗效果满意.
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脊髓型颈椎病患者骨密度变化与椎体变形及临床表现的相关性
目的:分析脊髓型颈椎病患者骨密度变化与椎体变形及与临床表现的相关性.方法:选择2009-01/06在安徽医科大学第一附属医院运动医学科住院的脊髓型颈椎病患者42例,分为骨密度正常组20例,骨密度降低组22例,所有病例测量颈椎侧位片C3.8的椎管椎体矢状径比、椎体变形指数,并作两组之间临床表现的比较.结果:两组比较,骨密度降低组颈椎(C_3, C_4, C_5, C_6)椎管矢状径比值较骨密度正常组显著降低(P＜O.05或P＜0.01),而颈椎(C_3, C_4, C_5, C_6)椎体变形指数在两组之间则差异无显著性意义(P＞0.05).骨密度降低组临床症状与体征阳性率显著高于骨密度正常组(P＜0.05).结论:脊髓型颈椎病患者骨质疏松会导致椎体骨质增生,椎管狭窄,而骨密度降低患者临床表现更明显.
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组织蛋白酶K在人椎间盘中的表达及意义
背景:研究证实,椎间盘内酶类的激活与基质成分的降解密切相关.已知基质金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制剂两个酶系统在椎间盘细胞外基质改变过程中发挥着重要作用,除两者外,其他对细胞外基质有降解作用的蛋白酶是否也参与了椎间盘的退变过程?目的:检测正常和退变人椎间盘细胞中组织蛋白酶K的表达,探讨组织蛋白酶K与椎间盘退变的相关性.方法:应用免疫组化S-P法和ELISA法对30例腰椎间盘突出症患者椎间盘组织中组织蛋白酶K进行检测,并取15例健康成人(尸体)和脊柱骨折手术患者正常椎间盘组织作对照,观察组织蛋白酶K在正常和退变人椎间盘细胞中的蛋白表达.结果与结论:正常椎间盘和退变椎间盘中均有组织蛋白酶K表达,退变椎间盘中组织蛋白酶K表达水平明显高于正常组,差异有显著性意义(P＜0.05).提示组织蛋白酶K可能参与了椎间盘退变的病理改变.
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FHL1基因表达与先天性马蹄内翻足:15例患者及3名正常人的对比分析
背景:前期研究表明,在马蹄内翻足患者肌肉组织中存在FHL1基因表达下调,并利用凝胶阻滞实验在体外初步验证了HOXD13和FHL1基因启动子区转录因子预测位点的结合作用,但凝胶阻滞实验结果不一定能真实地反映体内转录调控蛋白和DNA结合的状况.目的:应用Western-blot技术进一步验证先天性马蹄内翻足患者足部肌肉组织中FHL1,HOXD13基因蛋白质水平的表达,应用染色质免疫沉淀技术验证在胚胎足部发育时在体内HOXD13和预测结合位点的结合作用.方法:15份先天性马蹄内翻足患儿肌肉组织标本由中国医科大学附属第二临床医院小儿外科提供,3份同年龄组正常儿童足部肌肉组织由中国医科大学法医学院提供,1例孕13周流产胚胎由中国医科大学附属第二临床医院妇产科提供.所有标本使用均经患者及其家属知情并同意.应用Western-blot方法检测15例先天性马蹄内翻足患儿及3例同年龄组正常儿童足部肌肉组织HOXD13和FHL1表达情况;并用软件预测FHL1基因上游HOXD13的结合位点,染色质免疫沉淀实验验证胚胎发育时HOXD13和FHL1的相互作用,以不表达HOXD13蛋白的脑组织作为对照.结果与结论:与同期正常儿童足部肌肉组织相比,15例人先天性马蹄内翻足患儿肌肉组织中有7例存在FHL1基因蛋白质水平表达下调,而这7例患儿中有5例同时存在HOXD13基因蛋白质表达下调.沉淀的人胚胎足部组织染色质中有预测HOXD13结合位点的扩增,无对照位点的扩增,对照脑组织中无预测位点的扩增.结果进一步验证显示了先天性马蹄内翻足患儿足部肌肉组织中FHL1、HOXD13基因表达下调;人类胚胎肢体发育过程中HOXD13蛋白可以和FHL1启动子区的预测位点结合发挥其转录调节作用.提示在人胚胎足部发育时,HOXD13表达下调导致了FHL1表达水平的下调,进而影响了足部肌肉生长发育和分化导致马蹄内翻足畸形的发生.
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山的那边是什么?
小时候家住的地方离烈士山很近,春夏秋3个季节许多个放学后的日子里小伙伴们常结伴到那里去玩.
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组织工程化牙齿的再生与发育
组织工程牙是指以天然成人或人工合成的可降解的、有一定空间结构的生物材料为载体,将从成牙组织中分离、培养的一定量的生物活性细胞"种植"到载体支架上，并提供细胞增殖和分化,在体外或植入体内形成有活性的牙齿样的结构和牙齿.
