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STA Compact全自动血栓与止血分析仪制冷回路工作原理及故障维修
STA Compact全自动血栓与止血分析仪在工作过程中需要在样品中加入试剂,为保证试剂的品质不变,要求试剂低温保存.其温度控制在15℃～19℃之间,当温度低于15℃时制冷工作停止;当温度高于19℃时系统发出超温报警信号.
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血液分析仪的使用要求与维护
1标本采集环节的特殊性
在采集血液标本特别是末梢血时，如操作稍有不当便会将污物或消毒棉丝带入样品杯。这样仪器在计数时便会出现干扰，使细胞计数出错。我们在血样标本采集好后，要及时上机检测，确保血样标本不被其他因素影响。如样本需保存则需注意防尘并低温保存，如采集标本和测定时间大于一分钟时，测定前需轻轻混匀，不能将样品剧烈旋转，否则将产生气泡和溶血。 -
英国Planer Kryo-10程序降温仪原理与故障检修实例
Kryo-10程序降温仪是由微电脑控制、采用液态氮作致冷剂的一种低温环境下的高精度温控仪.冷冻室温度可低至-160℃、并能按照用户设置的控制程序以各种速率升降温或保持在某一温度,因而,广泛地应用于骨髓、皮肤的移植和器官的低温保存.
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低温保存设备的发展
低温保存是低温生物学的一个重要组成部分.本文介绍了国内低温保存设备研制方面的一些成果,并对此做出了评价.随着科学技术的发展和人类的需求,低温保存设备必须有所改进和提高,作者对此提出了自己的一些看法.
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人类男性生殖组织库的发展趋势及伦理问题
以生殖力保存和预防疾病为目的,建立大型冷冻贮存库,分类冻存男性生殖细胞和组织,包括:精子、睾丸组织以及精原干细胞,并开展相关技术的研究,包括睾丸组织冷冻及原位和异位自体移植、精原干细胞的分离培养与低温保存、精原干细胞生精小管内移植,从而发展成为较为完善的男性生殖细胞/组织库,可能成为人类辅助生殖技术的一个发展趋势.
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弯曲菌菌种冷冻保存及复苏方法的研究
目的 探索一种简单、方便、有效的弯曲菌菌种保存方法.方法 采用含30%甘油的脑心浸液肉汤,将实验室保存的19株弯曲菌于-30℃和-70℃分别保存,每个菌株3个菌种管.1年后,采用5%脱纤维羊血的布氏肉汤进行增菌,然后转种哥伦比亚血平扳,比较存活效果.结果 -30℃条件下采用多管法保存穹曲菌可以获得与-70℃条件下保存相当的效果.结论 采用多管法(每株菌3个菌种管)于-30℃冷冻保存弯曲茵是一个简单、方便、有效、实用的方法、
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温度与时间对血脂4项结果的影响
目的:分析保存温度与时间对血清血脂4项指标测定结果的影响.方法:采集10名自愿受试者空腹静脉血,将离心后的血清分装,分别放置室温22℃、4℃和-20℃,测定不同保存时间的血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的浓度.结果:HDL-C室温、4℃放置不同时间测定值差异无显著性(P＞0.05).TC、TG和LDL-C室温2小时、4℃ 4小时内的检测结果相对稳定,未见差异有显著性.但-20℃ 7天保存的标本,除LDL-C外,其他血脂3项均与即刻检测结果有差别.结论:4℃条件下保存的分离标本,在2～4小时内的血脂四项检测结果比较稳定,不会影响研究结果.
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组织工程骨-80℃低温保存的初步研究
目的:了解不同冻存方法对组织工程骨生物活性的影响.方法:以骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)复合部分脱蛋白骨培养制备组织工程骨,实验分为:A组,组织工程骨用添加冻存保护剂的保存液保存;B组,组织工程骨用不添加冻存保护剂的保存液保存;C组,组织工程骨未行低温保存;D组,单纯MSCs培养.A组和B组的组织工程骨于-80℃深低温保存3个月,3个月后复温冻存的组织工程骨.扫描电镜观察MSCs的黏附和分布情况,MTT法检测细胞活力,对硝基苯磷酸法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,流式细胞仪分析细胞周期.结果:MSCs在材料表面和孔隙内均可黏附和分布,黏附于材料的细胞活力大小依次为C组＞A组＞B组(P＜0.01,P＜0.05),黏附于材料的细胞ALP活性大小依次为C组＞A组＞B组(P＜0.01).各组细胞周期未见明显变化,未见异倍体细胞.结论:选择适宜的冻存保护剂对组织工程骨的生物活性有一定的保护作用.
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骨髓基质干细胞-80 ℃保存的初步研究
目的:探索适合于人骨髓基质干细胞-80℃冷冻保存的条件和方法.方法:体外分离培养人骨髓基质干细胞,以含不同浓度二甲亚砜的冻存液和不同细胞浓度-80℃深低温保存.3个月后复苏接种培养,观察细胞形态、存活率和贴壁率;通过3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入实验比较细胞分裂增殖能力;3H-脯氨酸(3H-Proline)掺入实验检测胶原合成能力;RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和骨钙素mRNA表达.结果:不同二甲亚砜浓度保存骨髓基质干细胞复苏后的细胞形态和功能有所不同,其中含5%二甲亚砜冻存液组保存效果差,15%组佳.15%二甲亚砜冻存液组复苏后骨髓基质干细胞的形态与未冻存组相似,存活率为(85%±3%),贴壁率为(81%±5%).骨髓基质干细胞保持较强的分裂增殖和胶原合成能力,Ⅰ型胶原和骨钙素mRNA表达与5%或10%二甲亚砜冻存液组比较有统计学差异(P《0.05).冻存骨髓基质干细胞浓度为(5-10)×106个/ml组复苏后细胞存活率明显优于(1～2.5)×106个/ml组.结论:含15%二甲亚砜的冻存液适合于骨髓基质干细胞长期保存,高浓度组骨髓基质干细胞冻存效果优于低浓度组.
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地黄种质资源的离体保存研究
目的:探索地黄种质资源的离体保存方法.方法:应用不同品种的茎尖试管苗为材料,接种在装有MS+0.2BA+0.02NAA的试管中,同时将同一品种(85-5)的茎尖苗接种在不同培养基(A. 蒸馏水+10 g*L-1琼脂;B. 1/2 MS+5 g*L-1琼脂;C. MS+10 g*L-1琼脂;D. 1/2 MS +0.5 BA+0.02 NAA+10 g*L-1琼脂;E. MS+0.5 BA +0.02 NAA+10 g*L-1琼脂)上,4～6 ℃黑暗保存.结果:保存4个月后发现,相同培养基中不同品种的死亡率不同,土城和邢疙瘩较高(60%,73%),北京1号和85-5较低(9%,33%).10个月后,MS+0.2 BA +0.02 NAA上不同品种的保存苗多数死亡.85-5的保存苗在A号培养基上,除1只试管污染外,均处于存活状态,其他培养基上的保存苗多数基部褐化死亡.结论:地黄试管苗对低温的耐受力具有品种特异性,A号培养基可实现地黄种质资源的中期保存.
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程序降温法用于同种瓣膜的制备
目的研究同种瓣膜的制备方法,减轻制备过程中的细胞损伤.方法记录程序降温过程组织细胞的降温曲线,比较不同方法的组织细胞损伤.结果对照组在-4℃～-6℃区域,出现明显的降温速率减缓,甚至小幅度温度回升过程.实验组保持均匀的降温速率.实验组组织细胞的损伤程度较对照组明显减轻.结论同种瓣膜的降温过程中存在相变点的异常温度变化,通过调控不同的降温速率可以减轻降温过程本身对组织细胞的损伤.
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循环温差法测定生物组织活性的实验研究
如何测定低温损伤后的生物材料活性是低温保存和低温医疗领域中的重要课题.本文提出了循环温差法测定生物组织活性的新方法,并进行了初步的实验研究,给出了定量评价生物组织活性的数学关联式.实验证明,该方法所采用的测试装置简单,易于操作,结果稳定可靠,重复性较好.本文后指出了进一步的改进方法.
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低温保存后生物组织微波复温过程的数值分析
在液氮中低温保存的生物组织,使用前需要将其复温到正常温度.而复温过程中的反玻璃化与加热不均匀引起的热应力将对生物组织造成极大的伤害,而采用微波复温能够利用其快速加热的优点减少伤害.本文通过数值方法对麦克斯韦方程和传热方程进行了耦合求解,得到微波复温时组织内温度随时间的变化过程,讨论分析了加热过程中的组织内部温度分布的不均匀性,并提出了一些改善不均匀性的方法.
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改良HTK液低温保存对离体鼠心脏保护的作用
本研究旨在通过离体鼠心脏Langendorff灌注模型,依据器官低温保存的要求,在HTK(histidine-tryptophan-ketoglutar-at)液基础上添加相关成分,并与HTK液相比较,评价二者心肌保存效果.
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不同时段超低温保存对兔肌腱力学性能的影响
目的:探讨不同时段超低温保存对兔肌腱组织生物力学性能的影响.方法:以15%DMSO(二甲基亚砜)为低温保护剂,采用两步冷冻保存步骤,对青紫兰兔肌腱进行维持温度-50℃的冷冻预处理,-196℃液氮保存18d、180d,测试前用40℃水浴复温,每组肌腱8段,与新鲜肌腱对照进行拉伸实验.结果:肌腱的破坏荷载在对照组、18d组、180d组分别为(66.0±19.49)N、(65.0±7.07)N和(54.0±11.4)N,各组肌腱的延伸率(%)依次为63.5±17.3、38.6±0.98和30.6±0.47.结论:经不同时段超低温冷冻保存的兔肌腱,拉伸实验的生物力学指标无明显差异(P＞0.05).
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超低温保存自体颅骨回植在颅骨修补术中的临床应用
目的 探讨自体颅骨超低温保存并回植在颅骨缺损修补术中的临床应用价值.方法回顾性分析2010年1月—2016年1月蒙城县第一人民医院神经外科收治的25例去骨瓣术后颅骨缺损患者的临床资料.其中男10例,女15例;年龄15~72岁,平均39岁.患者均采取自体颅骨超低温保存并回植的方法 治疗,观察术后修补效果及并发症发生情况.结果 液氮保存后的自体颅骨外观如新鲜骨瓣,钻孔所得骨屑细菌培养均为阴性,病理检查可见成骨细胞及骨小梁.25例患者均顺利完成手术,术后未出现脑脊液漏、切口感染、排异反应、自体颅骨松动凹陷、硬膜外积液等并发症.患者切口均一期愈合,头颅外形均美观对称.25例患者术后随访3~12个月,平均9.4个月.术后定期复查CT显示均有骨缝结合部骨质生长,有骨瓣内板及板障骨质被吸收情况,外板完好,没有影响其骨架作用.结论 采用超低温保存的自体颅骨回植修复颅骨缺损,可恢复颅腔正常生理解剖结构,具有术后外形完美、材料保存简单等特点,具有一定的临床应用价值.
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大鼠冻存卵巢组织自体异位移植后长期功能评估
目的 评估成年大鼠冻存卵巢组织自体异位移植后的长期生殖、内分泌功能. 方法 78只Wistar成年大鼠,随机分为假手术组(1组,15只)、新鲜组织移植组(2组,24只)、冻存组织移植组(3组,24只)、去势组(4组,15只).将去势后成年大鼠的新鲜卵巢组织及冻存卵巢组织自体异位移植于肾被膜下,分别于移植后5、8、10个月处死各处理组1/3数量动物,取卵巢及子宫组织作组织学检查.通过阴道脱落细胞学检查、动情期雌、孕激素水平监测评估移植后卵巢组织的生殖内分泌功能. 结果 所有动物模型中,新鲜及冻存卵巢组织移植后都可观察到存活组织块.2、3组动情期雌、孕激素水平与假手术组无显著性差异(P>0.05),且均明显高于去势组(P<0.01).冷冻复苏后组织与新鲜组织各级卵泡构成比无显著性差异(P>0.05),各组不同时间取得的卵巢组织各级卵泡构成比相比较均无显著性差异(P>0.05).移植后5个月,2、3组原始卵泡明显减少,分别为假手术组的59.1%和54.5%. 结论 小块卵巢组织可耐受冻融过程;冻存卵巢组织自体肾被膜下移植后,卵巢组织形态无明显改变,原始卵泡总数虽然明显减少,但有成熟卵泡发育并排卵,并能长期维持生殖内分泌功能.
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低温保存脂肪间充质干细胞的生物学特性评价
目的 探讨低温保存对小鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)体外培养的生物学特性和分化潜能的影响.方法 分离、培养小鼠ADMSCs,取第3代细胞置于液氮深低温(-196℃)冻存12个月后复苏.MTT法测定ADMSCs的增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老;免疫细胞化学方法检测细胞表面分子CD73、CD90和CD105;条件培养基诱导后,免疫荧光法检测心肌特异性肌钙蛋白(cTnT),茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色检测成骨、成脂诱导分化潜能,Real time-PCR检测cTnT、Gata4、Ost和Runx2.未经低温保存的第3代ADMSCs为对照.结果 低温保存的ADMSCs其增殖活性、衰老率与未冻存细胞比较差异无显著性(P＞0.05).诱导后ADMSCs的cTnT阳性表达、茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色呈阳性反应,冻存组与对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 低温保存对ADMSCs体外生长特性和成心肌、成脂肪细胞、成骨细胞的分化潜能差异无显著性.
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线虫保存技术研究进展
本文较系统地阐述了有关线虫保存方法的研究进展,对实验室传统保存方法和近年发展的深低温保存和脱水保存的原理和生理生化机制作了简要概述,并比较了各种方法的优劣,对未来线虫商业化生产过程中保存方法的发展予以展望.
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D型肉毒梭菌毒素现场灭鼠应用效果
为了解D型肉毒梭菌毒素现场灭鼠效果，1997年7月至1998年3月夏、春两季进行观察研究。1 材料与方法1.1 观察现场选择鼠密度较高的农舍、单位、特行3种生境。1.2 毒饵配制与投放 D型肉毒梭菌毒素，由崔生发提供，含量分别为2 000万鼠单位/ ml和800万鼠单位/ml，常温运输，普通冰箱低温保存。用湿润浸泡法拌制，以小麦(特行用麦芽)为饵料，用温水稀释一定量毒素，分别配制成含毒素量为2万、3.33万和5万鼠单位/g毒饵。每种生境设D型肉毒梭菌毒素毒饵、0.5/万溴敌隆毒饵、空白对照试验区。先用粉迹法测密度，次日投放毒饵，每15m2房间投2～3堆，每堆10～15g(溴敌隆为20 ～30g)，观察3d毒饵消耗并适当补充，1周后测鼠密度（溴敌隆为2周后），观察灭效。
