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尘螨变应性鼻炎全血细胞IL-4、IL-13的表达及临床意义
目的 探讨IL-4、IL-13在变应性鼻炎发病机制中的作用及IL-4、IL-13拮抗剂治疗变应性鼻炎的临床意义.方法 取52例变应性鼻炎(实验组)及25例无过敏性疾病(对照组)患者的外周血,用PMA(phorbol 12-myristate 13-acetate佛波酯)+inomycin(离子霉素)及标准化尘螨抗原刺激后经细胞内染色,流式细胞仪检测IL-4、IL-13、IFN-γ的表达细胞百分数,ELISA检测血清IL-4、IL-13含量.结果对照组经标准化尘螨变应原刺激后细胞内测出IFN-γ为0.3%~0.4%,但检测不到IL-4与IL-13,经PMA+inomycin刺激后IFN-γ为5.0%~12.4%、IL-4为0.5%~0.8%、IL-13为0%~0.2%;实验组经标准化尘螨变应原刺激后IFN-γ为0.3%~0.5%、IL-4为0.9%~1.3%、IL-13为0.5%~0.9%,经PMA+inomycin刺激后IFN-γ为17.3%~24.0%、IL-4为2.1%~3.5%、IL-13为0.8%~2.0%.实验组血清中IL-4含量为(1.768±0.485)pg/ml、IL-13为(5.427±1.263)pg/ml,对照组IL-4与IL-13含量均低于敏感度.结论 IL-4、IL-13在变应性鼻炎患者中表达升高,参与了变态反应过程,为临床应用IL-4,IL-13拮抗剂治疗变应性鼻炎提供了依据.
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婴幼儿喘息者外周血白细胞介素4受体基因多态性表达的研究
对128例住院的婴幼儿喘息患者和82例同期健康婴幼儿,应用PCR-限制性内切酶酶切法进行白细胞介素-4受体基因150V和Q576R检测.患儿与正常儿童150与V50、Q576与R576等位基因频率和基因型频率之间存在差异,150/150基因型与喘息的易感性相关(P=0.015,OR=0.439,95%CI=0.223~0.826),150/150和Q576/R576的组合与喘息发病的易感性有关.说明携带易感基因的儿童可能容易发生反复喘息乃至以后的哮喘.
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程序性细胞死亡因子4是替代活化巨噬细胞的新分子标志物
背景:程序性细胞死亡因子4的表达水平与经典活化的巨噬细胞的表型负相关,但是程序性细胞死亡因子4的表达水平与巨噬细胞替代活化的关系仍不明确.目的:观察替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平改变,及其对替代活化的影响.方法:用白细胞介素4、地塞米松单独刺激或联合刺激诱导NR 8383细胞的替代活化;采用qPCR检测巨噬细胞替代活化的分子标志物的表达水平,确定诱导巨噬细胞替代活化的适条件;采用qPCR和Western blot检测替代活化的巨噬细胞模型中程序性细胞死亡因子4表达的改变;分别用大鼠程序性细胞死亡因子4高表达质粒和程序性细胞死亡因子4干扰质粒转染NR 8383细胞株,采用荧光倒置显微镜观察转染的效率,并检测程序性细胞死亡因子4的表达水平;分别检测程序性细胞死亡因子4高表达和程序性细胞死亡因子4敲低后NR 8383细胞株中巨噬细胞经典活化和替代活化的分子标志.结果与结论:①白细胞介素4和地塞米松联合刺激比白细胞介素4或地塞米松单独刺激可更有效的诱导巨噬细胞的替代活化;10 μg/L白细胞介素4+50 nmol/L地塞米松刺激24 h可有效诱导巨噬细胞的替代活化.②在替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平显著升高,是替代活化的分子标志.③程序性细胞死亡因子4高表达上调替代活化的分子标志的表达(P<0.05);而敲低程序性细胞死亡因子4可下调CD206的表达(P<0.05),并显著上调经典活化的分子标志诱导型一氧化氮合酶的表达(P<0.05).结果表明程序性细胞死亡因子4上调是替代活化巨噬细胞的一个重要分子标志物.