穴位注射治疗股骨头缺血性坏死246例

股骨头坏死(ONFH)是由多种病因引起的股骨头血液供应破坏或骨细胞变性导致骨的活性成分(包括骨细胞、骨髓造血细胞和脂肪细胞)死亡,继而导致股骨头结构改变,引起股骨头塌陷和功能障碍的疾患.它可分为创伤性与非创伤两大类.创伤性主要见于髋部创伤.非创伤性的致病因素多达40余种,常见病因为酒精中毒、激素应用等.治疗上是骨科疾病中的一个难题.我院运用穴位注射配合中药辨证治疗股骨头缺血性坏死,取得较好临床疗效.

脊髓损伤大鼠股骨松质骨超微结构的变化

目的探讨脊髓损伤(SCI)对大鼠骨组织超微结构的影响及其在SCI后骨代谢变化中的意义.方法 40只3个月龄SD大鼠均分为SCI组与对照组.SCI组于T10处完全横断脊髓;对照组仅行椎板切除术.术后1、3周时处死动物后用透射电镜对股骨髁部进行超微结构观察并检测血清钙(Ca)、碱性磷酸酶(ALP)、尿钙、尿钙/肌酐(Ca/Cr)的变化.结果 SCI组大鼠1周时可见显著的成骨细胞凋亡的发生;3周时可见凋亡的骨细胞,而成骨细胞多处于正常状态.截瘫鼠血钙、尿钙、尿钙/肌酐酶在伤后不同时间段均升高;血ALP在伤后1周时显著下降,3周时恢复正常.结论 SCI后早期成骨代谢受抑制可能与成骨细胞凋亡有关;骨细胞凋亡可能在破骨-成骨脱偶联中起中介作用.

骨细胞分离培养及其与成骨细胞鉴别比较的实验研究

目的:建立比较稳定的骨细胞实验室分离培养方法,并将其部分生物学特性与实验室培养的成骨细胞进行比较研究,明确两者区别.方法:采用序列酶消化法,分别从3只3dSD乳鼠骨骼中分离培养骨细胞和成骨细胞,培养24 h后进行细胞形态学观察.第1代细胞用碱性磷酸酶试剂盒采用重氮盐法(改良Kaplow氏法)染色,采用免疫细胞化学法对细胞的骨钙素(BGP)染色,测定碱性磷酸酶并计算其活性.结果:骨细胞多呈星状或树枝状,且有很多的突触；成骨细胞呈长梭形,有少量的突触.骨细胞碱性磷酸酶染色,胞浆内cAKP颗粒不明显；成骨细胞碱性磷酸酶染色,胞浆内可见众多cAKP颗粒.骨细胞BGP染色阳性明显,成骨细胞BGP染色阳性不如骨细胞明显.ALP在骨细胞中分泌较成骨细胞低,且有统计学差异.结论:实验室条件下能培养出骨细胞,该类细胞和成骨细胞有明显区别.

骨收获室内骨细胞的方向性生长

目的:利用骨收获室内无应力的物理特性,观察无应力时骨重塑是否有方向性.方法:采用骨收获室模型的动物实验方法,5只日本大耳白雌兔.研究中不限制兔的活动.骨收获室是带有1个宽1 mm的骨长入孔道的钛制圆柱形植入体,允许孔道内的成分被反复取出,仅伴有少量的对周围骨的干扰.先将骨收获室置放兔胫骨内8周,使其与骨达到较好的整合.8周后开始正式实验,其后每隔1个月收获组织.收获的组织,经固定、脱钙,采用石蜡包埋的组织切片.动物实施4阶段的4次手术:第1次空置；第2、3次收获的组织做纵向切片；第4次做横向切片.方向性分析:以每张切片所有骨细胞核方向的标准差为统计量,分析纵切面与横切面细胞的方向是否有差异.结果:收获室内长入组织,纵切面的细胞排列的方向性明显强于横切面,差异有统计学意义.结论:在无应力情况下,骨重建具有方向性.应力不是骨方向改建的直接指导因素.推测骨重建的方向性与骨收获室的结构特点相关,生理的方向性骨重建与应力的关系可能是通过血管介导,应力可能通过影响血管的方向性分布起作用.

骨髓间质干细胞及分化成骨的分子机制

骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)在骨髓中的含量极少,但其扩增能力很强,能诱导分化为多种间质组织,本文就BMMSC的生物学特性及其在骨损伤修复和造骨调控的作用机制进行综述.

骨细胞研究的新进展

骨细胞是骨组织中含量为丰富、分布广泛且包埋在矿化骨基质中的细胞，其寿命可接近机体的寿命。骨细胞通过细胞质树突形成骨细胞和骨表面之间相互通信网络系统，对维持骨组织的正常生理功能具有重要意义。骨细胞作为骨机械应力的直接感受器，不仅可以通过释放生物活性因子如PEG2、NO、ATP等以及经典Wnt／β－catenin信号通路将机械应力信号转化为骨形成或骨吸收的生化信号，并且将这些生化信号传递到骨组织其他类型细胞并调控其功能活动，从而引发骨重建功能。骨细胞周围出现的微裂隙会中断微管网络系统，进而引发骨细胞周围自噬。此外，骨细胞对调节体内矿物质平衡、脂肪代谢以及造血功能也极为重要。

中西医综合治疗股骨头缺血性坏死概况

股骨头缺血性坏死(Ischemie Neciosis of the Femoial Head,简称INFH)是骨的活性成分(骨细胞、骨髓造血细胞和脂肪细胞)死亡所引起的病理过程,其治疗至今仍是难题.

中西医结合治疗中心性视网膜色素变性1例

视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)是一种进行性损害视细胞的遗传性眼病,杆体逐渐被破坏.临床特点为夜盲、视野缩小和在视网膜上出现骨细胞样色素沉着.

下调骨细胞TGF-β/Smad4信号可抑制小鼠BMSCs成骨及破骨分化

目的检测骨细胞TGF-β/Smad4信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨和破骨分化的作用,并初步探讨其相关机制.方法用条件性基因敲减Cre/loxp技术特异性敲减骨细胞Smad4,获得下调骨细胞TGF-β/Smad4信号通路的小鼠;体外分离骨细胞并与野生型小鼠骨髓间充质细胞(BMSCs)共培养;碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红(alizarin red)染色检测早期成骨分化和晚期钙盐沉积,酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞;real-time PCR检测成骨分化特异标志物Runx2、Osterix(OSX)、ALP、osteocalcin和破骨分化特异标志物RANKL和OPG 的mRNA表达水平.Western blot检测成骨分化特异标志物Runx2和osteocalcin和破骨分化特异标志物RANK蛋白表达水平.结果下调骨细胞TGF-β/Smad4信号能够抑制BMSCs成骨转录因子Runx2、Osterix(P<0.01)、成骨分化特异标志物ALP和osteocalcin(P<0.01)以及破骨分化特异标志物RANK(P<0.01)的表达;增加破骨分化抑制物OPG的表达(P<0.05);而RANKL的表达无明显变化;终下调了RANKL/OPG的比值(P<0.05).结论终末分化的骨细胞调控骨的代谢,下调其TGF-β/Smad4信号可抑制BMSCs成骨和破骨细胞的分化.

c-Jun氨基末端激酶介导的细胞凋亡和自噬参与调控磷酸三钙磨损颗粒诱导的小鼠颅骨假体周围骨细胞死亡

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)介导的细胞凋亡和自噬是否参与调控磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导假体周围骨细胞死亡.方法 取雄性ICR小鼠36只,随机分为3组:正常对照组(control,n=12)、TCP磨损颗粒组(模型组,n=12)和SP6000125组(n=12).采用TCP磨损颗粒30 mg置于颅骨顶后缝合皮肤构建小鼠颅骨溶解模型,SP6000125组小鼠于术后第2天颅顶注射JNK通路特异性抑制剂SP600125(1.0 mg/kg),每3日1次.持续干预2周后处死小鼠取颅骨.Calcein-AM探针标记和HE染色观察各组假体周围骨细胞形态和活性变化;通过酶消化法获取假体周围骨细胞,应用流式细胞术检测假体周围骨细胞凋亡情况;Western blotting法检测假体周围骨细胞中Bcl-2、Bax、磷酸化JNK (p-JNK)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC-3)等蛋白的表达变化.结果 与control组比较,TCP组假体周围骨细胞活性明显降低,空骨陷窝比例显著增加,骨细胞凋亡明显(P＜0.05),JNK通路被活化,p-JNK蛋白表达明显上调(P＜0.05);自噬相关蛋白Beclin-1和LC-3表达显著上调,且LC-3Ⅰ向LC-3Ⅱ转换明显增加(P＜0.05);与TCP组比较,SP600125组假体周围骨细胞凋亡显著减少、自噬被明显抑制(P＜0.05).结论 JNK介导的细胞凋亡和自噬参与调控TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨细胞死亡,促进假体周围骨溶解.

骨细胞的生物学功能

骨细胞是骨组织中含量丰富、存活时间长的细胞。通过细胞突触，骨细胞保持了彼此间以及与骨基质表面其他类型细胞的联系，构成了动态的、功能活跃的骨稳态细胞调控网络。骨细胞可以直接感受机械刺激，将其转化为生化信号并传递到其他细胞，同时，骨细胞还可分泌多种功能蛋白，协同指导骨重建。骨细胞是骨组织中信号传递的桥梁枢纽，也是体内矿物平衡和胞外微环境的重要调节者。完整的骨细胞网络结构是维持骨组织正常功能的关键。

间充质干细胞在组织再生和免疫调节治疗中的应用

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一群存在于骨髓、脂肪、骨实质、胎盘及骨骼肌等多种组织中的干细胞,具有向骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞分化的功能[1].也有资料表明,MSC分化能力接近于胚胎干细胞,可分化为肌细胞、内皮细胞、上皮细胞、神经元样细胞和肝细胞[2-5].体外实验证实,MSC本身并不引起异体淋巴细胞活化,但可抑制由丝裂原或异体淋巴细胞激活的T、B淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞的增殖[6-8],抑制树突状细胞的发育与成熟[9].因此,MSC在造血干细胞移植、器官移植、骨和软骨组织修复、心肌梗死和肝脏损伤的治疗中具有潜在的应用价值,某些治疗措施已经进入临床试验阶段.目前,美国FDA已经批准的有关MSC治疗的临床试验包括:(1)异体MSC静脉输注治疗异基因骨髓移植中的移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD);(2)自体MSC静脉输注治疗Crohn病;(3)自体MSC局部应用治疗牙周疾病;(4)异体MSC静脉输注治疗心肌梗死;(5)异体MSC修复半月板;(6)粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员MSC治疗心肌梗死等.在国内,多家单位已经将自体或异体MSC试用于临床,以预防或治疗GVHD、心肌梗死、骨或软骨缺损和股骨头坏死等[10-13].然而,有关MSC临床应用的一些基本问题尚不清楚,盲目开展临床试验是不妥当的.本文就相关问题进行综述和讨论.

腰2交感神经节化学切除术治疗早中期创伤性股骨头坏死25例临床观察

股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)又称股骨头缺血性坏死(avascularnecrosis,AVN),是一种骨科常见的慢性行走性致残性疾病,其发病率近年来逐年上升,位居髋关节疾病的首位.股骨头坏死是股骨头血供中断或受损,引起骨细胞及骨髓成分死亡及随后的修复,继而导致股骨头结构改变、股骨头塌陷、关节功能障碍的疾病.ONFH可分为创伤性和非创伤性2大类,前者主要是由股骨颈骨折、髋关节脱位等髋部外伤引起血运突然中断而造成的结果,后者在我国的主要原因是皮质类固醇的应用及酗酒等.

骨性关节炎与整合素-FAK力学信号转导通路的基础研究

骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的由于关节软骨退行性变引起的疾病,好发于中老年人,其病因及发病机制尚不明确,组织病理学上主要以关节软骨的丢失,骨赘形成,软骨下骨的增厚以及软骨下骨囊性变为特征,是不同因素作用所致的不可逆关节损害,临床表现为关节疼痛、僵直畸形和功能障碍[1-3].相关研究表明,机械应力是维持骨骼系统的重要生理因素之一,可以被骨细胞或其他细胞感应,既可减少骨的形成又可增强骨的吸收,从而调节骨细胞的多种功能[4].

Wnt信号通路在类风湿关节炎中的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以多发性关节炎为主要临床表现的慢性炎症性疾病,RA的主要特征和危害是慢性滑膜炎症造成的软骨损伤以及骨与关节的破坏.Wnt信号通路是重要的细胞信号转导通路,研究表明Wnt信号通路在骨细胞的分化、增殖和凋亡中发挥着重要的作用,对Wnt信号的深入研究有利于我们对RA患者骨与关节损伤的发生机制有更新的认识和了解.现就Wnt信号途径在RA发病机制中所起的作用综述如下.

股骨头坏死动物模型造模方法的研究进展

股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH）又称股骨头缺血性坏死（avascular necrosis of the femoral head， AVNFH），是骨科领域常见且难治的疾病。幼儿的股骨头骨骼尚未发育成熟，表现与成人不同，称为Perthes病（Legg-Calve-Perthes disease，LCPD）。国际骨循环学会（Association Research Circulation Osseous，ARCO）及美国医师学会（American Academy of Orthopaedic Surgeons，AAOS）将ONFH定义为：股骨头血供中断或受损，引起骨细胞和骨髓成分死亡以及伴随其后的组织修复，继而导致股骨头结构改变、股骨头塌陷，引起关节疼痛、关节功能障碍的疾病[1]。目前治疗ONFH的方法包括非手术治疗和手术治疗，尽管这些方法取得了相当大的进步，然而目前尚无疗效确切、普遍适用各时期的治疗方法出现。其中原因之一是因为缺乏一种自然病程和疾病的进展能够模拟 ONFH患者关节塌陷的动物模型来进行深入的研究探索新的治疗方法并系统的比较治疗效果[2]。

补肾法防治原发性骨质疏松症的细胞、分子作用机理研究

随着人类寿命的延长和老年型社会的到来,原发性骨质疏松症的发病率日趋上升,其所导致的身长短缩、驼背畸形、周身骨骼疼痛症状和全身症状,使患者殊为所苦;随之而来的骨脆性增高,易发骨折且难以愈合,已经并将继续成为医疗和社会的重大问题.大量的临床实践证实,运用中医补肾法防治骨质疏松症疗效显著,但其疗效机量尚有待深入研究.为此,本课题在卫生部科学基金资助下,以补肾中药补肾健骨胶囊为实验药物,重点在骨细胞及分子水平观察了补肾法防治骨质疏松的作用环节.现将主要内容报告如下:

软骨下骨与骨性关节炎病变的发生发展：从基础研究到临床治疗

骨性关节炎（ OA）是软骨与骨的退行性变过程。软骨下骨是构成关节结构和功能的基本单位之一，维持软骨正常结构和功能。在复杂应力和生物学作用下， OA软骨下骨的重塑和结构改变使软骨承受更高的应力。软骨下骨内血管生成和结构病变扩大了骨软骨异常交流途径，软骨下骨产生的代谢调节因子通过异常生物学交流直接促进软骨退变。研究软骨下骨内细胞及其变化，血管生成与骨软骨间生物学交流，揭示软骨下骨重塑和结构变化特点，探寻改善骨重塑治疗方法，将有利于延缓OA病变进展，有效防治OA。

1,25(OH)2D3对去卵巢大鼠骨组织成骨细胞、骨细胞凋亡的影响

目的 观察1,25(OH)2D3对去卵巢大鼠骨组织中成骨细胞、骨细胞凋亡的影响.方法 36只雌性SD大鼠随机分成四组,对尼尔雌醇组和1,25(OH)2D3组分别给予尼尔雌醇(0.1mg/kg)和1,25(OH)2D3 (0.05μg/kg)治疗12周.12周后,以DXA法测定大鼠全身的骨密度;放射免疫法测定各组大鼠血清中骨钙素及雌二醇的水平;处死各组大鼠,采用3′-OH末端DNA原位标记技术和透射电镜检测骨细胞、成骨细胞凋亡.结果 12周后,去卵巢组大鼠的骨密度和血清雌二醇水平明显降低,骨钙素含量升高,与假手术组相比,差异有显著性(P＜0.05).1,25(OH)2D3可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度和血清骨钙素含量(P＜0.05),但是不增加血清雌二醇的水平(P＞0.05).1,25(OH)2D3可以抑制骨细胞、成骨细胞凋亡,与去卵巢组相比差异有显著性(P＜0.05).结论 1,25(OH)2D3对去卵巢大鼠骨质疏松症具有防治作用,其部分机制可能为1,25(OH)2D3抑制了骨细胞、成骨细胞凋亡,从而调节骨重建.

骨组织对其所处的应力环境具有很强的适应能力,这使其形态总是能够好地满足其应力要求.骨骼的这种适应性展示了一系列有趣的问题.骨组织如何感知应力信号?哪些细胞组成感知系统?什么样的应力信号能够刺激这种感知系统?什么受体负责应力信号传导?应力刺激的分子学基础是什么?目前,应力环境在细胞水平的研究、骨骼细胞对应力刺激的识别、细胞对应力刺激的反应等方面的研究以惊人的速度展现出大量新信息.本文从机械应力、应力感应、细胞内信号途径等方面对骨骼的应力传导过程进行综述.