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胃泌素及胃泌素释放肽在胃癌组织中的表达及意义
目的研究胃癌组织中胃泌素(Gastyin,GAS)、胃泌素释放肽(Gastrin releasing peptide,GRP)的表达及其意义.方法采用组织芯片技术制作60例胃癌组织芯片,同时用S-P免疫组织化学方法检测胃癌组织芯片中GAS、GRP的表达.结果60例胃癌中GAS阳性率为31.7%;GRP阳性率为11.7%.中、低分化胃癌GAS、GRP的表达阳性率高于高分化胃癌(P＜0.05),黏液腺癌、印戒细胞癌GAS、GRP的表达阳性率显著高于其它组织学类型胃癌(P＜0.01),胃癌GAS、GRP阳性表达与淋巴结转移相关(P＜0.05).结论本研究结果提示中、低分化胃癌,黏液腺癌、印戒细胞癌可作为胃癌内分泌治疗的主要适应证.
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应用组织芯片技术检测胃癌组织中PDCD-5和COX-2的表达
胃癌是我国发病率高的消化道肿瘤,且死亡率呈逐年上升趋势.肿瘤细胞生长的无限性和浸润转移是肿瘤的重要特征,其发生发展是一个多因素、多阶段复杂的过程,而肿瘤细胞的生长和浸润转移又受多种因子的调控.新近发现的组织芯片技术已成为肿瘤研究的重要工具[1],是将10～1000个不同个体的组织标本按预先设计或研究需要排列在一张固相载体(载玻片)上所形成的组织微阵列,具有高通量、快速、多样本的特点.
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宫颈病变组织中MEKK3和TRAIL表达的研究
目的 研究有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶(MEKK3)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在宫颈病变组织中的表达及其相关性,分析其表达与宫颈癌临床病理特征及预后的关系.方法 利用组织芯片技术构建宫颈病变芯片,应用免疫组化En Vision法检测107例宫颈癌、86例宫颈上皮内瘤变(CIN)及35例慢性宫颈炎组织中MEKK3和TRAIL表达水平,同时随访3年以上宫颈癌患者44例,进行生存分析.结果 MEKK3在慢性宫颈炎、宫颈CIN和宫颈癌组织中阳性表达率逐渐升高(P＜0.05)；宫颈癌组织中TRAIL阳性表达率明显低于宫颈CIN和慢性宫颈炎组织(P＜0.05)；MEKK3阳性表达率在宫颈癌FIGO分期、浸润深度及淋巴结是否转移阳性率分别递增(均P＜0.05),而与患者年龄、组织学类型及分级无关(均P＞0.05)；TRAIL阳性表达率与宫颈癌组织学分级有关(P＜0.05),而与患者年龄、组织学类型、FIGO分期、浸润深度及淋巴结是否转移无关(均P＞0.05)；MEKK3和TRAIL表达呈负相关(P＜0.05); Log-rank分析结果提示MEKK3表达与生存有关(P＜0.05),而TRAIL表达与生存无关(P＞0.05).结论 MEKK3和TRAIL异常表达共同参与宫颈癌的发生发展过程,其阳性表达可作为宫颈癌早期诊断及评估生物学行为的分子标志物,MEKK3过表达预示宫颈癌患者不良预后.
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Six1和Ezrin在肾细胞癌组织中的表达及与疾病转归相关性研究
目的 研究Six1和Ezrin在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织中的表达及其临床意义.方法 应用组织芯片技术、免疫组化En Vision法检测98例RCC和28例正常肾对照组织中Six1和Ezrin的表达情况,分析其与临床病理参数及预后的关系.结果 RCC组织中Six1和Ezrin的阳性表达率分别为71.43％ (70/98)和76.53％ (75/98),明显高于正常肾对照组织的14.29％ (4/28)和17.86％ (5/28),差异有统计学意义(P＜0.05).Six1、Ezrin表达率与RCC的病理分级及临床分期有关(P＜0.05).RCC组织中Six1和Ezrin蛋白表达呈正相关(P＜0.05).Log-rank分析结果显示,Six1和Ezrin表达与RCC患者的总生存率有关(P＜0.05).结论 RCC组织中Six1、Ezrin蛋白表达均升高,其表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期密切相关,Six1和Ezrin表达与RCC患者预后有关.
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Cyclin D1、Ki -67在大肠癌组织中的表达及预后意义分析
目的：探讨 Cyclin D1和 Ki -67在大肠癌中的表达水平及其预后意义。方法将68例大肠癌及20例癌旁大肠组织制成组织芯片，用免疫组织化学 SP 法检测 Cyclin D1和 Ki -67的表达，探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果大肠癌组织中 Cyclin D1和 Ki -67的阳性表达率均显著高于癌旁组织（P ﹤0.01）；大肠癌组织中 Cyclin D1和 Ki -67的表达均与肿瘤分化程度、Dukes 分期、淋巴结转移和脉管侵袭显著相关（P ﹤0.05）。结论 Cyclin D1和 Ki -67的表达与肿瘤的分化、进展有关，有助于对患者预后的评价。
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基因芯片及其在中医药研究中的应用思考
随着人类基因组计划应运而生的生物芯片技术,正激起了生命科学研究者的广泛兴趣.生物芯片包括基因芯片(gene chip)、蛋白质芯片(protein chip)、组织芯片(tissue chip)三种.目前完善的是基因芯片,又称基因微阵列(gene microarray)、DNA芯片(DNA chip)或cDNA微矩阵(cDNA Microarray).基因芯片以其高通量、简便、缩微、多参数、集约化、平行化等优点,正成为目前基因表达分析的有力的工具.中医药学如何面对新技术,抓住机遇,促进发展,值得深思.笔者认为基因芯片的应用将为中医药现代化提供良好契机.
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ANKRD49在非小细胞肺癌的表达
目的 探讨ANKRD49蛋白质在非小细胞肺癌中的表达及其与多种临床参数的关系.方法 收集75例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织,制成组织芯片后用免疫组织化学法检测ANKRD49在癌组织及癌旁组织中的表达,同时分析ANKRD49的表达与肺癌不同临床参数之间的关系.用免疫印迹技术分析ANKRD49蛋白质在人气道上皮细胞及多种不同肺癌细胞系中的表达.结果 ANKRD49在肺癌组织中的表达率为82.67％,显著高于癌旁组织的49.33％ (P＜0.05);ANKRD49在低分化肺癌组织中的表达为80％,高于高分化肺癌组织的42.6％(P＜0.05);ANKRD49仅在肺腺癌细胞系A549和NCI-H1650中表达,而在人正常气道上皮细胞及其他肺癌细胞系中无表达.结论 ANKRD49可能参与非小细胞肺癌的发生发展过程.
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肾透明细胞癌N-WASP蛋白表达特点及与临床病理相关性
目的 研究肾透明细胞癌组织及癌旁正常肾组织中N-WASP表达特点及与临床病理的相关性.方法 对73例肾透明细胞癌组织及癌旁正常肾组织行N-WASP免疫组织化学染色,比较两组表达差异.对癌组织N-WASP表达水平与肿瘤病理分级,临床分期进行相关性分析.对总体生存率行单因素及多因素预后分析.结果 癌组织N-WASP表达低于癌旁组织表达(P ＜0.001).癌组织中N-WASP低、中表达的患者生存率高于高表达患者(P＜0.01).癌组织N-WASP表达水平(P＜0.01)与患者总体生存率相关.癌组织N-WASP表达水平可以作为判断肾透明细胞癌预后的独立预测因素(P＜0.05).结论 N-WASP在肾透明细胞癌中表达明显下降,并可以作为独立预测因素提示患者预后.
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ERKl和P16在人胃肠道间质瘤组织中的表达及相关性
目的 检测ERK1和P16在胃肠道问质瘤组和正常对照组中的表达,探讨其在胃肠道间质瘤(GIST)发生和发展中的作用和相互关系.方法 采用组织芯片技术和免疫组化Elivision二步法检测40例胃肠道问质瘤组和40例正常对照组中ERK1和P16的表达,应用图像分析软件Image-Pro Plus 6.0对ERK1和P16的表达行平均吸光度分析.结果 与正常组织相比,胃肠道问质瘤组织中ERK1的表达明显增高(P<0.01),而P16的表达明显降低(P<0.01).ERK1和P16的表达与组织学分级密切相关(P<0.05),而与年龄、肿块大小、组织学类型和复发无相关性.胃肠道间质痛中ERK1与P16的表达呈负相关(P<0.05).结论 在胃肠道间质瘤组织中,ERK1明显增高,P16则明显降低,两者之间存在显著负相关.
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PIWIL系列蛋白多克隆抗体制备、鉴定及组织分布
目的 制备PIWIL蛋白多克隆抗体,鉴定其特异性,初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布.方法 合成特异性PIWIL多肽,以马来酰胺活化匙孔血监蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL多克隆抗体,用亲和层析法纯化抗体.用ELISA和Western blot方法 进行抗体验证,应用人组织芯片进行PIWIL免疫组化研究.结果 通过构建系列PIWIL多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,成功制备4个兔抗人PIWIL蛋白多克隆抗体,证实兔抗人PIWIL抗体可特异性识别PIWIL多肽,该抗体在大多数正常及肿瘤组织上皮来源细胞胞质中旱阳性染色.结论 成功制备系列兔抗人PIWIL多克隆抗体,为进一步研究PIWIL在miRNA/RNAi通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具.
关键词： Argonaute蛋白 多克降抗体 组织芯片 -
成纤维细胞生长因子受体1阳性肺鳞状细胞癌临床病理特征
目的 通过观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)蛋白在肺鳞状细胞癌(SCCL)组织中的表达,探讨FGFR1阳性病例的临床病理特征以及免疫组织化学(IHC)方法在筛查肺鳞状细胞癌FGFR1阳性病例中的意义.方法 应用组织芯片技术制备208例SCCL组织微阵列;应用IHC检测FGFR1蛋白表达,结果与临床病理参数比较分析.结果 208例SCCL患者中FGFR1阳性13例,阳性率为6.3％.FGFR1阳性组中肿瘤大于5cm患者比例明显高于FGFR1阴性组(P＜0.05);淋巴结转移组FGFR1阳性率较无淋巴结转移组明显增高(9.7％比2.9％,P＜0.05);Ⅲ、Ⅳ期患者FGFR1阳性率较Ⅰ、Ⅱ期患者明显增加(13.1％比1.6％,P＜0.01).吸烟患者较不吸烟患者FGFR1阳性率差异不明显(P＞0.05),但随吸烟指数的增加,有增高的趋势.结论 FGFR1阳性表达与SCCL患者肿瘤体积较大、淋巴结转移以及临床分期较晚相关;与年龄、性别、肿瘤部位、分化程度及吸烟等无明显相关.
关键词： 肺鳞状细胞癌 成纤维细胞生长因子受体 组织芯片 免疫组织化学 人 -
UNC5H3和DCC在胃癌组织中的表达与增殖的关系及其预后
目的 探讨UNC5H3和DCC在胃癌组织的表达,与临床病理特征和增殖的关系以及与患者生存和预后的关系.方法 应用组织芯片和免疫组织化学技术,分析60例胃癌组织中UNC5H3、DCC和Ki-67的表达,并对其表达进行相关分析.利用图像分析软件Image-Pro Plus 6.0测量切片积分吸光度,对结果进行验证.采用Kaplan-Meier限乘法计算生存率.建立Cox回归模型,评价UNC5H3和DCC作为胃癌患者预后的独立影响因素的可行性.结果 在60例胃癌组织中,UNC5H3、DCC和Ki-67的阳性表达率分别为43.3％、53.3％和60.0％.UNC5H3和DCC与淋巴转移和远处转移之间,差异有显著性(P＜0.05).UNC5H3和DCC表达与Ki-67表达相互之间无相关性(P＞0.05).用Kaplan-Meier生存曲线经Log-rank检验发现,UNC5H3的阳性表达与胃癌患者生存之间存在相关性(P＜0.05).DCC的阳性表达与胃癌患者生存之间无相关性(P＞0.05).经Cox回归分析,UNC5H3和DCC的表达与胃癌患者预后无明显相关性.结论 依赖性受体UNC5H3和DCC共同参与了胃癌的发生进展,检测UNC5H3和DCC可作为反映胃癌临床病理学特点的指标,检测UNC5H3可作为胃癌患者生存期的指标,但UNC5H3和DCC的表达不是判断胃癌患者预后的独立影响因素.
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应用组织芯片技术研究甾体类受体共激活因子3基因在卵巢癌的扩增与表达
目的 应用组织芯片技术研究甾体类受体共激活因子3(SRC-3)基因在卵巢癌组织中的扩增与蛋白表达及其临床意义.方法 选取1995-2005年间在中山大学附属肿瘤医院和附属第一医院妇科接受手术治疗的卵巢癌患者150例,回顾分析患者临床病理资料.使用两点法制作含有150例卵巢癌的组织芯片.同时选取30例正常卵巢组织作为实验对照组.运用荧光原位杂交、免疫组化方法,对组织芯片中的组织库进行SRC-3基因的扩增与蛋白表达检测,结合肿瘤的临床病理学资料,分析它们之间的关联.结果 在150例卵巢癌组织芯片中,有128例肿瘤成功进行了免疫组化检测,其中46例(35.9%)出现SRC-3蛋白的过度表达,而且与肿瘤的Silverberg氏分级和FIGO分期均有显著的关联(P<0.05),其中45.1%的Silverberg氏G2/3级和46.0%的FIGOⅢ/Ⅳ期卵巢癌出现SRC-3蛋白的过度表达,其阳性率明显高于G1级(13.5%)和FIGO Ⅰ/Ⅱ期(14.6%)的肿瘤.在FISH检测中,9.1%的卵巢癌出现SRC-3基凶扩增,且全部出现SRC-3蛋白的过度表达;而在SRC-3基因无扩增的卵巢癌中,仍有28.6%的肿瘤检测到SRC-3蛋白的过度表达.结论 组织芯片技术是基因扩增与蛋白表达分析的高效准确可靠手段.SRC-3蛋白的过度表达可以作为预示该卵巢癌恶性程度的分子标记之一;在SRC-3的蛋白表达调控中,可能存在着SRC-3基因扩增以外的其它调节机制.
关键词： 组织芯片 卵巢肿瘤 甾体类受体共激活因子3基因 荧光原位杂交 免疫组织化学 -
组织芯片的基本应用范围
目的探索组织芯片的基本应用范围.方法将HE染色、组织化学、免疫组织化学、原位杂交和荧光原位杂交技术应用于组织芯片,了解这些技术应用于组织芯片的可行性和有效性.结果这些检测技术在组织芯片中均有清晰、定位明确的着色.结论HE染色、组织化学、免疫组化、原位杂交和荧光原位杂交技术可有效地用于组织芯片,因此,组织芯片可用于组织形态观察、组化特性分析以及蛋白和核酸(RNA和DNA)在组织细胞中的定位性研究.
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p16INK4A、p53、Ki-67及ER在宫颈病变中表达的临床病理意义
目的 探讨p16INK4A、p53、Ki-67及ER在不同程度宫颈病变组织中的表达及应用组织芯片技术的可行性.方法 将104例患有宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)、尖锐湿疣以及正常宫颈的组织各集成在3张组织芯片上,用免疫组化SP法检测其p16INK4A、p53、Ki-67及ER蛋白的表达.结果 p16INK4A、p53、Ki-67及ER在宫颈鳞癌组中的阳性表达率分别为100%、83.33%、83.33%和5.56%,p16INK4A表达以强阳性为主;在CINⅢ中的阳性表达率分别为82.35%、82.35%、100%、41.18%,p16INK4A和Ki-67表达以强阳性为主;在CINⅡ中的阳性表达率分别为88.24%、76.47%、100%和47.06%,p16INK4A表达以强阳性为主;在CINⅠ中的阳性表达率分别为65%、60%、100%和80%,p16INK4A表达以弱及中等强度为主,p53、Ki-67及ER表达为弱至中等阳性;在尖锐湿疣组中的阳性表达率分别为13.64%、59.09%、18.18%和68.18%,p16INK4A、p53和Ki-67表达均以弱阳性为主,ER表达则增强至中度阳性;正常对照组只有职表达为100%,其余全部阴性.宫颈鳞癌、CINⅢ、CIN Ⅱ、CINⅠ及尖锐湿疣各组p16INK4A、p53、Ki-67及ER蛋白阳性表达率与对照组比较差异显著(P<0.05).结论 p16INK4A缺失、p53突变与宫颈浸润性鳞癌、CIN的发生、发展密切相关;p16INK4A、p53和Ki-67的升高与宫颈病变恶性程度呈正相关,ER的升高与其呈负相关;组织芯片技术完全可以用于子宫颈病变方面的研究.
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胃肠间质瘤组织中MMP-14与CD147的表达及其意义
目的 探讨基质金属蛋白酶-14(MMP-14)和CD147的表达与胃肠间质瘤(GISTs)临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法检测69例GISTs组织中MMP-14和CD147的表达,分析MMP-14和CD147与各病理参数的关系.结果 GISTs组织中MMP-14和CD147的阳性率分别为94.2％和97.1％,MMP-14阳性表达程度与GISTs的危险度、CD147表达及肿瘤的大小呈正相关(P＜0.05)；CD147阳性表达程度与肿瘤的大小呈正相关(P＜0.05).结论 MMP-14阳性表达与GISTs危险度关系密切,可作为GISTs危险度的潜在评价指标.
关键词： 胃肠间质瘤 基质金属蛋白酶-14 CD147 免疫组化 组织芯片 -
TTF-1在肺癌诊断及鉴别诊断中的应用价值
目的评价甲状腺转录因子-1(TTF-1)在原发性肺癌中的表达特异性及敏感性,探讨TTF-1对肺癌诊断和鉴别诊断的潜在价值.方法原发性肺癌95例,其中腺癌52例,肺鳞癌39例,细支气管肺泡癌1例,肺小细胞癌3例;正常肺组织4例,上皮样胸膜间皮瘤4例及186例人体其他部位的正常组织和肿瘤组织做成组织芯片;采用EnVision方法进行TTF-1检测.结果 TTF-1阳性信号的定位在细胞核.44/52例(84.6%)原发性肺腺癌、2/39例(5%)肺鳞癌、1/1例肺小细胞癌和2/3例细支气管肺泡癌表达TTF-1,4例上皮样胸膜间皮瘤均不表达TTF-1,其他部位的正常组织和肿瘤组织(除1例甲状腺癌外)均不表达TTF-1.另外,6/7例肝细胞出现很强的胞质(+),胆管上皮(-).结论 TTF-1在原发性肺腺癌中的表达具有较高敏感性和特异性,提示TTF-1可作为一种有价值的标记用于原发和转移性肺腺癌的鉴别;它对于肺原发性低分化腺癌和鳞癌的鉴别也有一定价值,还具有鉴别肝细胞癌和胆管癌的潜在价值.
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消化道内分泌肿瘤49例临床病理分析
目的探讨一组消化道内分泌肿瘤的临床和病理形态学特点以及分类.方法复习49例消化道内分泌肿瘤的HE切片,用组织芯片技术制片,5种抗体做免疫组化染色并观察其结果.结果 49例肿瘤中类癌43例,小细胞癌6例.其中来自前肠27例,中肠10例,后肠12例.免疫组化Syn阳性34例(69.4%),CgA阳性45例(91.8%),CD56阳性13例(26.5%).阳性率与肿瘤发生部位无相关性.Ki-67和p53在直径＜1.5cm类癌组无阳性表达.散发型类癌组其得分高低与淋巴结转移与否之间差异不显著.结论消化道类癌从形态学到生物学行为1、2型与3型是完全不同的两组肿瘤;CD56在小细胞癌组和直径＜1.5cm类癌组有较高的表达率;混合型肿瘤占该组肿瘤的1/3.
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组织芯片在免疫组织化学质量控制中的应用
目的应用组织芯片技术改善和提高免疫组化染色的质量,使免疫组化结果更具有可信性和可比性.方法根据所测试抗体的不同,选用北京友谊医院病理科23例中性甲醛固定、石蜡包埋的组织标本(包括正常及病变的组织).用组织芯片制作仪挖取直径为2mm的组织芯,构建3个组织芯片蜡块,分别用来测试CD20、EMA和PR.然后进行常规切片,厚度4μm,烤片后将组织芯片分发给参加免疫组化质控的单位.各单位按自已实验室的实际情况进行免疫组化染色.结果经免疫组化染色后,53家单位寄回组织芯片157张.载玻片上的组织芯排列整齐,无移位脱失现象.显微镜下观察,所取组织芯均为有效组织,可完全代表其原组织.经过免疫组化研究中心5位评委对参加者测试片进行集体评审,免疫组化染色总体优良率70.7%.结论在此次免疫组化染色测试中,组织芯片显示了其信息含量多、可比性强及省时、省力等优点,使得大规模的免疫组化质量控制不仅成为了可能而且变得简便易行.免疫组化染色的总体质量较好,但仍有1/3切片染色不佳,存在的主要问题是抗原修复不足,需要改进.
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组织芯片检测大肠癌中NOS、HIF-1α的表达及与血管生成的关系
目的 研究iNOS、eNOS和HIF-1α在大肠癌和非肿瘤性大肠黏膜中的表达及与血管生成的关系.方法 取大肠癌和非肿瘤性大肠黏膜组织各80例制作组织芯片,采用免疫组化技术检测iNOS、eNOS、HIF-1α的表达.结果 iNOS、eNOS和HIF-1α在大肠癌和非肿瘤性大肠黏膜中的表达差异极显著(P＜0.01);iNOs、HIF-1α阳性组的MVD分别高于各自的阴性组(P＜0.05);iNOS的表达与大肠癌分化程度、浸润深度有关(P＜0.01);HIF-1α的表达与浸润深度、Dukes分期有关(P＜0.05).结论 检测iNOS、:HIF-1α在大肠癌中的表达对判断大肠癌的恶性程度有一定价值.应用组织芯片大规模高效检测I临床组织样本具有快速、方便、经济、准确的特点.
