首页 > 文献资料
-
酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用分析
酶联免疫吸附技术的出现是在20世纪60年代,由免疫荧光和组织化学共同发展的一种新型的技术,初期知识用酶来代替在生物组织中标记抗体的荧光素,对其中的抗原进行鉴定和定位.随着科学技术的不断发展,酶联免疫吸附技术也逐渐的在免疫扩散和免疫电泳板的沉淀线做鉴定.1971年期间, Engvall等人利用碱性的磷酸酶标记了抗原或者抗体,建立了酶联免疫吸附技术检测系统,这一技术的建立成为了血清学实验历史中的一场革命,是十分有发展前景的新技术.酶联免疫吸附技术也是固相酶免疫测定技术中的一种.
-
饮用水有机提取物对小鼠睾丸酶活性的影响
水污染和水资源缺乏是当今世界重大的环境问题之一,也是人类面临的严重挑战.流行病学调查显示,人类精液的精子密度已由1940年的1.13亿/ml下降到1990年的0.66亿/ml;每次射精量也由3.4 ml下降到2.75 ml,分析认为环境污染是主要原因之一[1].我们曾对某市饮用水的有机污染物进行了气-质联机(GC/MS)分析,结果表明,饮用水中含有雄性生殖毒物,如:氯仿、苯系物及邻苯二甲酸酯等[2].为了进一步探讨饮用水有机提取物对雄性生殖的影响及其机制,我们进行了本试验研究.
-
人工脂褐素制备方法的初步探索
目的:探讨人工脂褐素的制备方法,及其组织化学特征和生物学效应.方法:提取大鼠肝脏线粒体,氧化还原交联,制备人工脂褐素,小鼠腹腔内注射,做巨噬细胞吞噬实验.取1～5d的腹腔巨噬细胞,作动态观察.结果:1～5d的腹腔巨噬细胞多种组织化学染色和荧光示踪呈阳性反应,胞质内颗粒或荧光团明显,分布特征与阳性对照相似.结论:人工脂褐素具有天然脂褐素的组织化学特征和生物学效应,可以作为替代品,用于抗哀老研究.
-
Survivin和PTEN蛋白在大肠癌中的表达和意义
目的:探讨Survivin和PTEN蛋白在大肠癌中的表达及意义.方法:应用免疫组织化学SP法分别检测68例大肠癌及20例正常大肠黏膜组织中Survivin和PETN的表达.结果:68例大肠癌中suvivin和PTEN蛋白阳性表达分别为66.2%和47%.Survivin高表达和PETN低表达与大肠癌的分化程度、浆膜浸润和淋巴结转移均呈正相关(P＜0.05).大肠癌中Survivin表达与PTEN表达呈负相关(r＜0,P＜0.05).结论:Survivin和PTEN的异常表达在大肠癌发生、发展过程中起重要作用,两者的联合检测可作为反映大肠癌进展和判断预后的生物学指标.
-
睫状神经营养因子对周围神经损伤后再生的影响
目的 研究睫状神经营养因子（CNTF）对周围神经损伤后再生的影响。方法 用硅胶管桥接大鼠双侧坐骨神经缺损，形成神经再生室。左侧室内注入基因重组人CNTF，右侧注入生理盐水（NS）。术后14、30、60和90天取材，行大体、光镜、电镜观察。术后90天行轴突图像分析、电生理检测及霍乱毒素—辣根过氧化物酶（CB-HRP）逆行追踪。结果 与对照侧相比，实验侧再生有髓神经纤维数目较多、轴突较粗且髓鞘较厚，复合肌肉动作电位（CMAP）的潜伏期较短、神经传导速度较快且波幅较高。实验侧CB-HRP标记的脊髓前角运动细胞数明显多于对照侧。结论 外源性hCNTF有明显促进周围神经再生作用。
-
中药863对大鼠D-氨基半乳糖肝损伤保护作用的定量组织化学研究
药863是我们以清热利湿解毒为主,辅以舒肝健脾,活血化瘀为治则,结合现代科学对保肝中药的研究成果而组成的方剂.为判定该方剂的保肝作用并探讨其作用机理,本实验用国产D-氨基半乳糖做成肝炎动物模型,用组织学和组织化学方法观察和分析了所用方剂对D-氨基半乳糖肝损伤的保护作用,并用图象分析仪和Micro-videomat对组织化学染色结果进行了原位定量分析,以期获得可靠的生物参数依据.
-
固本化痰健脑方对拟痴呆大鼠胆碱系统的影响
目的:观察中药固本化痰健脑方对拟痴呆(AD)模型大鼠胆碱能神经系统功能的影响.方法:用鹅膏蕈氨酸建立大鼠AD模型,用改良Ellman法测定大脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,用组织化学染色及图像分析技术测定AchE纤维密度,观察AchE在拟痴呆模型大鼠大脑海马和纹状体尾壳核内的不同分布及密度改变.结果:模型组能显著增高脑AchE活性(P＜0.01),空白组、阳性对照组、固本化痰健脑方高剂量组和低剂量组的AchE活性显著性低于模型组(P＜0.01);在纹状体尾壳核CPU区和海马CA区,空白组、阳性对照组、固本化痰健脑方高剂量组和低剂量组与模型组相比均具有较高的积分光密度(P＜0.01).结论:固本化痰健脑方对鹅膏蕈氨酸所引起的脑内胆碱能神经元损伤具有一定的保护作用,其作用机制与抑制乙酰胆碱酯酶活性和提高Ach递质的量有关.另外,固本化痰健脑方高剂量较低剂量疗效佳.
-
鹰爪花茎和叶中内生真菌的组织化学定位与分子鉴定
目的:研究鹰爪花Artabotrys hexapetalus茎叶的显微结构及其内生真菌在组织内的分布特点及种类鉴定.方法:采用石蜡永久制片法对鹰爪花的显微结构进行研究,细胞化学法确定内生真菌的分布,平板分离法对内生真菌分离培养,通过rDNA中内转录间隔区(ITS)序列进行分类鉴定.结果:鹰爪花茎次生构造由周皮、皮层和维管柱组成,韧皮部纤维成层分布；叶为异面叶,主脉维管束为外韧型,具纤维组成的维管束鞘；茎和叶多个组织有内生菌分布.共分离鉴定18株内生真菌,其中拟茎点霉Phomopsis spp.是鹰爪花内生真菌优势菌群,占分离总数的61.1％,其次为胶孢刺盘孢Colletotrichum gloeosporioides.结论:鹰爪花茎和叶显微特征明显,其内生真菌的分布无明显组织特异性,拟茎点霉为鹰爪花内生真菌的优势种群.
-
穴位的本态:穴位组织细胞化学的动态变化
采用免疫组织化学结合激光共聚焦技术,研究了正常穴位、不同部位穴位、刺激后的穴位、疾病状态的穴位局部组织细胞化学的动态变化,结果表明:①在正常的穴位处存在P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)标记的神经纤维和形态完整的肥大细胞,这些肥大细胞同时也呈现出组织胺(HA)和五羟色胺(5-HT)的阳性标记.不同部位的穴位组织细胞化学成分相同但含量不同.②针刺大鼠"合谷"穴后,穴位局部表现为伤害性神经肽SP和CGRP在穴位局部表达增加,肥大细胞聚集脱颗粒,HA和5-HT表达增加.③在造成胃黏膜损伤后,体表敏化点的分布和内脏的神经节段分布类似,和经典穴位重叠率高.敏化穴位的局部也出现了和穴位刺激后相同的组织细胞化学改变.提示穴位处虽然没有一个特异性的解剖学结构,但是无论是疾病反应还是针刺刺激,其局部的组织细胞化学改变却是一致的.这可能就是穴位处组织细胞化学动态改变的基础.
-
中药2号方抗大鼠肝纤维化的组织化学及免疫组织化学实验研究
目的:探讨中药2号方对肝纤维化组织化学及免疫组织化学方面的影响.方法:用猪血清腹腔注射法复制大鼠免疫性肝纤维化模型,用中药2号方进行预防和治疗,观察了肝脏ATPase、ACP、CCO、5′-N、G-6-P、SDH、IV胶原、LN、FN的变化,用图像分析仪做定量分析,并进行统计学处理.结果:中药治疗组上述指标的改善情况明显优于西药治疗组(P<0.01).结论:中药2号方有预防和治疗肝纤维化及保护肝细胞酶活性的作用.
-
山茱萸水提取物对肾阳虚动物模型肝脏和睾丸影响的实验研究
目的:探讨山茱萸补肾阳作用.方法:应用氢化考的松所致的肾阳虚动物模型,观察山茱萸水溶物对肾阳虚大鼠的影响.结果:山茱萸水溶物具有使肾阳虚大鼠肝脏重量接近正常,肝细胞病理改变减轻,肝细胞RNA和糖原含量升高,丙二醛含量下降;它还能使肾阳虚大鼠睾丸脏器系数向正常方向逆转,使睾丸间质细胞内RNA含量增加.结论:山茱萸水溶物具有保护和改善肾阳虚动物模型肝脏和睾丸器官机能的功效.
-
蚂蟥不同月龄口器组织学及组织化学研究
利用石蜡切片、HE及AB-PAS染色法研究不同月龄蚂蟥口器组织结构的变化.结果显示1～3月龄口径与口宽增加幅度较小,分别为0.6,0.3 mm;3～4月龄增幅大,为1.2 mm;4～6月龄口径、口宽达到大值,基本不再增加.口唇位于口部前端的外缘,外被薄的保护膜,随着生长口膜上皮细胞由立方上皮细胞到柱状细胞再到长柱状细胞.口腔深处共有3个颚,较大1个居背面,另外2个较小的分居左右腹侧,与肌肉质的咽相连,颚从外到内由角质层、上皮细胞层、肌层、颚腔组成,颚上均存在具有分泌酸性颗粒的乳突,从2月龄开始存在大量酸性颗粒状物质;口腔由内向外由黏膜层、黏膜下层、肌层组成,周围有着丰富的围口神经.咽由内向外由黏膜层、肌层、浆膜层构成,黏膜褶皱随生长增高增厚,黏膜上皮由复扁平上皮变为柱状上皮,肌层发达且随着生长逐渐增厚,4月龄厚度大.蚂蟥黏液细胞主要由管状、梨状2种形态4种着色类型构成,不同时期AB-PAS染色变化不大,口唇1月龄黏液细胞少,2,3月龄黏液细胞增多且主要为Ⅱ型黏液细胞,口腔中含有较多Ⅰ型黏液腺细胞,咽部肌层下的结缔组织层分布着较少的Ⅱ型黏液细胞.
-
金属硫蛋白在铜绿治疗小鼠实验性肝癌中的作用
目的:研究金属硫蛋白(metallothionein,MT)在铜绿治疗实验性小鼠肝癌(H22)过程中所起0的作用.方法:采用原子吸收法、银饱和法、组织化学法同步观察了肝脏及肿瘤组织中铜元素与MT的含量及分布规律.结果:(1)治疗组肝组织内铜及MT含量均明显高于模型组;(2)治疗组肿瘤组织中铜含量明显高于模型组,而MT含量显著低于模型组;(3)组织化学检测可见治疗组肝细胞胞浆和核内铜元素及MT同时存在.肿瘤组织内铜大量存在,而MT很少或呈阴性.结论:(1)肝组织内大量的MT可与铜耦合,有利于保护肝脏免受铜的损害;(2)肿瘤组织内MT减少有利于发挥铜对肿瘤细胞的杀伤作用.
-
兔急性上颌窦炎早期一氧化氮合酶的表达及意义
目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)在兔急性上颌窦炎(AMS)窦粘膜中的表达及其意义.方法:健康新西兰白兔36只,分为空白、阴性对照组和AMS组.通过阻塞窦口并注入1.0ml的肺炎链球菌悬液(109CFU)建立AMS模型,观察时间点为自手术第5、10天.应用黄递酶--NADPH组织化学技术,以NADPH脱氢酶特异性测定NOS在空白、阴性对照组和AMS组兔上颌窦粘膜中的分布及不同时间点AMS组NOS活性表达.结果:正常和急性上颌窦炎兔窦粘膜酶化学染色均有反应,主要分布于粘膜上皮、血管内皮和腺体细胞(染色程度与正常组相比,P＜0.05或P＜0.01).结论:正常兔上颌窦粘膜存在NOS,一氧化氮(NO)与上颌窦急性炎症有关,炎症时NOS活性明显增高,过多的NO会对组织或细胞产生损伤,提示NO在AMS发病机制中有重要意义.
-
实验犬环杓后肌功能重建的组织化学研究及图像分析
为了确定并比较实验犬两种不同术式:Ⅰ.颈袢胸骨舌骨肌支肌蒂移植术;Ⅱ.副神经胸锁乳突肌支肌蒂移植术,治疗声带麻痹的效果.建立单侧联合性声带麻痹动物模型,分别用Ⅰ、Ⅱ两种术式移植神经肌蒂于失神经的环杓后肌(PCAM).术后4个月取各组PCAM做超微结构检查,并做光镜组织化学:乙酰胆碱酯酶(AChE)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、三磷酸腺苷酶(ATPase)、糖原(PAS)反应.用图像分析定量并测示肌纤维直径.结果发现两种术式都能使PCAM恢复功能,第Ⅱ种术式组织化学结果优于第Ⅰ种术式.为治疗声带麻痹提供了重要的理论根据.
-
缝隙连接蛋白43在培养的新生大鼠心室肌细胞中的时空表达
目的 讨连接蛋白43(Cx43)在培养的新生大鼠心室肌细胞中的时空表达变化规律.方法 利用免疫细胞化学方法及免疫电镜技术,观测培养2、4、8、10、12、16、20、26、30d大鼠心室肌细胞Cx43蛋白的表达;结果培养第2d心肌细胞开始表达Cx43,表达部位主要在细胞质中,呈点状;第4d细胞质中点状分布减少.主要集中在细胞膜连接处;第10d在细胞连接处增多,呈条、链状分布;以后基本恒定,无明显变化;第30d时Cx43颗粒出现紊乱分布; 绪论 Cx43在培养的新生大鼠心肌细胞中的表达随培养时间延长而出现位置和量的变化,与培养心肌细胞的生长、发育及功能变化一致.
-
小鼠肝癌细胞移植瘤内淋巴管的形态与亚细胞结构
目的观察小鼠肝癌细胞所致小鼠移植瘤内淋巴管形态学改变,探讨移植瘤内是否有淋巴管新生. 方法将小鼠肝癌(H22)腹水型瘤株细胞接种于昆明小鼠腋部皮下,2周时摘取肿瘤,采用HE染色观察癌肿的发展,光镜下用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法观察毛细淋巴管;半薄切片筛选毛细淋巴管;应用透射电镜观察毛细淋巴管内皮细胞超微结构. 结果动物模型显示2周时小鼠腋部可见明显肿块.5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法可见中心区无毛细淋巴管,周边部可见稀疏的染成棕黄色的毛细淋巴管,染成蓝色的血管较为多见.透射电镜下,周边区可见毛细淋巴管,亚细胞结构发生损伤. 结论小鼠肝癌细胞所致小鼠移植瘤内存在新生毛细淋巴管.
-
小鼠卵黄囊间充质干细胞的培养及鉴别
目的 研究小鼠卵黄囊间充质干细胞(YS-MSCs)的分离、培养和鉴定.方法 显微分离妊娠10d的小鼠胚胎卵黄囊,经0.1%的Ⅰ型胶原酶消化1h得到卵黄囊细胞,取贴壁细胞培养,并于接近汇合时进行传代培养,透射电镜下观察YS-MSCs的超微结构;流式细胞仪检测YS-MSCs表面标志;钙钴法测定YS-MSCs碱性磷酸酶(AKP)活性;细胞组织化学检测YS-MSCs化学变化;地塞米松、胰岛素定向诱导YS-MSCs分化为脂肪细胞,油红0检测中性脂肪.结果 体外可获得YS-MSCs,细胞大多数呈梭形;透射电镜下YS-MSCs表面有微绒毛,胞浆中有丰富的线粒体、粗面内质网、高尔基复合体;核大,形态不规则;流式细胞术分析YS-MSCs免疫表型显示,原代和第1代YS-MSCs均为CD44、CD105阳性,CD34也有少量表达;细胞化学YS-MSCs PAS-过碘酸雪夫染色阳性,苏丹黑-B (S8)及碱性磷酸酶(AKP)染色阴性;YS-MSGs经成脂诱导后,胞浆中有脂滴形成,经油红0染色脂滴呈鲜红色.结论 小鼠YS-MSCs的生物学特性与成体间充质干细胞相似,且更为原始,提示其可作为组织工程的种子细胞来源.
-
成人毛囊器官培养模型中敏乐定促毛囊生长机制的研究
目的 探讨敏乐定促进毛囊生长的机制.方法 选用无血清成人毛囊器官培养模型,体外加入不同浓度的敏乐定,测量毛囊生长速度.在不同时间点取培养毛囊,进行组织化学及免疫组织化学染色,检测Ⅰ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、转化生长因子β1 (TGFβ1)、整合素β1及K19的表达情况.结果 培养毛囊在前3d增长较快,而后期增长趋缓,1mg/L敏乐定对毛囊生长促进作用明显.敏乐定组毛囊退化表现出现较晚,Ⅰ型胶原蛋白含量较对照组多,MMP-1表达减少;TGFβ1表达较对照组减少;整合素β1和K19与对照组相比没有显著差异.结论 敏乐定能够延缓器官培养毛囊的退化期出现而延长生长期,促进毛囊的增长.敏乐定的这种作用可能是通过抑制TGFβ1的过度表达而实现的.
-
辛伐他汀对颈椎异体骨移植融合过程的影响
目的 研究辛伐他汀对颈椎异体骨皮质移植融合过程的影响. 方法 健康成年雄性Wistar大鼠44只,随机分为对照组、辛伐他汀组、重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)组及空白对照组,前3组行颈椎前路间盘切除异体骨皮质椎间移植融合术.分别在手术后2、4、8和12周将动物处死,取出颈椎后拍摄X线片,观察融合情况,双能量骨密度仪测量颈椎椎体骨密度;颈椎标本组织化学染色观察椎体骨小梁同植骨块表面融合,及植骨内部的血管新生和骨形成的情况. 结果 颈椎骨密度对照组较空白对照组明显降低(P<0.01),而辛伐他汀组和rhBMP-2组颈椎椎体骨密度同空白对照组无明显差别.病理显示,对照组炎性纤维组织长期存在,术后3月植骨界面有少量的软骨内成骨;而辛伐他汀组术后炎性纤维组织形成少,存在时间短;在术后第8周辛伐他汀组及rh BMP-2组异体骨表面均可与椎体骨小梁发生骨性融合;植骨12周,rhBMP-2组植骨内部的血管侵入和骨质形成较少,而辛伐他汀组植骨内部可见较多的新生血管形成,新生血管周围可形成环形骨质沉积. 结论 辛伐他汀可促进异体骨皮质移植后同颈椎椎体的融合.
