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流感可进行哪些实验室检查?
血象:白细胞总数减少,淋巴细胞相对增加;合并细菌感染时,白细胞总数和中性粒细胞增多.抗原检测:取患者鼻洗液中黏膜上皮细胞的涂片标本,用荧光或酶标记的流感病毒免疫血清染色检测抗原,有助于早期诊断.
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酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用分析
酶联免疫吸附技术的出现是在20世纪60年代,由免疫荧光和组织化学共同发展的一种新型的技术,初期知识用酶来代替在生物组织中标记抗体的荧光素,对其中的抗原进行鉴定和定位.随着科学技术的不断发展,酶联免疫吸附技术也逐渐的在免疫扩散和免疫电泳板的沉淀线做鉴定.1971年期间, Engvall等人利用碱性的磷酸酶标记了抗原或者抗体,建立了酶联免疫吸附技术检测系统,这一技术的建立成为了血清学实验历史中的一场革命,是十分有发展前景的新技术.酶联免疫吸附技术也是固相酶免疫测定技术中的一种.
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ALISEI全自动酶标仪故障分析与维护
酶标仪是一种用途广泛的生物、医学仪器,利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理,根据呈色物的有、无和呈色深浅进行定性或定量分析.这是一种极具生命力的免疫学技术.可用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验,以及其他需要进行比色的分析工作中.
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用肽核酸快速检验、鉴定和计数瓶装水中的铜绿假单胞菌
Stender H.等人在2000年11月美国出版的《微生物方法杂志》上,介绍了一种新的同时检测、鉴定和计数铜绿假单胞菌的CISH (Chemiluminescent in situ hybridization)方法,该方法已经研究成功。这种检验方法用一个工作日就可以完成上述工作。用大豆过氧化酶标记的肽核酸(Peptide nucleic acid,PNA)为探针结合铜绿假单胞菌的种特异性rRNA,单个的铜绿假单胞菌菌落标记5小时后,可直接在滤膜上找到。每种微生物的过氧化酶作用物都会发光,这个现象可以通过胶片或数码相机系统看到。每一个光点都是一个铜绿假单胞菌。通过对28株铜绿假单胞菌和17株其他菌包括种属关系非常相近的菌的实验证实,该方法的灵敏度和特异性均为100%。而且,铜绿假单胞菌可通过发光点进行计数。作者认为PNA CISH发光法与传统的薄膜过滤技术相比,PNA探针特异性技术使实验结果又快又准确。(王晓玲供稿 郑云雁校)
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艾滋病实验室工作探讨
ELISA是指酶联免疫吸附试验,检测HIV抗体时可使用血液、唾液、尿液样品,HIV抗原或抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原或抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果,试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定,经过6年的HIV抗体检测工作,总结体会如下.
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建立引物双标记的聚合酶链反应-酶联免疫吸附法检测军团菌mip基因
建立一种新的检测嗜肺军团菌mip基因的引物双标记聚合酶链反应-酶联免疫吸附(PCR-ELISA)法,应用于豚鼠军团菌感染的早期检测和诊断.其方法是将一对嗜肺军团菌引物分别标记有生物素和异硫氰酸荧光素,经PCR扩增后,将标记有生物素的PCR扩增产物加入链酶亲和素包被的微孔板中,洗去未结合物后直接加入碱性磷酸酶标记的抗荧光素抗体,待与荧光素结合后,再加入底物产生显色反应,ELISA仪测得A值.
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ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA方法的检测原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性.在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应.用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开.
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艾滋病毒重组抗原及第三代艾滋病毒抗体EIA诊断试剂盒的研制
近年来中国的艾滋病毒(HIV)感染人数以每年30%的速度增长,HIV感染者总数已超过60万人,感染者已从吸毒人员、献血员等高危人群扩展到社会各个阶层,我国已处于艾滋病泛滥前的关键时期.HIV诊断试剂盒是HIV防制工作中重要的技术工具.用于人群筛检的HIV诊断试剂盒已历经三代,第一代试剂盒主要使用来自细胞培养的HIV病毒的裂解产物作为抗原;第二代产品使用基因工程重组抗原和/或人工合成肽作为抗原,使包被抗原中免疫优势区的比例明显增强,从而提高了试剂的灵敏度,而且标准化生产的相对更纯的抗原的使用使试剂的特异性和重复性均大为提高.前两代试剂均采用间接法原理,即先以抗原包被聚丙乙烯板,再加入待检血清,后加入酶标记的抗人IgG抗体,因此均只能检测IgG抗体.1992年问世于美国的第三代试剂则采用双抗原夹心法,即先以抗原包被,再加入待检血清、酶标记的抗原,从而可同时检测所有类型的抗体,明显提高了试剂的灵敏度,同时由于采取了双抗原识别机制,特异性也得到了明显提高,因此在国外已取代间接法而成为主流试剂.
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ALISEI自动酶标仪故障维修2例
酶标仪是一种利用酶联免疫分析方法的检验科重要设备,它主要根据酶标记原理,对呈色物的有无和呈色深浅进行定性或定量的分析.其可用于单克隆抗体部分、凝血分析、抗生素灵敏度检验和其他需要进行比色的分析工作.
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GF-M3000型自动化酶标分析仪的应用与体会
酶标分析仪简称酶标仪,是专用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的自动化分析仪器.它主要是依据酶标记的原理,对检测样品呈色物的有无和呈色深浅进行定性和定量分析.GF-M3000型酶标仪是各级医疗机构配置的主要机型.正确掌握仪器的使用方法,是确保检测结果准确、可靠,为临床诊疗提供科学依据的重要环节.现从使用者的角度,对GF-M3000型酶标仪的特点、基本操作方法及应用作一阐述.
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从甲型肝炎亚临床感染儿童粪便中检出甲肝病毒
1980年12月~1981年4月,江苏省海门县厂洪公社15大队发生一起由沟水引起的甲型肝炎暴发流行.从461名居民中发现12名甲肝病例,11名为黄疸型.暴发后期,对5~29岁居民135人抽血检测,查出SGPT升高者8人.用固相酶标记双夹心法[1]对全部12名病例和8名SGPT升高者,检测血清抗-HAVIgM.12名病例全部阳性,确诊为甲型肝炎.8名SGPT升高的无症状者中,3名阳性,均为5~14岁儿童,表明为亚临床感染.
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流行性出血热患者外周血非特异性酯酶标记淋巴细胞动态观察
1984年11月~1985年3月我院对194例出血热患者进行了外周血非特异性酯酶标记T淋巴细胞动态观察,显示细胞免疫功能低下,其方法简便,现总结如下.
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时间分辨免疫荧光技术的优势分析
放射免疫分析(RIA),以其高度特异性、灵敏度和实用性,吸引着各国的生物医学工作者,但操作中始终存在放射污染.随着生物技术不断提高,人们发展了一系列非放射性标记技术,如酶标记、化学发光、生物发光标记等标记技术,其中,在普通荧光标记基础上发展起来的新技术--时间分辨免疫荧光技术,为引人注目.
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一例肝、小肠联合移植的病理学观察
患者,男性,55岁,1999年2月2日因绞窄性肠梗阻行全小肠、部分十二指肠及升结肠(含盲部)切除,1999年4月15日行同种异体辅助性肝、小肠联合移植.我们对该例移植小肠之造瘘口的全层小肠组织进行连续15次组织学观察,并行1次移植肝穿刺活组织检查,以探讨小肠移植后小肠的组织学变化及了解移植肝是否出现排斥反应的病理学变化,并在恢复血液供应前(零时)、急性排斥时及死亡后取小肠组织进行酶标记的抗原抗体免疫组织化学染色(SABC),观察HLA-DR 及白细胞介素2受体(IL-2R)在组织中的表达.
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Claudin-7基因敲除模型的建立
为研究Claudin-7在机体中的功能[1],我们建成Claudin-7基因敲除小鼠模型并分析其特点.一、材料与方法1.材料:利用DNA同源重组技术建立基因敲除小鼠,SPF级动物房饲养,兔抗COX-2、P-Histone H3多抗(cell signaling,USA),兔抗Claudin-7多抗购自日本IBL公司;鼠抗GAPDH单抗购自美国Calbiochem公司;抗兔和抗鼠辣根过氧化酶标记的二抗购自美国Promega公司.
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鼻咽血管纤维瘤雄激素受体的免疫组化检测
鼻咽血管纤维瘤(Juvenile nasopharyngeal angiofibroma,JNA)多发于青春期男性.Martin(1948)和Schiff(1959)首次报道JNA与性激素有关.这说明类固醇性激素在JNA的发病和发展中可能有重要作用.近些年来,人们采用葡聚糖包裹活性碳吸附法(DCC法)对这一问题进行实质性探讨.但迄今为止,很少见到有关采用过氧化酶标记的链霉卵白素法(streptavidin peroxidase,SP法),检测JNA组织中雄激素受体(androgen receptor,AR),并对JNA中成纤维细胞进行特殊染色,用体视学方网测试系统定量计算成纤维细胞面数密度的报道,为探讨AR在JNA发病中的作用,我们进行了这方面的研究.
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自检HBV免疫标志物ELISA试剂是否失效
酶联免疫吸附试验(ELISA)是建立在酶免疫技术上的,是以酶标记的抗体(或抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶高效催化反应的专一性相结合的一种免疫检测技术,即将生物反应(抗原抗体反应)与酶促反应组合在一起的免疫-酶促反应.
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SEROZYME-Ⅰ型磁酶免仪标准曲线的人工输人方法
磁分离均相酶联免疫定量测定技术具有酶标记,无放射性污染,对实验室要求低,试剂有效期长,适合单个或少量标本测试等优点,是中小型医院替代放免技术,开展内分泌、肿瘤标志物等测定的良好而实用的方法.在我们使用中发现,该仪器的程序较呆板;当由于某种原因使内存标准曲线丢失或发现曲线有问题需要修改或重新输入时,却不能直接进入标准曲线进行输入修改,而必须重新做曲线.为此,常常为一个错误而必须重做一次曲线并在制作新曲线的过程中进行修改,否则,一旦曲线内存后你根本不能再进入到修改标准曲线的步骤.为此笔者根据该实验原理,找到了经济实用地进行人工输入标准曲线程序的方法.操作如下:
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ELISA在梅毒血清学诊断中的应用
酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种利用酶标记抗原或抗体检测相应抗体或抗原的免疫学检测方法,目前已广泛应用于各种抗原和抗体的测定.在梅毒的免疫学检测中,用非致病性螺旋体作为抗原成分的ELISA方法已用于先天梅毒的诊断和梅毒的抗心磷脂抗体与其它疾病的抗磷脂抗体的鉴别,而以梅毒螺旋体为抗原成分的ELISA试验也已应用于梅毒血清学的诊断[1].
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免疫检测技术及其研究进展
免疫检测技术是一种以抗原抗体特异性识别和结合为原理对样品中特定的目标物进行定性定量测定的分析方法,其在临床医学、现代生命科学、食品科学、生态学等领域发挥着重要作用.本文主要综述近几年应用比较广泛的免疫学检测方法及其研究近况.