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恙虫病致多器官功能衰竭1例分析
病历资料患者,男,56岁,以"发热咳嗽4天,腹痛、腹泻2天",于6月4日入院.入院4天以前,患者无明显诱因出现发热,自测体温高达38.6℃,热型不详,干咳,偶有胸闷,活动后气促,伴头晕、心悸,全身乏力,食欲不振,四肢肌肉酸痛.入院2天前,患者出现阵发性、非放射性腹痛,排5次淡红色水样大便,每次150~200ml,排便后腹痛无缓解.发病2天以来,小便呈淡红色,量较平时少(具体量不详),就诊于我院.门诊以"发热原因待查"收入传染科.
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2所医院物品与人员手HBsAg及HBV-DNA污染检测
于1998年、1999年的3~5月,对福州地区2所医院口腔门诊物品与人员手进行了HBsAg与HBV-DNA检测.检测时,以浸有磷酸盐缓冲液的无菌棉拭,对物品表面与人员手往返涂抹采样.随后,将棉拭头剪入2 ml磷酸盐缓冲液中.在旋涡混匀器中充分震荡后,离心(4000 r/min)5 min.取离心液,用ELISA法检测HBsAg抗原性.以样液OD值(S)与阴性对照OD值(N)的比值(S/N)>2.1,为HBsAg阳性.以上海医科大学预防医学研究所提供的非放射性分子杂交法检测HBV-DNA,当测定孔位呈现蓝紫色斑点时为HBV-DNA阳性.
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新型的电化学发光免疫分析及其临床应用
1990年Leland[1]等人建立了电化学发光反应系统之后,以电子得失过程中的电位差作能量激发源的电化学发光免疫分析(electrochemoluminescence immunoassay,ECLIA)相应建立。ECLIA与其他几种标记技术相比,有许多优点:(1)无放射性辐射危害,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应;(2)灵敏度高,检测线性范围在6个数量级,下限值为1pmol,达到或超过RIA水平;(3)检测速度快,检测仅需几分钟到十几分钟;(4)稳定性好,自动化程度高,可直接使用液体试剂;(5)应用范围宽,既可检测不同分子大小的抗原、半抗原和抗体,又可用于核酸探针的检测。ECLIA符合临床检验的需要,为科研工作和临床诊断提供了一种痕量非放射性的免疫检测手段。
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原位杂交检测腋淋巴结阴性的乳腺癌组织nm23 mRNA表达及其意义
我们应用Digoxigenin(DIG)标记非放射性原位杂交技术检测nm23 在96例腋淋巴结阴性(ANN)及48例腋淋巴结阳性(ANP)乳腺癌中的表达并分析其意义.
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在组织芯片上利用量子点技术进行抗原的检测
在组织培养和组织切片上,可利用放射性和非放射性方法检测抗原的定位.而在传统的免疫荧光分析技术中,有机荧光基团存在激发波长范围很窄、发光时间短,容易猝灭等缺点,限制了它们在蛋白定量上的使用.荧光半导体纳米颗粒量子点(quantum dots)提供了一种潜在的方法去克服有机荧光基团的这些缺陷,开始在免疫荧光分析中初步应用,并取得了令人满意的效果.
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杂交捕获法与荧光定量PCR法在高危型HPV检测的比较
宫颈癌为女性常见的癌症之一,我国宫颈癌的发病率和死亡率占全世界的1/3,且有年轻化的趋势[1-2].大量研究显示,持续的高危型人乳头瘤病毒(humarl papillornavims,HPV)是宫颈癌及癌前病变发生的必要条件.据国际宫颈癌生物学研究(IBSCC)机构报道,宫颈癌组织中HPV DNA的检出率高达93%[3].因此,将HPV DNA检测纳入宫颈癌及癌前病变筛查势在必行.目前使用多的是美国Digene公司的2代杂交捕获分析(hybrid capture 2,HC2),也是美国食品和药品管理局(FDA)惟一批准用于临床的非放射性HPVDNA检测技术,具有较高的敏感度和特异度[4],但此检测试剂昂贵,完全依赖进口,在经济欠发达地区很难推广.实时荧光定量PCR检测(FQ-PCR)是敏感的核酸扩增技术,可在较短时间内获得非常准确的结果,检测HPV的成本明显低于HC2分析.本研究通过比较HC2和FQ-PCR法检测HPV DNA结果,评价FQ-PCR的临床应用价值.
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大肠癌细胞功能性Fas配体的表达度与肿瘤免疫逃逸的关系
目的:表达Fas配体(fasligand,FasL)的肿瘤周围激活的Fas阳性淋巴细胞凋亡异常增加.肿瘤的发生在很大程度上是因为转化的细胞不能正常凋亡所致.观察Fas与FasL在结肠癌细胞株的表达,在体外验证结肠癌细胞SW620是否可以诱导淋巴细胞发生凋亡.方法:用免疫组织化学SABC法观察结肠癌细胞系和Jurkat T淋巴细胞系Fas与FasL的表达,为癌细胞的Fas和FasL的功能提供形态学依据.采用非放射性细胞毒分析,测定SW620结肠癌细胞与Jurkat靶细胞共培养后LDH释放值检测效应细胞的杀伤效应.结果:结肠癌SW620细胞FasL染色呈阳性反应,阳性反应物主要定位于癌细胞的胞膜及核周区,而Fas染色几乎呈阴性反应.Jurkat细胞系Fas,FasL免疫组化染色呈阳性反应,阳性反应物主要定位于癌细胞的胞膜.CytoTox96非放射性细胞毒分析显示大肠癌SW620细胞系与激活的T细胞(Jurkat T细胞)共培养,诱导对Fas介导的凋亡敏感的T淋巴细胞(Jurkat T细胞)明显凋亡,并随着SW620接种浓度增加和共培养时间的延长,Jurkat T细胞凋亡的比例显著增加.用含有乙酸肉豆佛波醇(phorbol 12-myristatel3-ac-etate,PMA)加离子霉素(ionomycin)的DMEM培养基孵育48 h的大肠癌SW620细胞系与激活的T细胞(Jurkat T细胞)共培养,Jurkat T细胞凋亡的比例也明显增加.结论:结肠癌细胞SW620表达功能性FasL,能杀伤Fas阳性Jurkat T淋巴细胞,形成免疫逃逸.
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雷尼酸锶治疗骨质疏松症的研究进展
雷尼酸锶(Strontium Ranelate,SR)由一个有机酸(雷尼酸)和两个非放射性锶原子组成.SR具有双向调节作用,能诱导骨重建的解偶联,增加骨形成,减少骨吸收,但不抑制骨转换,是非常有潜力的新药,目前被认为是有效治疗骨质疏松症的药物之一[1].但国内相关研究还很少.
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放射性镍钛合金内支架防治胆管良性狭窄的实验研究
我们通过观察放射性与非放射性镍钛合金支架对犬胆总管愈合的影响,探讨放射性镍钛合金支架对防治胆管狭窄的临床作用.
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硼中子俘获疗法进展和展望
硼中子俘获疗法(boron neutron capture therapy,BNCT)的基本原理是基于核裂变反应.当非放射性硼(10B)元素受到低能量中子照射后即发生核裂变,从而产生高能量α粒子(4He),其本身衰变为锂(7Li)核[10B(n,α)7Li].7Li核和α粒子的射程大约只有1个细胞的直径(10μm),所以其引起的损伤范围也仅局限于带有1oB的细胞.因此,无论从生物学或生理学角度上来看,BNCT是新的一种靶向性放疗[1].BNCT要取得成功,首先必须选择性地运送足量10B到肿瘤细胞内,同时保持周围正常细胞不含或仅含极低浓度10B.
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辽宁省某核电厂非放射性职业病危害因素检测结果
目的 了解核电厂非放射性职业病危害因素的种类及其浓度(或强度),为企业日常管理提供依据.方法 采用职业卫生现场调查法,了解核电厂非放射性职业病危害因素的种类;采用现场采样及现场检测的方法对核电厂非放射性化学和物理有害因素进行检测.结果 核电厂非放射性职业病危害因素有粉尘(电焊烟尘、铁及其化合物粉尘、砂轮磨尘)、化学毒物(硫化氢、氯气、盐酸、氢氧化钠、氨、联氨、锰及其化合物、一氧化氮、二氧化氮)、物理因素(噪声、高温、工频电场、紫外辐射、照度),其中粉尘合格率为100.00%,化学毒物合格率为98.65%,物理因素合格率为76.49%,其中噪声强度合格率仅为52.99%,照度合格率为90.91%.结论 辽宁省某核电厂非放射性职业病危害种类繁多,其浓度(或强度)基本合格,主要问题是工作场所噪声强度高及照明不足.
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氯化镧对HL-60及K562细胞增殖和凋亡的影响
许多医疗单位已经应用放射性稀土元素对肿瘤进行诊断和治疗.但关于非放射性稀土元素抗肿瘤效果报道较少.Ji等[1]发现稀土元素氯化物处理后的人胃癌细胞株PAMC82在琼脂糖培养基中培养时集落形成能力下降,Northern blot分析显示,PAMC82细胞经氯化镧及氯化铈作用后P53、P16(MTS1)及P21(WAF1)基因表达升高.此研究表明轻稀土元素具有抑制癌细胞增殖的效果,这可能与癌细胞中钙调素下降及某些基因表达升高相关.Sato等[2]发现1mmol/L镧系(La3+、Ce3+、Nd3+、Sm3+、Gd3+、Yb3+)及Al3+离子作用后黑色素瘤细胞的生长率明显低于对照组;细胞周期分析显示三价金属离子阻止细胞从G0/G1期过渡到S期.为了观察镧对白血病细胞的影响,我们研究了LaCl3对HL-60及K562细胞的生长和凋亡的影响.
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脱氧核糖核酸生物传感器的应用
近年随着分子生物学和生物学技术的发展,基因的检测方法越来越多,在传统放射标记法的基础上,各种非放射性标记法发展迅速.在这些方法中,研究较多的是以核酸探针为识别元件、以基于核酸相互作用为原理的DNA生物传感器[1].该传感器以其简易、快捷、价廉的独特优越性,在分子生物学、卫生检验和环境监测等领域具有广泛的应用前景.本文简要评述DNA生物传感器的原理及其在分析科学中的应用和研究进展,并提出今后的研究方向和发展趋势.
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儿童创伤后脊柱的固定
无论是院前急救还是医院急诊室,在处理创伤病人时有一种观点,即"每个伤者都有可能存在颈椎损伤除非你能排除这种可能性",这个观点很重要.随着循证医学知识的增加,包括一些非传统技术的应用,排除颈椎损伤的能力也在增强.院前急救排除方法及急诊室的非放射性临床排除方法已经越来越被接受.原先用于成人,近来用于儿童的一些诊断方法也在不断发展,但在儿童受伤后没有完全排除脊柱损伤前,保护脊柱的措施至关重要.
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胃癌组织中 c-erbB-2癌基因表达与胃癌主要病理特征的关系
原癌基因 c-erbB-2(又称 neu 或 HER-2)属于受体酪氨酸激酶Ⅰ类亚家族,定位于人类17号染色体q21区带上,编码产物为 Mr18500的跨膜糖蛋白(故又称 P185),参与对细胞生长、繁殖、分裂的调控,其异常表达或基因突变时,使某些不正常细胞的独立生长能力失控,从而发展为肿瘤细胞[1,2],可作为卵巢癌、乳腺癌、子宫内膜癌及消化道肿瘤预后的参考指标[3]。笔者应用非放射性原位杂交技术检测胃癌标本中 c-erbB-2基因的扩增情况,分析了其与肿瘤分化、肿瘤浸润和淋巴结转移的关系,现报告如下。
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荧光原位杂交法诊断细菌及真菌进展
荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization,简称FISH)技术是在20世纪80年代末在已有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传学技术.发展迅速,已被广泛应用于分子生物学、分子遗传学及临床医学等学科领域,进行基因诊断及疾病诊断,核酸序列测定等.研究显示荧光原位杂交可以在相当短的时间内对临床标本和阳性血培养直接鉴定.以下就荧光原位杂交法在细菌及真菌的检测鉴定方面作一综述.
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TrFIA检测HBV感染者血清标志物与HBV DNA相关性分析
用酶联免疫法(ELISA)检测HBV M模式,不能直接反映乙型肝炎病毒血清标志物具体含量.HBV M是检测HBV感染的主要的病原学标志和直接证据之一.近年来,临床上检测HBV感染者血清标志物应用多的仍是ELISA,但此法只能做定性检测,无法获知两对半具体的含量.TrFIA是发展较快的一种高灵敏度的非放射性免疫定量的检测方法,该方法灵敏度高、特异性强、结果重复性好、易于自动化,现已广泛应用于各种指标的检测[1].
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FISH技术在肿瘤分子诊断中的应用
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术.因其具有快速、安全、灵敏度高及探针可长期保存等优点,目前已广泛应用于细胞遗传学、肿瘤生物学和产前诊断等领域,尤其在肿瘤筛查、早期诊断及指导临床用药方面具有很好的应用价值.
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CLIA,TrFIA及ECLIA分析系统与临床(文献综述)
近年来,标记免疫分析技术的研究和应用取得新的进展[ 1].尤其是非放射性标记免疫技术的分析自动化已推广应用于临床.如化学发光免疫分析(CL IA)、时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)及电化学发光免疫分析(ECLIA)相继建立(以上各种分析技术的性能比较见表1).它们除与放射免疫和免疫放射同样具有高度特异性和灵敏度外, 还克服了放射性核素可能造成的环境污染、核素半衰期的影响、保存期短等缺点,得到越来越广泛的应用,成为非放射性免疫分析中有前途的方法.
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时间分辨免疫荧光技术的优势分析
放射免疫分析(RIA),以其高度特异性、灵敏度和实用性,吸引着各国的生物医学工作者,但操作中始终存在放射污染.随着生物技术不断提高,人们发展了一系列非放射性标记技术,如酶标记、化学发光、生物发光标记等标记技术,其中,在普通荧光标记基础上发展起来的新技术--时间分辨免疫荧光技术,为引人注目.