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高山红景天的组织培养与快速繁殖
分别以高山红景天的幼茎和幼叶作为外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比对高山红景天愈伤组织的诱导、继代、生根的影响,以建立其快速繁殖体系.结果表明,幼茎是佳的外植体,愈伤组织诱导佳的培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率达83.3％;不定芽诱导和增殖的佳培养基为MS +6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,诱导率和增殖率较高,达72％,且产生的不定芽数量较多,为3～4个;生根培养基以MS+IAA 0.5mg/L为好,生根率100％,而且幼苗长势旺盛,能够满足高山红景天工厂化快速繁殖的要求.
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组织培养联合14C-UBT平行检测对胃幽门螺杆菌感染的诊断临床分析
目的:探讨在胃幽门螺杆菌(HP)感染的诊断中,组织培养联合14C-UBT平行检测的诊断价值.方法:收治胃HP感染患者200例,按照其临床特点分为餐后不适综合征组及上腹痛综合征组,各100例.结果:上腹痛综合征组患者HP阳性检出率显著高于餐后不适综合征组患者(P<0.05);与单一检测方式相比,组织培养联合14C-UBT检测HP具有更高的敏感性和特异性(P<0.05).结论:在胃HP感染的检测中,组织培养联合14C-UBT平行检测具有较高的准确性,诊断价值良好.
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急性结膜炎的腺病毒病原及其DNA基因型
急性结膜炎(AC)可由肠道病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒等多种病毒引起,其中肠道病毒可引起急性出血性结膜炎(AHC)爆发或流行,腺病毒除引起流行性角膜结膜炎外多为散发病例,为了解AHC流行期间及流行间隙期间,腺病毒在AC中的病原及其DNA基因型,我们从1994～2000年间共收集到141例AC患者急性期眼分泌物标本,通过HeLa、Hep-2、A549等细胞共分离出51株病毒,病毒阳性率为34.5%.按病毒在细胞上的表现,其中腺病毒26株(阳性率为18.4%),肠道病毒25株(阳性率为17.7%),经组织培养中和试验鉴定,26株腺病毒中,3型腺病毒21株,占腺病毒的80.8%,7型腺病毒4株,占15.4%,非3、7、11型腺病毒1株,占3.8%;25株肠道病毒中,CA24v 21株,占肠道病毒的84%,余4株肠道病毒待定.
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人用狂犬病疫苗的过去、现在和未来
早在1885年，路易*巴斯德证明狂犬病毒能通过兔神经系统重复传代而减毒，并制备出有效的疫苗首次用于人体免疫，从而开创了人用狂犬病疫苗的发展史。人用狂犬病疫苗的发展经历了从传统的神经组织疫苗到现行的以组织培养疫苗为主的过程，并且正在应用现代生物技术不断改进和发展。 一、早期使用的传统疫苗［1-3］ 1885年巴斯德尝试用感染狂犬病毒固定毒的兔脊髓干燥后制成减毒活病毒，给一名9岁男孩进行13次连续、毒力剂量逐渐增加的暴露后处理获得了成功。1908年Fermi通过在室温下用1%酚处理脑组织改进了巴斯德的方法，但悬液中仍有高达100 MLD50的残余毒力。1911年Semple在此基础上作了进一步改进，将脑组织悬液于37℃用酚固定、灭活，制备了无毒性的Semple疫苗。1925年Hempt通过补加乙醚处理，进一步确保了疫苗的无毒性。使用Semple疫苗后严重的神经麻痹事故的发生率在1/500～1/2 000间,这种疫苗目前在发展中国家仍在广泛使用。我国自1949年起，一直使用由羊脑制备的Semple疫苗，直至1980年停止使用，由原代地鼠肾细胞疫苗取代。
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逆转录聚合酶链式反应检测某些动物性产品中冠状病毒初探
对于引起人类严重急性呼吸综合征的冠状病毒(SARS-associated coronavirus)[1]检验方法有免疫荧光法、ELISA法和分子生物学方法,这些方法全部针对临床标本.目前食品中检测的病毒种类仅限于甲肝病毒、轮状病毒、诺瓦克病毒、柯萨奇病毒等肠道病毒.由于环境样品不同于医学标本,样品中病毒数量极少,传统方法需要从大量样本中富集、分离病毒,再经过如组织培养等方法检测,这些方法因细胞病变不明显、重复性差、时间太长等均不适用.
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应用组织培养及扩繁技术迅速扩大黄花蒿优良品种的栽培
目的 应用组织培养及扩繁等现代生物技术,将优良黄花蒿品种迅速扩大到露地大面积栽培,实现黄花蒿的标准化、现代化栽培,以提高其产量与质量.方法 以黄花蒿花序为外植体分别进行愈伤组织诱导及芽和根的分化得黄花蒿组培苗;利用黄花蒿组培苗进行继代生根培养,并依次完成温室移栽和露地栽培.结果 黄花蒿愈伤组织诱导率为100%,芽分化率为100%.根的分化率可达85%;继代培养黄花蒿组培苗生根率高可达99%,温室移栽成活率100%.露地栽培成活率为98%,且生长性状稳定.结论 使用此方法可在短期内获得大量优选黄花蒿组培苗及继代苗进行露地栽培.从而实现迅速扩大黄花蒿优良品种的大面积种植,且成本低廉、简便易行.
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百合组织培养实验教学方法的探讨
将中药百合植物组织培养的实验纳入到医学生物学的实验教学中,探索中医院校医学生物学的实验教学如何与中医药专业教学有机地结合起来,尝试中药实验教学方法的改进.
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104 银杏的研究进展
报道了银杏化学成分、药理作用及栽培方面的研究进展.
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麻黄离体培养研究进展
麻黄的出口量和使用量在逐年增加,麻黄碱的提取一直以野生资源为原料,使麻黄野生资源将近枯竭,土地沙化日趋严重,生态环境受到严重破坏.为了保护野生资源,国务院颁发了有关禁止滥挖干草和麻黄的通知,鼓励人工种植麻黄,从根本上解决麻黄资源紧缺的问题.目前人工种植麻黄的种源主要依靠采集野生种子育苗,由于野生麻黄的种源是一混杂的群体,因此栽培的麻黄在形态、生长发育及其有效成分上都存在差异,影响麻黄的产量和质量,从而制约了我国麻黄企业的发展.因此利用生物技术进行麻黄快速繁殖及种质保存、细胞离体培养产生代谢药用产物的研究具有广阔的应用前景.本文综述了国内外麻黄组织培养、细胞悬浮培养等研究状况,为麻黄资源可持续利用提供了一个新的有效途径.
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珍稀濒危药用植物金铁锁的组织培养和快速繁殖研究
金铁锁(Psamnosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu)为珍稀濒危药用植物,属国家二级保护植物,可治疗风湿痹痛,胃痛,创伤出血,跌打损伤.为有效保护其野生资源,对金铁锁进行组织培养和快速繁殖研究,以金铁锁幼嫩茎段作外植体,在MS+IAA0.1-1.0+BA0.5-1.0培养基上一步分化成苗;在MS+BA0.5-1.5+KT0.1-0.5+IAA0.1-0.5+2,4-D0.1-0.5+NAA0.1-0.5培养基上增殖;分化出的苗在1/2MS+NAA0.1-0.2+IBA0.1-0.2培养基上迅速生根,生根率可达100%.为了实现金铁锁的快速增殖,使用正交实验探讨了不同生长调节物质对其增殖的影响和佳培养条件的筛选:MS+0.5mg/L BA+0.1mg/L KT+0.1mg/L IAA+0.2mg/L NAA+0.5mg/L 2,4-D培养基,培养温度19.5±1℃,光照强度1200Lx,光照周期12小时为优化培养条件.
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薯蓣大规模培养技术研究
选择薯蓣优良单株的地上茎段、茎尖进行快繁技术研究,使增殖系数达到5.2,生根率92%,而且根条粗壮,移栽成活率较高,实现了薯蓣大规模试管繁殖,成功地建立了快速繁殖无性系.通过对提高繁殖率及生根率的研究,建立了规模化生产技术体系,制定的种苗质量标准,有助于薯蓣种苗生产规范化产业化的形成.
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尼莫地平对体外培养成骨细胞的影响
目的 观察尼莫地平对体外培养成骨细胞的作用.方法 在新生SD大鼠头颅骨第2继代成骨细胞(OB2)培养液中分别加入不同浓度(10-1～10 9g/L)尼莫地平,分别观察OB2的增殖功能(用波长570nm处OD值表示),分化功能(用碱性磷酸酶ALP活性表示)和矿化功能(用矿化结节数量/视野表示).结果 增殖功能OD值为0.12±0.01～0.41±0.04;ALP活性为0.09±0.01U/mg蛋白质;矿化结节数量/视野为1.3±0.9个.结论 与对照组比较,尼莫地平各浓度对OB2的增殖、分化和矿化功能作用各异.当尼莫地平浓度为10 6g/L时,对OB2的增殖和分化功能具有刺激作用,对OB2的矿化功能具有显著的抑制作用;当浓度升高(10-2g/L)时,对OB2的增殖功能具有明显的抑制作用;当浓度降低(10 8g/L)时,对OB2的增殖功能失去作用.
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兔髓核细胞原代培养及独活寄生汤对Fas介导的凋亡通路的影响
目的:研究兔髓核细胞的培养条件及生物学特性,并探讨独活寄生汤对体外培养兔髓核细胞凋亡的影响.方法:无菌环境下分离兔腰椎髓核组织,酶消化法消化,用DMEM/F12(1∶1)培养液培养.通过Ⅱ型胶原及集聚蛋白聚糖免疫组织化学检测进行细胞鉴定.髓核细胞传至第二代时开始药物干预.根据独活寄生汤药液不同浓度(100、200、400μg/mL)进行分组,0μ g/mL为空白对照组.药物干预72h后,收集髓核细胞.RT-PCR法检测Fas、FasL、Bcl-2、Bid、Bax、Caspase-8、Caspase-3 mRNA表达情况.结果:髓核细胞Ⅱ型胶原和集聚蛋白聚糖免疫组化染色为阳性.与空白对照组比较,独活寄生汤干预后能够下调Fas、Fasl、Bax、Bid、Caspase-3、Caspase-8 mRNA的表达(P＜0.05),上调Bcl-2 mRNA的表达(P＜0.05).结论:体外环境下单层培养、酶消化法成功培养了兔髓核细胞.独活寄生汤通过抑制Fas介导的Ⅰ型和Ⅱ型凋亡通路的激活,从而抑制髓核细胞凋亡.
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白木香的研究概况
白木香 (Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg),别名土沉香、女儿香、牙香树、莞香、六麻树[1],为瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属植物,是一种热带、亚热带常绿乔木.
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不同植物生长调节剂对半夏愈伤组织诱导效应的研究
目的 以半夏叶柄为外植体,研究不同植物生长调节剂对半夏愈伤组织形态的影响.方法 分别采用单一激素和多个激素正交试验,考察不同植物生长调节剂对半夏愈伤的诱导效果.结果 单一激素不同水平的愈伤组织诱导效果因激素种类和浓度的不同而有所差异;多种激素不同水平对半夏愈伤诱导的效果与诱导率和启动时间有关,同时还应考虑愈伤的质地、形态等;植物生长调节剂对半夏愈伤组织的诱导能力从大到小依次为6-苄基腺嘌呤、α-萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖.结论 通过考察不同植物生长调节剂对半夏愈伤组织的诱导效应,确定了适宜做半夏悬浮培养材料的培养基和一次性成苗培养基.
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重楼种苗繁育研究进展
重楼为我国名贵中药材，极具药用价值。近年来重楼药材需求量逐渐增加，人工栽培存在瓶颈，野生资源开采陷入恶性循环，且已严重透支。因此，在加强重楼资源保护的同时，积极深入开展基础研究，破解种苗繁育问题，推动人工栽培，以满足市场需求，对实现重楼资源的可持续发展和采用具有重要意义。本文综述了重楼种苗繁育现状，包括种子繁殖、茎段繁殖及组织培养等，为重楼规范化种植、资源保护与利用提供参考。
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喜树愈伤组织的诱导与培养
目的:研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件.方法:以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件.结果与结论:MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上.愈伤组织在MS+6-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养.
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朱砂根的组织培养与植株再生
目的:研究药用植物朱砂根组培快繁技术,为其产业化生产提供科学依据.方法:考察不同基本培养基、植物激素、添加物等对腋芽诱导、增殖及植株再生的影响.结果:以朱砂根带芽茎段为外植体,初代培养腋芽诱导的佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1).腋芽增殖的佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+KT 0.5 mg·L~(-1).生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1);添加0.2%的活性炭可明显促进根的生长,提高生根率、生根数.有利于朱砂根无菌苗移栽存活的基质类型为河沙.珍珠岩-蛭石(1:1:1),或蛭石.珍珠岩(1:1),成活率在80%以上.结论:通过腋芽增殖快繁育苗技术可获得完整植株,达到快速繁殖的目的.
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怀姜试管姜诱导技术的研究
目的:以清化姜脱毒苗为材料,研究不同浓度的蔗糖,NAA,PP333,6-BA对试管姜诱导的影响.方法:采用正交实验方法配制成不同的培养基.结果与结论:蔗糖是试管姜形成的主要影响因素,PP333,NAA次之,6-BA则抑制试管姜的形成.诱导试管姜的适宜培养基为MS+NAA 1.0 mg·L-1+PP3330.2 mg·L-1+8%蔗糖.
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白木香组织培养的初步研究
目的:考察因素对诱导白木香愈伤组织产生的影响.方法:用不同外植体、光照条件、激素进行实验.结果:叶的诱导效果优于茎,暗培养优于光照培养,5号激素配比优于其他组合.结论:以叶作外植体,在MS+6-BA 0.8 mg*L-1+NAA 1.0 mg*L-1的培养基上进行黑暗培养对诱导白木香愈伤组织效果好.
