180 金丝梅愈伤组织对NF-κB依赖性促转录的抑制作用

稀土元素对冬凌草愈伤组织生长及冬凌草甲素、乙素含量的影响

目的:探讨稀土元素镧、铈对冬凌草愈伤组织生长及冬凌草甲素、乙素含量的影响.方法:冬凌草均匀愈伤组织在添加不同浓度La3或Ce3的培养基中培养,通过质量法测定愈伤组织鲜质量、绘制生长曲线,HPLC测定甲素、乙素含量.结果:CeCl3·7H2O浓度为1μmol·L-1时,愈伤生物量高,是空白条件下的2.4倍.空白及对照条件下甲素含量均为0；空白条件下乙素含量低为0.11％,随着Ce3+浓度升高而升高,当浓度为10 μmol· L-1时高达0.58％；乙素随着La3+浓度升高而降低,当浓度为0.1 μmol· L-1时含量高达0.44％.结论:0～ 10 μmol·L-1的La3+及Ce3+均有利于冬凌草愈伤生物量的积累及乙素的合成,对甲素的合成无影响,将CeCl3 ·7H2O浓度10 μmol· L-1作为佳条件选择.

新疆紫草7种萘醌类成分的同时测定

目的:建立同时测定新疆紫草中紫草酸、紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素、异戊酰紫草素7种成分的HPLC检测方法.方法:选用安捷伦ZORBAX SB-C18(4.6 mm× 250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.03％甲酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长516,254 nm,柱温30℃,进样量6μL,流速1 mL· min-1.结果:7种萘醌类对照品在进样量范围内分别与峰面积呈现的良好线性关系(r＞0.999 1);仪器精密度和稳定性RSD均＜3％；加样回收率在97％～103％ (n=3).结论:该方法快速、准确、重复性好,可同时定量新疆紫草的7种水溶性及脂溶性萘醌类成分,为新疆紫草的质量评价提供了更为全面的科学依据.

高效液相色谱法测定黄芩愈伤组织中黄芩苷、黄芩素含量

目的:研究黄芩愈伤组织中黄芩苷,黄芩素的含量测定方法.方法:采用HPLC法测定黄芩愈伤组织中黄芩苷,黄芩素的含量.结果:黄芩愈伤组织中黄芩苷,黄芩素的含量分别为0.39%和0.051%.结论:建立了黄芩愈伤组织中黄芩苷,黄芩素的含量测定方法.

离体条件下培养物中冬凌草甲素积累与其组织结构关系

目的:研究冬凌草甲素动态积累变化关键期培养物显微、超微结构的变化,探讨培养物组织结构与冬凌草甲素积累的相关性.方法:采用高效液相色谱法研究了离体培养过程中培养物内冬凌草甲素积累的动态变化规律.在此基础之上,采用石蜡切片、透射电镜方法研究了培养物组织结构与冬凌草甲素积累的关系.结果:离体培养过程中培养物中冬凌草甲素积累表现出有-无-有的规律性,随着叶片外植体的脱分化,培养物内叶绿体数目逐渐减少,冬凌草甲素的含量也随之逐渐降低,当冬凌草甲素再次积累时,培养物内叶绿体数目再次增多且出现了维管组织的分化.结论:冬凌草甲素积累合成与培养物叶绿体数目的多少及内部维管系统的分化有着紧密的联系.

三角叶黄连愈伤组织诱导和培养条件的优化

目的:对三角叶黄连愈伤组织的培养条件进行优化,建立三角叶黄连组织培养的技术体系.方法:采用响应面方法( RSM)中的Box-Behnken设计方法优化三角叶黄连愈伤组织增殖的佳激素配比；考察不同培养基、外植体、温度、光照条件对三角叶黄连愈伤组织诱导的影响.结果:以茎尖为外植体愈伤组织诱导率高,为12.67％,佳培养条件为(15±2)℃,暗培养.2,4-D,KT是影响三角叶黄连愈伤组织形成的主要因素,其次为NAA.结论:三角叶黄连愈伤组织诱导的适培养基为6,7-V +2,4-D0.5 mg·L-1+KT 2.0 mg·L-1,增殖的适培养基为6,7-V +2,4-D 4.6 mg·L-1+KT3.8 mg·L-1+NAA2.4 mg·L-1.

冬凌草植株再生过程中冬凌草甲素的积累机制

目的:探讨冬凌草植株再生过程中培养物的生理特性与冬凌草甲素积累之间的机制.方法:采用紫外分光光度法、高效液相法测定不同时期培养物内叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白、丙酮酸、冬凌草甲素的含量.结果:培养物内叶绿素、丙酮酸、可溶性蛋白含量与冬凌草甲素含量呈正相关,相关系数分别为0.781,0.897,0.866;而可溶性糖含量与冬凌草甲素含量呈负相关,相关系数为-0.515.结论:冬凌草培养物内叶绿素、丙酮酸的含量、可溶性蛋白与冬凌草甲素积累有相互促进的关系,而可溶性糖变化主要与培养物细胞的生长、发育关系密切.

南方红豆杉组织培养提取物对α-糖苷酶活性的影响

目的:研究南方红豆杉枝叶及其愈伤组织萃取紫杉醇后剩余部分对α-糖苷酶活力的影响.方法:将萃取紫杉醇后剩余部分分别加入α-淀粉酶、α-麦芽糖酶、α-葡萄糖苷酶不同微量反应体系中,分别用Bernfeld法、PNPG法、GOD法测定其酶活性,并采用Dixon作图法研究其动力学性质.结果:枝叶及其愈伤组织对α-麦芽糖酶和α-葡萄糖苷酶有明显的抑制作用,与拜唐苹的作用一致,其抑制存在量效关系,抑制α-麦芽糖酶活性[IC50=(218.49±18.24) mg/mL和(91.04±5.43) mg/mL]呈可逆性、竞争性抑制,抑制α-葡萄糖苷酶活性[IC50=(7.99±1.57) mg/mL和(19.87±2.52) mg/mL]呈不可逆性、竞争性抑制.结论:南方红豆杉枝叶及其愈伤组织萃取紫杉醇后剩余部分对α-糖苷酶均有一定的抑制活性,愈伤组织较优于枝叶.

盾叶薯蓣离体培养体系的建立及薯蓣皂苷元含量分析

以盾叶薯蓣叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对盾叶薯蓣愈伤组织、不定芽及再生植株的影响,并对不同材料诱导获得的再生植株中薯蓣皂苷元含量进行了分析.结果表明,诱导愈伤组织的适培养基为MS+BA2.0 mg·L-1+2:4D0.1mg·L-1;诱导不定芽及芽生长的培养基的适培养基为MS+BA0.1 mg·L-1(0.05mg·L-1)+病毒唑5 mg·L-1:诱导试管苗生根的适培养基为MS/2+IAA0.2mg·0-1+NAA0.2mg·L-1.相同外植体诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异不明显;不同盾叶薯蓣诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异明显.

HPLC法测定不同外植体诱导虎杖愈伤组织中大黄素含量

目的 通过HPLC法考察不同外植体对虎杖愈伤组织中大黄素含量的影响.方法 选取MS+6-BA 0.2 mg/L+KT 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L为培养基,分别以虎杖的叶片、茎段、叶柄为外植体,诱导出愈伤组织;采用Oiamonsil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.1%磷酸(80:20);检测波长:254 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:27℃;进样量:20 μL.结果 由叶片、茎段、叶柄所诱导的愈伤组织中大黄素含量分别为0.709 6、1.6800、0.1668 mg/g,大黄素在0.25～5 μg/mL浓度范围内线性关系良好,r=0.99985,平均加样回收率为101.19%,RSD=1.20%.结论 HPLC法可用于愈伤组织中大黄素的含量测定,且由茎段所诱导的愈伤组织中大黄素含量较高.

不同植物生长调节剂对半夏愈伤组织诱导效应的研究

目的 以半夏叶柄为外植体,研究不同植物生长调节剂对半夏愈伤组织形态的影响.方法 分别采用单一激素和多个激素正交试验,考察不同植物生长调节剂对半夏愈伤的诱导效果.结果 单一激素不同水平的愈伤组织诱导效果因激素种类和浓度的不同而有所差异;多种激素不同水平对半夏愈伤诱导的效果与诱导率和启动时间有关,同时还应考虑愈伤的质地、形态等;植物生长调节剂对半夏愈伤组织的诱导能力从大到小依次为6-苄基腺嘌呤、α-萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖.结论 通过考察不同植物生长调节剂对半夏愈伤组织的诱导效应,确定了适宜做半夏悬浮培养材料的培养基和一次性成苗培养基.

RP-HPLC 法测定川芎愈伤组织中阿魏酸的含量

目的 建立高效液相色谱法测定川芎愈伤组织中阿魏酸含量的方法 .方法 利用 ZORBAX 300SB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm) 色谱柱,乙腈-1%三乙胺(15∶85)为流动相,检测波长为320 nm,流速 1.0 mL/min,柱温为27 ℃,进样量20 μL.结果 阿魏酸在 0.93～4.67 μg/mL 范围内线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为 99.98%,RSD=1.63%.结论 该方法 快速简便、准确可靠,可用于川芎愈伤组织中阿魏酸的含量测定.

怀槐愈伤组织形成与异黄酮积累

目的:考察怀槐愈伤组织形成与总异黄酮积累的关系.方法:不同培养基诱导怀槐子叶和下胚轴产生愈伤组织,紫外分光光度术测定愈伤组织中总异黄酮并含量.结果:NAA/BA及含2,4-D组合有利子叶愈伤组织的诱导;MS,N6,B5培养基适宜子叶形成愈伤组织,而SH较适宜下胚轴产生愈伤组织.愈伤组织具有异黄酮合成能力,含有NAA激素组合诱导的子叶愈伤组织总异黄酮含量较高,而2,4-D/BA组合诱导的下胚轴愈伤组织总异黄酮含量较高,高浓度2,4-D/KT组合抑制子叶和下胚轴愈伤组织积累异黄酮.愈伤组织根据发育的形态特征可分为4种类型,以黄色、疏松、颗粒状的Ⅱ型愈伤组织中总异黄酮含量高.结论:培养基与激素组合影响愈伤组织的形成及发育形态特征,并反映在愈伤组织异黄酮合成差异上,获得的黄色、疏松颗粒状愈伤组织为后续的细胞液体悬浮培养及异黄酮合成代谢的调控研究奠定了基础.

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的:研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件.方法:以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件.结果与结论:MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上.愈伤组织在MS+6-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养.

白木香组织培养的初步研究

目的:考察因素对诱导白木香愈伤组织产生的影响.方法:用不同外植体、光照条件、激素进行实验.结果:叶的诱导效果优于茎,暗培养优于光照培养,5号激素配比优于其他组合.结论:以叶作外植体,在MS+6-BA 0.8 mg*L-1+NAA 1.0 mg*L-1的培养基上进行黑暗培养对诱导白木香愈伤组织效果好.

贯叶金丝桃愈伤组织的诱导及其有效成分的定性

目的:诱导出贯叶金丝桃的愈伤组织,并确定其中含有金丝桃素.方法:在不同条件下采用组织培养技术,进行贯叶金丝桃的愈伤组织诱导研究,用HPLC方法确定其中含有的金丝桃素.结果和结论:佳诱导条件是MS基本培养基加入生长调节物质2,4-D(4μg@L-1)和6-BA(0.2μg@L-1).叶腋等分生组织较多的部位易于诱导愈伤组织.诱导出的愈伤组织,经HPLC方法确定其含金丝桃素.

杜仲愈伤组织与悬浮细胞中黄酮和绿原酸积累研究

目的:比较杜仲愈伤组织和悬浮细胞生长及其次生代谢产物黄酮和绿原酸的积累.方法:将杜仲无菌苗真叶诱导的愈伤组织进行悬浮培养,研究了悬浮培养物生长的动态和总黄酮类及绿原酸产量积累的动态.结果:杜仲愈伤组织中黄酮和绿原酸高分别达到13.46,1.712 mg·g~(-1),而悬浮细胞中黄酮和绿原酸高分别达到16.63,3.93 mg·g~(-1).结论:与愈伤组织相比,悬浮细胞具有生长周期短、速率快、黄酮和绿原酸积累量高的优势.

皖贝母试管鳞茎诱导技术的研究

目的:研究离体条件下皖贝母试管鳞茎诱导的佳培养条件.方法:以单块愈伤组织分化形成的鳞茎个数和鲜重为指标,考察蔗糖浓度、水杨酸、活性炭和5℃低温预培养对皖贝母试管鳞茎的形成和生长的影响.结果:50 g·L-1的蔗糖处理形成的鳞茎个数和鲜重都极显著高于其他处理,水杨酸对试管鳞茎的形成具有抑制作用,以5 g·L-1的活性炭处理形成鳞茎个数和鲜重优于其他处理,5℃低温预培养30～40d对试管鳞茎的形成和膨大效果好.结论:低温预培养30～40 d的皖贝母愈伤组织,接种于MS+KT 2 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1+50g·L-1蔗糖+5 g·L-1活性炭的培养基中,鳞茎形成和生长发育效果佳.

明党参愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养的研究

目的:建立明党参愈伤组织的诱导及其细胞悬浮培养的技术体系.方法:采用正交试验法研究不同植物激素对明党参叶柄、根和叶片愈伤组织诱导的影响,以及明党参不同外植体细胞的悬浮培养.结果:叶柄易诱导出愈伤组织,其次是根和叶片,4种植物激素对明党参根和叶柄愈伤组织的诱导都具有极显著的效果,其中诱导叶柄愈伤组织形成的佳激素组合为0.5 mg·L~(-1) NAA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+0.1 mg·L~(-1) KT+0.5 mg·L~(-1) 6-BA,培养14 d左右,诱导率达到100%.此外,明党参叶柄细胞培养至21 d时,细胞量和多糖均达到大值,分别1 090.28,36.85 mg·L~(-1).结论:明党参叶柄是愈伤组织诱导的佳外植体和细胞悬浮培养体系的佳细胞来源.

盾叶薯蓣成熟叶片植株再生的研究

目的:以成熟叶片为外植体,建立一套盾叶薯蓣Dioscorea zingiberensis的快速繁殖技术.方法:以大量元素减半的MS 培养基为基本培养基,通过研究BA,NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽增殖和生根的影响找出相应的佳激素组合.结果与结论:在含1.0～5.0 mg·L-1 BA和1.0～2.0 mg·L-1NAA的培养基上,80%以上的叶片可以在60 d内形成愈伤组织;愈伤组织转到含2.0～5.0 mg·L-1BA和0.2～0.5 mg·L-1 NAA的培养基上后,60%以上的愈伤组织可以在50 d内分化出不定芽;在含2.0 mg·L-1IBA的培养基上,100%的不定芽可在20 d内长出4～6条不定根.再生植株移栽后,生长健壮,成活率达80%以上.