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延龄草无菌培养体系的建立及防褐变措施
目的:对延龄草外植体的筛选及灭菌条件和培养基进行优化,降低污染率和褐变率,建立延龄草根茎无菌组织培养体系.方法:从延龄草子房、叶、茎、地下根茎、根尖5种材料中筛选出适宜的外植体,考察多种药液交替灭菌和培养基中添加抗生素对降低组培污染率的影响,研究培养基中添加抗坏血酸(VC),聚乙烯吡咯烷酮(PVP),活性炭对降低褐变率的效果.结果:地下根茎为延龄草组织培养适宜的外植体,可采用紫外线照射30 min,800倍多菌灵浸泡30 min和0.2％ HgCl2处理20 min交替灭菌,培养基中添加100 mg·L-1氨苄青霉素和1.0g·L-1活性炭可降低根茎组培污染率和褐变率.结论:建立了低污染率和褐变率的延龄草根茎无菌培养体系,为其他根茎类植物组织培养提供参考.
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HPLC法测定不同外植体诱导虎杖愈伤组织中大黄素含量
目的 通过HPLC法考察不同外植体对虎杖愈伤组织中大黄素含量的影响.方法 选取MS+6-BA 0.2 mg/L+KT 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L为培养基,分别以虎杖的叶片、茎段、叶柄为外植体,诱导出愈伤组织;采用Oiamonsil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.1%磷酸(80:20);检测波长:254 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:27℃;进样量:20 μL.结果 由叶片、茎段、叶柄所诱导的愈伤组织中大黄素含量分别为0.709 6、1.6800、0.1668 mg/g,大黄素在0.25～5 μg/mL浓度范围内线性关系良好,r=0.99985,平均加样回收率为101.19%,RSD=1.20%.结论 HPLC法可用于愈伤组织中大黄素的含量测定,且由茎段所诱导的愈伤组织中大黄素含量较高.
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地黄叶片器官形态建成中几种内源激素的变化
地黄Rehmannia glutinosa Libosch.为玄参科草本植物,是我国著名的"四大怀药"之一[1].目前,地黄的组织培养多以叶片、块根和花粉等为外植体,经脱分化诱导生成愈伤组织,再分化成再生植株,但都存在植株再生率低、分化周期长、重复性差的问题[2],而且这一途径往往表现出遗传上的不稳定性[3],因此使得地黄组织培养技术在生产和育种上的应用受到限制.
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正交试验法在乌头组织培养中的应用
乌头Aconitum carmichaeli Debx.为毛莨科乌头属多年生草本植物.其子根为常用中药附子.乌头的组培快繁研究已见报道的有胡延玉[1]利用茎尖和带腋芽茎段培养并获得再生植株,但所用培养基成分复杂,生长周期长.林静等[2]利用叶片和幼茎进行培养,叶片只诱导出愈伤组织阶段而未分化出芽.关文灵等[3]以试管苗的叶片为外植体,成功培养出组培苗.本研究以乌头叶柄为外植体,利用多因子正交试验法,确立了乌头叶柄通过愈伤组织再生植株的一整套方法.
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药用植物不定根培养的影响因素
随着中药现代化,药用植物资源远远不能满足中药产业的需求,因此亟需为中药资源的开发开辟新的途径,药用植物不定根大规模培养是实现中药产业化的一个重要途径,而如何建立良好的不定培养体系是药用植物不定根培养的关键.该文主要从植物激素、外植体、蔗糖、接种量、无机盐等几个方面综述了药用植物不定根培养的影响因素.
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刺五加组织培养与细胞工程进展
综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状.分别从体细胞胚胎发生的影响因素:外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议.
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辽东楤木体细胞组织培养研究
通过查阅和整理国内外相关文献资料,简述了辽东楤木体细胞组织培养研究的现状与进展.目前辽东楤木可以通过两种途径获得再生苗,一条途径是胚状体成苗,另一条途径是分割丛生芽诱导生根成苗.而在辽东楤木体细胞胚和丛芽的诱导过程中,外植体、培养基、生长调节物质、培养条件(接种量、pH值、糖浓度、光照等)均为其关键因素.
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绿萝快繁体系的建立
本实验分别以绿萝的茎、腋芽为外植体在含有不同激素种类及浓度的培养基上诱导愈伤组织的形成,并诱导不定芽的分化,建立绿萝的快繁体系.结果显示:(1)以茎段为外植体,在培养基MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.4mg/L+2,4-D 1.0mg/L上愈伤诱导率高;(2)以腋芽(带节的茎段)为外植体,在两种培养基MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.2mg/L和MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.2mg/L上初代培养即可诱导不定芽长分化.上述诱导获得的愈伤组织和不定芽进一步继代培养,分别采用黑暗和光照处理,发现光照可以显著促进愈伤组织和不定芽的转绿、增殖和分化.
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生长激素对绞股蓝无菌苗生根的影响
目的研究生长激素对绞股蓝无菌苗生根的影响.方法采取绞股蓝试管繁殖苗插条及外植体,在无菌条件下研究不定根的生成及激素对生根过程的影响.结果扦插诱导生根和茎段、叶片外植体接种诱导生根,培养基中的无机盐浓度是促使生根的主要因素,附加适当浓度的生长素NAA或IAA则会对生根有明显的促进效果,其作用是IAA优于NAA.结论生长激素对绞股蓝无菌苗生根的生长有一定的促进作用.
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甲状旁腺相关蛋白在鼠胚髁突外植体软骨内成骨中的作用
目的 探讨甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)对体外培养的鼠胚髁突软骨内成骨的影响.方法 体外解剖分离鼠胚髁突,行外植体培养,通过组织学、免疫组化等方法观察PTHrP对体外培养的髁突外植体软骨内成骨的影响.结果 髁突外植体在无血清半固态培养系统中能正常发育.加入人PTHrP(1-34)后,实验组髁突长度的增加较对照组明显,两组间差异有显著性(P＜0.05);组织学及免疫组化染色显示:加入人PTHrP(1-34)后培养的髁突外植体增殖层和肥大软骨细胞层明显增厚,同时Ⅱ及Ⅹ型胶原在增殖层和肥大软骨细胞层中表达增强.结论 PTHrP可刺激髁突外植体软骨增殖层和肥大层软骨细胞的增殖,促进髁突软骨内成骨的形成.
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辣椒再生体系的研究和建立
(Capsicum annuum L.)品种的子叶和下胚轴,分别离体培养在附加不同激素的MS培养基上,对诱导外植体不定芽分化和芽伸长的影响因素如苗龄、基因型、外植体、激素组合等进行研究.结果表明,苗龄对外植体不定芽分化有直接影响;子叶的不定芽分化率高于下胚轴;不定芽的分化率对基因型有很大的依赖性,赤霉素(GA_3)、AgNO_3的添加能使芽伸长率提高.通过结果比较,筛选出了辣椒叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为Ms+1.0 mg/L玉米素(ZT)+0.2 mg/L吲哚乙酸(IAA);芽伸长培养基为MS+1.0 mg/L ZT+0.2 mg/LIAA+2.0 mg/L CA_3+5.0 mg/LAgNO_3;生根培养基为MS+0.1 mg/L IAA+0.2MG/L萘乙酸(NAA).
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西红花组织培养研究进展
西红花是一种名贵的中草药,其传统方法繁殖不能满足市场需求,近年来研究者们尝试以西红花作为外植体,探索其组织培养方法.该文从外植体、培养基、培养条件等不同方面论述西红花国内外研究进展,以期系统了解并科学指导该领域的研究.
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药用植物毛状根高频诱导的影响因素
如何提高毛状根的诱导率,是毛状根培养中关键的一步.文章慨述了在利用发根农杆菌诱导药用植物毛状根过程中,转化方法、发根农杆菌Ri质粒类型以及菌液浓度、植物种类和外植体取材部位及其放置方式和处理方法、外植体预培养和共培养及感染时间、外源激素及抗生素和乙酰丁香酮、光照条件等多种因素对药用植物毛状根诱导率的影响情况和较佳选择,以期能为进一步扩大发根农杆菌的寄主范围和毛状根的大规模培养提供参考,从而有利于建立一个较为完善和普遍适用的高频转化体系.
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怀牛膝组织培养的研究
怀牛膝为苋科牛膝属植物牛膝(Achyranthes bidentata BL.)的干燥根，主产河南沁阳、武陟等县。本品性甘、苦、酸、平，具有补肝肾、强筋骨、通血脉、降血压及镇痛等功效。对怀牛膝的全面研究始于60年代，多集中于成分分析，药理作用及栽培措施等方面的研究。利用不同器官作为外植体进行组织培养的研究，尚未见相关报道，为了探索出一条利用生物工程技术改造怀牛膝品质的途径，我们进行了探索性的研究，现已从怀牛膝茎、叶等部位诱导出愈伤组织及芽分化。……
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怀地黄再生体系的初步研究
目的:建立怀地黄再生体系.方法:以叶片、叶柄为外植体,研究不同浓度生长调节剂对愈伤组织诱导及植株再生的影响.结果:叶片在Murashige and Skoog(MS) +6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg·L 1+1-萘乙酸(NAA)1.0 mg·L-1+2,4-二-氯苯氧乙酸(2,4-D)0.2 mg· L-1的培养基中愈伤组织诱导率高;叶柄在MS+ 6-BA2.0mg·L-1和NAA 0.25 mg ·L-1的培养基中愈伤组织诱导率高,叶柄愈伤的芽分化能力在MS+ 6-BA3.0mg· L-1培养基中较好;生根以未添加生长调节剂的MS培养基佳.结论:本方法初步建立了怀地黄再生体系,简单、稳定、易于操作,可为怀地黄品种选育、抗逆、高产等研究奠定基础.
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黄精不同外植体对愈伤组织诱导的影响
目的 为获得黄精优质快繁种苗和实现细胞悬浮培养规模化生产提供技术参考和研究基础.方法 采集黄精栽培资源,移栽至温室过冬.诱导愈伤组织,以MS基本培养基、添加6-BA、NAA、2,4-D作为4种因素,每个因素设置3个水平,分别为:1/3MS、1/2MS、MS,利用正交设计设置9个试验小组.选取带芽的根茎、新生嫩叶及嫩茎为外植体,筛选诱导黄精愈伤组织的佳外植体.结果 黄精嫩叶诱导率高为60％,远远高于根茎及嫩茎的愈伤诱导率,且嫩叶作为外植体的整体褐化率又低于其他外植体.结论 黄精嫩叶为本试验诱导愈伤组织的佳外植体.
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延龄草根茎组织培养研究
目的 建立延龄草组织培养体系,为解决资源问题、快速繁殖延龄草奠定基础.方法 从延龄草子房、叶、茎、地下根茎、根尖等材料中筛选出适宜的外植体,筛选适宜的无机盐离子(MS、1/2MS和B5)、细胞分裂素(BA、KT和2-ip)、生长素(IAA、NAA和IBA)种类和浓度,探索延龄草根茎愈伤组织诱导和芽分化的条件.结果 仅地下根茎可诱导愈伤组织,愈伤组织诱导率约36.4％;低浓度的无机盐离子浓度利于愈伤组织的诱导,BA是愈伤组织诱导的主要因素.结论 根茎是诱导延龄草愈伤组织的适宜外植体,愈伤组织诱导的适培养基为1/2MS+BA 2.5 mg· L-1+ IAA 1.5 mg·L-1+3％蔗糖+0.6％琼脂,芽分化适培养基为1/2MS+ BA 2.0mg· L-1+ IAA 1.5 mg·L“+3％蔗糖+0.6％琼脂.
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当归毛状根的诱导及其遗传稳定性研究
目的 采用发根农杆菌浸染当归无菌苗,刺激其长出毛状根,以此为基础建立当归毛状根的培养体系.方法 以纸床培养当归种子长出的子叶为材料,经灭菌后,用R1601发根农杆菌侵染外植体,诱导出毛状根,并以当归无菌苗为对照,采用PCR扩增法,检测毛状根中的DNA.结果 发根农杆菌侵染当归长出膨大根,但没有生成毛状根;DNA检测得出,膨大根中DNA谱带与无菌苗一致,但阿魏酸含量较低,无法满足用药需求.结论 该研究可为当归毛状根的进一步研究提供理论依据,为当归无菌苗的批量生产提供技术支持.
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不同外植体和激素组合对盾叶薯蓣组织培养的影响
目的探讨盾叶薯蓣组织培养的佳外植体和激素组合.方法 采用盾叶薯蓣茎段、叶为外植体,接种于不同激素组合的培养基上,观察比较培养情况.结果 佳外植体为腋芽萌发而来的无菌枝条切段,诱导愈伤组织的佳培养基为MS+BA1.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,不定芽分化的培养基为LS+BA1.5mg·L-1,诱导生根的培养基为1/2 MS+NAA1.0mg·L-1.结论外植体的选择是盾叶薯蓣组织培养成功与否的关键所在.
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正交设计优化皱叶生菜离体再生体系
目的 为获得生菜高频率的离体再生体系.方法 采用正交试验设计,探讨不同生菜品种、不同消毒时间对培养生菜无菌苗的影响,并研究不同浓度的植物生长调节剂、AgNO3 和不同外植体切段对生菜外植体芽分化及生根成苗的影响.应用回归分析法对试验结果进行分析.结果 美国大速生品种用70%乙醇浸泡60 s,再用2%次氯酸钠处理15 min,发芽率达到80%,无菌苗生长好;生菜离体培养再生芽的优分化条件组合为Ms(murashige and skoog's medium)附加BA(6-苄基腺嘌呤,6-benzylaminopurine)0.2 mg/L,NAA(萘乙酸,α-naphthaleneacetic acid)0.1 ms/L,外植体为2～3 d的子叶;生菜再生芽在含低浓度的生长素[NAA浓度为0.05 mg/L,或LAA(吲哚乙酸,indole-3-acetic acid)浓度为0.5 mg/L]的1/2 MS培养基中生根情况较好.结论 优化的,生菜离体再生体系具有很好的重复性,可用于遗传转化获得保健生菜的研究.
