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高科技算命术
想知道你儿子适合练短跑还是长跑吗?只要花399美元购买一个DNA试剂盒,然后让他向试剂盒提供的一根塑料试管里吐2.5毫升唾液,封好后寄给"23与我"公司(23andMe,23代表人的23对染色体)就可以了.
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育儿法为什么在自己孩子身上不显灵?
实践证明,<育儿法>中罗列的那些"不可动摇的铁规则"也并非"放之四海而皆准"的真理,其适应性也难划分明确,应因人而异.由于部分孩子自身存在于DNA中的遗传密码存在明显差异,故位于大脑内的一种叫做"多巴胺容纳体"的分子数量会比一般孩子要少.多巴胺容纳体分子的任务,是与能将快感感受给大脑的神经传递物质多巴胺融为一体,来接受快感信号的.
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联合检测子宫内膜中DNA、CEA、EMA、KT及端粒酶诊断子宫内膜癌
目的检测子宫内膜癌的DNA含量,细胞膜抗原定位和端粒酶的研究.方法以流式细胞仪检测32例子宫内膜癌的DNA含量、以免疫组化方法检测细胞膜抗原癌胚抗原(CEA)、上皮膜抗原(EMA)、角蛋白(KT)在子宫内膜癌上的定位,以原位杂交方法检测端粒酶活性.结果DNA含量及SPF值是判定子宫内膜组织分化程度的重要指标;细胞膜抗原在子宫内膜癌中高表达;端粒酶在子宫内膜癌组织中活性显著增高,与正常内膜组织相比P＜0.05.结论DNA非整倍体是子宫内膜癌分子生物学的特异性标志;细胞膜抗原在子宫内膜癌中的阳性染色分布特点是其诊断的重要标志;端粒酶活性增高在子宫内膜癌的临床诊断中有重要意义,可能成为早期诊断的指标.
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抗癌药物卡铂与DNA分子相互作用的原子力显微镜研究
目的:本论文主要研究抗癌药物卡铂在体外与长度为1341bp的DNA链相互作用的机理.运用原子力显微镜来直接观察卡铂和DNA分子作用后引发的DNA的结构、形貌和长度的变化,来阐明卡铂和DNA的作用方式.方法:卡铂和DNA分子首先在溶液中相互作用,然后取少量作用后的溶液用于原子力显微镜的观察.结果:卡铂与DNA相互作用后,DNA链发生弯曲,长度缩短,且随着浓度提高,长度缩短程度变大.
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孕妇血清乙肝病毒载量与血清学免疫标志物的关系分析
目的:分析孕妇血清乙肝病毒(HBV)载量与血清学免疫标志物的关系,以为临床免疫干预提供依据.方法:回顾性分析近年感染乙肝的孕妇216例,将血清标志物分为5种模式,分析每种模式与HBV载量的关系.结果:HBsAg、HBeAg、HBeAb阳性模式的HBV DNA阳性率高,为90.2%,HBeAb、HBcAb阳性模式和HBcAb阳性模式HBV DNA阳性率较低,分别为9.7%、7.7%.结论:HBV DNA检测能准确地检测出孕妇体内乙肝病毒复制的真实状况,为临床的免疫干预提供有力诊断依据,为切断乙肝的母婴传播提供重要参考.
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植物油DNA的高效提取方法
本文优化高效提取植物油中DNA的方法,以市场上日常可采购的食用植物油为实验原料,并利用多种检测方法评价优化的硅膜吸附柱法提取效率.结果显示,经过优化后的提取方法具有可靠的提取质量,提取效率高,便于后续植物油基因检测工作的良好开展.
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胚胎发育过程中的DNA甲基化作用
胚胎发育是哺乳动物发育的基本特征,胚胎在发育的过程中是否存在问题,要取决于遗传学调控机制的运行是否有误.在胚胎发育过程中为重要的是胚胎的基因组范围内的DNA 甲基化模式的作用.胚胎发育过程中的DNA 甲基化作用是与基因印记的建立、基因表达的调控以及细胞和胚胎的形态建成都密切相关的.
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兔透明带蛋白ZPB(RC55)DNA疫苗PCMV4-RC55的构建及其在兔的免疫反应
本实验以兔ZPB作为免疫抗原，利用DNA疫苗技术进行兔免疫避孕疫苗的研究。利用EcoRI内切酶将PGEM-RC55的兔ZP基因RC55亚克隆至pBluescript载体，再经HindIII/Xbal双酶切后，将RC55基因构建至真核表达质粒载体PCMV4，得到PCMV4-RC55。在PCMV4-RC55 DNA疫苗免疫新西兰兔的实验中，设雌兔实验组及雄兔实验组，以Bupivacaine-HCL为辅助剂进行大腿肌肉注射，24 h后在相同部位注射250 μg PCMV4-RC55 DNA，并在第4周免疫加强一次。分别于注射PCMV4-RC55前及注射后第2、4、5、6、7、8周耳静脉取血，收集血清，采用ELISA法检测新西兰兔产生抗ZP-RC55抗体水平。检测结果表明，PCMV4-RC55 DNA疫苗能诱导雌兔和雄兔产生免疫应答，抗体滴度高可达1∶8 000，滴度维持在1∶4 000水平能持续两个月以上。
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孕妇外周血中胎儿细胞和DNA的分离及分析
近年来无创伤性产前遗传学诊断技术的研究进入到胎儿染色体和基因的诊断,利用母血中胎儿细胞及其遗传物质进行产前诊断.胎儿细胞中有核红细胞(NRBC)在母体外周血中的数量较多,此类细胞含有胎儿的全部遗传信息,且生命周期较短,是理想的产前诊断的胎儿细胞,在此介绍几种从母血中分离胎儿有核红细胞的方法.业已证实,母体外周血中存在胎儿DNA,且DNA的浓度随孕周而增高,这使得从母血中直接获取胎儿DNA来进行基因诊断成为可能.目前聚合酶链反应(PCR)及荧光原位杂交(FISH)技术是较为成熟的分析胎儿DNA的方法.
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多角体病毒DNA和蛋白对大鼠毒性的病理学观察
选择家蚕核型多角体病毒作为新型表达载体，并选择其宿主家蚕作为生物反应器建立的家蚕基因工程表达系统具有高效、表达条件简便等优点，在生物医药等领域具有广阔的应用前景和经济效益[1]，评价和验证家蚕生物反应系统及其相关产品的安全性，保证接触BmNPV的操作人员的健康及其产品临床应用的安全性有着重要意义。
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硫酸镍对原代培养大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤的研究
目的 探讨硫酸镍(NiSO4)致原代培养大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤的作用.方法 选择健康成年雄性Wistar大鼠,采用胶原酶消化以及Percoll分离液梯度密度离心法,经贴壁培养获得高纯度大鼠睾丸间质细胞,采用3β-HSD法鉴定细胞纯度.取对数生长期的间质细胞,分别用浓度为0、250、500和1000μmol/L硫酸镍处理6、12和24 h.采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;分光光度法检测间质细胞抑制羟自由基能力(Anti-OH·),酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量.结果 经3β-HSD法鉴定,睾丸间质细胞纯度达95％以上.与对照组比较,250 μmol/L硫酸镍处理12h组和500、1000μmol/L硫酸镍各处理组,ROS水平均增高(P＜0.05);250μmol/L硫酸镍处理12和24 h组,以及500、1000 μmol/L硫酸镍各处理组,Anti-OH·均降低(P ＜0.05);500、1000μmol/L硫酸镍处理12和24 h组,8-OHdG含量均增加(P＜0.05).结论 硫酸镍致大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤可能与其导致间质细胞Anti-OH·降低和ROS水平增加有关.
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镉铅对泥鳅DNA甲基化水平的影响
目的研究镉(Cd2+)、铅(pb2+)以及二者联合(Cd2++pb2+)作用对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)肝胰脏、肾脏及鳃DNA甲基化水平的影响.方法 0.05和5.00mg/L Cd2+、pb2+及Cd2++pb2+对泥鳅染毒,染毒2、7、14、21、28和35 d时取样,用高效液相色谱(HPLC)分析DNA甲基化水平.结果 5.00mg/L Cd2+、Pb2+及Cd2++Pb2+染毒2 d导致DNA异常高水平甲基化;Cd2+及Cd2++pb2+的毒性影响大于pb2+(P＜0.05).0.05 mg/L Cd2+与Pb2+作用下,鳃DNA甲基化水平在第7天时明显升高,而肝胰脏和肾脏则在第14天时升高(P＜0.05);染毒21 d后,3种组织甲基化水平均下降,并维持异常低度甲基化.结论 Cd2+、Pb2+及Cd2++Pb2+对泥鳅DNA甲基化水平的影响与离子种类、浓度及其作用的时间、靶器官等均具有相关性.
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单细胞凝胶电泳技术分析硫辛酸对细胞DNA损伤的作用
目的 H2O2是自由基代谢过程中的一个重要的中间产物,在引起细胞DNA损伤过程中具有重要作用.抗氧化剂硫辛酸可以对抗多种自由基损伤.本试验的目的是利用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)来研究不同浓度H2O2分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量-效应关系,同时观察硫辛酸对H2O2损伤DNA的保护作用,从而为探讨细胞DNA损伤的机制提供直接证据,并筛选出有效的抗细胞DNA损伤的抗氧化剂.
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乙型肝炎病毒DNA的含量与乙型肝炎病毒表面抗原的关系
目前,临床上常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物,一些实验室利用乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)ELISA法检测吸光度或S/CO值(S为样品的吸光度值,CO为Cut Off值)高低来观察药物的治疗效果,我们采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的方法检测HBV DNA的含量[1],并与血清标志物HBsAg的S/CO值高低进行比较,以探讨二者之间的关系.
关键词： 乙型肝炎病毒 DNA 乙型肝炎病毒表面抗原 -
DNA聚合酶β对苯并[a]芘致DNA损伤修复的影响
目的 揭示聚合酶β(pol β)的表达水平与苯并[a]芘(BaP)诱导的DNA损伤效应的关系.方法 采用3种具有相同遗传背景的小鼠胚胎成纤维细胞pol β野生型(polβ+/+)、pol β缺陷型(pol β-/-)和野生型pol β高表达型(pol β oe)作为模型细胞.首先用RT-PcR和western bolt鉴定3种细胞中pol β在mRNA和蛋白质水平的表达情况,然后通过MTT试验和单细胞凝胶电泳(彗星试验)观察BaP作用下3种细胞的存活率及DNA损伤和修复效应.结果 3种细胞在pol β mRNA和蛋白表达水平上存在明显差异,polβ-/-细胞中pol β基因缺失,而pol β oe细胞中pol β基因则较野生型pol β+/+细胞高出2倍以上;BaP能诱导3种细胞DNA的损伤以及细胞存活率的降低;与pol β+/+细胞相比,pol β-/-细胞的IC_(50)更低,DNA损伤更严重且更加不易修复;反之,pol β oe细胞的IC_(50)更高,DNA损伤效应更弱,DNA修复速率加快.结论 pol β在修复外源性致癌物BaP导致的DNA损伤中发挥着重要的作用,pol β基因缺陷使细胞DNA修复能力降低,而pol β基因的高表迭则能帮助细胞应对DNA损伤,在一定程度上对细胞的存活起到了保护作用.
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DNA聚合酶β对苯并[a]芘致DNA损伤修复的影响
目的 揭示聚合酶β(pol β)的表达水平与苯并[a]芘(BaP)诱导的DNA损伤效应的关系.方法 采用3种具有相同遗传背景的小鼠胚胎成纤维细胞pol β野生型(polβ+/+)、pol β缺陷型(pol β-/-)和野生型pol β高表达型(pol β oe)作为模型细胞.首先用RT-PcR和western bolt鉴定3种细胞中pol β在mRNA和蛋白质水平的表达情况,然后通过MTT试验和单细胞凝胶电泳(彗星试验)观察BaP作用下3种细胞的存活率及DNA损伤和修复效应.结果 3种细胞在pol β mRNA和蛋白表达水平上存在明显差异,polβ-/-细胞中pol β基因缺失,而pol β oe细胞中pol β基因则较野生型pol β+/+细胞高出2倍以上;BaP能诱导3种细胞DNA的损伤以及细胞存活率的降低;与pol β+/+细胞相比,pol β-/-细胞的IC_(50)更低,DNA损伤更严重且更加不易修复;反之,pol β oe细胞的IC_(50)更高,DNA损伤效应更弱,DNA修复速率加快.结论 pol β在修复外源性致癌物BaP导致的DNA损伤中发挥着重要的作用,pol β基因缺陷使细胞DNA修复能力降低,而pol β基因的高表迭则能帮助细胞应对DNA损伤,在一定程度上对细胞的存活起到了保护作用.
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克洛诺菌属分离株16S rDNA序列分析
目的 对2株克洛诺茵属(原阪崎肠杆茵)模式株和29株食品分离株的16S rDNA进行序列分析.方法 对茵株的16S rDNA进行PCR扩增、测序,获得目的 茵的16S rDNA序列并通过BioNumenics软件对其进行多重对比分析和系统发育学分析.结果 除ATCC51329和ES 014外,其他克洛诺茵属与ATCC29544的16S rDNA序列均属于同一基因群,而ATCC51329和ES 014分别属于另外一个分支.从16S rDNA序列分析可知,除ES014不能确定外,其它克洛诺菌属分离株均可从基因水平上得到准确鉴定.结论 从基因水平上对国内克洛诺茵属食品分离株进行鉴定,并研究了相关茵株之间的系统发育学关系.
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成都地区血浆凝固酶阴性葡萄球菌耐药性及分子流行病学分析
目的 探讨成都地区血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)耐药性及分子流行病学特征.方法 采集成都市15所医院和6所疾病预防控制中心分离的不重复的2038株CoNS,按NCCLS推荐的方法和判断标准进行药敏试验.同时将CoNS作质粒和PFGE分型.结果 (1)CoNS以表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌为主,3种葡萄球菌占CoNS的82.2%,不同来源菌株的构成不完全一致.(2)CoNS对一种及一种以上抗菌药物有耐药性,耐药率为80.4%,对复方新诺明(SMZ)、青霉素G、氨苄青霉素、红霉素、TMP-SMZ和四环素等抗菌药物有较高的耐药性,对万古霉素、氟哌酸、丁胺卡那霉素较敏感.共检出25种耐药谱型,主要耐药谱型为氨苄青霉素+红霉素+青霉素G+SMZ、氨苄青霉素+庆大霉素+链霉素+四环素、氨苄青霉素+青霉素G+四环素、链霉素+红霉素+青霉素G+SMZ+TMP-SMZ、红霉素+新生霉素+青霉素G+SMZ+TMP-SMZ和青霉素G+SMZ+TMP-SMZ.不同来源CoNS的主要耐药谱型不完全一致,主要生化型别CoNS耐药性表现出一定的相似性.(3)CoNS质粒检出率为72.9%,共分为12个质粒谱型(Ⅰ-Ⅻ),以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主,3个型别占1485株携带质粒的CoNS的80.1%.(4)CoNS共有29种PFGE谱型和112个亚型,A、B、C、D、E等5型占总数的89.1%,在不同来源的CoNS中均为优势基因型.不同来源的CoNS中A型具有较相似的构成比且均为主要的基因型,其它几种优势基因型的构成缺乏相似性.结论 本地区CoNS耐药率相当高,多重耐药的现象普遍存在于不同类型的人群中.不同来源CoNS尤其是来自医务人员和患儿的CoNS有很高的同源性,存在着互相传播的潜在可能.
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大剂量芹菜素对大鼠抗氧化酶活性及DNA损伤影响的研究
目的 观察大荆量芹菜素对大鼠的抗氧化活性及对DNA氧化损伤的影响.方法 将100只Wistax大鼠随机分为5组,每组20只,即基础饲料对照组,低剂量芹菜素组(掺入量为2.5%,相当于2g/kgbw),次低剂量芹菜素组(掺入量为5.0%,相当于4g/kg bw),中剂量芹菜素组(掺入量为7.5%,相当于6g/kgbw),高剂量芹菜素组(掺入量为10%,相当于8g/kg bw),实验周期为13周.实验结束前收集动物2h尿液,实验结束后处死动物,留取血液和肝脏,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性、丙二醛(MDA)含量,分析8-羟基脱氧鸟苷含量.结果 在2和4g/kg bw剂量时,雄性肝脏SOD、GSH-Px以及2g/kg bw剂量组的GST活性明显低于对照组(P<0.05);血清中雄性8g/kg bw剂量组的GST以及雌雄4g/kg bw剂量组的GSH-Px活性明显低于对照组(P<0.05),其他各项指标与对照组比较,差异均无显著性.结论 本试验条件下,大剂量芹菜素能够降低雄性大鼠的抗氧化酶活性,但对DNA损伤没有影响.
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叶酸拮抗高同型半胱氨酸血症大鼠Bcl-2基因低甲基化研究
目的 探讨叶酸对蛋氨酸饮食诱导高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠主动脉组织Bcl-2基因甲基化水平影响.方法 健康6周龄雄性wistar大鼠36只,体重(160±10)g,适应性喂养一周后随机分为对照组、高同型半胱氨酸组、叶酸干预组、每组12只.对照组给予AIN-93G配方饲料,高同型半胱氨酸组饲以含1.7％蛋氨酸的AIN-93G配方饲料,叶酸干预组饲以含1.7％蛋氨酸和0.008％叶酸的AIN-93G配方饲料.喂养18周后,全自动生化仪测定血浆Hcy浓度、叶酸浓度和维生素B12浓度;免疫组化检测大鼠主动脉组织Bcl-2表达;巢式降落式PCR联合甲基化特异性PCR检测Bcl-2基因启动子区甲基化水平,荧光RT-PCR检测主动脉组织Bcl-2基因mRNA表达.结果 18周蛋氨酸饮食可以诱导大鼠高同型半胱氨酸血症(P＜0.01),叶酸摄入可以拮抗血浆同型半胱氨酸水平升高(P＜0.01);与对照组比较,高Hcy组大鼠主动脉组织Bcl-2阳性细胞数目增加,Bcl-2基因启动子区甲基化水平降低(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达增加(P＜0.05).叶酸干预后,主动脉组织Bcl-2阳性细胞数目减少,Bcl-2基因启动启动子区甲基化水平高于高Hcy组(P＜0.05),Bcl2 mRNA表达低于高Hcy组(P＜0.05).结论 叶酸摄入可以拮抗高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉组织Bcl-2低甲基化,使Bcl-2表达减弱,可能是其参与抗动脉粥样硬化形成的分子机制之一.
