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明党参遗传多样性的SRAP分子标记
目的:研究明党参的遗传多样性,为明党参种质资源利用提供理论依据.方法:以10个不同居群的明党参为材料,通过SRAP分析,计算各样品间的遗传相似系数,在此基础上采用UPGMA方法进行聚类,构建树状图.结果:从160个引物组合中筛选得到17个多态性引物组合,共检测到363个基因位点,其中多态性位点有314个,平均每个引物组合产生18.47个多态性位点,多态性位点百分率为86.50%,显示了较高的多态性比率;各居群遗传相似系数在0.495 9～0.818 2;根据聚类结果可将10个不同居群的明党参分为两大类.结论:明党参不同居群间具有高度的遗传多样性;不同居群的亲缘关系与其地理分布有一定的相关性.
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明党参种子品质检验及质量标准研究
目的:研究明党参种子品质检验方法,为明党参种子检验规程及质量标准的制定提供依据.方法:依据种子检验方法对不同产地、不同生长年限明党参种子的品质进行测定.结果与结论:测定了不同生长年限的明党参种子净度、千粒重、含水量、生活力,并据此初步制订了明党参种子的质量分级标准.
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明党参愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养的研究
目的:建立明党参愈伤组织的诱导及其细胞悬浮培养的技术体系.方法:采用正交试验法研究不同植物激素对明党参叶柄、根和叶片愈伤组织诱导的影响,以及明党参不同外植体细胞的悬浮培养.结果:叶柄易诱导出愈伤组织,其次是根和叶片,4种植物激素对明党参根和叶柄愈伤组织的诱导都具有极显著的效果,其中诱导叶柄愈伤组织形成的佳激素组合为0.5 mg·L~(-1) NAA+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+0.1 mg·L~(-1) KT+0.5 mg·L~(-1) 6-BA,培养14 d左右,诱导率达到100%.此外,明党参叶柄细胞培养至21 d时,细胞量和多糖均达到大值,分别1 090.28,36.85 mg·L~(-1).结论:明党参叶柄是愈伤组织诱导的佳外植体和细胞悬浮培养体系的佳细胞来源.
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明党参与川明参群体遗传结构及分子鉴定的ISSR分析
目的:明党参和川明参群体遗传遗传多样性、遗传结构及分子鉴定的研究.方法: 对7个不同野生群体的明党参和1个栽培群体的川明参进行ISSR分析.利用POPGENE分析软件分析了群体的遗传多样性和遗传结构.结果: 共检测了152个位点,总的多态性位点百分率P为90.8 %,群体遗传分化值Gst为57.5 %,明党参群体水平的遗传多样性(A=1.272;P=27.26%;I=0.132;H=0.087)高于川明参群体(A=1.217;P=21.7 %;I=0.103;H=0.067).结论: 明党参的遗传多样性较高,遗传变异主要存在于不同群体间.川明参的遗传多样性低于明党参.聚类分析结果表明,川明参与明党参在DNA水平出现了相当的遗传分化.并通过ISSR分析筛选出了川明参一个特有的分子标记.对明党参和川明参的系统发育关系也进行了探讨.
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明党参种子休眠机制和发芽条件的研究
目的:研究明党参种子的休眠机制和佳发芽条件,为明党参种子检验提供依据.方法:在25,20,15,10,5℃下层积处理明党参种子,每隔10 d观察种子胚的形态变化,并测定种子的胚长和种子霉烂率.分别在以上5个温度下进行明党参种子常规萌发实验,发芽基质为纸床和砂床,测定发芽开始时间、发芽持续时间、发芽率和发芽势.结果:15℃层积下胚生长快,10℃和5℃下前期生长较慢,但后期生长加快,20℃以上发芽受到明显抑制.25,20,15,10℃下霉烂率较高.5℃层积处理45d既能较快打破休眠,又能降低霉烂率.在10～15℃纸床条件下发芽快,发芽率和发芽势高.结论:明党参种子的休眠以形态休眠为主;温度是影响明党参发芽的主要.因素.明党参种子的佳前处理方法为5℃层积45d;佳发芽基质为纸床;佳发芽温度为10～15℃.
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明党参种植基地土壤和药材中的有机氯农药及重金属残留分析
目的:测定、分析江苏明党参规范化种植基地土壤和药材中的有机氯农药残留量及重金属含量,为明党参安全规范化生产提供依据.方法:采用气相色谱法测定有机氯农药残留量,用ICP法测定铅、镉、铜、铬、砷含量,用原子荧光光谱法测定汞含量.结果:江苏明党参种植基地土壤和药材中有机氯农药残留量、重金属含量均低于国家限量标准.结论:江苏明党参种植基地土壤和药材均符合中药材GAP标准.
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明党参干物质积累及多糖含量的动态研究
目的:研究明党参干物质积累及多糖含量的变化规律,确定明党参佳采收期,为明党参规范化种植提供依据.方法:定期采样,测定明党参根的鲜重、干重、折干率和多糖含量.结果:明党参根在整个生长期内总的趋势是不断生长增大,但是在一年内则随着气温、降水、抽薹、开花、结实等内外因素的变化而发生波动.1～6月份期间,多糖含量不断增加,到6月份达到高峰,之后又逐渐下降.结论:明党参宜在3年龄即移栽后第2年的6月中下旬进行采收.
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明党参野生居群生物学及其药材质量调查
目的:调查明党参种质资源现状,为筛选明党参优良种质提供依据.方法:对9个不同居群的野生明党参的群落生态环境、物候期、形态学特征等方面进行调查比较,并通过对9个居群的野生明党参和句容产栽培明党参的酯酶同工酶电泳酶谱探讨明党参野生居群间亲缘关系.结果:野生明党参资源正日趋减少,居群处于濒危状态.栽培明党参种子发芽率一般高于野生明党参种子,但野生明党参根中多糖含量一般高于栽培明党参.南京周边地区明党参多糖含量较高.不同产地明党参居群的存在着亲缘关系的地理学远近差异.结论:野生明党参资源处于濒危状态;南京周边地区特别是紫金山明党参的种质比较优良,可以作为进一步筛选优良种质的依据.
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不同株龄明党参化学成分分析
目的:探究明党参化学成分的动态变化规律,为明党参规范化栽培提供理论指导.方法:运用HPLC,GC-MS和比色法对不同株龄明党参根中多糖、甘露醇、胆碱、生理性灰分、水溶性成分及茎叶中挥发油成分进行分析,并用夹角余弦法计算水溶性成分的相似系数.结果:不同株龄明党参根中水溶性成分、甘露醇、胆碱和生理性灰分含量均差异显著,多糖含量差异不显著.甘露醇、生理性灰分和多糖含量成年株高于幼年株;水溶性成分和胆碱含量幼年株高于成年株.随生长年限的增长,根中水溶性成分和茎叶挥发油成分具有集中转化的趋势,主要成分越来越突出.结论:生长年限对明党参化学成分有显著性影响,合理采收年限在明党参移栽后的2～4年内.
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明党参居群间根中水溶性成分HPLC分析
目的:分析我国明党参主要分布区内明党参居群间根中水溶性成分的相似性,为明党参种质资源评价及药材质量控制提供理论依据.方法:运用冷浸法和HPLC对10个居群明党参根中水溶件成分进行提取与分析,根据各居群明党参根中主要水溶性成分的相对含量,由夹角余弦法计算相似系数,采用UPGMA方法进行聚类,构建树状图.结果:明党参居群间根中水溶性成分差异显著.九华山居群水溶性浸出物的含量高,大龙山和浮山2个居群水溶性浸出物的含量低于<中国药典>标准.各居群根中水溶性成分HPLC图谱差异明显,共有峰数目少.居群间根中水溶性成分的相似系数差距很大,为0.030 6～0.999 5.紫金山居群根中水溶性成分为特殊,除与红山居群的相似系数达到0.969 7的较高水平之外,与其他7个居群的相似系数均较小.而老山、茅山、青龙山和琅琊山4个居群根中水溶性成分的组成极为相似,居群间的相似系数均在大于0.99的很高水平.聚类结果将10个居群的明党参分成3类.结论:明党参居群间根中水溶性成分存在丰富的多样性,明显地分为3个类型.
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不同产地野生明党参药材中胆碱的含量测定
目的 测定不同产地野生中药材明党参中胆碱的含量.方法 本文采用硝酸加热回流分解提取,滤液用40％的氢氧化钠调节至PH至9～10,加入过量甲醇,冰箱放置过夜,滤液浓缩后加入雷氏铵盐甲醇溶液,生成粉红色片状结晶,丙酮溶解后定容至25 mL容量瓶中,吸取5 mL至25 mL容量瓶后于520 nm处测定吸光度.结果 不同产地野生药材中胆碱的含量分别为江苏南京幕府山37.78％,句容天王镇虎山57.03％,句容茅山41.98％,南京青龙山60.74％,南京紫金山38.20％,南京老山33.99％,安徽滁州32.79％,安徽安庆57.38％,安徽青阳36.16％,浙江杭州38.96％.结论 可看出不同产地野生明党参药材中胆碱的含量在32.79％～60.74％之间,其中以江苏南京青龙山、安徽安庆、江苏句容天王镇虎山中胆碱的含量较高.
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正交实验法优化明党参中氯化胆碱的提取工艺
优化中药材明党参中氯化胆碱的提取工艺.采用酸水的浓度、提取时间、提取所用酸水的体积、提取次数设计四因素三水平的正交实验,以氯化胆碱的含量为考察指标优化明党参药材中氯化胆碱的提取工艺.优化后的工艺条件为明党参60℃干燥粉碎后用0.5％,20倍的硝酸溶液加热回流分解提取1次,每次5小时,滤液用40％NaOH溶液调节PH至9～10,加入过量甲醇,冰箱放置过夜,抽滤后得滤液,浓缩加入雷氏铵盐甲醇溶液,生成粉红色片状结晶,将结晶溶解定容后应用紫外分光光度测定氯化胆碱的含量.经过三批样品工艺验证,明党参药材中氯化胆碱的平均含量为37.02％,RSD值为2.8％,说明该工艺稳定可行.
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明芪胶囊抗炎、抑菌作用探讨
明芪胶囊系我院制剂室生产的中药制剂,处方组成为明党参9 g,黄芪9 g,辛荑9 g,百合9 g,苍耳6 g,黄芩6 g,白芷3 g,细辛3 g,薄荷3 g,陈茶1.5 g,鲜葱白15 g.该制剂在临床上主要用于治疗变应性鼻炎,经多年验证其疗效明显.为寻求明芪胶囊抗炎抑菌的实验依据,我们以小鼠二甲苯致炎法和大鼠足跖蛋清致炎法观察其抗炎作用;以注射用青霉素钠为阳性对照,观察其抑菌作用;以制霉菌素为阳性对照,观察其抑制霉菌作用.
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明党参有效成分及炮制机理研究
明党参(Radix Changii)是我国珍稀中药材之一.为伞形科(Umbelliferae)明党参属植物明常参Changium smymioides Wolff的干燥根.该属仅明党参一种,特产我国华东地区,以江苏品质佳.该药始用于明、清,具有"补肺气通下行","养血生津,消热解毒"作用.近代用于"温脾,化痰湿,平肝风.治头晕泛恶,中风昏仆".为<中华人民共和国药典>2000年版一部收载品种,谓:"润肺化痰,养阴和胃,平肝,解毒".为阐明明党参有效物质基础,探讨炮制加工机理及致敏活性物质,经课题组应用现代化学分离技术、色谱分离技术、顶空分析技术、波谱结构解析技术和现代药效学研究方法对明党参进行了较深入的研究,不但发现了其新的化学成分结构及新的药理作用,还从分子水平上探讨了其加工炮制机理,致敏成分的反应机制,取得了诸多新的研究成果.
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明党参根皮化学成分研究
目的 研究明党参Changium smyrnioides根皮的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、反相柱色谱以及LH-20凝胶柱色谱等多种技术进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定.结果 从明党参根皮95％乙醇提取物中分离得到了15个化合物,分别鉴定为欧前胡素(1)、珊瑚菜内酯(2)、花椒毒酚(3)、5-羟基8-甲氧基补骨脂素(4)、香草酸(5)、别欧前胡素(6)、补骨脂素(7)、佛手柑内酯(8)、5-甲氧基-8-O-β-D-葡萄糖基补骨脂素(9)、异茴芹内酯(10)、咖啡酸(11)、橙黄胡椒酰胺乙酸酯(12)、vaginatin (13)、β-谷甾醇(14)、琥珀酸(15).结论 化合物6～13为首次从党参属植物中分离得到.
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明党参内生真菌种群的生态分布及其诱导子活性研究
目的 研究不同产区、不同生长期明党参内生真菌的种群结构与生态分布,以及内生真菌诱导子对明党参细胞生长与多糖积累的影响.方法 采用微生物分离、培养与鉴定等牛物学方法、植物细胞悬浮培养方法以及统计分析方法.结果 从4个产地明党参植株中共分离到8属116株内生真菌,其中镰孢属(Fusarium LK.ex FR.)、地霉属(Geotrichum LK.)和链格孢属(Alternaria Nees)为优势种群.随着明党参生长期的不同,内生真菌种群结构出现明显的动态变化.在苗期和孕蕾期,内生真菌种群丰富,数量较多,尤其是在孕蕾期3种优势种群的分离率和分离频率分别达到30%和19%以上.部分内生真菌种群还具有明显的区域专一性和组织专一性.此外,内生真菌Fusarium sp.3诱导子处理组,明党参细胞生长量和多糖量分别比对照提高了31.86%和38.01%.结论 明党参内生真菌具有丰富的生物多样性,种群结构及分布与其生态环境具有密切的相关性,且部分明党参内生真菌诱导子对其细胞生长和多糖积累均具有显著的促进作用.
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识别真假明党参
明党参又名土人参、百丈光，为伞形科植物明党参的根，生于山野稀疏灌木林下土壤肥厚的地方，每年春季采挖，除去茎叶及须根，洗净泥土，置沸水中煮至无白心，取出，刮去外皮，晒干即可入药。其性凉，味甘微苦，具有清肺、化痰、平肝、和胃、解毒的功效，用于治疗痰火咳嗽、喘逆、头晕、呕吐、目赤、白带、疔毒疮疡等症。商品中，浙江、江苏所产的粉沙参亦做明党参入药。此药与常用桔梗科植物党参只差一个字，但不属同科植物和同一品种。市场上有以伞形科植物川明参冒充明党参，使用时注意鉴别。
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正相高效液相色谱法测定明党参中天门冬酰胺的含量
目的:建立正相高效液相色谱法测定明党参中天门冬酰胺含量的方法.方法:色谱柱为Venusil HILIC(5μm,250×4.6mm);流动相为V(乙腈):V(0.5％磷酸二氢钾水溶液)=78:22;检测波长为203nm;流速为1.0mL/min;柱温为25℃.结果:平均回收率为99.32％,RSD为3.16％.该方法的标准曲线为Y=9698261X +51964,相关系数Y为0.9997.结论:该方法简单,准确性、重复性好,适用于明党参药材的质量分析.
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明党参果实超临界萃取部位化学成分研究
目的:对明党参果实超临界CO2萃取部位的化学成分进行研究.方法:采用CO2超临界萃取技术提取、柱层析、重结晶的方法.以熔点、1H核磁共振、13C核磁共振、GC-MS等手段鉴定结构.结果:分离得到7个化合物,经光谱方法依次鉴定为二十九烷(Ⅰ)、油酸(Ⅱ)、二十三烷酸(Ⅲ)、二十七烷醇(Ⅳ)、β-谷甾醇(V)、珊瑚菜内酯(Ⅵ)、5-羟基-8-甲氧基-补骨脂素(Ⅶ).结论:化合物Ⅵ和Ⅶ为首次从明党参植物果实中分离得到的香豆素类成分.
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中药党参抗应激作用的研究
中药党参为常用补气药.据文献报道[1],党参有补气、益血、生津、升血糖,增加心脑供血量,抑制中枢神经系统的功能.本研究进一步证明党参对小鼠缺氧、耐疲劳能力的影响.
