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补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素含量与其果实饱满程度的相关性研究
目的:研究补骨脂药材中补骨脂素、异补骨脂素的含量与其饱满程度的相关性.方法: 同批药材根据饱满程度不同进行分组,各组分别测定补骨脂素与异补骨脂素的含量.结果: 饱满样品的含量明显低于干瘪样品的含量.结论: 补骨脂中补骨脂素及异补骨脂素的含量与其外观饱满程度明显有关.
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补骨脂素对人乳腺癌多药耐药 Bcl-2基因蛋白表达的影响
多药耐药性(MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一.补骨脂是补益药中少有的钙离子通道拮抗剂,补骨脂素是其主要成分之一,以往我们对其逆转MDR进行了几方面研究[1],明确其有明显的逆转耐药作用.目前已有报道探讨Bcl-2家族与白血病MDR形成的关系[2].本实验就补骨脂素对MCF-7多药耐药细胞株Bcl-2基因蛋白表达影响报道如下.
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光化学疗法治疗银屑病40例疗效观察
目的探讨银屑病光化学疗法的方法和疗效.方法用光敏剂补骨脂素外擦,1h后用长波紫外线对银屑病皮损部位进行有计划有规律的局部照射治疗.结果40例全部有效.其中37例治疗1个疗程皮损消失,3例治疗2个疗程皮损消失.有效率达100%,复发率明显降低.结论此法疗效佳,副作用少,复发率低,可作为银屑病首选治疗方法.
关键词： 光化学疗法 银屑病 长波紫外线(UVA) 光敏剂 补骨脂素 -
补骨脂素光化学法在血液消毒方面的研究进展
补骨脂素又称呋喃香豆素,主要存在于各种天然植物和人类的食物中,曾用于化妆品及与紫外线合用治疗牛皮癣.近年随着光化学法在血液消毒中的应用,补骨脂素逐渐受到关注. 它不仅能灭活血液中的已知和未知的病原微生物,还可去除单一血液成分如血浆、血小板中的白细胞和细胞因子,避免输血反应的发生.现将其在血液消毒方面的应用综述如下.
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补骨脂素的光敏反应
在光敏剂中,补骨脂素(Psoralen,PS)是重要的一群化合物,可从许多植物中提取,其分子结构为平面杂环复合物,是呋喃环和吡喃酮环的并构体:
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HPLC 法测定壮骨胶囊中补骨脂和异补骨脂素的含量
目的：建立高效液相色谱测定壮骨胶囊中补骨脂素和异补骨脂素含量的方法。方法色谱柱： C18（4.6×250 mm，5μm）；流动相：30％乙腈－0.5％乙酸水；流速：1.0 ml／min；柱温：25℃；检测波长：246nm；进样量：20μl。结果补骨脂素在0.002～0.04 mg／ml呈良好线性关系（r＝0.9997，n＝5），平均回收率为95.28％，RSD为1.84％（n＝5）；异补骨脂素在0.002～0.04 mg／ml呈良好线性关系（r＝0.9999，n＝5），平均回收率为96.37％，RSD为1.76％（n＝5）。结论本法操作简便，准确，灵敏，可用于壮骨胶囊补骨脂素和异补骨脂素的含量测定。
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高速逆流色谱法对补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的分离纯化研究
补骨脂素和异补骨脂素是中药补骨脂的特征成分,含量较高且具有多种生物活性,目前已成为补骨脂及其产品的质量控制成分.本文以补骨脂干燥成熟果实为原料,经乙醇回流制备补骨脂粗提物,率先采用高速逆流色谱技术进行分离,所得样品由高效液相色谱检测纯度,并由对照品确定成分.实验结果表明:采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(7:3:5:5)作为两相溶剂体系,经一步逆流分离可以从补骨脂粗提物中分离得到补骨脂素和异补骨脂素,二者纯度分别达到99.4%、99.1%.该法具有制备量大、分离效率高等优点.
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高效液相色谱法测定健骨口服液中补骨脂素、异补骨脂素与丹皮酚的含量
目的 建立高效液相色谱法测定健骨口服液中补骨脂素、异补骨脂素与丹皮酚的含量.方法 色谱柱为Waters Symmetry C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-1%甲酸(52∶48),检测波长245 nm和274 nm,流速1.0 ml/min,柱温30 ℃,进样量10 μl.结果 补骨脂素的线性方程为Y=91580X-3255(r=0.999 9,2.5~15 μg/ml),异补骨脂素的线性方程为Y=76426X+2691(r=0.999 9,2.5~15 μg/ml),丹皮酚的线性方程为Y=54063X-2077(r=0.999 7,1.25~6 μg/ml),线性关系良好,精密度实验中RSD均小于2%,加样回收率在89%~98%之间.结论 该测定方法简便、准确,分离效果好,可用于健骨口服液的质量控制.
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RP-HPLC法测定老年咳喘片中补骨脂素和异补骨脂素的含量
老年咳喘片由黄芪、白术、防风、甘草、黄精、淫羊藿、补骨脂制成,有滋阴壮阳、扶正固本的功效,可以提高免疫力,促进病体康复,用于老年慢性支气管炎及各种体虚症.补骨脂含香豆精类、黄酮类、单萜酚类以及挥发油、皂苷、多糖、类脂等成分.补骨脂素和异补骨脂素为香豆精类,在补骨脂中含量较高,故选取其作为定量指标控制本品的质量,采用高效液相色谱法测定其含量.
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补骨脂素对A375细胞黑素合成及ER/MAPK信号通路调控机制探讨
目的:探讨补骨脂素对A375细胞黑素含量、酪氨酸酶活性的影响及作用机制.方法:以密度2×105个/孔的细胞数接种于6孔板中,将细胞分为空白组、雌二醇组、补骨脂素组、补骨脂素+雌激素受体(ER)阻断剂组(ICI182780)(浓度分别为1×10-3,1,1 μmol· L-1).采用NaOH裂解法、多巴醌氧化法检测黑素含量及酪氨酸酶活性;蛋白免疫印迹法(Westernblot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法测定ER/丝裂原激活的蛋白激酶(ER/MAPK)通路中关键蛋白激酶p38,c-Jun氨基末端激酶(JNK),细胞外信号调节激酶2(ERK2)和小眼畸形相关转录因子(MITF),多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)的蛋白含量及相应mRNA表达.结果:与空白组比较,补骨脂素组对A375细胞中的黑素合成及TYR活性具有显著抑制作用(P＜0.01),对A375细胞中雌激素受体β(ERβ)蛋白的表达具有明显的抑制作用(P＜0.05),对p38 MAPK,ERK2,JNK的蛋白表达极显著的抑制作用(P＜0.01),对MITF,TYR,TRP-1,TRP-2的蛋白表达极显著的抑制作用(P＜0.01),对ERK2,p38 MAPK,MITF,TRP-1 mRNA表达显著被抑制(P＜0.01);与补骨脂素组比较,ICI182780能够逆转ERβ,ERK,MITF,TYR,TRP-1的蛋白表达(P＜0.01)及p38MAPK,JNK,TRP-2的蛋白表达(P＜0.05),同时能显著阻断补骨脂素对ERK2,p38MAPK,MITF,TRP-1 mRNA表达作用(P＜0.01).结论:补骨脂素通过ER/MAPK信号通路下调MITF和TYR,TRP-1,TRP-2的表达量,从而减少黑素合成.
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复方卡力孜然酊质量标准的研究
目的:建立复方卡力孜然酊的质量标准.方法:采用TLC对处方中补骨脂、驱虫斑鸠菊、当归、蛇床子和丁香进行定性鉴别;并用HPLC对处方中补骨脂素进行含量测定,采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-水(50:50)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长246 nm,进样量为10 μL.结果:薄层色谱斑点清晰,易于识别,专属性强;补骨脂素在0.05004～0.350 28 μg呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.4%,RSD 0.9%(n=9).结论:方法准确灵敏,重复性好,提高后的质量标准更有效的控制制剂质量.
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HPLC测定龙钻通痹颗粒剂中青藤碱和补骨脂素
目的:建立一种同时测定龙钻通痹颗粒剂中青藤碱和补骨脂素含量的高效液相色谱方法.方法:采用Phenomenex Gemini C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1％三乙胺(47.5∶52.5)为流动相,流速1 mL·min-1,检测波长246 nm.结果:青藤碱在1.01 ～12.12 μg呈良好的线性关系(r=0.999 7),补骨脂素在0.024 36 ～0.292 32 μg呈良好的线性关系(r =0.999 8).青藤碱和补骨脂素的平均回收率为100.49％和97.00％,RSD为3.0％和1.9％.结论:建立了同时测定龙钻通痹颗粒剂中青藤碱和补骨脂素含量的高效液相色谱方法,该方法快速,简便,结果准确,重复性好,可作为龙钻通痹颗粒剂的质量评价方法.
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正交设计优选退白汤的提取工艺
目的:研究退白汤的提取工艺.方法:采用正交试验设计法考察不同提取工艺制备的退白汤中补骨脂索和异补骨脂素的含量,依据试验数据设计佳提取工艺.结果:加水量、煎煮时间对提取效果有显著影响,佳提取工艺为加水10倍量,药材浸泡1 h,煎煮2次,每次煎煮1 h.结论:优选出的提取工艺经济,简便,提取效率高.
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补骨脂的超临界CO2萃取工艺优选
目的:对补骨脂的超临界CO2流体萃取工艺条件进行优化.方法:选取萃取温度、萃取压力、萃取时间为考察因素,以补骨脂素和异补骨脂素萃取率为指标,采用单因素考察及正交试验对补骨脂萃取工艺进行优选.结果:优选的工艺条件为1.5倍量95％乙醇为夹带剂,萃取温度65℃,萃取压力20 MPa,萃取时间2h.结论:优选的超临界CO2流体萃取工艺合理,可行.
关键词： 补骨脂 补骨脂素 异补骨脂素 超临界CO2流体萃取 高效液相色谱法 -
炮制对补骨脂中12种化学成分含量的影响
目的:比较补骨脂生品及3种炮制品的各项检查指标及化学成分的差异,为补骨脂不同炮制品的临床使用提供参考.方法:按《中国药典》2015年版标准,测定补骨脂生品、炒品、盐炙品及酒炙品的杂质、水分、总灰分和酸不溶性灰分,通过HPLC比较补骨脂不同炮制品中主要化学成分的差异.结果:补骨脂生品及3种炮制品的杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分测定结果均符合《中国药典》2015年版的要求.通过对照品比对及文献查阅确定了12个主要化学成分,即补骨脂苷,异补骨脂苷,补骨脂素,异补骨脂素,新补骨脂异黄酮,补骨脂甲素,补骨脂定,补骨脂乙素,补骨脂二氢黄酮甲醚,corylifol A,4'-O-甲基补骨脂查尔酮和补骨脂酚.结论:补骨脂酚有肾毒性和肝毒性,炮制后补骨脂酚在酒炙品和盐炙品中含量均较生品下降,说明酒炙和盐炙具有炮制减毒的作用;与生品相比,盐炙品中补骨脂素和异补骨脂素含量显著升高,这与补骨脂盐炙后温肾助阳作用增强相关.4'-O-甲基补骨脂查尔酮在炮制品中含量显著升高,而补骨脂二氢黄酮甲醚含量显著降低,这可能是由补骨脂二氢黄酮甲醚在高温下发生降解转化而成.上述这些成分的改变可能是不同炮制品临床功效产生差异的主要原因.
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HPLC法测定关节康片中补骨脂素和异补骨脂素的含量
目的:建立关节康片中补骨脂素和异补骨脂素的含量方法.方法:采用Hypersil 0DS色谱柱(250×4.0mm,5μm);以甲醇-水(43:57)为流动相;检测波长为245nm;流速为1mL/min;柱温为室温.结果:补骨脂素与异补骨脂素分别在0.0127～0.4064μg(r=0.9999)、0.01152～0.3686μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,加样回收率分别为97.9%(RSD=2.1%),102.3%(RSD=1.9%).结论:方法简便、结果准确,可用于关节康片的质量控制指标之一.
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高效液相色谱法测定宫炎平片中补骨脂素的含量
目的:测定宫炎平片中补骨脂素的含量.方法:采用反相高效液相色谱法,DiamonsilTM-C18柱,甲醇-水(50:50)为流动相,流速为1.0mL·min,检测波长246nm,柱温为室温.结果:补骨脂素平均回收率为99.9%,方法精密度(RSD)为2.0%(n=6).结论:该法可用于宫炎平片中补骨脂素的含量测定.
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五指毛桃质量标准的研究
目的:研究五指毛桃的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法对五指毛桃中的补骨脂素进行定性鉴别,并用反相高效液相色谱法测定补骨脂素含量.结果:补骨脂素在(0.0772～0.386)μg·mL-1之间与峰面积线性关系良好(r=0.99997),平均回收率为99.2%,RSD=2.15%.方法精密度(RSD)为2.50%(n=6).结论:所用方法简便、准确、可靠,能有效地控制五指毛桃的质量.
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疏肝颗粒质量标准的研究
以TLC法鉴别了该方中的柴胡、补骨脂、叶下珠,并采用双波长薄层扫描法测定了复方中补骨脂素的含量,回收率为97.5%,RSD=1.79%.
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腰疼丸中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定
研究建立HPLC法测定腰疼丸中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法,回归方程为:补骨脂素Y=16596384C-9480,r=0.9999;异补骨脂素:Y=16579853C+11410,r=0.9999;线性范围:补骨脂素0.1014～0.7098μg;异补骨脂素0.1038～0.7266μg.
