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  • MPTP对多巴胺能神经细胞凋亡的影响

    作者:郑刚;陈景元

    本文就神经毒素1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)对多巴胺能神经细胞凋亡的影响进行综述,重点从MPTP损害细胞线粒体、促进细胞氧化应激、影响细胞信号转导、促进神经胶质细胞激活以及损害多巴胺转运体等方面介绍和总结了近年来在MPTP诱导多巴胺能神经细胞凋亡的机制尤其是细胞信号转导改变方面的研究进展;并对从细胞凋亡角度阐释帕金森病的发病机制以及MPTP多巴胺能神经毒性研究的进一步发展提出了展望.

  • 2,4-二硝基苯甲醚大鼠亚慢性经口毒性研究

    作者:张盼红;高俊宏;刘志永;王鸿;卢青;岳红

    目的 研究2,4-二硝基苯甲醚(2,4-dinitroanisole,DNAN)经口灌胃染毒的亚慢性毒性作用,为科研生产人员的职业健康防护提供基础资料.方法 将96只成年SPF级SD大鼠按体重随机分为4组(雌雄各半),分别为低、中、高(5.0、15.0、45.0 mg/kg)3个染毒组和1个对照组.对照组给予淀粉溶液,每天染毒1次,连续90 d.染毒结束后将所有动物处死,对血液常规指标、血液生化学指标进行检查,取其脏器进行称重,计算脏器系数,并进行病理组织学检查.结果 各组间体重比较,差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组食物利用率与对照组比较降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,雄性大鼠高剂量组附睾脏器系数降低,肝、肾、脾脏器系数升高,低剂量组肾和中剂量组心、肝、肾脏器系数升高,雌性大鼠高剂量组肝、肾脏器系数升高,低、中、高剂量组肾上腺脏器系数降低,差异均有统计学意义(P<0.05).雌雄大鼠脑、心、肺、肝、脾、肾、胃、肾上腺、子宫、卵巢在各剂量组均出现轻度炎细胞浸润、水肿、充血等.尿常规结果显示,高剂量组尿白细胞含量显著高于对照组(P<0.05).电解质检查结果显示,染毒组钠、离子钙、总钙值、氯、pH值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,雄性中、高剂量组凝血酶原时间、凝血酶原国际标准化比值降低,雌性低剂量组部分活化凝血活酶时间降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,染毒组的血液学指标出现不同程度的改变.结论 在本试验条件下,DNAN可影响大鼠的血液系统和呼吸系统的功能,同时对肝、肾、附睾有一定的损伤作用.

  • DNPH柱前衍生高效液相色谱法测定食品包装材料中的微量甲醛

    作者:陈秀杰;王娴;余涛

    目的 建立2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定食品包装材料中微量甲醛的方法.方法 样品浸泡液经DNPH于60℃的水浴中衍生20 min,用环己烷提取,液相色谱仪测定.结果 甲醛在0 ~8.00 μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r=0.9998,相对标准偏差为0.9% ~2.6%,加标回收率为91.0% ~ 101.5%.结论 本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好、简便、快捷等优点.

  • 二硝基苯肼柱前衍生-HPLC法测定水中微量甲醛和乙醛

    作者:叶坚;王娴;余涛

    目的 探讨二硝基苯朋(DNPH)衍生化高效液相色谱(HPTC)法测定水中微量甲醛和乙醛的方法.方法 在60℃的水浴中,水样中的甲醛和乙醛经DNPH衍生化20 min,用环己烷提取,用高效液相色谱仪测定.结果 甲醛、乙醛在0 ~ 8.0 μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好,甲醛和乙醛的相关系数r分别为0.9997和0.9996;甲醛和乙醛的相对标准偏差分别为0.5% ~2.4%和1.1% ~3.2%;加标回收率分别为97.6%~99.3%和98.4% ~ 101.7%;方法低检出浓度分别为0.002和0.005 mg/L.甲醛检测结果与国标方法比较无显著性差异(P大于0.05).结论 本方法不但可同时检测水中微量的甲醛和乙醛,具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好等优点,而且简便、快捷,适合大批量样品分析.

  • UPLC-MS/MS检测生活饮用水中部分非常规项目

    作者:王谢;张洁;马青青;张耀光;夏芳;张向兵;翟志雷;梁瑞玲

    目的 建立生活饮用水中丙烯酰胺、微囊藻毒素(LR)、莠去津、乐果、灭草松、呋喃丹和2,4-滴的快速、准确检测方法.方法 样品经0.20μm滤膜过滤,直接上机检测,优化佳的色谱和质谱条件,运用超高效液相色谱—质谱联用(UPLC-MS)方法检测水质非常规项目中的7项指标.结果 7种组分保留时间均在4.0 min之内,检出限为0.0001~0.000 3 mg/L,加标回收率81.0% ~ 102.3%.结论 该方法快速、灵敏度好、成本低,能为水质非常规项目的检测提供有力的技术支持.

  • 水中灭草松、莠去津、2,4-滴、呋喃丹和微囊藻毒素UPLC-MS-MS快速测定方法

    作者:单晓梅;谢继安;沈登辉;刘柏林;陆蓓蓓;王冰霜

    目的 建立同时快速测定水中灭草松、莠去津、2,4-滴、呋喃丹和微囊藻毒素化合物超高效液相色谱—串联质谱方法.方法 直接或离心后取上清液进样,利用Acquity BEH C18色谱柱分离待测物,串联质谱仪检测,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL/min,外标法定量.结果 灭草松、2,4-滴、莠去津、呋喃丹、微囊藻毒素-RR、微囊藻毒素-LR 6种化合物线性浓度范围分别为1.0 ~50.0、1.0 ~50.0、0.5 ~25.0、1.0 ~50.0、0.2 ~10.0和0.2~10.0 μg/L,其线性相关系数均大于0.999,6种化合物的方法检出限为0.01 ~0.1 μg/L,回收率为98.0% ~102.1%,相对标准偏差为1.73% ~3.06%.结论 该法简便、准确,适用于生活饮用水中多种农药和微囊藻毒素的快速分析.

  • 正相色谱串联质谱法直接进样测定水体中的草甘膦和2,4-滴残留

    作者:郑和辉;卞战强;田向红;于建;查玉娥;张娟

    目的 建立直接进样测定饮用水和水源水中的草甘膦和2,4-滴的液相色谱质谱分析方法.方法 采用正相色谱柱:CAPCELL PAK ST柱(2.1 mm×150 mm),流动相为乙腈/10 mmol/L的乙酸铵水溶液(pH =10.10).水样直接过0.22 μm滤膜,用高效液相色谱串联质谱分析检测.结果 草甘膦(100.0 ng/mL,400.0 ng/mL)和2,4-滴(10.0 ng/mL,40.0 ng/mL)在水中进行两个质量浓度的加标实验,每个质量浓度平行测定6次.通过测定和工作曲线的计算,得到草甘膦测定的结果为:95.3±3.8 ng/mL和402.7±20.8 ng/mL,即平均回收率分别为95.3%和100.7%;2,4-滴测定的结果为:9.7±0.2 ng/mL和38.6±1.0 ng/mL,即平均回收率分别为97.0%和96.5%.草甘膦在水中质量浓度范围在20.0 ~ 800.0 ng/mL,线性相关系数为0.9992;2,4-滴在水中质量浓度范围在2.0~ 80.0 ng/mL,线性相关系数为0.9996.在自来水中添加草甘膦和2,4-滴,以10倍信噪比(S/N)计算,在进样量10μL时;得到的本方法草甘膦和2,4-滴低检测质量浓度分别为4.0 ng/mL和0.4 ng/mL.结论 该方法简单,速度快,准确度和灵敏度高,满足测定日常地表水水体中百草甘膦和2,4-滴检测项目的需要.

  • 2,3,5-三苯基氯化四氮唑在增菌液中的应用研究

    作者:王红戟;陈娅

    目的 确立2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)在增菌液中,对不同的细菌产生抑制和被完全抑制时的浓度.方法 用金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌配制不同的菌液浓度,分别加到含1.0 mg/ml琼脂粉的普通营养肉汤增菌液中(副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水代替普通营养肉汤),再加入不同量的10.0 mg/ml TTC储备液,记录TTC对各菌产生抑制和被完全抑制时的浓度.结果 在菌量30.300 cfu/ml时,金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌开始被抑制和被完全抑制时的TTC浓度分别为0.02、0.1、0.2、0.6、0.6、0.1 mg/ml和0.1、0,7、0.5、>2.0、>2.0、0.2 m/nl.结论 检测样品时,在增菌液中加入1.0 mg/ml的琼脂粉和适量的TTC可提高致病菌的检出率,可直观样品中细菌数量.选择含不同TTC浓度的增菌液,可选择性地进行筛选增菌,进一步提高检出率.

  • 壮阳春胶囊质量标准研究

    作者:许亚静;谭洪泉;赫玉芳;南敏伦

    目的:建立壮阳春胶囊的定性定量方法.方法:采用TLC法对处方中肉苁蓉,何首乌进行了定性鉴别;采用HPLC法,色谱柱为Shim-pack(岛津)C18(150×4.6mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水(19:81)为流动相;检测波长320nm,流速1mL.min-1,柱温25℃,进样量10μL,对方中制何首乌所含2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进行了含量测定.结果:壮阳春胶囊中肉苁蓉、何首乌薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;壮阳春胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄搪苷的含量测定线性范围为0.05μg~0.50μg(r=1.0000),平均回收率为99.51%(RSD=1.91%,n=6).结论:薄层色谱鉴别和含量测定方法准确可行,重复性好,可有效地控制壮阳春胶囊的质量.

  • 柱前衍生法测定茶叶中L-茶氨酸的含量

    作者:何沃权;莫永川

    本文研究了柱前衍生测定茶叶中L-茶氨酸含量的方法.茶叶中的L-茶氨酸用热水提取后,经2,4-二硝基氟苯衍生后上高效液相色谱法测定.色谱条件为:色谱柱(Kromasil C18柱4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈︰磷酸盐溶液(pH=6.5)=15︰85梯度洗脱;检测波长:360 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;进样:5μL.本方法检出限4 mg/kg,在1.0~50.0μg/mL呈现良好的线性关系(r=0.9999),衍生后的样品室温25℃放置6天内稳定,重现性试验相对标准偏差0.16%(n=6),回收率为96.4%~102.2%.本高效液相色谱法可以准确地测定茶叶中L-茶氨酸的含量.

  • 2,4-二硝基苯肼气相色谱法测定食品中甲醛的含量

    作者:贾俊;周兰影;郑宏儒;刘大鹏;李桂杰;张旭

    建立一种2,4-二硝基苯肼气相色谱法测定食品中甲醛的方法,优化色谱条件,测定分析市售米粉、腐竹和毛肚三种食品中的甲醛含量.食品经水浸提,2,4-二硝基苯肼(DNPH)衍生15 min,正己烷萃取,经HP-5型色谱柱(15 m×0.25 mm,0.25μm)分离,N2为载气,柱流量1.20 mL/min,分流比为10:1,进样口温度为250℃,ECD电子捕获检测器温度设为280℃时,色谱条件佳.

  • 液相色谱-串联质谱法测定复合食品包装袋中2,4-二氨基甲苯

    作者:舒勇;赵成仕;张居舟

    本文首次建立了复合食品包装袋中2,4-二氨基甲苯的超高效液相色谱-串联质谱测定方法.样品中2,4-二氨基甲苯用沸水浸取,经滤膜过滤后,直接使用超高效液相色谱-串联质谱进行分析测定.结果表明,该方法对复合食品包装袋中的2,4-二氨基甲苯的检测限为0.2 μg/L,检测浓度范围为0.2~100 μg/L,线性关系良好(R2=0.9994);样品的加标回收率为92%~108%,RSD偏差(n = 6)为2.1~5.9%.所建立的方法灵敏、快捷、准确,完全满足复合食品包装袋中2,4-二氨基甲苯检测的需要.

  • 2,4-二硝基氯苯在致敏试验中剂量方法的探讨

    作者:李启富;刘琳;喻荣珍;褚芳;田泽敏

    2,4-二硝基氯苯是一种淡黄色或黄棕色针状结晶,有苦杏仁味,分子式为:C6H3CIH2O4.主要用于医药、农药、合成染料和化学助剂等原料.而在农药、消毒产品的毒理学试验时,2,4-二硝基氯苯主要用于在皮肤变态(致敏)反应毒性试验中,作为该方法可靠检查的阳性对照物.在此试验中,我们采用少量体积分数为95%的乙醇溶解该阳性物后,再用水稀释,此方法简单,可获得较好的阳性结果.

  • TCDD或β-NF染毒对斑马鱼肝和鳃MROD酶活力的作用

    作者:陈进东;何盛昱;谢英明;林红英;杨蓉;陈进军

    2,3,7,8-四氯-二苯-对-二嘿英(2,3,7,8-tetrachlorod-ibenzo-p-dioxin,TCDD)、β-萘黄酮(beta-naphthoflavone,β-NF)是环境中常见的多环芳烃类(polycyclic aromatic hydrocarbon,PAHs)有机污染物,它们能通过大气环流远距离迁移,在植物表面沉积或通过水体污染饲料,后者被畜禽采食后进入畜禽体内,直接或间接进入人体[1-2].

  • 2,5-己二酮染毒大鼠神经电生理参数时效性变化

    作者:郭新;王青山;张利平;朱英健;谢克勤

    2,5-己二酮(2,5-HD)是正己烷在体内代谢终产物,也是介导慢性正己烷中毒的神经毒物,可引起感觉-运动障碍型多发性周围神经病[1].临床病例分析表明,神经电生理检查是诊断该病的重要辅助手段,患者示感觉、运动动作电位波幅下降,运动传导速度减慢和远端潜伏期延长,且电生理异常可早于临床症状[1-3];动物实验显示,染毒终点大鼠神经电生理改变与人类一致[4],但对各项电生理指标时效性变化、发生改变的顺序及指标敏感性研究,尚未见报道.本研究采用电生理学方法测定并分析大鼠坐骨-腓神经干复合动作电位(CAP)波幅、潜伏期、阈强度、大刺激强度和神经传导速度(NCV)等5项电生理参数,以比较各项指标随染毒时程发生变化的顺序及发展趋势,为进一步探讨2,5-HD周围神经病变发生机制提供依据.

  • 2,5-己二酮对大鼠大脑皮层细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响

    作者:姚文环;程东;颜燕;杨非;郭婕;李慧;张静;冯宪光;张天亮

    目的 初步探讨大鼠大脑皮层细胞凋亡在2,5-己二酮(HD)致大鼠神经退行性病变中的作用.方法 60只Wistar雄性大鼠,经腹腔染毒,剂量分别为100和300 mg/(kg·d),连续8周(每周5d).处死一半动物并分离、冻存大脑组织.另一半动物停止染毒、自然恢复8周后取材.采用TUNEL方法检测大鼠大脑皮层细胞凋亡指数(AI),采用免疫组化方法检测大鼠大脑皮层细胞Bcl-2和Bax的相对含量.结果 染毒8周后,100和300 mg/kg剂量组动物AI分别为22.25% (P <0.05)和25.12% (P <0.05),与对照组7.94%比较,阳性细胞数量明显增加.恢复8周后100和300 mg/kg剂量组动物AI分别为18.45% (P <0.05)和17.20% (P <0.05),与对照组7.48%比较,仍存在显著性差异,但300 mg/kg剂量组动物AI较染毒8周时有所减小;100和300 mg/kg剂量组动物在HD染毒8周和8周+恢复8周时,Bcl-2含量分别相当于对照组的89.2%、78.4%和80.9%、132.9%;Bax含量分别相当于对照组的126.3%、135.6%和74.6%、80.9%.结论 HD致大鼠退行性病变过程中可能伴有大脑皮层细胞凋亡的发生.

  • TCDD宫内暴露对雄性子代睾丸组织病理学形态和功能的影响

    作者:孙雅文;刘亚男;马静;陈京山;闫欢;李京;刘金川;张利新;王永明

    目的 通过设置日常接触(0.2 μg/kg.bw)和子代高非致畸(0.8μg/kg.bw)这两个极限剂量,探讨胚胎性腺性别决定期宫内2,3,7,8-四氯二苯并二嗯英(TCDD)暴露对子代成年雄性大鼠睾丸形态、精子发生及血清睾酮、雌二醇水平的不同影响.方法 孕SD大鼠随机分为TCDD染毒组(0.2和0.8μg/kg.bw)和对照组(玉米油+二甲基亚砜),于GD 8~14天每日定时灌胃染毒.测定90日龄成年雄性子代的体重增重、睾丸总重;睾丸组织切片苏木素-伊红(HE)染色后测量睾丸生精细胞层厚度,计算睾丸间质细胞密度,并使用Johnsen's Score对睾丸的精子发生进行评价;化学发光法测定血清中睾酮及雌二醇的水平.结果 (1)0.8 μg/kg.bw组成年雄鼠睾丸总重明显低于对照组(P<0.05),0.2μg/kg.bw剂量组睾丸总重和体重增加量与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);(2)两个TCDD组睾丸Johnsen's Score得分均低于对照组(P<0.05),0.8μg/kg·bw组生精细胞层厚度明显低于对照组(P<0.05),睾丸间质细胞密度组间差异无统计学意义;(3)两个TCDD组成年雄鼠血清雌二醇水平明显下降(P<0.05),睾酮水平组间差别无统计学意义.结论 胚胎性腺性别决定期内,孕鼠日常接触剂量和高剂量TCDD暴露均可造成成年雄鼠睾丸组织病理学形态的改变,睾丸生精细胞层厚度变薄,精子发生受损,可能影响睾丸精子生成,造成雄性子代生殖能力降低.

  • 二氯苯胺对小鼠免疫功能的影响

    作者:张波

    2,3-二氯苯胺是一种重要的有机原料中间体,广泛应用于农药、医药、染料和感光材料等精细化工行业.其中间产物在土壤、水体环境中相对较稳定,不易降解,在土壤、水体环境中可较长时间残留,对鱼类、哺乳动物以及人类的潜在危害已引起极大关注[1-3].本实验目的在于研究该化合物对小鼠免疫功能的影响.

  • 2,2’,4,4’-四溴联苯醚的肝细胞氧化损伤毒性效应研究

    作者:贾晓栋;张建清;黄海燕

    目的 探讨2,2’,4,4’-四溴联苯醚(2,2’,4,4’-tetrabromodiphenyl ether,BDE-47)的L02肝细胞毒性效应.方法 采用CCK8法检测BDE47的肝细胞毒性效应,确定时间-剂量-效应关系.选取3个剂量组:高(80 μmol/L)、中(20 μmol/L)和低剂量(5μmol/L)的BDE-47染毒细胞,同时设立一个空白对照组和一个溶剂对照组,试剂盒检测各剂量组超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)的表达,SPSS 13.0进行统计分析.结果 BDE-47具有明显的肝细胞毒性(与对照组相比,P<0.01),染毒时间在12 ~72 h时呈现时间-剂量-效应关系,并发现BDE-47染毒肝细胞12 h的半数抑制浓度为80 μmol/L,为其显著作用时间点;BDE-47染毒L02肝细胞后,细胞外的LDH表达增加,细胞内MDA含量增加;而细胞内GST和SOD酶活力则呈现低浓度BDE47染毒时升高而高浓度时降低.结论 BDE-47对L02肝细胞具有一定的细胞毒性,并能够导致细胞氧化应激损伤.这可能是其生物毒性效应的重要机制之一.

  • 2,5-己二酮对大鼠坐骨神经骨架蛋白的影响

    作者:程东;韩晓英;姚文环;李慧;郭婕;颜燕;周雯;张天亮

    目的 探讨2,5-己二酮(HD)对大鼠坐骨神经中神经丝、微丝、微管等骨架蛋白的影响.方法 Wistar雄性大鼠,经腹腔染毒,剂量分别为100和300 mg/(kg·bw),连续8周(每周5d).处死一半动物并分离、冻存坐骨神经.另一半动物停止染毒、自然恢复8周后取材.采用免疫组化方法检测大鼠坐骨神经中高分子量神经丝(NF-H)、中分子量神经丝(NF-M)、低分子量神经丝(NF-L)、β-肌动蛋白(β-actin)和β-管蛋白(β-tubulin)的相对含量.结果 剂量组NF-H、NF-M、NF-L相对含量在染毒8周时均降低,下降至对照组的81% ~92%,且呈现剂量-反应关系;染毒8周又自然恢复8周时相对含量较染毒8周时无明显变化.β-actin的相对含量与对照组相比无明显变化.β-tubulin的相对含量在染毒8周时无明显变化,染毒8周又自然恢复8周时300 mg/(kg·bw)剂量组明显降低.结论 HD导致大鼠坐骨神经中骨架蛋白的改变自然恢复8周后无明显变化.

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