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兔髓核细胞原代培养及独活寄生汤对Fas介导的凋亡通路的影响

卢建华;苏陈颖;王靖;俞冰;张春丽;钱志钢;柯高峰

摘要: 目的:研究兔髓核细胞的培养条件及生物学特性,并探讨独活寄生汤对体外培养兔髓核细胞凋亡的影响.方法:无菌环境下分离兔腰椎髓核组织,酶消化法消化,用DMEM/F12(1∶1)培养液培养.通过Ⅱ型胶原及集聚蛋白聚糖免疫组织化学检测进行细胞鉴定.髓核细胞传至第二代时开始药物干预.根据独活寄生汤药液不同浓度(100、200、400μg/mL)进行分组,0μ g/mL为空白对照组.药物干预72h后,收集髓核细胞.RT-PCR法检测Fas、FasL、Bcl-2、Bid、Bax、Caspase-8、Caspase-3 mRNA表达情况.结果:髓核细胞Ⅱ型胶原和集聚蛋白聚糖免疫组化染色为阳性.与空白对照组比较,独活寄生汤干预后能够下调Fas、Fasl、Bax、Bid、Caspase-3、Caspase-8 mRNA的表达(P<0.05),上调Bcl-2 mRNA的表达(P<0.05).结论:体外环境下单层培养、酶消化法成功培养了兔髓核细胞.独活寄生汤通过抑制Fas介导的Ⅰ型和Ⅱ型凋亡通路的激活,从而抑制髓核细胞凋亡.

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