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液相色谱-串联质谱法检测人血清25羟维生素D3水平及条件控制分析
目的 人血清25羟维生素D3 [25-(0H) D3]测定对于评价体内维生素D的水平十分重要.本文拟建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血清25-(OH)D3的方法.方法 人血清样本(400μl)用纯甲醇去蛋白,离心后用正己烷进行液-液萃取.采用大气压化学离子源(APCI源),正离子多反应监测模式.色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm)；流动相:100％甲醇；流速:0.2ml/min.结果 LC-MS/MS的检出限为1.0ng/ml,25-OHD3浓度在6～120ng/ml范围内,峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999),平均回收率为99.5％(范围:97.1％～103.4％),RSD为4.7％.分别用LC-MS/MS和放射免疫法检测53例血清样本,两种方法的平均浓度分别为23.69ng/ml和20.1 ng/ml,LC-MS/MS比放射免疫法(RIA)平均高17.69％ (P=0.083).二者的相关性良好,RIA=LC-MS/MS-3.57,相关系数为0.883.结论 本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度,易于操作,与放射免疫法相关性好,可用于测定人血清中25-(OH)D3的含量.
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微机多探头放免仪FT--630维修实例
微机多探头放免仪FT-630是用于放射免疫(RIA)测定的.该机具有10路γ辐射探头,能同时检测10个样品,并与微机相配合,能完成各种RIA数据的处理以及精密度管理.
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前列腺特异性抗原检测方法改良之探讨
前列腺特异性抗原(PSA)多采用放射免疫一步双抗体夹心法的原理进行检测.此项指标已被广泛用于男性体查,以达到对前列腺癌的早期诊断、早期治疗.
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L-精氨酸与N-硝基L-精氨酸甲基酯对雄性大鼠睾酮分泌的影响
目的:阐明一氧化氮(NO)对男性生殖轴中睾丸内分泌功能的调节作用.材料与方法:于雄性SD大鼠腹腔内注射不同剂量(0～210mg/kg)的L-ARG(L-arginine,L-ARG,NO前体)与L-NAME(Nw-nitrio-L-arginine-mythel-ester,L-NAME,NO合酶的竞争性抑制剂,0～70mg/kg),每天一次,共8天,后一次注射后1小时采血.然后将SD大鼠分成4组,分别注射同一剂量的L-ARG(160mg/kg)、L-NAME(50mg/kg)、L-ARG+L-NAME和生理盐水,每天一次,注射13天,每隔3～4天采血一次.用放射免疫同步测定法测定血清中睾酮含量,对所得数据进行统计学处理.结果:L-ARG对睾酮分泌具有抑制作用(P＜0.01),而L-NAME则促进睾酮的分泌(P＜0.01),两者都具有时间依赖性,并与剂量高度相关.L-ARG和L-NAME混合注射时,睾酮的含量与生理盐水注射组无明显区别(P＞0.05).结论:NO对雄性大鼠的睾酮分泌具有抑制作用.
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乙型肝炎肝纤维化生化检验及放射免疫相关问题探讨
目的:探讨乙型肝炎肝纤维化的生化检验和放射免疫等相关问题 方法:选取我院于2015年1月至2016年7月收治的乙型肝炎肝纤维化患者60例,作为试验,选取同期于我院进行健康体检者60例作为对照组,对两组受试者进行血清相关生化检验以及放射免疫检查,并将两组受试者的检查结果进行对比结果:试验的透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)及Ⅲ型前肢原(PC-Ⅲ)等检测指标均显著高于对照组,且两组检查结果对比差异有统计学意义(P＜0.05);试验的白蛋白(ALB)、血清胆固醇(CHO)及血清胆碱酯酶(CHE)等检测指标均显著低于对照组,且两组检查结果对比差异有统计学意义(P＜0.05) 结论:对乙型肝炎肝纤维化患者进行血清相关的生化检验及放射免疫检查,可以帮助有效鉴别、诊断疾病,为以后进行临床治疗提供可靠根据、指导,具有临床推广价值.
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放射免疫分析测定血清透明质酸、四型胶原在肝脏疾病诊断中的应用
血清透明质酸(HA)是结缔组织基质的主要成分之一,它具有维持组织形态、体积、抗压缩及张力等物理效应.由间质细胞合成,经淋巴系统入血,在血中半衰期仅2～5分,大部分迅速被肝脏内皮细胞摄取后分解,极少量由肾脏滤过.当肝功能受损时,血清HA升高,且随病情的加剧明显升高,尤其是肝硬化患者升高幅度更大.Ⅳ-C是基底膜主要胶原成分,广泛分布于全身组织器官中,主要在肝脏内合成与代谢,肝脏病变时,合成异常增多.2010～2010年对208例患者应用放射免疫测定其血清含量.现总结报告如下.
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液芯技术应用在肿瘤标志物检测中的应用
恶性肿瘤会对人体健康造成巨大危害,及早诊断、及早治疗有利于肿瘤的防治.随着科技的发展,肿瘤标志物的检测方法不断更新,在放射免疫酶联免疫化学发光固态芯片后,现在较常用的是液芯片.
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北虫草提取物对运动员血乳酸等指标的影响
目的:通过检测男运动员血乳酸等指标的含量变化,观察北虫草提取物对运动员生理功能的影响.方法:以男运动员为研究对象,每个实验分2组,对照组和给药试验组,总计26人.血乳酸和尿素氮含量测定分别采用乳酸分析仪与二乙酰-肟检测法,血清睾酮、皮质醇含量测定采用放射免疫分析法,结果:运动和安静时实验组血乳酸的测定结果为(11.476 ± 1.680和0.94 ± 0.185)明显低于对照组(14.736 ± 1.988和1.76 ± 0.302),差异性显著,P＜0.05与 P＜0.01.实验组血清睾酮和皮质醇的放免测定结果为(850.808 ± 193.918和20.10 ± 2.57),对照组分别为(717.685 ± 124.008和27.17 ± 6.32),实验组血清睾酮含量明显高于对照组,皮质醇含量明显低于对照组,差异有显著性P＜0.01.血清睾酮/皮质醇比值和尿素氮的测定结果为(43.086 ± 12.217和10.27 ± 1.89),对照组分别为(27.998 ± 9.873和14.77 ± 1.21),实验组血清睾酮/皮质醇比值明显高,尿素氮含量降低,与对照组比较,差异性显著,P＜0.05.结论:北虫草提取物具有促进血生化指标恢复和抗疲劳的作用.
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国产酵母乙型肝炎疫苗2年免疫效果和安全性评价
以7～9岁小学生为对象进行了国产酵母乙型肝炎(乙肝)疫苗接种效果评价,结果如下.1.材料与方法:在辽宁省北票市选择一般健康状况良好的7～9岁小学生,免疫前筛查HBsAg、抗-HBs、抗-HBc均为阴性,近期无感冒发烧,体温正常,无接种乙肝疫苗史、肝病史及1年内无输血史.共计110名,其中男生58人,女生52人.采用深圳生物制品研究所生产的酵母乙肝疫苗,剂量为5 μg/0.5 ml,免疫程序按0、1、6月,上臂三角肌内注射.血清筛选应用放射免疫试剂检测HBsAg,以S/N值≥2.1判为阳性;对阴性者检测抗-HBs和抗-HBc,抗-HBs S/N≥2.1为阳性.第1针免疫后3、7、12、24个月血样,均采用美国雅培公司所产Abbott RIA试剂盒检测抗-HBs.小学生抗-HBs抗体几何平均滴度(GMT)计算采用改良Hollinger公式,抗体滴度≥10 mIU/ml为阳性,计算抗体阳转率.
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四君子汤对脾虚患者免疫功能影响
目的探讨四君子汤治疗脾虚证对免疫功能影响.方法选择42例脾虚患者,服用四君子汤2个月后,用放射免疫分析和散射比浊方法检测脾虚患者治疗前后血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA),以进行比较.结果治疗后IL-4、IL-8、IgG、IgA水平均较治疗前明显升高(P《0.01).结论脾虚能引起免疫功能下降,经四君子汤治疗后有明显改善.
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急性脑梗死患者治疗前后临床血清学变化
目的 探讨急性脑梗死患者治疗前后血清高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血浆血栓素B2( TXB2),6-酮-前列腺素F1.(6-K-PGF1α)、甘油三脂(TG)、β脂蛋白(β-LP)的变化.方法 对94例急性脑梗死患者(男58例,女36例),用放射免疫和生化方法检测血样本中HDL、LDL、TXB2、6-K-PGF1α、TG、β-LP的含量.结果 急性脑梗死患者治疗后HDL、6-K- PG F1α浓度明显升高(P＜0.05),LDL、TG、β-LP、TXB2浓度显著降低(P＜0.01).结论 急性脑梗死患者治疗后血液的高凝状态明显改变,血脂降低.
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尿β2-微球蛋白联合检测在H型高血压早期肾损害中的应用
目的 探讨尿β2-微球蛋白(β2-MG)对H型高血压早期肾损害诊断的意义.方法 对67例H型高血压患者(男36例,女31例),用循环酶法和放射免疫法检测血清Hcy、尿32-MG的含量.结果 H型高血压患者β2-MG明显升高(P＜0.01).结论 检测尿β2-MG对H型高血压早期肾损害的诊断及治疗有重要意义.
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血清C肽免疫检测方法的对比分析及临床意义探讨
采用四种常规免疫检测方法同时检测血清C肽,分析检测方法间的差异性并研究检测差异对临床判断胰岛β细胞功能的影响.随机选取病人51例152份血清样本,其中正常糖耐量13例,空腹血糖受损8例,糖耐量减低9例及2型糖尿病21例.免疫检测方法包括放射免疫法一种、化学发光法两种和电化学发光法一种.四种方法检测血清C肽的结果相互之间总体相关系数在0.74～0.99之间;检测数值间差异均显著(P＜0.0001).在监测血清C肽的变化节律方面,四种免疫检测的变化趋向性表现一致,对临床判断无显著差异.
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电化学发光免疫分析法测定TSH、FT3、FT4的临床应用
电化学发光免疫分析法(electro-chemiluminescence immunoassay, ECLI)是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫分析法之后的新一代标记免疫测定技术,是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物[1].它包括了电化学和化学发光两个过程.整个测定过程全自动控制,反应时间短,15～30分钟即可出结果.该法灵敏度高,检测下限可达1pmol/L.
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195例饮食公共场所服务行业HBsAg阳性者乙肝标志物分析
病毒性乙型肝炎是一种严重危害人类健康的世界性传染病, 我国为乙型肝炎高发地区. 根据<食品卫生法>和<公共场所卫生管理条例>中有关规定, HBsAg阳性者需进一步作HBeAg检测. 凡HBeAg阳性者不得从事一切饮食、公共场所服务业. HBsAg单项阳性者不得从事食品业、理发、美容、洗浴业和托儿幼教业. 卫生机构不能发放健康合格证, 已在岗位者必须坚决予以调离. 为探讨其调离标准在控制乙肝传染源方面的科学性, 本文对195例HBsAg阳性的健康体检者, 用放射免疫(RIA)方法进行了HBV血清学6项标志物检测, 现将结果报告如下.
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MTX治疗输卵管妊娠的临床护理体会
输卵管妊娠是妇科急症之一,今年来发病率有明显上升趋势[1].随着高分辨率超声诊断、高敏感度放射免疫β-hcg测定以及腹腔镜在临床上普遍应用,输卵管妊娠的早期诊断率显著增高[2],使该病得以用药物进行保守治疗,为年轻未生育的患者提供了保留生育机能的机会.
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督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进大鼠受损伤脊髓组织产生神经生长活性物质
目的 探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用能否促进受损伤脊髓组织产生神经生长活性物质.方法 成年大鼠分为正常组、对照组、神经干细胞移植组(NSCs组)、督脉电针组(电针组)和督脉电针+神经干细胞移植组(电针NSCs组).除正常组外均实施T10段脊髓全横断手术,其中电针组和电针NSCs组于术后5d进行电针治疗.分别于术后14 d和28 d取材,进行受损伤脊髓组织环一磷酸腺苷(cAMP)含量的放射免疫检测;用Westenblotting检测神经营养素-3(NT-3)、神经营养因子受体(Trk)以及生长相关蛋白-43(GAP-43)的水平.结果 1.在术后14 d,NSCs组、电针组和电针NSCs组的脊髓损伤区cAMP含量较正常组有增加.但除电针组外,脊髓损伤区的上段或下段组织cAMP含量低于正常组.在术后28 d,电针NSCs组脊髓损伤区上段、下段组织cAMP含量仍保持较高水平.NSCs组和电针NSCs组的脊髓损伤区cAMP含量较正常组有所增加.2.NT-3、Trk及GAP-43的表达以电针组和电针NSCs组较为明显,对照组和NSCs组的3种蛋白表达均低于电针组和电针NSCs组.结论 督脉电针能促进受损伤的脊髓组织产生cAMP;督脉电针与NSCs移植联合应用能保持受损伤的脊髓组织较高水平的cAMP,而且NT-3、Trk及GAP-43的含量也有增高的趋势.
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腺嘌呤致大鼠雄性不育发病机理的实验研究
目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)超家族的细胞内信号转导分子Smad 2、Smad 4蛋白在腺嘌呤所致雄性不育的大鼠睾丸内定位、分布及作用机制.方法应用免疫组织化学SABC法检测正常成年及腺嘌呤(300mg/kg)灌胃后第7、14、21 d大鼠睾丸中Smad 2、Smad 4的定位和分布,并通过图像分析系统进行统计学分析,同时应用放射免疫法测定血清中睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量.结果Smad 2免疫阳性产物位于实验大鼠各级生精细胞及支持细胞的胞质内,Samd 4则位于间质细胞的胞质内;灌胃后第21 d大鼠睾丸中Smad2、Smad 4表达明显高于正常成年及7、14 d大鼠,同时,血清中T较正常成年及7、14 d大鼠明显降低,LH、FSH明显增高.结论腺嘌呤所致雄性不育可能与Smad 2在大鼠睾丸生精细胞中表达增强及Smad 4在睾丸间质细胞中表达增强,直接或间接影响睾丸的生精功能有关.
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人参环氧炔醇对体外培养施万细胞表达神经营养因子的影响及可能机制的研究
目的 研究人参环氧炔醇(PND)对体外培养施万细胞(SCs)神经营养因子(NTFs)表达的影响;并探讨其机制.方法 用含有不同浓度的PND培养液分别处理SCs,以免疫组织化学法检测PND对SCs NTFs表达的影响;放射免疫方法测定SOs内环磷酸腺苷(cAMP)水平的变化,并进行图像处理及统计学分析.结果 PND分别在2.5～20.0μmol/L及5.0～20.0μmol/L剂量范围内可分别促进体外培养SCs NGF及大脑衍生神经营养因子(BDNF) 的表达(P<0.05),在10μmol/L剂量对两者促进作用均明显(P<0.01);在2.5～20.0μmol/L剂量范围内PND可提高体外培养SCs胞内cAMP含量(P<0.05),而在10μmol/L剂量作用显著(P<0.01).结论 PND能明显促进体外培养SCs NGF、BDNF的表达和分泌;PND可提高SCs的胞内cAMP水平,并与PND促进体外培养SCs NGF、BDNF 表达之间存在相关性,提示其可能是PND提高体外培养SCs NGF、BDNF表达的调控机制及信号传导通路.
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Wistar大鼠胰岛细胞体外分离、纯化及鉴定
目的 探索Wistar大鼠胰岛分离纯化的佳条件.方法 采用肝胰管内灌注胶原酶消化分离胰岛及Ficoll 400密度梯度离心纯化.纯化后的胰岛经组织学染色、电镜及放射免疫法鉴定其特异性和活力.结果 组织学染色显示纯化后胰岛的活力和纯度分别在95%和85%以上.电镜显示纯化后的胰岛形态完整,包膜清晰,分泌颗粒丰富.放射免疫结果表明,低糖组和高糖组分泌胰岛素的浓度有显著差异,证明胰岛功能良好.结论 肝胰管内灌注胶原酶消化法是一种好的消化方法.影响胰岛收获量的因素很多,例如胰腺的充分扩张,胶原酶的浓度和活性以及消化的时间等.
