高效液相色谱-串联质谱法检测豆芽中的6-苄基腺嘌呤含量

6-苄基腺嘌呤（6-benzylaminopurine，6-BA）是一种人工合成的细胞分裂素，与植物内源性激素具有相似的结构及性质，为一种植物生长调节剂[1]。如果人体摄入过量会刺激皮肤黏膜，出现食道和胃黏膜损伤、恶心、呕吐等症状。目前，测定豆芽中6-BA的方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-大气压化学源质谱法及液相色谱—串联质谱法[2-4]等。本研究采用LC-MS/MS法来测定豆芽中的6-BA，提取试剂为酸化甲醇，以乙腈及水（含0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱，经过反相色谱分离后以多反应监测方式进行检测。

五子衍宗丸对少精子症模型大鼠的实验研究

目的 研究五子衍宗丸对腺嘌呤所致的少精子症模型大鼠的影响,探讨其改善男性少精子症的作用机理.方法 72只成年雄性大鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,阳性药组及五子衍宗丸大、中、小剂量组.以腺嘌呤溶液(250 mg/kg)每日灌胃,连续4周,造成大鼠少精子症模型.同日各受试药组按剂量灌胃给药,连续4周.取附睾尾作精子计数、形态学观察及精浆中性α-糖苷酶测定;取血测肝、肾功能及生殖激素;肝、肾及生殖器官称重并计算脏器指数及病理形态学观察.结果 与模型组比较,五子衍宗丸各剂量组精子数量和活动率显著升高,畸形率显著下降,并呈现量效关系;精浆中性α-糖苷酶显著升高;大、中剂量组肝、肾功能有显著改善;血清睾酮显著升高;附睾指数及前列腺+精囊指数显著增加.形态学观察显示:五子衍宗丸各剂量组肾脏病变明显改善.结论 五子衍宗丸对腺嘌呤诱发的少精子症模型大鼠有明显的改善作用.

海洋胶原肽延缓腺嘌呤所致大鼠慢性肾功能损伤

目的 研究海洋胶原肽对腺嘌呤所致大鼠慢性肾功能损伤的影响.方法 利用腺嘌呤100 mg/kg制备大鼠慢性肾功能损伤的模型,观察海洋胶原肽1.125 g/kg以及2.25 g/kg两个剂量对慢性肾功能损伤的影响.于实验的第0、1、3、5、8、12周检测各组大鼠血清肌酐、尿素氮的水平,收集大鼠24 h的尿量,计算肌酐清除率.实验期间观察大鼠的精神状态、体重增长的改变,实验结束时对肾脏组织超微结构的改变进行观察.实验持续12周.结果 实验5、8、12周时,模型组动物血清肌酐水平明显升高[(182.2±119.52)μmol/L、(308.17±88.37)μmol/L、(347.57±68.24)μmol/L],尿素氮水平也明显升高[(29.20±16.48)mmol/L、(63.03±18.68)mmol/L、(95.53±24.88)mmol/L],而肌酐清除率明显降低[(0.53±0.23)ml/min、(0.17±0.13)ml/min、(0.14±0.08)ml/min].海洋胶原肽2.25 g/kg干预组的血清肌酐和尿素氮水平在相应的时间点明显低于模型组大鼠血清的相应指标,而肌酐清除率则明显高于模型组[5、8、12周时血清肌酐水平:(105.60±11.84)ml/min、(175.40±73.93)ml/min、(240.14±71.53)ml/min;尿素氮水平:(23.62±3.89)mmol/L、(41.90±23.78)mmol/L、(72.93±26.12)mmol/L;肌酐清除率:(0.99±0.35)ml/min、(0.45±0.28)ml/min、(0.26±0.06)ml/min].肾脏超微结构较模型组的损伤明显减轻.海洋胶原肽1.125 g/kg干预组较模型组比较也有改善趋势,但血清肌酐、尿素氮水平及肌酐清除率的变化与模型组比较,差异没有统计学意义.结论 海洋胶原肽2.25 g/kg可以延缓腺嘌呤导致的大鼠慢性肾功能损伤的进程.

温脾汤对腺嘌呤诱导肾衰大鼠体内自由基增多的抑制作用

三七总皂苷防治大鼠腺嘌呤肾间质纤维化作用的实验研究

目的:观察三七总皂苷对大鼠腺嘌呤性肾间质纤维化的防治作用.方法:将Wister大鼠58只,随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、尿毒清组和三七总皂苷组.模型组、尿毒清组和三七总皂苷组大鼠,手术切除左侧肾脏,而假手术组手术取出左侧肾脏,剥离深包膜但不切除肾脏.模型组、尿毒清组、三七总皂苷组以腺嘌呤180mg/kg灌胃,并同时给予尿毒清和三七总皂苷治疗,实验在第2周和第4周时称重,并留取24h尿液.第4周末处死大鼠,留尿、取血测定尿、血Ca2+、P3-及Scr、BUN,取肾组织称重、福尔马林固定,并进行肾组织染色.用SPSS11.0进行统计学处理.结果:三七总皂苷组与模型组比较,可以明显改善肾间质纤维化大鼠的血Ca2+、P3+(P<0.05),提高血RBC、Hb水平,降低血清Scr、BUN(P<0.05),减少肾组织中腺嘌呤结晶的沉积,减轻肾脏病理损害.结论:三七总皂苷通过减少腺嘌呤性大鼠肾组织中腺嘌呤结晶的沉积、降低P3-,提高Ca2+、RBC、Hb水平,改善肾功能,从而对腺嘌呤性大鼠肾间质纤维化有明显的防治作用.

菊参化学成分及其药理活性探析

目的：研究菊参的化学成分并通过药理实验寻找活性成分，为进一步开发利用该药用资源提供依据。方法：在药理活性筛选结果指导下，采用硅胶柱色谱、大孔树脂柱色谱、高效液相色谱等方法对其化学成分进行分离纯化，应用UV、IR、MS、NMR等分析技术对化合物的结构进行鉴定。结果：菊参正丁醇萃取部分能延长小鼠常压缺氧状态下的存活时间（P<0.05）。并从中分离得到了2个生物碱类化合物---1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酸（玉）和腺嘌呤（域）。结论：化合物玉和域均为首次从菊参植物中分离获得。

变应性鼻炎肾阳虚复合豚鼠模型筛选与评价

目的：在卵清蛋白致敏变应性鼻炎豚鼠模型基础上，采用糖皮质激素、羟基脲、腺嘌呤3种不同阳虚诱导剂诱发，建立变应性鼻炎肾阳虚复合模型，以筛选建立理想而稳定的变应性鼻炎（Allergic Rhinitis，AR）病证结合动物模型。方法：采用卵清蛋白（Ovalbumin，OVA）诱导建立变应性鼻炎豚鼠模型，同时给予糖皮质激素、羟基脲或腺嘌呤建立肾阳虚复合模型，观察动物宏观体征及死亡情况、局部过敏症状，酶联免疫吸附法（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）法测血清中 sIgE 和组胺含量，苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin，HE）染色观察肾和睾丸组织形态学改变。结果：糖皮质激素、羟基脲和腺嘌呤3种致肾阳虚药物均可使动物表现出肾阳虚症状及体征、体重下降并具有一定的致死率。与空白组相比，糖皮质激素对肾脏和睾丸组织形态影响较小，羟基脲和腺嘌呤对肾脏和睾丸等形态结构影响较大。结论：对比3个肾阳虚复合模型，羟基脲复合组模型比激素复合组和腺嘌呤复合组模型更稳定，且死亡率较低，较为理想。不过变应性鼻炎病证结合动物模型的指标评价标准尚待进一步研究。

改良桂枝加大黄汤对慢性肾衰的试验

目的:观察改良桂枝加大黄汤对慢性肾衰大鼠的治疗作用.方法:用腺嘌呤诱发大鼠慢性肾衰竭模型,再用改良桂枝加大黄汤煎剂灌服4周.结果:血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)降低,肾脏病理也有改善,使肾小管及间质内结晶沉积物明显减少.结论:该方能延缓慢性肾衰,可作为辨证加减治疗慢性肾衰的基础方剂.

健脾排毒丸治疗腺嘌呤诱导大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究

目的:观察健脾排毒丸对腺嘌呤诱导大鼠慢性肾衰大鼠的保护作用.方法:腺嘌呤诱导大鼠慢性肾衰模型,用健脾排毒丸干预30d,以肾功能及肾脏病理为观察指标.结果:健脾排毒丸可降低慢性肾功能衰竭模型大鼠的尿量、尿蛋白,并明显降低血中肌酐、尿素氮及胆固醇含量,病理学显示可减轻模型鼠肾组织的损害.结论:健脾排毒丸对腺嘌呤诱导大鼠慢性肾功能衰竭有较好的治疗作用.

金匮肾气丸对腺嘌呤致不育大鼠精子质量与肾脏功能的影响

目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及肾功能的影响.方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、金匮肾气丸组.应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)含量;自动生化分析仪分析血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;HE染色、光镜观察肾脏组织变化,透射电镜观察实验大鼠睾丸中精子鞭毛密度.结果:金匮肾气丸能明显增加大鼠精子密度、活率及活动度,提高大鼠血清T含量,降低E2,LH,FSH含量;降低血清BUN和Scr含量.结论:金匮肾气丸可提高模型大鼠的精子质量,改善肾功能.其提高精子质量可能是通过刺激间质细胞产生T及降低异常升高的E2这一间接作用实现的.

不同提取工艺生殖营养方对腺嘌呤所致小鼠肾功能损伤的影响

目的:探讨不同提取工艺的生殖营养方对小鼠肾功能的影响.方法:100只雄性健康小鼠随机分为对照组、模型组、生殖营养方1(水提)、2(70％乙醇提)、3(40％乙醇提)共5组,模型与生殖营养方3组按300 mg· kg-1腺嘌呤灌胃造模,每周2次；造模同时生殖营养方组分别灌胃不同提取工艺的生殖营养方煎剂,按生药量折算为1.96 g·kg-1,每周5次,试验周期为2个月.结果:生殖营养方各提取物组显著降低腺嘌呤染毒小鼠血浆中的肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、乳酸(LD)含量及黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性(P＜0.05),显著降低肾组织中的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性(P＜0.05),并显著升高琥珀酸脱氢酶(SDH)活性及蛋白(Pr)浓度(P＜0.05).均以水提物的保护作用好.结论:不同提取工艺的生殖营养方对腺嘌呤染毒造成的小鼠肾功能的损伤有保护作用,以水提效果好.

腺嘌呤肾虚多尿大鼠肾脏CYP11B2 mRNA表达变化的研究

目的:通过研究腺嘌呤对醛固酮合成酶途径的影响,探讨其导致"肾虚多尿"的机制所在.方法:利用酶联免疫分析法分别检测正常组、腺嘌呤组动物血中皮质酮(Cort)、醛固酮(ALD)的含量;并采用RT-PCR的方法检测各组动物肾脏CYP11B2 mRNA的表达.结果:与正常组比较,腺嘌呤可明显减少大鼠血中Cort,ALD含量,并下调模型大鼠肾脏CYP11B2mRNA的表达.结论:腺嘌呤肾虚多尿大鼠血中Cort,ALD含量减少,肾脏CYP11B2 mRNA的表达下调,影响醛固酮合成酶途径,从而减少ALD的合成,导致水液代谢异常引发多尿,本实验研究结果从醛固酮合成酶的角度阐明了腺嘌呤导致"肾虚多尿"的作用机制.

生血宝颗粒对腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭贫血模型影响的实验研究

目的:探讨生血宝颗粒对大鼠肾功能衰竭贫血模型的影响.方法:大鼠长期口服腺嘌岭致慢性肾功能衰竭制备贫血模型,造模同时给予药物治疗.观察各组动物体重、食量、血红蛋白含量(Hb)、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及尿酸(UA)、血清铁与促红细胞生成素(EP0)含量.结果:生血宝可以使腺嘌呤造模后动物的体重与进食量增加,一定剂量的生血宝对慢性肾衰过程中的Hb下降有改善作用,并使血Cr与UA有一定程度的降低,血清铁含量增加.但对EP0含量的影响不明显.结论生血宝对腺嘌呤所致慢性肾衰贫血有一定治疗作用.但其作用机理有可能并不是通过提高血清EP0水平,而是与增加模型动物进食量、提高血清蛋白含量和一定程度降低血Cr与UA有关.

肾康对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭大鼠血清SOD、MDA及血流变学的影响

目的:观察肾康对慢性肾功能衰竭(CRF)大白鼠清除自由基能力,抗氧化能力,改善肾性贫血作用及血液流变学的影响.方法:用腺嘌呤(Adenin)法给大鼠造模,同时给肾康灌胃治疗,测血肌酐(Cr)计算24h肌酐清除率(Cc);测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、(MDA)含量,红细胞(RBC)数、血红蛋白(Hb)含量、血沉及血液流变学指标.结果:45g@kg-1(每ml含生药3g)肾康与模型对照组比较,24h肌酐清除率升高;血清T-SOD含量升高;CuZn-SOD含量升高;MDA含量下降;RBc数升高;红细胞压积增大,血沉减慢.结论:肾康有改善肾功能作用,具有清除氧自由基能力,有增强机体抗氧化的能力.

UPLC-MS/MS同时测定蛹虫草中6种成分的含量

目的:建立同时测定蛹虫草中腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素含量的方法.方法:液质联用技术,以甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相等度洗脱,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,通过电喷雾离子源,选择正离子模式多反应监测方式检测.结果:腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素的线性范围分别为37.5～1 200 μg·L-1(r=0.998 5),20 ～640 μg·L-1(r =0.996 4),40～1 280 μg·L-1(r=0.999 1),77.5 ～2 480 μg·L-1(r=0.993 5),27.5～880μg·L-1(r=0.992 4),90～2 880 μg·L-1(r=0.9937),加样回收率在92.1％～102.6％,RSD均＜8,1％.腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素在蛹虫草中的平均质量分数分别为268.33,11.28,185.66,1 421.44,10.67,812.21μg·g-1.结论:该法专属性强、快速灵敏,可用于蛹虫草中腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素的含量测定.

腺嘌呤与氢化可的松所致大鼠肾阳虚证模型比较研究

目的:比较腺嘌呤与氢化可的松所致大鼠肾阳虚证模型的特点.方法:将50只雄性SD大鼠随机分为对照组(10只)、腺嘌呤组(20只)、氢化可的松组(20只),模型组分别给予腺嘌呤混悬液灌胃和肌内注射氢化可的松,造模21d后,将各模型组大鼠均分为模型组和给药组,给药组给予肾气丸混悬液灌胃21d.处死大鼠后,检测下丘脑促肾上腺激素释放激素(CRH),血清肾上腺皮质激素(ACTH)、肾上腺皮质酮(CORT)、促甲状腺素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4),尿17-羟皮质类固醇(17-OHCS)及肾髓质水通道蛋白(AQP)1、AQP2含量,取肾组织进行HE染色.结果:与对照组比较,模型组大鼠下丘脑CRH、血清ACTH、CORT、T3、T4、TSH及尿17-OHCS含量显著下降(P＜0.01);腺嘌呤组大鼠肾髓质AQP1、AQP2含量显著下降,肾小球扩张,肾小管内有针状褐色结晶沉积,氢化可的松组这些指标无显著变化;肾气丸干预后,各给药组大鼠下丘脑CRH、血清ACTH、CORT、T3、T4、TSH及尿17-OHCS含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),腺嘌呤给药组大鼠肾髓质AQP1、AQP2含量显著升高,肾损伤明显改善.结论:腺嘌呤诱导的大鼠肾阳虚模型水液代谢紊乱明显,肾损伤明显氢化可的松诱导的大鼠肾阳虚模型表现为HPA轴受抑制.

在辨证指导下根据中药钙磷比值选药治疗慢性肾功能衰竭的实验研究

目的：探讨辨证论治原则下慢性肾衰(CRF)选药组方和提高疗效的统一衡量指标。方法：检测部分常用中药中钙磷含量，在辨证相同情况下按经验方肾衰Ⅰ号的组方原则，以药物中钙磷含量比值为统一衡量指标，精选药物组成肾衰Ⅱ号；再以其治疗腺嘌呤诱导的CRF大鼠，并与肾衰Ⅰ号、尿毒清对比。结果：在改善血钙磷、CT方面，肾衰Ⅱ号优于肾衰Ⅰ号，尿毒清(P<0.05～0.01)；改善肾功能和24h尿蛋白肾衰Ⅱ号，疗效接近肾衰Ⅰ号，尿毒清(P>0.05)；降低血ET，升高NO肾衰Ⅰ、Ⅱ号优于尿毒清(P>0.05)，肾衰Ⅰ、Ⅱ号间无明显差异(P>0.05)。结论：在辨证前提下，根据药物中钙磷含量比值选药组成的新方总体疗效优于经验方；药物中的钙磷含量可做为CRF辨证选药、优化组方的客观化衡量指标。

肾阳虚变应性鼻炎动物模型的研究

目的 研究腺嘌呤制作肾阳虚变应性鼻炎动物复合模型,探讨肾阳虚对变应性鼻炎(AR)的影响.方法 分别用糖皮质激素、腺嘌呤和卵清蛋白(OV)建立肾阳虚AR豚鼠复合模型,观察动物鼻部症状、PCA试验、鼻腔黏膜嗜酸细胞计数和肾、睾丸组织学的变化.结果 肾阳虚状态下豚鼠对致敏原的应答反应较对照组强烈,运用腺嘌呤造模豚鼠鼻痒、喷嚏、流涕等变应性症状为突出.结论 肾阳虚体质易致AR产生,或协同加重鼻黏膜的变态反应性程度;传统糖皮质激素制作肾阳虚AR模型抑制AR症状欠客观,腺嘌呤制作肾阳虚AR模型是更好选择.

除湿化瘀方防治大鼠高尿酸血症的研究

目的本实验采用腺嘌呤(Adenine)、乙胺丁醇灌喂大鼠诱导高尿酸血症动物模型,观察除湿化瘀方对其的影响.方法选择大鼠作为模型动物,以腺嘌呤、乙胺丁醇为造模剂,塑造高尿酸血症动物模型,动态检测大鼠血尿酸等生化指标,观察除湿化瘀方对该模型动物血清尿酸水平的影响.结果除湿化瘀方高剂量给药7、14d可明显降低腺嘌呤、乙胺丁醇诱发的大鼠血尿酸升高,第7天可明显降低黄嘌呤氧化酶水平,肾功能损害明显低于别嘌呤醇组.结论除湿化瘀方有明显降尿酸作用,其机理有待进一步研究.

不同品系栝楼果皮腺嘌呤和鸟苷含量比较

目的：比较不同品系栝楼果皮腺嘌呤、鸟苷含量，为选育良种和评价瓜蒌皮药材质量提供依据。方法采用高效液相色谱法测定3个品系栝楼果皮中腺嘌呤、鸟苷的含量，色谱柱为Waters AtlantisT3-C18（4.6 mm×150.0 mm，5μm），流动相为甲醇-水，检测波长254 nm。结果品系Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ栝楼果皮腺嘌呤含量分别为0.1594、0.1596、0.1341 mg/g，鸟苷含量分别为0.0971、0.1279、0.0934 mg/g。结论不同品系栝楼果皮鸟苷含量存在较大差异，以品系Ⅱ果皮中的腺嘌呤、鸟苷含量较高，提示选育良种是提高瓜蒌皮药材腺嘌呤、鸟苷含量的有效途径。