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  • S型氯代甘油醇对大鼠精子运动和超活化抑制作用研究

    作者:张皓;郑唯韡;王霞;刘莉;屈卫东

    目的 研究S型氯代甘油醇( SACH)对大鼠精子运动和超活化的影响和可能机制.方法 20只成熟雄性SD大鼠随机分为4组,分别给予0、2.5、5.0和10mg/kg BW SACH,连续灌胃染毒52天.取附睾尾精子,获能条件下培养5h,以计算机辅助精子分析系统检测精子运动和超活化运动,同时检测精子特异的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDS)活性、三磷酸腺苷(ATP)和环磷酸腺苷(cAMP)水平,观察己酮可可碱(PTF)对SACH的拮抗作用.结果 SACH染毒组大鼠精子曲线运动速率(VCL)、平均路径速率(VAP)、直线运动速率(VSL)和精子头侧摆幅度(ALH)与对照组相比受到显著抑制(P<0.01),运动直线性( LIN)显著增强(P<0.01).SACH使VCL≥400μm/s或LIN≤20%的比例显著减少(P<0.01和P<0.05),表明精子超活化受抑制.SACH显著抑制GAPDS活性,ATP和cAMP水平也随染毒剂量增加呈下降趋势.PTF可改善精子cAMP水平,部分缓解精子运动和超活化的抑制程度.结论 SACH抑制大鼠精子GAPDS活性导致ATP和cAMP水平下降,可能是影响精子运动和超活化的重要机制.

  • 碘缺乏对大鼠仔鼠海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白表达的影响

    作者:董静;刘万洋;王毅;魏薇;陈杰

    碘是合成甲状腺激素所必需的微量元素,人类生存环境缺碘可造成碘缺乏病(iodine deficient disorder,IDD).母体甲状腺激素的缺乏可直接导致子代脑发育关键期甲状腺激素供应不足,致使子代生长发育,尤其是中枢神经系统的发育分化障碍[1].

  • 不同寒热药性中药对酵母致热大鼠的体温调节作用研究

    作者:万红叶;孔祥英;杨悦;李晓敏;林娜

    目的 观察比较四种典型寒、热药性中药对酵母致热大鼠体温的调节作用及相关因子的影响.方法 108只SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常组、模型组、大黄组、黄连组、吴茱萸组和高良姜组各18只,背部皮下注射酵母混悬液建立大鼠发热模型.各组大鼠分别于造模前1h、造模后3.5 h灌胃给药,正常组、模型组给予蒸馏水灌胃;其余各组给予相应药物水煎液灌胃.分别于造模后4h、8h和12 h取血和下丘脑,通过酶联免疫吸附法检测血浆和下丘脑匀浆液中前列腺素E2 (PGE2)、环磷酸腺苷(cAMP)和精氨酸加压素(AVP)的含量.结果 注射酵母后4h,模型组大鼠体温开始升高,8h达高峰,大黄、黄连可显著降低发热大鼠体温(P<0.01或0.05);注射酵母后8h,模型组大鼠下丘脑的PGE2和cAMP含量[分别为(31.55±9.88) pg/mg、(0.17±0.03) pmol/mg]增高,血浆中AVP水平(0.14±0.02) pmol/ml降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05).大黄和黄连可降低酵母致热大鼠下丘脑PGE2[分别为(113.65±18.60) pg/mg、(127.72±15.75) pg/mg]、cAMP[分别为(0.69±0.08) pmol/mg、(0.74±0.10) pmol/mg]含量,增加发热大鼠血浆中AVP含量[分别为(1.08±0.12) pmol/ml、(0.91±0.01) pmol/ml],与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01或0.05);吴茱萸和高良姜对发热大鼠的体温和相关因子均无明显影响.结论 寒性中药大黄、黄连能降低酵母致热大鼠的体温,其作用机制可能与调节下丘脑中PGE2、cAMP、血浆中AVP因子的含量有关;热性中药吴茱萸、高良姜无相关作用.

  • 清热散瘀解毒方对EP性发热大鼠血清、下丘脑组织中cAMP含量的影响

    作者:李祖金;樊静;陈孟溪;彭燕芬;徐晓丹;肖光辉

    目的:通过观察清热散瘀解毒方对EP性发热大鼠cAMP的影响,探讨该方的退热机理.方法:应用随机分组方法将大鼠分为清热散瘀解毒方组(12只)、萘普生药物组(12只)、模型组(12只),每组注射2,4-二硝基苯酚进行小鼠非感染发热造模,然后分别灌入中药、西药、生理盐水(模型组和空白组).2h后测定体温及血清中cAMP的含量,比较分析不同药物对EP性发热大鼠体温的影响以及cAMP含量的变化.结果:中药组和西药组灌药2h后,体温明显低于模型组(P<0.05);中药组、西药组血清和下丘脑cAMP含量明显低于模型组(P<0.05).结论:清热散瘀解毒方能降低EP性发热大鼠体温,其作用机理可能与下调机体血清和下丘脑组织中cAMP含量相关.

  • 远近配穴电针对自体髓核移植大鼠脊髓p38丝裂原活化蛋白激酶及环磷酸腺苷表达的影响

    作者:龙贤齐;王旭;任秀君;于雪;图娅;唐玉秀

    目的:探讨远近配穴针刺对自体髓核移植腰痛大鼠机械缩爪阈和脊髓中p 38丝裂原活化蛋白激酶(p 38 MAPK)及环磷酸腺苷(cAMP)表达的影响,为理解不同针刺处方作用机制提供实验依据.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、假手术组、全穴组、近穴组和远穴组,每组13只,采用自体髓核移植方法建立腰痛模型.全穴组电针双侧腰5(L 5)“夹脊”“大肠俞”“委中”和“昆仑”,近穴组电针双侧L5“夹脊”和“大肠俞”,远穴组电针双侧“委中”和“昆仑”.电针治疗每天1次,每次20 min,连续治疗7 d.于术前1 d和术后3、5、7 d观察大鼠行为学和机械痛阈值;于术后8 d,取脊髓L 4-L 6节段,用免疫组织化学法和免疫蛋白印迹法测定p 38 MAPK表达,用酶联免疫吸附法测定cAMP含量.结果:与正常组相比,模型组在术后3 d表现出明显痛觉过敏,持续至术后7 d;与模型组比较,3个针刺组机械痛阈变化百分率提高(P<0.01);全穴组、近穴组痛阈升高趋势优于远穴组(P<0.01,P<0.05).与正常组相比,模型组脊髓p 38 MAPK表达水平显著上升(P<0.01);与模型组相比,近穴组、远穴组、全穴组p 38 MAPK表达水平显著下降(P<0.01,P<0.05),以近穴组为明显,全穴组次之.与正常组相比,模型组脊髓cAMP表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,近穴组、全穴组cAMP表达下降(P<0.01,P<0.05).结论:远部取穴、近部取穴和远近配伍取穴电针均能对内源性髓核刺激导致的腰痛模型大鼠7 d内痛阈和脊髓p 38 MAPK、cAMP(除远穴组外)表达产生调节作用,近部取穴和远近配伍取穴调节作用更加明显.

  • 加味逍遥汤对抑郁大鼠海马cAMP,PKA,PKC的影响

    作者:丁国安;余国汉;伍远菲;黄俊东;梁绍才;李佑辉;黄雪君;梁富成

    目的:从信号转导通路上重要调节因子cAMP(环磷酸腺苷),PKA(蛋白激酶A)及PKC(蛋白激酶C)的角度,探讨抑郁大鼠模型受体后信号转导的变化及加味逍遥汤的干预作用.方法:将SD大鼠随机分为6个组,每组10只,即正常组、模型组、氯米帕明组(13.5 mg·kg-1)、加味逍遥汤高、中、低剂量组(生药11.7,5.85,2.925 g·kg-1).造模同时各组按10 mL·kg-1体重给药,正常组、模型组给予等量的生理盐水,每日1次,连续24 d.末次给药后1h,快速断头处死,在冰上剥离大脑,分离海马迅速放入冻存管,投入液氮中,随后置于-70℃低温冰箱保存备用.按ELISA试剂盒说明用酶标仪检测大鼠海马cAMP,PKA及PKC的含量变化.结果:与模型组比较,各组均能增加大鼠海马cAMP,PKA及PKC的含量,差异有显著性意义(P<0.05),加味逍遥汤各剂量组cAMP,PKA及PKC的含量增加,随剂量增加作用加强,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05);加味逍遥汤高、中剂量组与氯米帕明组相比cAMP,PKA及PKC含量差异没有显著性意义.加味逍遥汤高、中剂量组与低剂量组相比,差异有显著性意义(P<0.05).结论:加味逍遥汤可能是通过调节受体后cAMP,PKA及PKC信号传导通路发挥抗抑郁作用.

  • 当归对阴虚哮喘小鼠模型的影响

    作者:王志旺;李荣科;刘雪枫;妥海燕;程小丽;任远

    目的:探讨当归对阴虚哮喘BALB/c小鼠的治疗作用.方法:84只BALB/c小鼠随机分为7组,正常组,模型组,地塞米松组(地塞米松,0.5 mg·kg-1),当归高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg-1)及联合组(当归4 g·kg-1与地塞米松0.5 mg·kg-1联合用药),除正常组外,其余各组通过注射卵清白蛋白(OVA)致敏、雾化吸入OVA激发的方法复制哮喘BALB/c小鼠模型,实验后期ig甲状腺素来复制阴虚哮喘小鼠模型;在当归的干预下观测当归对小鼠体重、肺液清除功能、自主活动、哮喘行为学、肺功能、血清环磷酸腺苷(cAMP)与环磷酸鸟苷(cGMP)及肺脏病理学的影响.结果:与正常组比较,模型组动物肺脏含水量与体重显著下降,小鼠自主活动、进食量与饮水量明显升高,cAMP水平明显升高,cGMP水平明显降低,cAMP/cGMP水平明显升高,小鼠潮气量明显降低,呼吸频率与哮喘行为学综合评分明显升高,肺组织病理学变化较为明显(P <0.05,P<0.01);与模型组比较,当归高、中、低剂量组及联合组在维持阴虚哮喘模型肺组织含水量与体重的同时可减少小鼠自主活动、进食量与饮水量,降低cAMP水平、提高cGMP含量而缓解cAMP/cGMP失衡状态(P <0.05,P<0.01),改善阴虚哮喘模型的阴虚症状;当归可增加阴虚哮喘小鼠潮气量,降低呼吸频率与哮喘行为学综合评分,缓解肺组织病理学变化(P <0.05,P<0.01),改善阴虚哮喘模型的哮喘症状.结论:当归对阴虚哮喘的阴虚证与哮喘有一定的治疗作用.

  • 乌药提取物对胃实寒模型大鼠cAMP,cGMP,GAS,MTL水平的影响

    作者:聂子文;郭建生;陈君;张猛;刘红艳

    目的:观察乌药对胃实寒模型大鼠血浆中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)的影响.方法:模型组大鼠采用寒冷刺激法造模3d制备胃实寒模型,按前后体重差随机分成8组,分别为模型对照组、吗丁啉组、红花水煎液组、乌药水煎液组、乌药挥发油组、乌药醇提液组、乌药水提乙醚萃取物组、乌药醇提乙醚萃取物组,乌药各提取物给药剂量均为生药1.64 g·kg-1,第4d造模后10 min,给药组ig相应药液10 mL·kg-1,空白对照组及模型对照组给予等体积蒸馏水,1h后进行第2次给药,以酚红法测定胃排空率.采用酶联免疫法测定大鼠血浆中cAMP,cGMP,MTL和血清GAS的含量.结果:与正常组比较,模型组胃排空率显著降低(P<0.05),cGMP,cAMP/cGMP降低(P<0.05),cAMP,GAS,MTL值无显著差异.与模型组比较,乌药水煎液、乌药挥发油、乌药醇提乙醚萃取物能明显抑制胃排空率(P<0.05或P<0.01);乌药水煎液和乌药挥发油能明显升高cAMP含量(P<0.01),乌药水煎液、乌药挥发油、乌药醇提液、能够明显降低cGMP含量(P<0.0l),乌药水煎液、乌药挥发油、乌药醇提乙醚萃取物能明显升高cAMP/cGMP(P<0.01).结论:乌药水煎液、挥发油和醇提乙醚萃取物组能够明显抑制胃排空,明显升高cAMP/cGMP.

  • 甘附冲剂抗大鼠心动过缓及其作用机制的研究

    作者:李东;陈志武;岑德意;王迪生

    目的:探讨甘附冲剂抗大鼠心动过缓的可能作用机制.方法:用普萘洛尔(Pro)制备大鼠心率减慢模型;测定大鼠心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量.放射免疫法测定心肌组织中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET)的含量.结果:30,90,270mg·kg-1甘附冲剂可显著抑制Pro引起的大鼠心率减慢(P<0.05或P<0.01),和心肌组织中MDA含量的升高,提高大鼠血浆CGRP的含量.并可显著降低心肌组织中cGMP的含量,提高cAMP/cGMP比值(P<0.05或P<0.01);90,270 mg·kg-1甘附冲剂可增强大鼠心肌组织中SOD和GSH-PX的活性(P<0.05);甘附冲剂各剂量对大鼠心肌组织中cAMP含量及大鼠血浆ET含量并没有明显影响.结论:甘附冲剂抗大鼠心动过缓的作用可能与抗自由基、升高cGRP及调节cAMP和cGMP的平衡有关.

  • 大鼠虚热证模型的建立与评价

    作者:叶耀辉;张博文;郑红梅;刘波;于欢;史毅;龚千锋

    目的:对热性中药致虚热证模型的复制和评价进行探究.方法:使用不同剂量热性中药附子、干姜、肉桂灌胃大鼠.每天观察大鼠的活动状态、毛发光泽、爪色、二便等一般状况,每天定时测定大鼠的肛温、粪便量、尿液量、饮水量、饮食量,并于体液消耗量出现明显差异时采集血液和相关组织器官,测定血清三碘甲状腺原氨酸(T3),甲状腺素(T4),血浆环磷酸腺苷(cAMP)及环磷酸鸟苷(cGMP)含量的变化和相关脏器指数.结果:与空白组比较,各模型组大鼠饮水量、体液消耗量大多数升高,动物出现虚热证的证候;且血清中T4含量呈增高趋势,T3/T4降低.模型低剂量组和模型中剂量组的cAMP和cGMP含量与空白组比较大多数显著升高,而模型高剂量组含量则有所降低.结论:灌胃热性中药可以复制出虚热证模型,体液消耗量的增加对虚热证模型复制有一定的指导意义.

  • 桂枝汤主要成分对PGE2刺激的胚胎大鼠下丘脑神经cAMP-PKA的影响

    作者:刘敏;谭余庆;黄敬耀;霍海如;李兰芳;郭淑英

    目的:cAMP-PKA(环磷酸腺苷-蛋白激酶A)是细胞内非常重要的信号转导途径.本实验研究了桂枝汤四个主要组成成分,桂皮酸、桂皮醛、芍药苷及甘草次酸,不同组合对PGE2(前列腺素E2)刺激的胚胎大鼠下丘脑神经细胞内cAMP-PKA水平的影响.方法:用放免法测定不同组合成分作用的细胞cAMP含量和PKA活性.结果:各成分作用时,桂皮酸(0.625μg/mL)、桂皮醛(10、0.625μg/mL)、芍药苷(0.625μg/mL)和甘草次酸(10μg/mL)对细胞cAMP含量或PKA活性有显著的降低作用;在27组不同成分的组合中,有19组对细胞cAMP含量、16组对细胞PKA活性有显著的降低作用.结论:桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草次酸的不同浓度组合可能与桂枝汤体温双向调节作用的物质基础有关,其作用可能与调节cAMP-PKA通路有一定的关系.

  • 醒胰降糖灵对实验性糖尿病大鼠臀大肌中环化腺苷酸、环化乌苷酸含量的影响

    作者:李荣科;李应东;丁文君;王志旺;骆文郁

    目的:探讨醒胰降糖灵对实验性糖尿病大鼠臀大肌中环化腺苷酸(cAMP)、环化乌苷酸(cGMP)含量的影响.方法:用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射65mg·kg-1,并连续7 d皮下注射甲状腺素诱发大鼠实验性糖尿病模型,至14 d,选取成模大鼠以醒胰降糖灵干预21 d后,用放射免疫方法检测大鼠臀大肌中cAMP、cGMP的含量.结果:与正常组比较,模型组大鼠臀大肌中cAMP、cGMP含量有显著下降(P<0.01),醒胰降糖灵组与造模组比较有明显升高(P<0.01).结论:醒胰降糖灵可阻抑实验性糖尿病大鼠臀大肌中cAMP、cGMP含量的下降,其作用机制可能与醒胰降糖灵参与胰岛素受体后水平信息转导有关.

  • 6味山姜属中药对胃实寒证大鼠胃组织PDE,cAMP,cGMP,cAMP/cGMP的影响

    作者:黄燕琼;秦华珍;柳俊辉;王晓倩;刘磊;余腾飞;刘颖;李文强;谭喜梅

    目的:研究高良姜、草豆蔻、红豆蔻、大高良姜、建砂仁、益智6味山姜属中药对胃实寒证模型大鼠胃组织磷酸二酯酶(PDE)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、cAMP/cGMP的影响,揭示6味山姜属中药所含挥发油与温中散寒功效的相关性.方法:实验分2批进行,第1批取SD雄性大鼠160只分为16个组:模型Ⅰ组,模型Ⅱ组,阳性对照组,高良姜、草豆蔻、红豆蔻3味药物各个挥发油高、低剂量组、去挥发油水液高、低剂量组;第2批除了观察药为大高良姜、建砂仁、益智挥发油高、低剂量组、去挥发油水液高、低剂量组外,其余分组均同第1批.采用灌服2~3℃寒凉药(石膏、知母、黄柏、龙胆草,给药剂量为36g·kg-1,2次/d)加冷冻的方法制造大鼠胃实寒证模型;分别予以6味药物挥发油、去挥发油水液,低剂量组给药剂量为20g·kg-,高剂量组给药剂量为60 g·kg-1,阳性对照药选用附子水煎液,剂量为8 g·kg-1;每隔12 h给药1次,连续给药3次.测定大鼠胃组织PDE,cAMP,cGMP含量,计算cAMP/cGMP.结果:①对磷酸二酯酶(PDE)的影响:与正常组相比,第1,2批模型组胃组织中PDE明显升高(P<0.05或P<0.01),分别为32.27,52.80 nmol·L-1.高良姜、草豆蔻、红豆蔻、大高良姜、益智的挥发油高、低剂量组对于模型组大鼠胃中PDE有显著的降低作用(P<0.05或P<0.01),大高良姜去挥发油高剂量组对其也有一定的降低作用,但无显著性差异;②对cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响:与空白组比较,第1,2批模型组胃组织中cAMP的浓度明显降低(P<0.05),分别为0.68,0.81 nmol·L-1.6味中药挥发油高、低剂量组与模型组相比,cAMP浓度均明显升高(P <0.05或P<0.01),cGMP无明显变化,cAMP/cGMP增大(P<0.05或P<0.01);高良姜、草豆蔻、建砂仁去挥发油高剂量组对cAMP浓度也有一定的影响,但无显著性差异.结论:6味中药所含挥发油可升高胃组织中cAMP的含量、cAMP/cGMP及降低PDE的含量,其中部分中药的去挥发油高剂量组也有相似的影响,揭示了6味山姜属中药所含的挥发油与温中散寒功效有密切的相关性,且发现此6味药的去挥发油提取液对部分检测指标也有良好的改善作用,揭示其功效也与其所含的其他成分有关.

  • 玉屏风散联合督脉铺灸对变应性鼻炎患者血清IL-6,cAMP,cGMP的影响

    作者:李泳文;孙麦青

    目的:探讨玉屏风散联合督脉铺灸对变应性鼻炎(AR)患者血清白细胞介素-6(IL-6),环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP)的影响.方法:选取2013年6月至2016年6月河南省中医院收治的AR患者100例,依据治疗方法分为铺灸组和玉屏风组,每组50例,铺灸组患者给予西替利嗪+督脉铺灸治疗,玉屏风组患者在此基础上给予玉屏风颗粒治疗,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6,cGMP,cAMP水平,分析所有患者治疗前后血清IL-6,cGMP,cAMP水平和喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒消失时间及治疗疗效、不良反应、复发等情况.结果:铺灸组和玉屏风组治疗后血清IL-6,cGMP,cAMP水平明显低于本组治疗前,玉屏风组治疗后血清IL-6,cGMP水平明显低于铺灸组,玉屏风组治疗后血清cAMP水平明显高于铺灸组(P<0.05);玉屏风组喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒消失时间明显低于铺灸组,玉屏风组治疗有效率明显高于铺灸组(P<0.05),两组均无严重不良反应发生;随访1年期间,玉屏风组复发率明显低于铺灸组(P<0.05).结论:玉屏风颗粒联合督脉铺灸治疗可有效提高AR患者的近远期疗效,可能与其更有效调节机体免疫功能平衡有关,且其具有良好的安全性,值得临床作进一步推广.

  • 6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

    作者:郭文峰;杨伟鹏;王怡薇;王彦礼;胡灿;温鹏;高小玲;陈蔚文

    目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响.方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平.结果:6-姜酚处理组Caco-细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常对照组(P<0.05),后者分别为(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/孔;6-姜酚与Rp-8-Br-cAMP合用组120 min时点为(6.92±0.67)μmol/孔,明显低于相应时点单用6-姜酚组(P<0.05);6-姜酚处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值6-姜酚组为(0.317±0.022),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);荧光定量PCR结果,6-姜酚能上调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达,但与cAMP抑制剂合用后该抑制作用被阻断.结论:6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系.

  • 理中汤对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

    作者:郭文峰;杨伟鹏;王怡薇;王彦礼;胡灿;温鹏;高小玲;陈蔚文

    目的:观察理中汤对Caco-2细胞肽转运载体(PepT1)转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响.方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予理中汤处理,并设立空白及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平.结果:理中汤处理组Caco-2细胞15,30,60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(4.52±0.57),(6.34±0.57),(7.29±0.64),(8.23±0.67)μmol/孔,高于空白对照组(P<0.05),后者分别为(2.42±0.68),(3.15±0.76),(5.62±0.20),(6.54±0.54)μmol/孔;理中汤与Rp-8-Br-cAMP合用组15,30,120 min时点分别为(2.68±0.46),(4.13±0.46),(6.73±0.43)μmol/孔,明显低于相应时点单用理中汤组(P<0.05);理中汤处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值理中汤组为(0.326±0.031),高于空白对照组(O.220±0.019)(P<0.01);理中汤对Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达未见明显作用,但与cAMP抑制剂合用,理中汤能逆转Rp-8-Br-cAMP下调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达的作用.结论:理中汤具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系.

  • 太阴病(脾阳虚证)欲解时环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷变化及理中汤干预的影响

    作者:吴萍;李杰;张发斌;张广梅;赵协慧;王仁嫒;陈湘宏;杨艳;刘占厚

    目的:探讨太阴病(脾阳虚证)“欲解时”环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)变化及理中汤干预的影响.方法:大鼠随机分为空白组、模型组和药物组,模型组和药物组以大承气汤4.0mL/200g灌胃造模成功后,药物组以理中汤3.5m L/200g灌胃干预,空白组、模型组等量0.9%氯化钠溶液灌胃,连续12d于子时、卯时、午时、酉时随机抽取空白组大鼠8只、模型组和药物组各10只,称重后断头取血,分离血清,酶联免疫法测定血清cAMP、cGMP含量.结果:空白组同一天不同时辰cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比较差异均无统计学意义;模型组大鼠cAMP含量、cAMP/cGMP在造模后第1~6天的子时、午时、卯时、酉时均低于空白组(P<0.05),药物组高于空白组(P<0.05);第7~12天各组趋于一致.结论:cAMP、cGMP的变化主要反映了太阴病(脾阳虚证)发展中能量代谢的变化,是其病理变化的物质基础,不具有时间生物学调控意义.

  • 温阳消饮法对胸腔积液大鼠小肠AQP4及cAMP-PKA信号通路表达的影响

    作者:杨子庆;张琦;徐路;任小彤;李雷兵;罗炽琼;徐建虎;李林鲜;肖桦

    目的:探讨温阳消饮法对胸腔积液模型大鼠小肠水通道蛋白4 (AQP4)的表达、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)含量的影响,阐释该法的作用机制.方法:用计算机随机分组方法,将Wistar成年大鼠随机分为温阳消饮组、去桂消饮组、模型对照组、空白对照组,每组10只.除K组外,其余3组动物以1%角叉菜胶胸腔注射建立大鼠胸腔积液(悬饮)模型,造模24h后拍摄X线胸片进行模型评价.于造模成功后2h各组予相应药物灌胃,每天1次,连续5d.灌胃结束后处死各组大鼠,采取小肠组织,用蛋白印迹法检测AQP4,用酶联免疫吸附法检测cAMP、PKA.结果:①AQP4表达:与空白对照组比较,模型对照组显著降低(P<0.05);与模型对照组比较,温阳消饮组、去桂消饮组均显著增高(P<0.05);②cAMP含量:各组比较,其差异均无统计学意义;③PKA含量:与K组比较,其余各组均显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,温阳消饮组、去桂消饮组的差异无统计学意义.结论:在胸腔积液模型中,大鼠小肠上段AQP4的表达降低,而温阳消饮法可上调之,这可能与该法治疗水饮病的作用机制有关.

  • 香芩解热颗粒对酵母致热大鼠的解热作用

    作者:聂坚;胡文敏;李刚;柯瑾;熊磊

    目的:通过复制酵母型发热实验动物模型,初步探讨香芩解热颗粒的解热作用机制.方法:将进行体温筛选后的60只大鼠,随机分为6组,即对照组、模型组、布洛芬组以及香芩解热颗粒低、中、高剂量组.利用酵母混悬液制作大鼠感染性发热模型,造模前预防性给药2次(间隔4h),造模4h后第3次给药,监测造模后1、4、6、8、10h肛温,应用酶联免疫法(ELISA)测定大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α (TNF-α)及下丘脑PGE2、cAMP含量.结果:模型组大鼠在造模后的1-10h内体温均显著高于对照组(P<0.05),造模6h达到峰值;与模型组比较,造模6h后所有给药组大鼠体温均显著降低(P<0.05).ELISA结果显示:与对照组比较,模型组大鼠血清IL-1 β、TNF-α及下丘脑PGE2、cAMP含量显著升高(P<0.05);与模型组比较,布洛芬组及香芩解热颗粒高剂量组大鼠血清IL-1β、TNF-α以及下丘脑PGE2、cAMP含量显著下降(P<0.05),其中香芩解热颗粒高剂量组下丘脑PGE2、cAMP与布洛芬组无显著差异.结论:香芩解热颗粒对酵母型发热大鼠有明显的退热趋势,其退热作用机制可能与下调内生致热原及下丘脑PGE2、cAMP水平有关.

  • 养阴益气活血方活性物质对脑缺血性损伤的保护作用

    作者:别晓东;万海同;陈悦青

    目的:探讨养阴益气活血方活性物质对脑缺血性损伤保护作用的研究.方法:采用四血管阻断法造成大鼠全脑缺血模型,观察脑匀浆液丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、环磷酸腺苷(cAMP)及血浆皮质醇(F)、全血谷光甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力的含量变化及相应的病理改变.结果:养阴益气活血方在显著降低缺血再灌注大鼠脑组织中MDA、NO、ET、cAMP含量的同时,提高SOD、GSH-PX的活性.结论:养阴益气活血方能抑制脂质过氧化反应,提高机体抗氧化能力,对微血管和细胞损伤产生保护作用,因此对脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用.

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