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核酸与ELISA检测联合应用于血液筛查的效果
目的 分析核酸与ELISA方法联合检测汉中地区无偿献血者的血液标本的结果,评估核酸检测技术(NAT)应用于献血者血液筛查中的必要性和重要性.方法 使用ELISA检测对2015年8月1日至2017年7月31日汉中地区无偿献血者的80869份标本进行检测,检测出的阴性标本用全自动核酸检测系统进行核酸检测.结果 80869份血液标本中,1859份标本ELISA法检测结果为阳性,不合格率为2.30％;79010份标本ELISA法检测结果为阴性,对其进行核酸检测,有反应性的标本103份,其中,HBV-DNA阳性标本100份,阳性率为0.13％;检出HCV-RNA阳性标本3份,阳性率为0.004％;未检出HIV-RNA阳性标本.结论 NAT能在ELISA检测阴性的献血者标本中筛查到有反应性的标本,有效缩短血液病毒的"窗口期",进一步提高血液安全性.
关键词： ELISA检测 核酸检测技术(NAT) 血液筛查 血液安全 -
ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的分析
目的：探讨ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的原因以及所要采取的对策。方法别使用试剂检测筛查血液标本，然后根据检测试剂说明书的要求，在全自动样本处理系统控制微机上编辑程序，程序包括初检和复检。使用一次性探针和永久性探针的污染情况对比，再使用2种标本进行3孔复检，在进行判断是否为强阳性所引起的拖带污染现象。结果整个检测过程中，以HIV检测为例所检测的7324份血液检测中出现拖带假阳性现象的为2例，而2013年1月-2014年5月间共检测血液标本66085份，没有出现拖带假阳性现象。结论一次性加样探针的使用能够很好的减少甚至杜绝拖带假阳性污染现象的发生，在检测过程中由于不同的厂家的试剂有所区别，在设计加样参数时应该遵循科学合理的原则，检测仪器要定期进行检验维修，校准，同时对于血液标本要严格质量控制，提高检测的准确性和安全性，使得全自动检测设备的优势充分。
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荧光RT-PCR检测与ELISA检测在戊肝临床诊断效果的比较分析
目的 探讨和比较荧光RT-PCR检测与ELISA检测在戊肝临床诊断的效果.方法 从我院健康体检中心2013年1月至2016年1月的50500血清标本中随机选择100份作为研究标本.通过采用酶联免疫法对戊肝抗体的检测,然后再通过荧光RT-PCR检测法进行确诊,观察和比较两组检测方法的检查结果.结果 阳性一致率为55％,阴性一致率为100％,总一致率为75％,Kappa值为0.59(0.4＜ Kappa≤0.75),表示两者一致性一般.ELISA阳性检出率为30％,PCR阳性检出率为50％,PCR阳性检出率明显高于ELISA,数据比较差异具有统计学意义,P=0.000 ＜0.005.结论 荧光RT-PCR检测和ELISA检测在戊肝的诊断中都具有一定的检查准确度,同时荧光RT-PCR检测的阳性检出率明显高于ELISA检测.由于ELISA检测容易受到各方面因素的影响而发生漏诊的情况,因此建议对于ELISA检测出现可疑的标本,使用RT-PCR进行确诊,使更具可靠性.
关键词： 荧光RT-PCR检测 ELISA检测 戊肝 临床诊断 -
2010-2013年中国南京地区无偿献血人群HBV、HCV、HIV感染情况分析
本研究在于了解中国南京地区无偿献血者HBV、HCV和HIV感染及分布情况,探讨本地区人群的传染病流行趋势,为献血宣传和招募工作提供指导意见.将2010.6.10-2013.6.9三年间南京地区无偿献血者199777人次的血液标本,采用ELISA法检测HBsAg、抗-HCV和抗-HIV,对三项阴性标本再采用NAT联合检测HBV-DNA、HCV-RNA和HIV-RNA,对检测结果进行统计分析,并将抗-HIV初筛反应性标本送南京市疾病预防控制中心确证.结果表明,3年中无偿献血者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV感染率分别为0.45％,0.28％,0.11％;NAT呈反应性为0.07％;确证抗-HIV阳性32例,其中男性30例(6例为再次献血者),女性2例;不确定3例,其中男性2例,女性1例.经统计学处理证实,初次献血者与重复献血者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测不合格率差异有统计学意义.结论:2010.6.10-2013.6.9南京地区无偿献血人群中抗-HCV、抗-HIV阳性率呈逐年下降趋势,HBsAg、NAT检测不合格率随年龄段增加而增加;抗-HCV、抗-HIV检测不合格率随年龄段增加而降低,重复献血者检测不合格率远远低于初次献血者,抗-HIV检测女性酶免检测阳性率高于男性,但确认阳性率男性明显高于女性.因此应提高献血前的征询技巧,重视献血者的招募环节,重点加强初次献血者献血前的征询和评估,加强无偿献血知识的宣传,巩固和发展固定无偿献血者队伍,大力普及NAT检测技术应用于血液筛查,将有效地提高血液安全.
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如何正确认识HBeAg和抗-HBe同时阳性
编辑同志:阅读<中华检验医学杂志>2008年第31卷第1期专家答疑栏目中毛远丽教授撰写的"为何在临床工作中会遇见同一份标本的对应抗原、抗体同时阳性,如何解释?"一文~[1],文中毛远丽将HBeAg和抗-HBe同时阳性仅归于检测敏感度的提高,笔者认为此说法是不全面的.被检测血清中存在高浓度的HBeAg,其浓度范围处于剂量-反应曲线的下降区域,此时可检出HBeAg.同时平行的竞争法ELISA检测抗-HBe的试验中,由于混入了含有高浓度HBeAg的中和试剂,混合样本中的HBeAg总剂量就可接近或超过高剂量钩状效应的临界浓度,出现反应信号降低或无反应信号.
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维吾尔族宫颈癌患者外周血中CD+4CD+25CDlow/-127调节性T淋巴细胞与细胞因子的临床意义
宫颈癌是位居妇科肿瘤第一的恶性疾病[1].如何有效预防和治疗宫颈癌,提高患者生存质量是目前的研究热点.CD+4 CD+25 Treg在维持自身耐受和免疫稳定的同时,也抑制着免疫系统对肿瘤的免疫应答[2].经TGF-β和IL-10处理的细胞可获得明显的抑制效应性T淋巴细胞增殖的作用,炎症因子IFN-γ则与Treg起相反的作用[3].维吾尔族是宫颈癌高发民族,死亡率高[4].本研究通过流式细胞术检测维吾尔族宫颈癌患者外周血CD+4 CD+25 CDlow/-127 Treg细胞含量,采用ELISA检测血清中细胞因子TGF-β、IL-10及IFN-γ的水平,以便有针对性地开展新疆地区宫颈癌防治工作.
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核酸检测在献血者乙型肝炎病毒筛查中的应用
目的 探究核酸检测在献血者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染筛查中的作用.方法 以惠州市中心血站2016年2至10月接收的30 025个献血者为研究对象,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和核酸检测方法进行HBV检测.结果 在30 025份血液标本中,有29 995份乙肝病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg) ELISA检测为阴性,单试剂阳性标本有15例;核酸筛查阳性共有45份,经核酸检测确认为阳性的标本共有34份,而HBsAg ELISA检测确认的阳性共有2份.由此可知,核酸检测HBV的阳性筛查率为0.15％,阳性的拆分阳性率为0.11％,而ELISA检测HBsAg却存在漏诊情况.结论 在对献血者进行HBV检查时,核酸检测相对于ELISA检测具有更高的准确率,有利于进一步确定血液安全性.
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高危人群梅毒的检测及分析
目的：探讨连州市高危人群梅毒的检测方法与效果。方法：在2013年6月到2013年8月对连州市400名静脉吸毒者进行了梅毒的检测，检测方法包括梅毒ELISA检测与明胶颗粒凝集确诊试验（ TPPA）。结果：高危人群经过ELISA检测后，检出梅毒阳性36例。与明胶颗粒凝集确诊试验（TPPA）结果对比，ELISA检测梅毒的敏感性与特异性为100．0％和99．7％。结论：吸毒高危人群多伴随有性传染疾病，ELISA检测梅毒有很好的特异性与敏感性，适于大批量标本的检测。
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聚合酶链反应与血清酶联免疫吸附试验在生殖器疱疹中的应用对比分析
目的:考察聚合酶链反应(PCR)与血清酶联免疫吸附试验(ELISA)在生殖器疱疹中的应用效果差异.方法:选取140例生殖器皮肤、黏膜损伤患者,分别采用聚合酶链反应与血清酶联免疫吸附试验检测标本中单纯疱疹病毒,对两种结果不符患者采用第二种PCR进行检测.结果:140例样本中,PCR检测出阳性样本59例,单纯HSV-1感染患者6例,单纯HSV-2感染患者46例,混合感染患者7例.ELISA检出阳性样本57例.140例样本中,有17例结果不符,采用第二种PCR进行检查证实,ELISA检测法敏感性为96.3％、特异性为98.8％、阳性预测值为89.8％.PCR法敏感性为97.1％、特异性为92.8％、阳性预测值为95.6％.结论:相比于PCR法,ELISA法具有更高的敏感度和特异性,避免了样本间的相互污染,具有临床应用价值.
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济源市2008-2010年无偿献血者血液检测淘汰原因分析
目的 分析无偿献血者血液检测不合格淘汰的原因,探讨我国对阳性献血者进行确认的必要性.方法 对2008-2010年济源市无偿献血者血液ELISA检测淘汰原因进行统计分析.将2007-2010年ALT单项不合格及ELISA检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP0.7≤S/CO＜1的献血者作为随访检测对象.结果 2008-2010年无偿献血23 016人次,淘汰362人次.初次献血16 110人次,淘汰261人次,固定献血(献血次数≥3次,每年至少献血1次)6906人次,淘汰101人次.初次与固定献血者淘汰率差异无统计学意义(P＞0.05).单阳淘汰274人次,占淘汰人次的75.69％(274/362)、双阳淘汰88人次,占24.31％ (88/362).抗-HIV不合格的血液标本经市CDC确认均为阴性.2007-2010年随访检测:ALT不合格153人次,合格122人次,合格率79.74％;HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP4项共检测144人次,合格132人次,合格率91.67％.结论 应建立合理的献血屏蔽淘汰管理制度.ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV ELISA检测不合格者,定期进行随访.采供血机构应逐渐开展集中化检测,提高检测质量,开展阳性标本确认实验,避免ELISA检测假阳性的献血者被排除.
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ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA方法的检测原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性.在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应.用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开.
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实时荧光PCR和ELISA在乙型肝炎病毒检测中的应用价值
目的 研究乙肝患者的免疫学检测方法同HBV-DNA之间的关系,在乙肝患者的治疗中,保证检测方法的可靠性、准确性.方法 用酶联免疫吸附技术(ELISA)进行HBV患者的免疫学检测,用实时荧光聚合酶链反应技术(PCR)进行HBVDNA的检测,用统计学的方法对结果进行分析.结果 217例标本由上述两种技术同时进行测定,由PCR技术检测出的阳性率与ELISA技术检测出的阳性率之间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);而HBV-DNA阳性拷贝数与ELISA技术检测出的“大三阳”和“小三阳”两组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HBV-DNA的灵敏度比ELISA技术更高,在临床治疗中能发挥更为重要的作用.
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南昌地区献血人群幽门螺杆菌感染的血清学分析
目的 调查南昌地区献血人群中幽门螺杆菌(Hp)感染的血清阳性率并对其影响因素进行分析.监控Hp在献血不同人群中感染变化规律,为优化献血人群作参考.方法 采用整群抽样方式抽取2010年6~9月南昌地区不同献血种类(全血和机采血小板)的献血者633人(男377人,女256人).采取统一调查表进行现场问卷调查方式,采用ELLSA检测血清中Hp-IgG抗体,数据统计分析采用SPSS 17.0软件.结果 献血人群总的Hp感染血清阳性率为48.66%(308/633).男女之间、不同ABO血型间Hp阳性率差异无统计学意义(P﹥0.05);不同年龄、婚姻状况、体重指数、医务人员与非医务人员间的Hp阳性率差异有统计学意义(P < 0.05);逐步多因素Logistic回归分析筛选出与Hp感染相关的因素分别为共同居住人数(OR = 1.394,χ2=4.675,P = 0.031),就餐规律性(OR = 0.650,χ2=10.902,P = 0.001)、吸烟(OR = 0.631,χ2=6.432,P = 0.011)、机采血小板献血者(OR = 0.731,χ2=9.205,P = 0.002)和AB血型(OR = 0.512,χ2=3.995,P = 0.046).结论 南昌地区献血人群中存在较高的Hp感染血清阳性率;Hp感染与同居住人数多少、是否吸烟、就餐规律性等相关联;AB型血相比A型、B型和O型不易感染Hp;机采血小板献血人群中Hp感染率较低;Hp阳性率在献血人群中的情况分布及影响因素的分析对于完善献血标准、对了解南昌地区的献血队伍提供了参考数据.
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齐齐哈尔市无偿献血者血液HBV、HCV、HIV酶免检测联合核酸检测结果分析
目的：探讨酶免检测联合核酸扩增检测2016年齐齐哈尔地区无偿献血人群HBV、HCV、HIV-I和HIV-2感染的收益情况。方法对2016年齐齐哈尔地区无偿献血者血液标本进行HBV、HCV、HIV（1+2型）感染性标志物的筛查。结果EIA检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV均为阴性的合格血液共13716份/14097份。NAT检测呈反应性19份/13716份，反应性率为1.39‰。19例NAT检测反应性标本中11例为NAT拆分检测病毒核酸反应性且11例均为HBV DNA反应性。结论应用核酸扩增检测能有效提高输血安全，降低输血传播相关病毒的风险；而献血人群中检出核酸反应性的标本主要为HBV DNA反应性而HBsAg无反应性。
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ELISA检测弱阳性结果原因分析
ELISA检测时常出现的弱阳性结果是每个免疫实验室经常遇到的问题,笔者将从以下五个方面进行阐述.
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浅谈幽门螺杆菌临床检验方法
目的：用不同方法检测幽门螺杆菌，评价有效的方法，为临床检验提供有利依据。方法统计分析了400例感染有幽门螺杆菌的患者临床资料。分离胃活检标本中的幽门螺杆菌，并用尿素酶试验、涂片镜检方法以及幽门螺杆菌抗体ELISA检测的方法进行对比鉴定研究。结果嗜银染色法检验阳性者181例（45.3%），快速尿素酶法检验阳性者76例（19.0%），两种方法检验均显阳性者135例（33.75%）；嗜银染色法检验阳性、快速尿素酶法检验阴性6例（1.5%），嗜银染色法检验阴性性、快速尿素酶法检验阳性36例（9.0%）。结论嗜银染色法特异性比较高，血清H p 抗体对测定非侵入性幽门螺杆菌，准确率较高，且对患者不会造成较大损伤。在临床上可采用联合诊断法来提高幽门螺杆菌的诊断准确性。
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茵兰益肝颗粒剂体外抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究
[目的]验证含有茵兰益肝颗粒剂药效成分的药物血清对转染乙型肝炎病毒基因的人肝癌细胞系2.2.15(HepG2.2.15)细胞分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原的(HBeAg)抑制作用.[方法]组织培养及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测.[结果]药物血清第8天对HepG2.2.15细胞半数毒性浓度(TC50)为11.48%,大药物血清无毒浓度(TC0)为6.0%.6.0%、3.0%、1.50%、0.75%4种药物血清浓度在HepG2.2.15细胞中第8天对HBsAg的抑制率分别为7.89%、5.8%、1.6%、1.6%,对HBeAg抑制率均为负值.[结论]茵兰益肝颗粒剂对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg有较低的抑制率,对HBeAg无抑制作用.
关键词： 乙型肝炎病毒 HepG2.2.15细胞 细胞培养 ELISA检测 -
探讨ELISA检测HBsAg中延时不同时间比色对结果的影响
ELISA以其特异性好、灵敏度高、操作简便等优点,广泛应用于各个临床实验室.原理,其基本操作过程是:样本→加酶标记物→37℃水浴30min→洗板→加底物液→37℃水浴15min→加终止液→酶标仪比色→判定结果.
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某部官兵血清抗体状况的前瞻性调查分析
目的 了解某部官兵抗体水平受自然因素的影响状况.方法 采用前瞻性观察研究的方法,采用ELISA方法两次检测某部官兵血清中HBsAg、抗-HAVIgG、抗-HBs、抗-HBc、麻疹IgG抗体、乙脑IgG抗体和肾综合征出血热IgG抗体.结果 HBsAg两次检测均阴性,抗-HAV两次检测结果分别为74.00%和64.44%,抗-HBs分别为22.00%和34.41%,抗-HBc分别为16.00%和10.00%,麻疹IgG抗体分别为6.00%和14.44%,乙脑IgG抗体分别为10.00%和15.56%,肾综合征出血热IgG抗体分别为14.00%和7.78%.6种抗体两次检测结果比较的P值均大于0.05.结论 观察期内官兵血清抗体水平受当地自然环境因素的影响不明显.
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HBsAg弱阳性ELISA检测假阴性原因分析
ELISA(酶联免疫法)由于操作简单,试剂便宜,易于开展,特异性高,故是目前检测肝炎病毒常用的方法之一.但影响因素也较多.在日常的工作中,笔者发现低浓度样本(HBsAg含量低)易导致假阴性.为探讨其原因特做以下试验:①试剂平衡时间,②溶血程度.
