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ACS:180发光免疫分析系统原理与常见故障维修
拜尔ACS:180全自动化学发光免疫分析系统是近几年才发展起来的一项新技术.它是依托磁性微粒子分离技术和直接化学发光技术,以吖啶酯为发光标记物,通过双抗夹心法和竞争法来实现对甲状腺、贫血、癌标、性激素、心血管、胰腺等项目的检测.其临床意义已日渐显现出来.
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肿瘤标志在良恶性胸水鉴定的应用
目的:探讨胸腔积液肿瘤标志CEA、CA19-9、CA12-5、NSE、CYFRA21-1的检测在鉴别结核性胸积液与癌性胸积液的意义.方法:应用生物素-链霉亲和素双抗夹心法测定.
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两种PTH载体蛋白连接法的特异抗体及载体抗体比较的初步探讨
人甲状旁腺激素(hPTH)是由84个氨基酸组成的一种重要的生物活性肽,对调节钙、磷代谢起着极为重要的作用,目前多使用针对限定抗原表位的抗体建立夹心法来测定人甲状旁腺激素(hPTH)分子.PTH结构简单,单独刺激机体不易产生抗体,只有与载体分子连接后才可得到较强的免疫应答效应.
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泪液乳铁蛋白夹心法酶联免疫吸附试验的建立及初步临床应用
泪液乳铁蛋白(lactoferrin,LF)是泪液中主要的抗菌蛋白质[1-2],对眼表组织起积极防护作用,其含量在很大程度上能反映泪腺的外分泌功能.干眼是与泪膜密切相关的眼表疾病,病因复杂、临床表现多样,诊断存在较大困难.
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抗凝剂对检测抗-HIV结果的影响
当使用ACD-A抗凝剂用血浆做反定型血型时,有溶血现象[1],因此改用EDTA抗凝剂,有较强的抑制补体激活溶血作用,而使用含有EDTA的抗凝剂的血浆,在使用双抗原夹心法的试剂检测抗-HIV检测时,会出现花板现象.
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磁性分离酶联免疫测定方法应注意的事项
磁性分离酶标免疫技术是80年代中期Serono(史朗洛)诊断中心发明的一种非同位素免疫检测的先进技术,称为磁性抗体免疫技术,它采用标本抗原,酶标单克隆抗体(原),荧光素标单克隆抗体夹心法(竞争法)形成免疫复合物.磁珠联接的抗荧光素抗体与免疫复合物中的荧光素结合,经磁场分离,洗涤,加底物后测定酶促反应成色结果可计算出标本抗原含量.此方法具有操作简便,无放射危害,多波长同时检测,
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乙型肝炎表面抗原可疑样本的3种测定方法比较
我国在世界上属于乙型肝炎病毒( HBV)感染的高发区,根据流行病学调查,人群发生率较高,表面抗原携带率约为15%.乙型肝炎表面抗原( HBsAg)是乙型肝炎的感染指标之一,因此,HBsAg的检查往往是体检的项目之一,对乙型肝炎的预防和治疗具有重要的意义.检测HBsAg,常采用酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法以及胶体金免疫层析法(GICA)和化学发光免疫测定(CL)3种检测方法.现就ELISA夹心法以及GICA和CL 3种检测方法,对收集的HBsAg可疑标本进行测定,并对结果进行分析比较,现报告如下.
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几种风湿性疾病患者血浆肿瘤坏死因子及白细胞介素8的检测及意义
本文应用双单克隆抗体夹心法(ELISA)检测了风湿性疾病患者血浆TNFα、IL-8水平,探讨两者与风湿病病情活动的关系,揭示TNFα及IL-8在风湿病发病机制中的作用.
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FITC-抗FITC系统在夹心法ELISA检测IFN-γ和IL-4中的应用
异硫氰酸荧光黄(FITC)是一种具有抗原性的荧光素分子,极易与免疫球蛋白形成稳定的结合物,并且不影响抗体结合抗原的活性.偶联了辣根过氧化物酶(HRP)的高效价的抗FITC分子单克隆抗体(mAb),与FITC标记的特异性一抗组成的FITC-抗FITC放大系统,可以有效地提高酶联免疫吸附试验(ELISA)的敏感性、特异性,在某些方面比放免测定更为优越[1].我们使用阴离子交换层析法纯化本室制备的高效价的小鼠源性抗FITC分子单克隆抗体(mAb)[2],并偶联辣根过氧化物酶(HRP),组成FITC-抗FITC放大系统,应用于夹心法ELISA,明显提高了检测IFN-γ和IL-4(Th1/Th2类细胞因子)酶联免疫吸附试验(ELISA)的敏感性、特异性,使之更适合于基础研究和临床标本的检测.
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检测可溶性TREM-1的 ELISA法的建立及初步应用
目的:建立定量检测可溶性TREM-1的抗体夹心ELISA法.方法:采用抗人TREM-1单克隆抗体(mAb)包被酶标板,以兔抗鼠TREM-1多克隆抗体为夹心抗体、HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组小鼠可溶性TREM-1为标准品,建立检测可溶性TREM-1的ELISA法,并对30例正常人和30例急性肺部感染患者血清样本进行了检测.结果:建立的夹心ELISA法检测TREM-1的线性范围为0.78~200 μg/L,批内、批间变异系数分别为6.52%和9.46%.30例正常人和30例血清急性肺部感染患者TREM-1的含量分别为(0.69±0.18) μg/L和(1.16±0.42) μg/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.001).结论:成功建立了一种灵敏度高、稳定性好的检测可溶性TREM-1的抗体夹心ELISA法.
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乙肝两对半测试卡快速检测血清乙肝三系应用及评价
因我所承担了浙江省女子劳教所收容劳教前体检的工作,其需要立即得到劳教人员乙肝三系结果.我所原先采用的ELISA法不能满足其要求,现采用乙肝两对半测试卡法快速检测乙肝三系.乙肝两对半测试卡采用的是胶体金免疫层析技术,其中HBsAg HBsAb HBeAg三项采用夹心法,HBeAbHBcAb两项采用竟争抑制法.乙肝两对半测试卡法只需一次加样,五项结果同时出现,确实达到了快速检测的目的.为了检测乙肝两对半测试卡法的敏感性和特异性,将180份标本用测试卡法和ELISA法进行了比较.
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抗-LSP单克隆抗体的临床应用
本文报告用自制的抗-LSPMcAb作为试剂,建立ABC-ELISA双夹心法,并与ABC-ELISA间接法,ELISA、PHA法作比较,同时检测277例乙肝患者血清申的抗-LSP水平,其阳性率在慢性活动性肝炎及慢性迁延性肝炎病例中,双夹心法分别为91.7%和50.0%;间接法分别为91.7%和56.2%,明显高于ELISA和PHA法(P<0.01或0.05),而慢性活动性肝炎的抗-LSP阳性率也高于其它各型肝炎(P<0.01或0.05).本文还检测肾损伤型SLE和慢性肾病患者的抗-LSP,双夹心法阳性率分别为15.4%和17.8%,明显低于间接法46.2%和、62.2%,P<0.05.
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ELISA(双夹心法)检测华支睾吸虫患者血清循环抗原
我们曾报告在中华分支睾吸虫(下称华支睾吸虫)患者血清中存在抗成虫可溶性蛋白抗原的特异性抗体,用酶联免疫吸附试验(间接法)可检测到该抗体,阳性率达93.9%.
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从甲型肝炎亚临床感染儿童粪便中检出甲肝病毒
1980年12月~1981年4月,江苏省海门县厂洪公社15大队发生一起由沟水引起的甲型肝炎暴发流行.从461名居民中发现12名甲肝病例,11名为黄疸型.暴发后期,对5~29岁居民135人抽血检测,查出SGPT升高者8人.用固相酶标记双夹心法[1]对全部12名病例和8名SGPT升高者,检测血清抗-HAVIgM.12名病例全部阳性,确诊为甲型肝炎.8名SGPT升高的无症状者中,3名阳性,均为5~14岁儿童,表明为亚临床感染.
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夹心与竞争化学发光免疫分析检测人血清透明质酸的比较分析
目的:比较人血清透明质酸(HA)夹心化学发光免疫分析和竞争化学发光免疫分析,对两种方法的相关性、线性范围和检测效果进行评价.方法:分别应用人血清HA夹心和竞争化学发光免疫分析对197例血清样本进行HA含量检测,并对检测结果进行分析,同时对两种方法的精密度、回收率和灵敏度进行比较.结果:夹心法的准确性和精密度都要高于竞争法,在95%可信限下其检测灵敏度能达到0.66 μg/L,而竞争法只能达到7.26 μg/L,两种方法均能准确测定血清中HA含量,其相关性良好,线性关系为y=1.1893x-25.974(r=0.9871),两组数据之间没有显著性差异(t=1.966,P>0.05).结论:两种方法都能准确测量人血清中HA含量,但夹心化学发光免疫分析的灵敏度、重复性、回收率都优于竞争法.
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ELISA法检测抗HCG方法的建立及在不孕症中的初步应用
上海市计划生育科学研究所不孕症试管婴儿中心(200032)汪玉宝 1927年Ascheim和Zondek直接肯定并详细描述了人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin, HCG)的特点.通过多年研究确认HCG是妊娠过程中非常重要的激素之一.对维持妊娠起重要作用.通过试验证明,HCG-β亚单位和破伤风类毒素偶合物,注入人体后产生抗HCG的抗体,其作用可维持一年,起到避孕作用[1],说明抗HCG抗体能引起不孕,我们在原来酶免检测抗HCG方法的基础上进行改良,建立了夹心法检测抗HCG,通过试验证明此方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便的特点.证明抗HCG与不孕症有密切的关系.
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基于夹心法的DNA生物传感器用于检测大肠埃希菌O157:H7 stx2基因
目的 构建DNA生物传感器用于大肠埃希菌O157:H7的快速检测.方法 基于双探针夹心法,结合酶标生物电催化反应技术和计时电流的电化学法检测大肠埃希菌O157:H7的stx2基因.结果 在佳反应条件下,DNA探针能较好地固定于金电极表面;探针标记链酶亲合素后,检测信号明显增强.DNA生物传感器具有良好的特异性,其值可达6.25×10-8mol/L.结论 构建的DNA生物传感器特异性和灵敏度高,可为大肠埃希菌O157:H7的快速检测提供新的方法.
关键词: DNA传感器 夹心法 大肠埃希菌O157∶H7 -
不同加样方式对竞争ELISA法检测抗HBc的影响
目的 探讨不同加样方式对竞争ELISA法结果的影响.方法 收集乙肝病毒标志物(HBV M)62份常见阳性模式(A组)、45份单项抗HBe阳性(B组)、36份HBVM全阴性(C组)及89份随机收集的血清标本,用竞争ELISA法以2种加样方式检测抗HBc,以夹心ELISA法检测抗HBc为对照.结果 3组血清标本用竞争法2种加样方式检测的抗HBc结果A值均存在统计学差异(t=2.887~6.096,P=0.00~0.009),且B组的2种方式定性结果符合率仅为86.7%;对随机收集的89份血清标本,加样方式一与夹心法结果存在统计学差异(X2=5.56,P<0.05).结论 不同加样方式对竞争ELISA法结果的影响应引起重视.
关键词: 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎病毒核心抗体 竞争法 夹心法 -
内镜治疗食管静脉曲张方法的临床研究
食管静脉曲张(EV)破裂出血是肝硬化门脉高压症凶险的并发症.内镜食管静脉硬化术(EVS)和内镜食管静脉套扎术(EVL)是治疗食管静脉曲张出血的首选方法,但越来越多的临床研究显现出两者各有利弊,为此我们采用EVL+EVS+EVL联合方法(夹心法)治疗食管静脉曲张破裂出血,并将3种方法的临床效果进行对比研究,现报告如下.
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45例单纯疱疹病毒性脑炎临床与EEG分析
作者将2001至2005年在本院经ELISA双单克隆抗体夹心法[1]测定血、脑脊液HSV特异性抗原(HSV-Ag)而确诊的45例单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)患者的临床与脑电图(EEG)检查结果进行分析.