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荧光标记免抗淋球菌IgG的研制
淋病是对人类健康危害较大的性传播疾病之一,对淋病的检验应力求快速、准确,我们应用淋球菌标准菌株免疫家兔,再经异硫氰酸荧光黄(FITC)标记免抗淋球菌IgG,制成的兔抗淋球菌IgG荧光抗体获得了良好的效果,现报告如下.
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FITC-抗FITC系统在夹心法ELISA检测IFN-γ和IL-4中的应用
异硫氰酸荧光黄(FITC)是一种具有抗原性的荧光素分子,极易与免疫球蛋白形成稳定的结合物,并且不影响抗体结合抗原的活性.偶联了辣根过氧化物酶(HRP)的高效价的抗FITC分子单克隆抗体(mAb),与FITC标记的特异性一抗组成的FITC-抗FITC放大系统,可以有效地提高酶联免疫吸附试验(ELISA)的敏感性、特异性,在某些方面比放免测定更为优越[1].我们使用阴离子交换层析法纯化本室制备的高效价的小鼠源性抗FITC分子单克隆抗体(mAb)[2],并偶联辣根过氧化物酶(HRP),组成FITC-抗FITC放大系统,应用于夹心法ELISA,明显提高了检测IFN-γ和IL-4(Th1/Th2类细胞因子)酶联免疫吸附试验(ELISA)的敏感性、特异性,使之更适合于基础研究和临床标本的检测.
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壳聚糖-碳纳米粒的制备及其体外性质的研究
目的制备壳聚糖-碳纳米颗粒并研究其理化性质和体外活性.方法首先,用溶胶法制备出分散性良好的碳纳米粉末,再通过正负电荷相互吸引制备出壳聚糖-碳纳米颗粒;其次,用绿色荧光蛋白(PEGFP-C1)质粒DNA作报告基因,以静电吸附的方式将PEGFP-C1质粒DNA与壳聚糖-碳纳米颗粒结合形成载基因纳米粒;再次,用扫描电镜观察其形态特征,激光粒度分析仪测定其粒度分布及表面电位(Zeta电位),MTT试验检测壳聚糖-碳纳米载体对HepG2细胞和COS7细胞的毒性作用,凝胶阻滞实验确定该基因载体的DNA携带率,DNase Ⅰ保护实验研究其对所携带基因的保护作用,体外纳米粒导入实验定性评价纳米粒进入在体外进入细胞的活性,并用荧光显微镜观察导入效果.结果壳聚糖-碳纳米粒表面携带正电荷,聚合指数＜0.3;与DNA结合后效率较高,且可保护DNA免受DNase Ⅰ的降解;经FITC标记后能够成功地进入到COS7细胞和HepG2细胞.结论壳聚糖-碳纳米颗粒能进入到细胞内部,且导入效率较高,可以用作基因递送的非病毒载体系统,值得进一步研究.
