首页 > 文献资料
-
ACS:180发光免疫分析系统原理与常见故障维修
拜尔ACS:180全自动化学发光免疫分析系统是近几年才发展起来的一项新技术.它是依托磁性微粒子分离技术和直接化学发光技术,以吖啶酯为发光标记物,通过双抗夹心法和竞争法来实现对甲状腺、贫血、癌标、性激素、心血管、胰腺等项目的检测.其临床意义已日渐显现出来.
-
测定癌胚抗原的吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立
目的 建立一种定量测定血清中癌胚抗原(CEA)含量的检测方法.方法 根据双抗体夹心法实验原理,利用吖啶酯化学发光免疫分析技术-结合生物素-亲和素磁颗粒分离技术.结果 方法的低检测限为0.2ng/mL,线性范围为2.2~ 360ng/mL,批内变异为1.9%~2.2%,总变异为6.5% ~8.1%,与ROCHE公司的癌胚抗原检测试剂盒(电化学发光法)测定结果的拟合方程为Y=0.9969X +0.6168,相关系数为r=0.9921.结论 本方法的各项指标均满足临床检测的要求,适合临床推广应用.
-
血清铁蛋白在急性冠状动脉综合征中的水平及意义
目的:观察血清铁蛋白(SF)水平在ACS中的变化,及其与冠状动脉病变严重程度的关系,并探讨SF在ACS中的意义。
方法:选取ACS患者共126例,选取同期住院确诊心脏神经症的患者共41例为对照组。所有入组患者入院后即刻及入院第2日晨起留取静脉血标本。吖啶酯化学发光法测定SF。所有入组患者于住院期间行冠状动脉造影检查,根据冠状动脉造影结果计算Gensini积分作为评估冠状动脉病变严重程度的指标。 -
045 第二代TSH受体抗体的测定对Graves病的诊断有更高的敏感性
[英]/Costagliola S…//J Clin Endocrinol Metab .1999,84.-90~97 报道了一种使用人重组促甲状腺激素受体(TSHR)的第二代TSHR抗体的检查方法,它对Graves病的诊断有更高的敏感性。该方法依据Graves病人血清中的TSHR 抗体与促甲状腺素(TSH)竞争TSHR,通过测量已结合的125I 或吖啶酯标记的牛TSH的量来间接反映Graves病人血清中TSHR抗体的量。 对象和方法 将328例Graves病患者分为3组:第1组86人,为未经抗甲状腺药物治疗或治疗不超过4周的患者;第2组126人,接受治疗超过4周的患者;第3组116人,已缓解的患者。另520例对照分成4组:包括54例桥本甲状腺炎,69例非甲状腺性自身免疫病,115例甲状腺肿及282例健康对照。方法如下:①将含有人TSHR(hTSHR)cDNA基因和抗新霉素基因的二顺反子转染白血病K526细胞,培养该细胞后,从中提取hTSHR。②将羊抗鼠的单克隆抗体(moAb BA8)包被在试管中,然后加入提取的hTSHR,冻干4℃保存(moAbBA8仅与TSHR结合,而不干扰自身抗体或TSH的结合)。③从牛垂体中纯化出高亲和力的bTSH,用125I或吖啶酯标记。④分别以传统的放射受体分析法(RRA)及新法测量TSHR抗体:RRA方法依据说明书,而包被试管(CT)法,则是在含moAbBA8和hTSHR的试管中加入病人血清,然后再加入125I 或吖啶酯标记的bTSH,用γ计数器或荧光测量器来检查。统计分析用Yates校正χ2检验和Mann-Whitney秩和检验。 结果 CT法的特异性为99.6%,敏感性为99.8%,而传统方法的特异性为99.6%,敏感性为80.2%。在3组Graves病人中,CT法比传统方法更敏感(P<0.05),而在4组对照组间,这些方法没有明显不同(χ2=1.62,P=0.23)。 讨论 结果显示,在3组Graves病患者中,在特异性相同的条件下,CT检查方法比传统的检查方法更敏感。由于TRAb的活性与Graves病的复发有关,故使用更敏感的第二代TSHR抗体的测定方法可以很好地预示Graves病的复发与缓解。(戴亚丽摘 施秉银校)
-
乳腺癌患者血清HER-2/neu蛋白化学发光免疫定量分析方法的建立
目的 建立吖啶酯化学发光免疫分析定量检测乳腺癌患者血清HER-2/neu蛋白的方法.方法 用吖啶酯和生物素分别标记2株不同的HER-2/neu蛋白单克隆抗体,并用链霉亲合素包被微粒,通过链霉亲合素-生物素系统分离固相和液相,采用双抗体夹心法对建立方法的性能指标进行鉴定评估.结果 建立的方法线性范围5~300 ng/mL,低检测限为0.58ng/mL,批内变异系数≤3.0%,总变异系数≤8.8%,与西门子公司HER-2/neu蛋白测定试剂盒(化学发光法)的检测结果比对,相关系数(r) =0.991 9,总符合率98.9%.结论 建立的方法能够满足乳腺癌的临床诊疗要求,值得在临床推广应用.
关键词: HER-2/neu蛋白 化学发光 吖啶酯 免疫定量分析 -
人血清层粘连蛋白直接化学发光免疫分析法的建立及评价
目的 建立检测人血清层粘连蛋白(LN)的直接化学发光免疫分析法(CLIA),并对检测性能进行方法学评价.方法 采用包被有抗人LN单抗的微米级磁珠和吖啶酯标记抗人LN单抗分别作为固相试剂和发光试剂,建立并优化定量检测人血清LN水平的CLIA法,评价该方法的线性范围、灵敏度、精密度和特异性等性能指标,并与市场上同方法学的LN检测试剂盒进行相关性比对分析.结果 该方法线性范围为5.00~1000.00 ng/mL,检测灵敏度小于5.00 ng/mL,血清平均回收率为97.60%,批内变异系数(CV)小于5.00%,批间CV小于8.00%,特异性、稳定性良好,与市场上同方法学的LN检测试剂盒具有较好相关性.结论 建立的人血清LN直接化学发光免疫分析法能够满足临床检测需求.
-
磁微粒-吖啶酯化学发光游离甲状腺素检测试剂的研制及应用
目的:研制定量检测游离甲状腺素的化学发光免疫试剂。方法制备吖啶酯‐T4结合物作为信号标记物质,制备链霉亲和素‐磁性微球作为固相载体,结合生物素标记的甲状腺素(T4)抗体,建立小分子竞争法免疫分析体系,分析其灵敏度、准确度和线性范围等性能指标。结果灵敏度为1.5 pmol/L ,线性范围2~75 pmol/L ,批内不精密度 CV 为5.62%~8.24%,批间不精密度 CV 为7.08%~9.82%,与 T3和 rT3无交叉反应,37℃6 d 后发光值降幅为10.7%~14.6%,检测100例临床血清标本,测定结果与进口试剂的相关性 r 值等于0.9245。结论该试剂具有灵敏度高、线性范围广、稳定性好、受环境影响小、检测结果准确等特点,可配套全自动化学发光免疫分析系统,应用于临床检测。
-
ACS180PlUS化学发光免疫分析仪故障分析及处理方法
化学发光法是近些年来发展起来的一种先进的检测技术,具有快速、准确、特异性强、灵敏度高、无放射性污染等优点.ACS180是美国Bayer公司生产的化学发光免疫分析仪.它是采用吖啶酯作标记的化学发光分析,它根据吖啶骆在有过氧化氢的弱碱溶液中即可迅速发光的原理,再用类均相的包被抗体的磁性微粒,扩大反应面,加速免疫反应[1].笔者在使用过程中,经过近一年来的摸索和研究,总结积累了一些工作经验和一些常见报警分析及处理的方法,介绍给大家供广大同行参考.
-
ACS:180SE化学发光免疫分析仪常见故障的排除
我科引进德国Bayer公司研制的ACS:180SE化学发光免疫分析仪,并采用该公司提供为仪器相匹配的吖啶酯标记的免疫试剂盒,一台仪器可完成肿瘤、激素等40多项目的检测程序.该机具有无污染环境,自动化程度高,检测灵敏度高(小检出值为10-18ng/ml)等优点,比放射免疫分析更胜一筹.通过一年的使用,我们发现该仪器易出现以下常见故障,积累了排除故障的经验,总结如下: