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胶体金免疫层析法在布鲁氏菌病监测地区的现场应用
目的 验证胶体金免疫层析法(GICA)在布鲁氏菌病监测地区的现场应用效果.方法 选择布鲁氏菌病监测地区重点人群和布鲁氏菌病流行奶牛场的牛,采用GICA和虎红平板凝集试验(RBPT)进行检测.结果 监测地区重点人群检测结果GICA和RBPT两种方法阳性率分别为15.3%和11.4%;两种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05).奶牛监测结果,GICA和RBPT两种方法阳性率分别为14.4%和16.0%;两种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05).结论 GICA与RBFI"同样具有较好的敏感性;此外,GICA还具有操作简便、快速、微量等优点,适合于布鲁氏菌病监测地区的现场应用.
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胶体金免疫层析法在布鲁氏菌病不同流行地区的现场应用
目的 验证胶体金免疫层析法(GICA)在布鲁氏菌病不同流行区现场应用的价值.方法 选择布鲁氏菌病不同流行区人群,采用GICA、斑点金免疫渗滤法(DIGFA)和试管凝集试验(SAT)平行检测布鲁氏菌病人群抗体.结果 GICA、DIGFA和SAT检测重流行区、监测地区和非疫区人群抗体阳性率,3种方法之间差异无统计学意义(P＞0.05);GICA和SAT平行检测布鲁氏菌病重疫区人群抗体结果,二者阳性符合率为94.2%.GICA和SAT平行检测布鲁氏菌病非疫区人群抗体结果,二者阴性符合率为99.6%.GICA检测不同疫区之间人群抗体阳性率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 GICA不仅可及时快速发现患者,而且可监测疫情,反映流行程度,在布鲁氏菌病不同流行区具有较好的推广应用前景,对巩固布鲁氏菌病防治成果具有重要意义.
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胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A在谷物及饲料中的研究
应用胶体金免疫层析技术，建立一种快速检测谷物和饲料中赭曲霉毒素A的方法，其中包括胶体金的制备、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条对谷物类样品检测限为5 ng/mL，对饲料样品检测限为100 ng/mL，检测时间为10 min，试纸条特异性好，假阳性率小于5%，假阴性率为0。该法使用简单方便，非常适合现场快速检测谷物和饲料中的赭曲霉毒素A。
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磁微粒化学发光法和胶体金法检测乙型肝炎表面抗原的效果
目的 比较磁微粒化学发光法(CLIA)与胶体金法(GICA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的差异性.方法 利用郑州安图A2000化学发光分析仪测定患者标本,记录HBsAg的定量结果,将阳性标本用胶体金检测,记录检测结果,对两种方法的测定结果进行比较.结果 两种方法测定HBsAg的结果存在差异,化学发光法的阳性检测率比金标法的高.结论对用胶体金免疫层析法检测HBsAg处于临界状态的标本,应用化学发光法检测,以提高结果的准确度,更好地为临床提供诊断依据.
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三种乙型肝炎表面抗原检测方法在口岸体检中的应用评估
目的 循证检验医学(EBLM)指导下,对电化学发光法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析法等3种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测方法进行评价,为口岸出入境人员寻求佳的快速HBsAg检测方法和检测程序提供科学依据.方法 ECLIA、ELISA、胶体金免疫层析法检测40份(HBsAg)标准血清盘标本,以血清盘预期结果为标准,比较3种方法灵敏度、特异度、总符合率.同时应用成本小化分析方法,分别计算3种方法的成本.结果 在血清盘HBsAg检测中,ECLIA法的灵敏度、特异性和总符合率皆达100.0％,Kappa值为1.000;而ELISA法国产科华试剂灵敏度76.9％、特异性100.0％和总符合率85.0％,Kappa值为0.432;胶体金免疫层析法灵敏度34.6％、特异性100.0％和总符合率57.5％,经Kappa检验其值为0.216.成本小化分析结果显示:ECLIA法成本20元,ELISA法(科华,国产试剂)成本3元,胶体金免疫层析法成本3元,ECLIA法成本高.结论ECLIA方法适用于需评估免疫状态,为接种疫苗做准备的出国留学人员、出国商务人员、入境留学生、入境商务人员的HBsAg检测.ELISA国产试剂适用于出国劳务人员、海员等一般人群.胶体金免疫层析法适用于紧急事情人员和日常复查的检测.
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应用胶体金免疫层析法检测水产品中霍乱弧菌的研究
[目的] 应用胶体金免疫层析法,研究水产品中霍乱弧菌的快速检测方法.[方法] 通过模拟水产品棉拭子标本比对试验及现场应用比对试验,比较不同检验方法的差异.[结果] 70份增菌液中霍乱弧菌理论浓度为1.5×10CFU/ml的模拟水产品棉拭子标本分别按检验方法1、检验方法2检验,同时检出阳性51份,检验方法2的检出率(87%)显著高于检验方法1的检出率(74%);30份增菌液中霍乱弧菌理论浓度为1.5×101CFU/ml的"模拟水产品棉拭子标本"按检验方法2进行检验的检测结果均为阳性.对2 000份水产品进行检测的现场应用对照实验结果显示:检验方法3的检出率(0.4%)与检验方法1的检出率(0.3%)差异无显著性;胶体金试纸条实验的假阳性率为8%.[结论] 在胶体金免疫层析法实验中,增菌液增菌前霍乱弧菌含量为1CFU/ml,通过增菌后可被检出;增菌液霍乱弧菌含量为10CFU/ml,增菌12h后均可被检出;水产品棉拭子标本增菌12h检测阴性者可报告阴性,阳性者则参照<霍乱防治手册>[1]进一步分离鉴定.鱼贝类霍乱弧菌污染菌数较少(103CFU/100g以下)[2],无法满足使用胶体金免疫层析法所要求的含菌量(106CFU/ml)[3],可以通过改良增菌培养液成分,以提高待检菌繁殖能力,在短时间内提高增菌液待检菌浓度,使胶体金免疫层析法的灵敏性高于或接近常规的分离鉴定法.
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胶体金免疫层析技术快速检测谷物中3种真菌毒素的研究
目的 应用胶体金免疫层析技术开发一种快速检测谷物中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的三联检测卡.方法 优化胶体金溶液pH值、金标抗体量及抗原包被量制备3种胶体金试纸条,将试纸条组装成检测卡,研究该卡的检测限、准确度、特异性和稳定性.结果 AFB1、ZEN和DON 3种试纸条的胶体金溶液适pH值分别为7.5、7.5和7.0,金标抗体量分别为4.2、7.2和9.6 μg/ml,抗原包被量分别为1.0、1.4和0.8 mg/ml.检测卡的检测结果与仪器检测结果基本一致,重复性较好,与结构类似物及其他霉菌毒素无交叉反应,在室温条件下可以保存12个月.结论 该三联检测卡操作简便、快速、准确、稳定,且能同时检测3种真菌毒素,在谷物的现场检测中有较好的应用前景.
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疟疾胶体金免疫层析试纸条使用结果评价
疟疾的确诊靠实验室诊断,其中适用于基层卫生机构或野外,并能快速简便筛查,WHO推荐采用免疫层析检测法.2003年我们在大理州首次运用胶体金免疫层析法(下称胶金法)开展了疟疾检测,并与镜检法作对照,现将结果报告如下.
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人绒毛膜促性膘激素测试条(胶体金免疫层析法)的性能评价
目的:评价人绒毛膜促性腺激素测试条(胶体金免疫层析法)的分析性能.方法:主要从灵敏度,特异性,阴性符合率,阳性符合率,HOOK效应和加速稳定性等六方面来评价7个厂家生产的人绒毛膜促性腺激素测试条(胶体金免疫层析法).结果:在受检的7个厂家中,7种产品的灵敏度分别为12.5mIU/mL(3/7),20mIU/mL(2/7),5mIU/mL(1/7)和低于1mIU/mL(1/7);特异性检测中,仅有1个厂家显示人黄体生成激素对0mIU/mL HCG的检测有干扰,条带显示为弱阳性;7种产品的阴性符合率和阳性符合率均为100%;HCG在浓度高达100,000mlU/mL时无HOOK效应,结果仍显示为阳性或弱阳性;对于加速稳定性检测,测试条在(37±1)℃放置时,其稳定性时间均能超过21d.结论:在人绒毛膜促性腺激素试条(胶体金免疫层析法)的性能评价中,各厂家在一些重要指标上存在差异,有待于建立行业标准进一步统一使其规范化.
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胶体金免疫层析法检测技术在喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地的现场应用
青海省处于三江源地区,有鼠疫疫源地面积20余万km2,该地区动物间鼠疫流行较猛烈,并时常波及到人间,笔者应用胶体金免疫层析法检测技术(GICA)对一起人间鼠疫疫情成功的进行了早期检测.2006年9月在青海省湟源县发生一起人间鼠疫疫情.该患者于2006年9月8日在青海省玉树州曲麻莱县喜马拉雅旱獭鼠疫疫区剥食旱獭的过程中左手中指被划伤而感染,于2006年9月16日返回湟源县,就诊时被疑似鼠疫而隔离;由鼠疫专业人员现场采集患者标本,用GICA进行了初步的诊断.
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胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原应用评价
目的 对胶体金免疫层析法检测乙肝表面抗原(Hepatitis B surface antigens,HBsAg)的敏感性、特异性进行分析和初步评价.方法 采用胶体金免疫层析(Gold Immunochromatography Assay,GICA)法,酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent Assay,ELISA)法,对HBsAg定值血清和200份待测血清标本同时测定,对GICA法的测定结果进行分析评价.结果 GICA法的小检出量≥1.0ng/ml,ELISA法的小检出量≥0.5ng/ml,GICA法的敏感性低于ELISA法.与ELISA法相比,GICA法敏感度为91.1％,特异性为99.4％.结论 GICA法适用于HbsAg的急诊和初筛检查.
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基于RT-HDA等温扩增技术快捷检测H7N9禽流感病毒的方法研究
常规PCR方法不适宜于实验条件不足的基层现场检测H7N9禽流感病毒,不利于疑似病例的及时诊治.本研究旨在建立一种快速简便、高灵敏度、低成本的H7N9禽流感病毒快速核酸检测技术.选用H7N9禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)基因作为靶标区域设计引物,采用FITC和Biotin标记上下游引物,通过逆转录解旋酶依赖性等温扩增(Reverse transcription helicase-dependent isothermal amplification,RT-HDA)技术扩增病毒RNA,辅以胶体金免疫层析试纸检测核酸扩增产物,建立H7N9禽流感病毒等温扩增检测方法.采用H7N9禽流感病毒质粒和病毒培养物对该方法的灵敏性、特异性和重复性进行评价,结果显示:病毒低检测限20个拷贝数/μL,与常规PCR方法相比较无明显差异,重复性试验一致,与其他型别的禽流感、流感病毒无交叉反应.本研究建立的RT-HDA联合胶体金免疫层析试纸检测H7N9禽病毒检测方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性,特别适用于现场条件下检测H7N9禽流感病毒快速简便的检测.
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五种方法检测抗dsDNA抗体性能比较与临床评价
用化学发光免疫分析法(CLIA)、免疫印迹法(WB)、间接免疫荧光法(IIF)、胶体金免疫层析法(CGCIA) 和ELISA检测dsDNA抗体,评价方法的分析性能、相关性及对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值.用五种方法检测300例SLE组患者、300例疾病对照组患者和100名健康人对照组血清抗dsDNA抗体.经统计学分析,CLIA法灵敏度高,其次是ELISA、CGCIA、WB、IIF.IIF法特异性高.CLIA法与ELISA法、WB法与CLIA法之间相关性χ2检验无显著性差异(P＞0.05).CLIA法与ELISA法高度一致(Kappa值0.909).本研究提示ELISA与IIF法联合是临床实验室检测dsDNA抗体的佳方案.
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丙型肝炎病毒抗体胶体金免疫层析法的建立
目的 建立一种快速定性检测人血清丙型肝炎病毒(HCV)抗体的方法.方法 根据双抗原夹心法的实验原理,建立胶体金免疫层析法检测人血清中丙型肝炎病毒抗体.结果 检测中国食品药品检定研究院快速法丙型肝炎病毒抗体国家参考品,20份阴性参考品、20份阳性参考品符合率均为100％;低检出限参考品L1(1∶8,1∶16)和L2(1∶64,1∶128)均能检出阳性;平行测定10条重复性参考品,全部阳性且显色强度一致.检测1050份血清,与酶联免疫法的符合率达到96.9％.经RIBA复核确认,本方法灵敏度为97.9％,特异性为99.0％.结论 本分析方法提供了一种更方便、快速的检测人血清中的HCV抗体的方法,具有很大的临床价值.
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几种常见检测方法检测TORCH-IgM抗体的比较
TORCH是一组具有致畸作用的可引起先天感染的病原体,主要包括弓形虫(toxplasma gondii,TOX)、风疹病毒(rubella virus,RV)、巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)和单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型(herpes simplex virus Ⅰ/Ⅱ,HSVⅠ/Ⅱ),可引起胎儿早产、流产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡等,对优生优育与人口素质构成很大的威胁,因此TORCH的感染筛查、诊治工作,值得引起普遍关注[1].
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胶体金免疫层析法复检HBsAg阳性标本的可行性分析
目的 评价利用胶体金免疫层析法(GICA)复检酶联免疫吸附试验(ELISA)所检测出的乙型肝炎表面抗原(H BsAg)阳性标本的效果.方法 分离用ELISA法筛选出的无黄疸、无溶血HBsAg阳性标本血清,按初检A值/cutoff值的大小分为A-E 5组,每组随机选取40例患者标本,另取40例健康者血清纳入对照组F组.每组标本分别用GICA法、ELISA法和化学发光免疫分析法(CLIA)进行复检.以CLIA法检测结果为金标准,计算并比较GICA法和ELISA法复检的假阳性率及假阴性率.结果 GICA法复检全部标本的假阳性率为0.当1≤A值/cutoff值＜5时,GICA法的假阴性率为95.24％,同时,检测出1例因HBsAg滴度过高导致ELISA漏检的标本;当5≤A值/cutoff值＜10时,GICA法的假阴性率降为23.68％;当A值/cutoff值≥10时,GICA法的假阴性率为0.结论 ELISA法HB-sAg初检A值/cutoff值≥10时,用GICA法复检为阳性,可及时发出报告;当A值/cutoff值＜10时,为保证检验结果的准确性,除胶体金法外,还应使用ELISA等方法进行复检.
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初步建立胶体金免疫层析法快速检测东部马脑炎抗体
东部马脑炎病毒(eastern equine encephalitis virus, EEEV,以下简称为东马病毒)是引起东部马脑脊髓炎的病原体.东马病毒主要是通过黑尾脉毛蚊(Culisetamelanura)和环跗库蚊(Culex tarsalis)传播,而且可以经含有病毒的气溶胶通过呼吸道感染人类,感染后发病率高,传染性强,致死率高,缺乏有效的预防方法,病愈后多留有后遗症,所以被国际社会列为防制生物恐怖的主要病种之一,备受世界各国关注.
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胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原
目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg).方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析检测试条.血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条.结果 GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应.检测中国药品生物制品检定所HBsAg标准品,灵敏度可达1 ng/ml.用GICA与酶免疫法比较检测了395份不同血清标本中HBsAg,两法符合率为99.0%.结论 GICA检测血清中的HBsAg特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值.
关键词： 乙型肝炎病毒表面抗原 胶体金免疫层析法 -
胶体金免疫层析法用于产肠毒素葡萄球菌快速检测的研究
免疫层析技术是近10年来在免疫渗滤技术[1,2]的基础上建立的一种快速的免疫学检测技术,国内周继文等[3]、曾章新等[4]用免疫层析技术快速检测乙肝表面抗原获得较好的效果.本研究用胶体金标记产肠毒素金黄色葡萄球菌多价抗体,先制成胶体金探针,进而制成检测产肠毒素金黄色葡萄球菌免疫层析法(GICA)检测试纸条,用该法检测产肠毒素葡萄球菌,具有简便、快速、特异性好、需仪器及细菌抗原无需进行特殊处理等优点.
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幽门螺杆菌CagA抗体与肝硬化门脉高压性胃病的关系
目的:探讨幽门螺杆菌CagA抗体与肝硬化门脉高压性胃病的关系.方法:应用胶体金免疫层析法对52例肝硬化患者末梢血进行Hp-CagA抗体检测,并分析其与肝硬化门脉高压性胃病及并发症的关系.结果:肝硬化患者Hp-CagA抗体阳性率明显高于对照组,且合并上消化道出血、肝性脑病及存在门脉高压性胃病患者均为阳性.结论:对肝硬化患者常规进行末梢血Hp-CagA抗体检测,对预防和治疗门静脉高压性胃病,减轻肝硬化合并症具有重要的指导意义.
