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9.统计学方法 尽可能详细描述 ,建议补充有关统计研究设计、资料的表达与描述、统计分析方法的选择、统计结果的解释和表达等要求。
10.医学伦理问题及知情同意 须遵循医学伦理基本原则。当论文的主体是以人为研究对象时 ,作者应说明其遵循的程序是否符合负责人体试验的委员会 (单位性的、地区性的或国家性的 )所制订的伦理学标准。提供该委员会的批准文件 (批准文号著录于论文中 )及受试对象或其亲属的知情同意书。
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[1] 乔乔 ,李静 ,孙成玺 ,等.肠道病毒 71型嵌合体病毒感染性克隆的构建与鉴定 [J].中华微生物学和免疫学杂志 ,2015,35(2):87-93. DOI:10.3760 /cma.j.issn.0254-5101.2015.02.002. Qiao Q, Li J, Sun CX, et al. Construction and identification of a chimeric cDNA infectious clone of enterovirus 71 strain [J]. ChinJMicrobiolImmunol,2015,35(2):87-93. DOI:10.3760 /cma.j.issn.0254-5101.2015.02.002.
[2] Halpern SD,Ubel PA,Caplan AL. Solid organ transplantation in HIV infected patients[J]. N Engl J Med,2002,347(4): 284-287.
[3] 俞树荣 .立克次体病总论 //耿贯一 .流行病学 [M]. 2版.北京 :人民卫生出版社 , 1996: 882-888. Yu SR. Introduction of rickettsiosis / / Geng GY. Epidemiology[M]. 2nd ed. Beijing:People′s Medical Publishing House, 1996: 882-888.
[4] 李立明 ,颜江瑛 ,杨维中 ,等译 .健康的哨兵 :美国疾病预防控制中心的历史 (Etheridge EW. Sentinel for health:a history of the Centers for Disease Control)[M].北京 :中国协和医科大学出版社 , 2005.
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目的 初步探讨IL-10促进鼠衣原体感染的可能分子机制.方法 鼠衣原体经灌胃或子宫内感染C57BL/6野生型和IL-10-/-小鼠后,采用间接免疫荧光试验检测肠道和生殖道内鼠衣原体的生长情况;输卵管积水评分评估生殖道疾病严重程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血液中IFN-γ和IL-2的表达水平.结果 与野生型小鼠相比,IL-10-/-小鼠的肠道和生殖道均具有较强的衣原体清除能力,同时细胞因子IFN-γ和IL-2的表达显著性增加.此外,野生型小鼠表现出更严重的输卵管病理损伤.结论 IL-10通过抑制IFN-γ和IL-2的表达使宿主清除衣原体能力下降,从而促进衣原体在小鼠体内生长,加重输卵管积水的发病率.
目的 探讨调节性浆细胞在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)合并妊娠患者中的表达及作用.方法 选取2013年4月至2018年4月来我院就诊的SLE合并妊娠的患者,分为对照妊娠组、SLE稳定组和SLE恶化组.流式细胞术检测CD3-LAG-3+CD138 high调节性浆细胞的比例;ELISA检测可溶性人白细胞抗原-G(sHLA-G)和抗核抗体Ig的浓度;分离SLE恶化组外周血中淋巴细胞,置于含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养,并给予HLA-G蛋白刺激.结果流式细胞术结果显示SLE稳定组调节性浆细胞的比例为(2.483±0.1318)%,SLE恶化组的比例为(1.662±0.1304)%,两组间差异有统计学意义(t=4.431,P=0.0013);SLE稳定组的sHLA-G浓度为(36.50±3.510)ng/ml,SLE恶化组浓度为(16.50±2.405)ng/ml,两组间差异有统计学意义(t=4.701,P=0.0008);相关性分析的结果显示sHLA-G的浓度与调节性浆细胞的比例呈正相关(r=0.7471,P=0.0009);体外试验结果显示SLE恶化组B细胞和调节性浆细胞的比例分别为(7.573±0.6539)% 和(1.593±0.1879)%,HLA-G组的比例分别为(3.732±0.7178)% 和(2.503±0.2921)%,差异均有统计学意义(t=3.957,P=0.0027;t=2.620,P=0.0256).结论 SLE合并妊娠患者体内调节性浆细胞比例和sHLA-G浓度均显著降低,且与病情严重程度紧密相关,HLA-G具有促进调节性浆细胞比例升高的重要作用.
目的 对两种结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)蛋白Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)进行抗原性评价,为结核病免疫诊断和疫苗研究提供实验依据.方法 通过基因重组和蛋白质纯化技术,克隆表达和纯化结核分枝杆菌蛋白Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873).收集人群包括结核病患者、非结核病其他肺部疾病患者和健康志愿者的血液标本,以基因重组Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)蛋白作抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和效应T细胞酶联免疫斑点试验(ELISPOT)分别进行人群体液和细胞免疫学检测,分析其免疫学性能.结果 成功获得基因重组表达和纯化的结核分枝杆菌蛋白Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873),以这两种蛋白质作抗原进行人群体液和细胞免疫学检测.体液免疫检测,用ELISA检测135名结核病患者、56名非结核病其他肺部疾病患者和94名健康人的血清特异性IgG抗体,结果显示,Dnak(Rv0350)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为77.80%(105/135)、56.70%(85/150)和66.67%(190/285);MPT83(Rv2873)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为76.30%(103/135)、43.30%(65/150)和58.95%(168/285).细胞免疫检测,用ELISPOT检测59名结核病患者、65名非结核病其他肺部疾病患者和64名健康志愿者的外周血单核细胞被抗原刺激后效应T淋巴细胞产生γ干扰素(IFN-γ)的水平,结果显示,Dnak(Rv0350)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为66.10%(39/59)、62.79%(81/129)和63.83%(120/188);MPT83(Rv2873)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为47.46%(28/59)、79.84%(103/129)和69.68%(131/188).结论 结核分枝杆菌Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)蛋白均具有较好的抗原性,并且刺激T细胞产生免疫应答的能力较强,两者联合可能对于结核病免疫诊断和新型抗结核疫苗研究有更好的应用价值.
铜绿假单胞菌是一种条件性人畜共患病原菌,不仅可引起人的烧伤感染、脓胸等疾病,还可引发禽类等动物的菌血症、败血症等. 近年来,由于抗生素的大量应用,导致该菌的耐药性迅速上升,亟需一种更加有效的方式控制该病. 本文以铜绿假单胞菌主要外膜蛋白编码基因oprL和oprF为基础构建了单价、二价融合和联合DNA疫苗,并对其免疫小鼠和鸡后诱导的体液、细胞免疫应答水平及攻毒保护效果进行了检测,旨在为研制新型高效的铜绿假单胞菌疫苗提供实验资料.
目的 对中国东部温州地区淋病奈瑟菌流行菌株进行分型,并对四环素耐药的相关机制进行研究.方法 从淋病患者中分离出77株淋病奈瑟菌,采用E-test法进行青霉素、四环素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松和阿奇霉素的小抑菌浓度(MIC)测定.PCR和DNA测序用于检测四环素抗性相关基因,包括Tet-M基因、mtrR启动子区和mtrR编码区.多抗原序列分型(NG-MAST)和多位点序列分型(MLST)分别用于确定所有临床分离株和四环素耐药分离株的分子特征.结果 在77株淋病奈瑟菌中,74株(96.10%)、27株(35.06%)、70株(90.91%)和15株(19.48%)分别对青霉素、四环素、环丙沙星和阿奇霉素耐药.所有测试的分离株对大观霉素和头孢曲松敏感.19株耐四环素菌株均存在Tet-M基因,其中17株mtrR启动区域发生1个碱基A的缺失突变,3株mtrR编码区域发生G45D突变.19株四环素耐药淋病奈瑟菌共测得11个不同的NG-MAST基因型,其中ST14781、ST1766和ST1866各占15.79%(均为3株),2个ST型(10.52%,2/19)未在NG-MAST数据库中报道过.19株四环素耐药淋病奈瑟菌共测序得到12个不同的MLST基因型别,其中ST10899占26.32%(5株),ST1600占15.79%(3株).结论 淋病奈瑟菌对四环素的耐药可能与mtrR启动区域和Tet-M基因的突变相关.NG-MAST基因分型结果显示温州地区淋球菌临床分离物表现出分子分型多样化.应采取措施监测温州地区具有高抗药性的NG-MAST ST1766和MLST ST1600淋病菌克隆.
目的 了解单核-巨噬细胞和中性粒细胞抗问号钩端螺旋体(简称钩体)感染能力及吞噬溶酶体形成是否存在差异.方法 人THP-1单核细胞和HL-60细胞分别用佛波酯(PMA)和全反式维甲酸(ATRA)预处理,使其分化为单核-巨噬细胞和中性粒细胞.采用激光共聚焦显微镜法检测THP-1-PMA单核-巨噬细胞和HL-60-ATRA中性粒细胞吞噬问号钩体能力.采用透射电镜法检测胞内钩体形态.采用激光共聚焦显微镜法和荧光分光光度法检测胞内问号钩体活力和死亡率.采用激光共聚焦显微镜法检测不同吞噬细胞内吞噬溶酶体形成率.结果 THP-1-PMA单核-巨噬细胞和HL-60-ATRA中性粒细胞均能吞噬问号钩体,但前者吞噬问号钩体能力显著强于后者(P<0.05).胞内问号钩体都以吞噬泡的形式存在于上述两种吞噬细胞内.THP-1-PMA单核-巨噬细胞杀灭胞内问号钩体能力显著强于HL-60-ATRA中性粒细胞(P<0.05).THP-1-PMA单核-巨噬细胞内问号钩体与溶酶体共定位率显著高于相应的HL-60-ATRA中性粒细胞(P<0.05).结论 单核-巨噬细胞而非中性粒细胞作为主要的吞噬细胞在吞噬、杀灭入侵问号钩体过程中起着重要作用.中性粒细胞内较低的吞噬溶酶体形成率可能是导致其杀灭问号钩体能力较低的原因.
目的 探讨欧洲放线菌的鉴定方法、生物学特性,为放线菌病的诊断提供依据.方法取患者的脓液标本,进行细菌培养及革兰染色检查,用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行鉴定,E-test法作药敏试验.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行分离株的鉴定.提取菌株的DNA,选用16S rRNA的通用引物进行扩增,回收、纯化后对PCR的产物进行测序,与GenBank数据库中的序列进行同源性比较.结果药敏试验结果为对青霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松敏感,对环丙沙星耐药.MALDI-TOF MS鉴定为欧洲放线菌.16S rRNA基因检测鉴定为欧洲放线菌.结论MALDI-TOF MS和16S rRNA可对欧洲放线菌进行鉴定,对放线菌病的诊断具有重要的意义.
目的 研究轮状病毒(rotavirus,RV)感染对Caco-2细胞表面钠-氢(Na+-H+)交换蛋白3(NHE3)水平和生物活性的影响及其调控机制.方法 构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,分为对照组(CTL组)、RV组、细胞内Ca2+络合剂BAPTA-AM组和BAPTA-AM+RV组,用BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换蛋白活性和细胞表面NHE3蛋白水平,Western blot测定细胞Cdc42蛋白水平.结果 与CTL组相比,RV感染可引起细胞Na+-H+交换蛋白活性以及细胞表面NHE3蛋白水平明显降低,此抑制作用可被BAPTA-AM拮抗,此外RV感染可引起Cdc42蛋白水平升高,这一作用也可被BATPA-AM拮抗.结论 RV感染对NHE3蛋白水平及生物活性的调控可能与细胞内Ca2+介导的Cdc42依赖性内吞途径有关.
目的 筛选对H5N1流感病毒高度敏感、低致瘤性的MDCK细胞亚株,并对该细胞株进行全面的检定及分析.方法 通过极限稀释法获得细胞亚株,再对各细胞亚株进行血凝滴度、受体丰度和致瘤性检测,筛选出安全性好、敏感性高的细胞亚株,然后对所筛选细胞亚株进行全面的检定.结果 通过细胞克隆试验,共得到108株单细胞亚克隆株,经两轮血凝滴度初筛后得到3株细胞,再经致瘤性及受体丰度比较后选定一株亚克隆株G1作为备选细胞株.核型分析显示该亚细胞株染色体数目众数为78,未发现细菌、真菌、支原体及外源因子污染.裸鼠细胞致瘤性试验显示在观察期末接种部位病理解剖与阴性对照组无显著性差异,细胞未显示明显致瘤性.以细胞裂解物和细胞DNA接种裸鼠,均未致裸鼠产生结节,病理解剖显示与对照组无显著性差异,细胞未显示致癌性.结论筛选出的MDCK-G1亚细胞株符合安全性和敏感性的要求,具有用于大流行流感疫苗生产的潜在可能性.
目的 探讨2016年12月至2018年2月北京地区呼吸道病原体在急性呼吸道感染儿童中的流行特征.方法 回顾分析2016年12月到2018年2月在北京儿童医院因急性呼吸道感染就诊的34665例儿童病例,采用间接免疫荧光法定性检测人血清中抗8种常见呼吸道病原体的IgM抗体.8种常见呼吸道病原体包括呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、甲型流感病毒(in-fluenza virus A,IFA)、乙型流感病毒(influenza virus B,IFB)、副流感病毒(parainfluenza virus,PIV)、腺病毒(adenovirus,ADV),以及肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)、衣原体(Chlamydia pneumonia,CP)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP).采用SPSS19.0软件对数据进行统计分析.结果 在34665例患儿中,50.45%的儿童至少感染1种病原体,门诊轻症患儿感染率为56.11%,住院重症患儿感染率为44.06%.IFB阳性率高,为36.56%,合并感染检出率为9.78%,以IFB与MP合并感染多见.RSV在28 d<~≤1岁的患儿中检出率高,IFA、IFB、PIV病原体检出率在3<~≤5岁儿童中高.ADV、MP、CP及LP病原体随年龄增加检出阳性率升高.IFB、MP、IFA及RSV在冬春季节高发,其余病毒呈全年散发状态.在住院重症患者及门诊轻症患者中,8种呼吸道病原体IgM抗体的检出率差异有统计学意义(P=0.00).结论 本研究对北京地区2016至2018年15个月份的急性呼吸道感染的儿童呼吸道病原体IgM抗体检测情况进行回顾性分析,了解这期间北京地区呼吸道病原体在儿童中的流性特征,对防止滥用抗菌药物对儿童造成影响及减轻家长经济负担可起到积极作用.
CD8+T细胞是抵抗感染和肿瘤的重要免疫细胞.免疫应答中形成的长效记忆CD8+T细胞可在机体再次遇到相同抗原时快速应答.T细胞的活化、扩增和应答需要各种代谢途径供应能量,而不同发育阶段的T细胞对代谢途径的需求亦不尽相同.在急性感染中,调控代谢途径将影响记忆T细胞的分化.本文就糖代谢在调控记忆CD8+T细胞发育分化中的分子机制做一综述,以期为优化疫苗设计和肿瘤治疗方法提供理论基础和新的策略.
抗菌药物不仅可以通过与特定靶点相结合而发挥抗菌作用,也可通过诱导活性氧(re-active oxygen species,ROS)积累造成菌体氧化损伤.细菌对于氧化应激损伤,也有相应的防御机制,对ROS进行清除及损伤修复.然而细菌体内ROS的累积在抗菌药物杀菌过程中的作用机制却极其复杂.因此,本文对抗菌药物作用下细菌发生氧化应激的机制进行综述,并简要分析现有研究存在的问题及需要进一步解决的问题.
葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化.有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控一系列与肽聚糖合成相关基因的转录引起耐药性增加.表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统,而且与金黄色葡萄球菌VraSR具有较高同源性,但是目前尚不清楚两者在耐药性及致病性上有什么异同.本文结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌VraSR双组分系统的调控机制.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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两个审稿专家,提出了近20条的意见,要求很高,试验过程要详细,细节要解释清楚,,花了近一个月的时间对文章进行了修改,给出的修改说明有十几页,对试验数据也进行了补充,修改返回后就被录用了,还是比较艰难的。
我的文章送审了三个专家,其中有一个专家没有审稿,两个专家返回了审稿意见,给出的意见还是很中肯的,修改后送复审,两周后进入编辑加工状态,之后就被录用了。期间每次和编辑沟通时,编辑的态度都很好,不厌其烦的帮我解决问题,很感谢。
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前不久在期刊上投了一篇文章,审稿人给出了很详细的审稿意见,修改后被录用,历时两个月的时间,速度还是很快的,以后有合适的文章还会投稿的。