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卵白素-脂质体复合物作为开管毛细管电色谱的手性选择剂分离盐酸美西律
本研究开发了一种新的开管毛细管电色谱方法用于手性分离盐酸美西律,其中使用卵白素-脂质体复合物作为固定相.卵白素被组装在包含DPPE和PS (80:20,mg%)的脂质体上,两者复合体涂布在毛细管内壁.脂质体的表征用来评价涂层的均一性,而D,L-色氨酸的分离度被用来验证涂层的分离效能.对于盐酸美西律的手性分离,我们研究了影响分离效能的四个参数:缓冲液的种类、pH、浓度和施加电压,在优的条件下,盐酸美西律对映异构体得到较好的分离度.实验结果表明使用卵白素-脂质体复合物作为开管毛细管电色谱的固定相是可行的,在药物手性分离上有着潜在的优势.
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脑转移瘤中突变型p53蛋白的表达及临床意义
转移是恶性肿瘤的重要生物学行为,也是恶性肿瘤治疗中的难点和患者病死率高的重要原因,国内统计脑转移瘤占颅内肿瘤的3.5%~10%,国外尸检资料报告脑转移瘤占原发肿瘤的21%~46%,近年来,脑转移瘤有增多趋势[1].肿瘤的转移涉及多种相关基因的调控,我们选用31例脑转移瘤标本,应用免疫组织化学卵白素-生物素复合物(ABC)法,测定突变型p53蛋白(mtp53)的表达,探讨mtp53的表达及与预后的关系.
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介绍一种原位PCR检测方法
原位PCR就是将PCR的高效扩增与原位杂交的细胞定位相结合,在组织细胞原位检测单拷贝或低拷贝的特定DNA或RNA序列[1].作者介绍一种原位PCR方法是利用卵白素与生物素间的极高亲和力,通过一段外源性DNA片段,来达到连接标记NTPs的目的,再通过原位杂交技术来检测目的DNA.具体方法如下.
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内源性生物素对免疫组化染色结果的影响
免疫组化染色实验过程中,在选择使用生物素--卵白素或生物素卵白素检测系统时(如ABC、LSAB、SP法),由于有些组织中内源性生物素含量比较高,特别使用高温加热修复方法.
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肾组织冰冻切片中血红素氧合酶-1的免疫组织化学检测
目的 探讨大鼠肾脏组织冰冻切片中血红素氧合酶-1(HO-1)的免疫组织化学检测方法及其干扰因素.方法 腹腔内注射钴原卟啉(CoPP)诱导Wistar大鼠(n=24)肾脏高表达HO-1;比较常规链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法(n=8)、SP+蛋清封闭法(n=8)和Dako EnVision二步法(n=8)消除非特异性染色的效果,并通过检测已知阳性组织的HO-1表达加以验证.结果 Western blot法检测证实CoPP成功诱导全部24只Wistar大鼠肾脏高表达HO-1.用免疫组织化学法检测HO-1在大鼠肾脏组织中的表达时,可见(1)正常大鼠肾组织仅部分大血管区有内源性过氧化物酶的着色,能被0.3%H202·甲醇或3% H202消除;(2)正常大鼠肾组织有丰富的内源性生物素表达,常规SP法染色(n=8)出现较强的非特异性染色;SP+蛋清封闭法染色(n=8)不能消除非特异性染色,反而有放大作用;Dako EnVision二步法(n=8)可以有效消除非特异性染色,良好显示HO-1在肾脏组织中的分布.结论 内源性生物素是冰冻切片免疫组织化学染色的主要干扰因素;常规SP法或加用蛋清封闭不能消除其干扰;EnVision二步法可以有效避免非特异性干扰,良好的显示HO-1在阳性肾脏组织中的表达.
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人脑星形细胞瘤细胞凋亡及其相关基因bcl-2、Bax表达的研究
我们以常规福马林固定、石蜡包埋的人脑星形细胞瘤组织为材料,采用原位末端标记(TUNEL)技术及免疫组织化学链酶卵白素-过氧化物酶(SP)法对30例星形细胞瘤手术标本进行检测,分别观察肿瘤组织中凋亡细胞密度及bcl-2、Bax基因的表达状况.
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鼻咽血管纤维瘤雄激素受体的免疫组化检测
鼻咽血管纤维瘤(Juvenile nasopharyngeal angiofibroma,JNA)多发于青春期男性.Martin(1948)和Schiff(1959)首次报道JNA与性激素有关.这说明类固醇性激素在JNA的发病和发展中可能有重要作用.近些年来,人们采用葡聚糖包裹活性碳吸附法(DCC法)对这一问题进行实质性探讨.但迄今为止,很少见到有关采用过氧化酶标记的链霉卵白素法(streptavidin peroxidase,SP法),检测JNA组织中雄激素受体(androgen receptor,AR),并对JNA中成纤维细胞进行特殊染色,用体视学方网测试系统定量计算成纤维细胞面数密度的报道,为探讨AR在JNA发病中的作用,我们进行了这方面的研究.
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不同状态柯萨奇B3病毒暴露致气道炎症研究
目的观察不同致敏状态柯萨奇B3病毒(CVB3)呼吸道暴露的致气道炎症作用.方法将大鼠随机分成6组:对照组、单次病毒鼻腔暴露组、重复病毒鼻腔暴露组、腹腔卵白素加病毒鼻腔暴露组、鼻腔卵白素加病毒暴露组、单次鼻腔卵白素暴露组.各组4周处死,进行肺组织病理观察,分别计数炎症细胞及肥大细胞.结果重复病毒鼻腔暴露组炎症细胞计数高于单次病毒鼻腔暴露组(P<0.05),肥大细胞计数没有统计学差异;单次鼻腔卵白素暴露组炎症细胞高于正常对照组(P<0.05),肥大细胞计数没有统计学差异;腹腔卵白素病毒暴露组与鼻腔卵白素病毒暴露组炎症细胞计数和肥大细胞计数均类似,P均>0.05;所有病毒暴露的各组(病毒合并腹腔致敏组、病毒合并鼻腔致敏、单次鼻腔病毒暴露组)的炎症细胞及肥大细胞计数高于单次鼻腔卵白素暴露组(P均<0.01).结论单次鼻腔CVB3暴露就可致气道炎症;重复鼻腔CVB3暴露气道炎症稍加重;病毒与卵白素同时暴露并没有加重气道炎症;单次鼻腔卵白素暴露致气道炎症作用明显较病毒低.