水痘-带状疱疹病毒感染的动物模型

本文主要是对近20年来水痘-带状疱疹病毒(VZV)感染的动物模型进行了简单的回顾,并逐一对非人类灵长目动物、豚鼠、大鼠、小鼠模型的建立方法、病毒检测及其应用进行了论述.不断完善VZV感染的动物模型,并对此进行系统、深入的研究,对于探索VZV感染的机理及研制疫苗与抗病毒药物具有重要的意义.

TaqMan实时荧光定量PCR检测艰难梭菌

目的 建立特异敏感的实时荧光定量PCR方法,用于艰难梭菌的快速检测;评价基于纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌的2种标准曲线;并应用该荧光定量PCR法对急性艰难梭菌感染(CDI)的小鼠进行粪便含菌量检测评价.方法 针对艰难梭菌基因组中16S rRNA序列设计特异性引物和探针,建立一套快速检测艰难梭菌含量的实时荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、灵敏性;绘制艰难梭菌纯菌浓度梯度稀释标准曲线和粪便中同浓度梯度艰难梭菌的标准曲线,比较两者的差异;用艰难梭菌高毒株NAP1/027感染用抗生素处理的C57BL/6小鼠,建立CDI小鼠模型,同时应用该荧光定量PCR和活菌培养法定量检测小鼠粪便中的艰难梭菌含量变化.结果 建立的TaqMan实时荧光定量PCR具有较高的灵敏性和特异性,生成标准曲线的相关系数为0.999 8,斜率为-3.400 4;用纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌分别制备标准曲线,结果表明2种标准曲线定量检测结果差异无统计学意义.建立CDI小鼠模型,应用该荧光PCR能有效、准确的检测出粪便中艰难梭菌的含量,可替代费时费力的活菌培养计数法.结论 用纯培养艰难梭菌来制备标准曲线不影响对含菌粪便标本的准确定量检测,荧光定量PCR能准确快捷地检测CDI小鼠粪便中的艰难梭菌含量,比活菌计数更快速和方便,可用于艰难梭菌感染小鼠模型中小鼠肠道内艰难梭菌定植的定量检测.

耐万古霉素肠球菌小鼠感染模型的优化

目的 优化小鼠经口感染耐万古霉素肠球菌(VRE)肠道定植模型,明确不同抗生素预处理方式和感染剂量对VRE在肠道定植的影响.方法 C57/6J小鼠随机分为3组,分别为混合抗生素、氨苄西林、万古霉紊预处理组.混合抗生素预处理组:感染前第7天给予小鼠混合抗生素(卡那霉素、庆大霉素、粘菌素、甲硝唑、万古霉素)水溶液;感染前第2天,将混合抗生素水溶液换为万古霉紊水溶液,感染前1d,腹腔注射克林霉素.氨苄西林与克林霉素预处理组:感染前第7天给予氨苄西林水溶液,感染前1d,腹腔注射克林霉素.万古霉素预处理组:感染前第7天给予万古霉紊水溶液.第0天,3组小鼠同时进行VRE灌胃处理.感染后第3天,氨苄西林、万古霉素水溶液改换为正常饮用水,直至实验结束.在感染后2周内对收取的小鼠粪便活菌计数,观察VRE定植量的变化.结果 感染后第1天,VRE在3种抗生素预处理的小鼠肠道中均能成功定植.在感染后1～9 d,3种模型的粪便VRE含量在105～108 cfu/mg.感染后第9天,3组小鼠粪便中VRE定植量出现下降趋势,第15天(实验结束)粪便VRE含量降至103～105 cfu/mg.另外,感染后第10天氨苄西林处理组中有2只小鼠死亡.对万古霉素预处理模型给予的2个不同感染剂量,在整个急性感染期两组VRE定植量差异无统计学意义.结论 万古霉素预处理的VRE肠道定植模型的稳定性和简洁性优于混合抗生素或氨苄西林预处理的模型.在万古霉素预处理模型中,VRE可在肠道定植至少15d,且感染剂量在105～107 cfu/只间不影响VRE的肠道定植模型的建立.

用模拟经期内膜组织建立子宫内膜异位症小鼠模型及其生殖能力的研究

目的 建立子宫内膜异位症(EM)模型小鼠,观察EM模型小鼠的生殖能力,探讨影响其生殖能力的可能原因. 方法 将51只8周龄雌性C57BL/6小鼠作为受体,并随机分为模型组(n=21)、假手术组(n=15)和空白组(n=15).用模拟小鼠经期内膜组织腹腔注射的方法建立EM模型;将同等剂量的供体腹腔脂肪组织碎片注入假手术组小鼠的腹腔中;空白组不进行腹腔注射.观察3组小鼠的动情周期,于动情间期采血.将3组小鼠合笼至出现阴栓,统计各组小鼠的胚胎种植数、妊娠率、吸收胎率等.运用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测各组小鼠血清FSH、LH、糖类抗原125(CA125)浓度及腹腔液中白介素-2(IL-2)水平,比较各组间的水平差异. 结果 成功建立EM小鼠模型,模型组小鼠动情周期规律.模型组小鼠的妊娠率显著低于假手术组、空白组(P<0.05);3组小鼠的吸收胎率、畸胎率、胚胎重量、顶臀径等比较无显著性差异(P>0.05).模型组不孕鼠的血清FSH浓度、腹腔液IL-2浓度显著高于妊娠实验前的模型组、假手术组和空白组(P<0.01);血清LH、CA125浓度在各组间无显著性差异(P>0.05). 结论 用模拟经期内膜组织腹腔注射的方法可以成功建立EM模型,模型组不孕鼠的卵巢功能、腹腔免疫微环境受到了影响,可能是造成生殖能力下降的重要原因.

香烟烟雾提取物对小鼠精子活力的影响

目的 探讨香烟烟雾中所含外源活性氧物质(ROS)对小鼠精子活力的影响. 方法 香烟燃点后烟雾溶于二甲亚砜,配制成高ROS含量的香烟烟雾浓缩物(CSC).采用4周龄C57BL/6J小鼠45只,实验设置对照组(0 mg/ml CSC)、低剂量组(0.2 mg/ml CSC)和高剂量组(2.0 mg/ml CSC).连续饲喂含有CSC的饮用水4周,观察小鼠的生殖系统发育情况和可能的全身毒性反应,并检测肝功能指标.处死小鼠后即刻检测精子浓度和活力,检测睾丸内抗氧化酶类的表达水平,并制片观察睾丸组织病理变化. 结果 与对照组相比,低剂量和高剂量组小鼠精子浓度无显著变化,但高剂量组精子活力呈现显著下降.CSC低剂量组和高剂量组小鼠连续饲喂4周后精子总活动力分别为32％和19％,A级活动精子分别为13％和12％,均显著低于对照组(61％和24％)(P＜0.05).但在本实验剂量范围内,CSC对小鼠发育和生殖系统无明显毒性损伤,对睾丸抗氧化基因表达无显著影响. 结论 CSC对小鼠精子活力有显著影响,但是对小鼠全身和生殖系统无明显毒性作用.CSC饲喂法可推荐用于诱导小鼠弱精子症模型.

重度骨髓型急性放射病小鼠模型的建立

目的 探讨重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型的建立方法,为重度骨髓型急性放射病实验研究提供依据.方法 通过6Gy 60 Coγ射线单次全身照射小鼠,观察照射后小鼠表现、外周血白细胞计数、骨髓病理组织学、骨髓有核细胞数及骨髓微核率变化趋势来鉴定重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型的建立情况.结果 小鼠照后7d内活动量有所减少,未发生死亡;体重照后第3天降到低值,之后逐步上升;照后第3天白细胞降至低值,为基础水平的14.3％,照后第28天恢复到照前的98％;骨髓病理组织片显示照后第3天骨髓组织被脂肪填充,照后第28天仍以脂肪填充为主;骨髓有核细胞数照后迅速降低,照后第3天达低值,照后第28天仍未恢复;小鼠骨髓微核率在照后迅速攀升,照后14 d后与0Gy照射组无统计学差异.结论 6Gy60Coγ射线单次全身照射小鼠可建立重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型.

小鼠酒精性肝损伤模型的研究

目前国内外尚未建立统一、完善的酒精性肝损伤小鼠模型.探索酒精性肝损伤的机理筛选对预防酒精性肝损伤有效的保健食品,建立一个与人类酒精性肝损伤发展病变过程相似的动物模型极为重要.作者通过小鼠酒精性急性肝损伤模型的研究,应用于对肝损伤有辅助保护作用的保健食品筛选.

白血病小鼠模型的建立及应用

小鼠是白血病深入研究重要的动物模型,本文主要综述白血病小鼠模型的应用.

人参醇提物对糖尿病小鼠模型的治疗机理研究

目的 观察人参醇提物对糖尿病小鼠的治疗作用,并探讨其可能机理.方法 采用多次小剂量腹腔注射链脲佐菌素方法制备糖尿病小鼠模型,用人参醇提物连续治疗14天.结果 病理形态学观察显示,人参组小鼠的胰岛数量无明显减少(P>0.05),胰岛细胞大小基本正常,淋巴细胞浸润程度减轻;人参组小鼠血糖明显低于模型组小鼠,体重高于模型组,血清 C 肽水平明显高于模型组小鼠,自身抗体水平明显低于模型组,人参可以抑制糖尿病模型小鼠脾和胸腺的增大;人参对迟发型免疫反应具有抑制作用.结论 人参通过调节机体的免疫功能,减轻自身免疫反应的损害,减少了胰岛细胞的损伤,并使损伤的胰岛细胞得到一定程度的恢复,从而降低了血清自身抗体水平,增加了 C 肽的分泌,进而降低了模型小鼠的血糖水平.

274 芍药甘草汤对紫杉醇诱发疼痛小鼠模型的镇痛效果

环磷酰胺诱导的小鼠骨髓抑制模型及中药对其防治作用机制研究进展

化疗后骨髓抑制容易导致患者发生感染或出血,严重影响患者治疗、预后和生命质量,甚至危及生命,给患者及家属带来很大痛苦.中医药防治化疗导致骨髓抑制越来越受到重视.随着骨髓抑制动物模型的建立、应用和成熟,中药防治化疗导致骨髓抑制机制的研究也取得许多进展,显出中药治疗的优势和前景.

P2X2受体在肝郁脾虚证小鼠模型前额皮质中的表达

目的:研究胞外ATP特异性P2X2受体的表达与肝郁脾虚证发生之间的关系,为深入了解胞外ATP的释放现象与肝郁脾虚证的发生机制之间的关系奠定基础.方法:48只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组和氟西汀组,除正常组外其余各组小鼠均接受复合应激21 d,建立肝郁脾虚证小鼠模型.采用免疫组化、western blot和实时荧光定量PCR方法检测各组小鼠前额皮质P2X2受体蛋白和基因的表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠前额皮质P2X2受体蛋白表达显著下降(P<0.05),而P2X2受体mRNA表达差异无统计学意义,但存在一定的下降趋势(P>0.05);与模型组比较,逍遥散组和氟西汀组小鼠前额皮质P2X2受体蛋白表达显著升高(P<0.05),氟西汀组小鼠前额皮质P2X2受体mRNA表达显著升高(P<0.05).结论:本研究结果表明基于复合应激的肝郁脾虚证小鼠前额皮质P2X2受体的表达存在减少的趋势,其可能是诱导肝郁脾虚证发生的一个重要原因.

益母草总碱对小鼠前列腺增生模型的影响

目的:探讨益母草总碱对小鼠前列腺增生模型的影响.方法:昆明种雄性小鼠连续3周sc丙酸睾酮5 mg·kg-1·d-1,造前列腺增生模型,将模型小鼠分为5组,分别ig 160,80,40 mg·kg-1的益母草总碱液,450 mg· kg-1癃闭舒胶囊混悬液和同体积的生理盐水,另设一组空白组给同体积生理盐水；每天给药1次,连续给药30 d.末次给药1h后处死小鼠,观察益母草总碱对前列腺指数,对前列腺、睾丸、附睾、胸腺、脾脏组织形态的影响.结果:与前列腺增生模型组比,益母草总碱160,80,40mg·kg-1可显著降低前列腺增生模型小鼠前列腺指数,前列腺指数分别为(0.53 ±0.14),(0.51±0.11),(0.64±0.18)mg·g-1;可显著减改善前列腺增生伴发的睾丸、附睾病变；益母草总碱160,80,40 mg·kg-1可显著改善前列腺增生伴发的胸腺、脾脏萎缩,胸腺皮质厚度及淋巴细胞数分别为(24.16 ±2.22),(26.28 ±3.20),(26.32±3.31)μm及(60.3±4.5),(68.2±5.2),(53.3±4.2)个,脾小结及淋巴细胞数分别为(14.18 ±2.32),(16.14±3.04),(29.26±3.52)μm及(17.2±2.0),(15.3±3.1),(28.3±3.4)个.结论:益母草总碱对丙酸睾酮所致的小鼠前列腺增生模型有好的治疗作用.

肝郁型黄褐斑小鼠模型的建立及其与现有模型的比较研究

目的:建立并验证肝郁型黄褐斑小鼠模型,并与现有其他模型进行比较.方法:注射黄体酮同时,进行慢性束缚和紫外线局部照射.结果:黄体酮+紫外线+束缚复合法造模较其他方法更能导致皮肤丙二醛(MDA)升高和超氧化物歧化酶(SOD)降低以及皮肤黑色素细胞的增加,并且具有肝郁证的行动学表现.结论:黄体酮+紫外线+束缚法建立的肝郁型黄褐斑小鼠多因素模型获得成功.

蒲灵化瘀止痛方治疗子宫腺肌病小鼠的多靶点作用研究

目的:以雌激素效应相关因子、血管生成相关因子及其相互作用为靶点,探讨在子宫腺肌病(AM)小鼠疾病发生发展的不同时间段及子宫在位及异位内膜不同空间部位,蒲灵化瘀止痛方治疗AM的作用机制.方法:对8周龄ICR雌鼠施行雄鼠垂体宫腔内移植手术,术后分别饲养3个月及6个月,形成M1组及M2组(AM小鼠模型3月组及6月组).选择蒲灵化瘀止痛方为实验药物,同时将未造模同期小鼠设为正常组.各组分别给药3个月(Z1组及Z2组).运用免疫组化技术观察雌激素效应相关因子(P450、COX-2、ERa)及血管生成相关因子(VEGF、ENS、CD31、MMP-2)在模型组、用药组随疾病发生发展的不同时间段及子宫在位及异位内膜不同空间部位的变化.结果:在位内膜方面,①与正常组比较:M1及M2组CD31显著下降(P＜0.01,P＜0.05)、VEGF显著增高(P＜0.001)、MMP-2显著增高(P＜0.01);P450、COX-2、ERa表达在M1组无显著差异,P450、COX-2在M2组显著增高(P＜0.001).②M1与M2组比较:P450、COX-2、ERa表达M2组显著高于M1组(P＜0.01,P＜0.001,P＜0.05).③治疗前后比较:Z1与M1比较,VEGF、MMP-2表达显著下降(P＜0.01,P＜0.05),CD31显著升高(P＜0.001);Z2与M2比较,P450、COX-2、ERa表达下降显著(P＜0.01,P＜0.001,P＜0.05).在异位内膜方面,①与正常组比较:M1及M2组P450、COX-2表达及M2组ERa值表达均显著增高(P＜0.001,P＜0.01);②M1与M2组比较:M2组COX-2、ERa、P450表达与M1组比较有增高趋势(P=0.001,P=0.051,P=0.122);③治疗前后比较:Z1与M1比较,P450显著下调(P＜0.05)、COX-2及ERa无显著变化;Z2与M2比较,P450、COX-2、ERa下降显著(P＜0.001,P＜0.001,P＜0.05).结论:蒲灵化瘀止痛方可多靶点治疗AM.病程早期的中药治疗主要以血管生成相关因子为靶点,改善早期在位内膜的缺血缺氧状况,直接截断由此触发的雌激素生成的正反馈链.疾病的后阶段,中药治疗靶点主要是在位及异位内膜雌激素效应相关因子,通过雌激素效应的变化影响血管生成因子的变化.

蒿甲醚、双氢青蒿素对小鼠硬皮病模型的影响

目的:研究蒿甲醚及双氢青蒿素对小鼠硬皮病模型的影响.方法:随机将60只Balb/c小鼠分为正常组,模型组,溶媒组,阳性药组(青霉胺200mg·kg~(-1)),蒿甲醚低,高剂量组(5,20mg·kg~(-1)),双氢青蒿素低,高剂量组(5,25 mg·kg~(-1)).以0.1 mL 200 mg·L~(-1)博莱霉素对小鼠进行皮下注射,持续3周,制备硬皮病模型.造模同时灌胃给予不同剂量药物4周.给药完成后次日取皮肤和肺进行分析.观察HE染色后小鼠皮肤厚度和真皮纤维化程度,对皮肤羟脯氨酸含量,胶原含量进行测定.结果:与模型组相比,各药高剂量组皮肤厚度,胶原含量显著减少,其他各治疗组小鼠皮肤硬化程度也得到一定的改善.结论:蒿甲醚、双氢青蒿素对预防性治疗硬皮病小鼠有一定的疗效.

槌果藤对硬皮病小鼠模型皮肤硬化抑制作用的实验研究

系统性硬化症(PSS)是以真皮层胶原过度沉积为特征的结缔组织病,至今病因未明,治疗困难.Yamamoto等用博莱霉素皮下注射的方法成功诱导出C3H小鼠的硬皮病样改变,该小鼠模型在组织学、生物化学、细胞因子表达等方面与硬皮病十分相似[1],因此,研究者常以此为模型进行硬皮病病理、治疗方面的研究.

利用CRISPR/Cas9构建R778L类型肝豆状核变性疾病小鼠模型

目的 利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑系统构建针对人肝豆状核变性R778L突变类型的R780L突变小鼠.方法 通过BLAST比对人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列,证明二者保守性.通过CRISPR/Cas9系统进行小鼠受精卵显微注射,并对小鼠肝豆状核变性症状进行病理和生理学检测.结果 人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列高度保守.通过CRISPR/Cas9技术成功获得纯合的R780L突变小鼠,该小鼠存在明显的肝脏铜离子淤积以及血清ALT、AST的升高且未发现有可检测出的脱靶效应.结论 成功利用CRISPR/Cas9介导的基因敲入系统构建了针对人肝豆状核变性R778L类型的R780L突变小鼠模型.

二苯乙烯苷对β-淀粉样肽致痴呆模型小鼠行为及胆碱能功能的影响

老年性痴呆(alzheimer disease,AD)是以脑老化为基础的神经退行性疾病,发病机制复杂.研究表明,β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ-)沉积是AD发病的中心环节.二苯乙烯苷(2,3,5,4'-tetrahydroxy stilbene-2-O-β-D-glycoside,TSG)是中药何首乌的主要有效成分.我室以往的研究表明,TSG可明显保护体外培养的神经细胞抵抗Aβ-、H2O2及高糖所致的细胞存活率下降和乳酸脱氢酶漏出增多[1];明显改善急性脑缺血致啮齿类动物学习记忆功能,减少缺血半暗带,抑制脂质过氧化和细胞内钙超载[2].本研究的目的是观察TSG对Aβ1-40片段右侧脑室注射(Aβicv)致痴呆小鼠模型的影响.

科学家发现黄体酮引发炎症

近美国密西根州大学(MSU)的科学家发现,接触黄体酮能够激活引发乳腺炎症的基因.而黄体酮诱导的炎症可能是增加乳腺癌风险的一个关键因素.黄体酮是一种先天存在的类固醇激素,它能促进正常乳腺的发育.先前黄体酮作为乳腺癌的一个危险因素已被证实,这项研究发表在<类固醇生物化学与分子生物学>杂志上,MSU科学家通过黄体酮及它们在小鼠模型中的激活效应检测到一些基因的活性.