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重组蛋白及合成肽抗原在戊型肝炎病毒感染诊断中的应用
由于HEV体外培养一直未获成功,以重组蛋白或人工合成肽作为抗原来检测抗-HEV已成为戊肝实验室诊断及流行病学调查的主要手段.本文从HEV抗原表位的研究、重组蛋白和合成肽在HEV感染诊断中的应用及其诊断学意义和存在的问题几个方面作一综述.
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VEGF受体结合抑制肽的重组表达与活性分析
通过阻断肿瘤血管新生的相关因子与受体的结合抑制肿瘤血管的形成,已成为近年肿瘤治疗的重要研究策略.VEGF和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是促进血管内皮细胞生长重要的因子.本研究前期工作中已通过筛选噬菌体随机肽库,获得阳性克隆之一7P419(所带肽序列为GWYYDAX,X代表一特定氨基酸),该短肽具有明显的抑制VEGF的活性.本文将7P419与硫氧还蛋白Trx融合表达,检测该融合蛋白的抑制效果,并与人工合成肽7P419比较.
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艾滋病毒重组抗原及第三代艾滋病毒抗体EIA诊断试剂盒的研制
近年来中国的艾滋病毒(HIV)感染人数以每年30%的速度增长,HIV感染者总数已超过60万人,感染者已从吸毒人员、献血员等高危人群扩展到社会各个阶层,我国已处于艾滋病泛滥前的关键时期.HIV诊断试剂盒是HIV防制工作中重要的技术工具.用于人群筛检的HIV诊断试剂盒已历经三代,第一代试剂盒主要使用来自细胞培养的HIV病毒的裂解产物作为抗原;第二代产品使用基因工程重组抗原和/或人工合成肽作为抗原,使包被抗原中免疫优势区的比例明显增强,从而提高了试剂的灵敏度,而且标准化生产的相对更纯的抗原的使用使试剂的特异性和重复性均大为提高.前两代试剂均采用间接法原理,即先以抗原包被聚丙乙烯板,再加入待检血清,后加入酶标记的抗人IgG抗体,因此均只能检测IgG抗体.1992年问世于美国的第三代试剂则采用双抗原夹心法,即先以抗原包被,再加入待检血清、酶标记的抗原,从而可同时检测所有类型的抗体,明显提高了试剂的灵敏度,同时由于采取了双抗原识别机制,特异性也得到了明显提高,因此在国外已取代间接法而成为主流试剂.
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复合抗原多肽及其在血吸虫病疫苗中的研究进展
人工合成肽是研制分子疫苗和免疫诊断抗原一种替代途径.以含有抗原表位的短肽为基础合成多肽疫苗或诊断抗原,相对于天然或重组的蛋白质抗原,分子结构更为明确,它既保留了诱导免疫保护性应答的活性,又除去了非特异性成分,也易于生产.因此合成多肽研究在近年来已取得了很大的进展[1,2].
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新型人工合成肽:水蛭素类似物-降钙素基因相关肽嵌合体的抗凝活性
目的针对急性冠状动脉综合征存在的冠脉内血栓形成的特点,根据水蛭素及降钙素基因相关肽的生物学效应,设计出新型人工合成肽类:水蛭素类似物-降钙素基因相关肽(Hirulog-CGRP, HC),测试该嵌合肽是否具有水蛭素的抗凝血酶药理作用.
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人血管内皮生长因子合成肽的设计与合成
目的:预测血管内皮生长因子(VEGF)连续性表位,利用VEGF合成肽制备抗VEGF合成肽单克隆抗体.方法:根据VEGF189氨基酸序列,采用抗原指数方案及Goldkey软件,预测VEGF表位,确定合成肽序列,在430 A固相自动肽合成仪上合成.结果:VEGF氨基端1~26残基被确定为合成肽序列并合成.结论:VEGF抗原表位的预测与合成,为利用VEGF合成肽制备抗VEGF合成肽单克隆抗体提供了一条有效的途径.
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人工合成VEGF表位模拟7肽的生物学功能研究
目的: 检测人工合成血管内皮细胞生长因子(VEGF)表位模拟7肽特异抑制VEGF促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的活性.方法: 通过噬菌体展示技术, 筛选获得了表达模拟肽的阳性噬菌体克隆, 经测序得到VEGF表位模拟肽序列: GWYYDAX.人工合成该短肽, 用体外细胞培养的方法检测其对HUVEC的生长抑制作用.结果: 表位模拟肽 GWYYDAX可剂量依赖性抑制VEGF促进HUVEC生长的活性.结论: VEGF表位模拟肽可能模拟了VEGF的部分结构, 竞争结合HUVEC细胞VEGF受体(KDR),阻断了VEGF-VEGFR的信号传递而抑制细胞生长, 具有潜在的应用前景.
关键词: 噬菌体展示技术 血管内皮细胞生长因子 表位模拟肽 人工合成肽