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重组蛋白及合成肽抗原在GBV-C/HGV感染诊断中的应用
GBV-C是近几年刚发现的新病毒,对其致病性等方面的研究还不是很清楚.其诊断主要依赖于RT-PCR检测病毒RNA,但不适于临床常规检测及大面积筛查.以重组蛋白和合成肽作抗原检测血清中抗GBV-C抗体更适合于GBV-C感染的诊断和流行病学调查,有望得到广泛的应用.本文从GBV-C/HGV抗原表位研究及重组蛋白、合成肽在GBV-C感染诊断学和流行病学中的应用及其意义作一综述.
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重组蛋白及合成肽抗原在戊型肝炎病毒感染诊断中的应用
由于HEV体外培养一直未获成功,以重组蛋白或人工合成肽作为抗原来检测抗-HEV已成为戊肝实验室诊断及流行病学调查的主要手段.本文从HEV抗原表位的研究、重组蛋白和合成肽在HEV感染诊断中的应用及其诊断学意义和存在的问题几个方面作一综述.
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检测抗HIV-1/2型抗体的双抗原夹心方法的建立及其试剂盒的研制
目的建立更敏感的检测人免疫缺陷病毒(HIV)抗体的方法,并研制检测试剂盒。方法根据HIV-1/2型的基因序列及其所编码氨基酸结构,采用固相法合成了HIV-1型的gp41.1、gp41.2、gp120、p24和HIV-2型的gp36五条多肽,混合包被酶标板作为固相抗原。用辣根过氧化物酶标记以上多肽抗原作为标记物,建立检测血清中抗HIV-1/2抗体的双抗原夹心ELISA法。同时,应用该方法制备检测HIV抗体的试剂盒,并检测三批中国卫生部药品和生物制品检定所HIV诊断试剂国家参比品。结果建立了检测HIV-1/2抗体的双抗原夹心法。用检定所参比品检测,该方法特异性、灵敏度均为100%,变异系数小于10%。与间接法相比较其灵敏度、特异性均高于间接法(P<0.05)。检测210份其他病种患者血清均为阴性。与GBI公司的HIV抗体诊断试剂比较,检测40份卫生部药品和生物制品检定所提供的质控参比品(阳性20份,阴性20份),GBI试剂阴、阳性符合率及总符合率分别为100%(20/20)、85%(17/20)及92.5%(37/40),而应用该方法所研制的诊断试剂盒阴、阳性符合率及总符合率为100%。该试剂已通过国家卫生部质检。与雅培公司HIV诊断试剂比较检测90份献血员血清和88份HIV-1/2型感染者血清,符合率为100%。试剂盒于37℃放置4d后检测结果的阴、阳性判定不受影响。结论本法特异性强、灵敏度高、稳定性好,适用于献血员的筛选和临床HIV感染的检测。
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病毒样颗粒在免疫测定中的应用研究进展
检测病毒感染的免疫测定所用的抗原主要有灭活的病毒、具有病毒抗原表位的合成肽抗原以及利用基因重组技术构建和表达的重组蛋白.使用灭活病毒提取的抗原纯度相对较差,亦影响测定的特异性和灵敏性.许多病毒因不能人工培养或感染动物,或具有潜在的传染性和致病性,使得抗原的获得受到限制.