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血吸虫核酸疫苗研究进展
血吸虫病(Schistosomiasis)对人畜危害极大,它的防治是当今血防工作中的一个急待解决的重要课题.目前不少学者倾向于寻求一种有效的血吸虫疫苗,作为综合防治中的主要措施之一,随着现代分子生物学及免疫学的发展,血吸虫疫苗已由灭活疫苗、减毒活疫苗和基因工程重组蛋白疫苗进展到核酸疫苗,这是一种新型疫苗,同分子疫苗一样,也属于一种亚单位疫苗.本文拟在核酸疫苗及其在血吸虫方面的研究进展方面做一综述.
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囊虫病的分子生物学研究进展
分子生物学技术的发展推动了许多研究领域的不断进步,使许多研究更加深入完善.近年来,将分子生物学技术应用于囊虫病的研究,不仅使我们对囊虫病的致病机理有了更深层次的了解,为我们更好的诊断和治疗囊虫病也提供了新的途径和方法.本文对囊虫病的分子生物学研究进展作一综述,以期对现有研究成果总结的基础上,为今后的研究提供新的视角和方向.
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肺炎衣原体Mr 53×103蛋白全基因克隆和表达
肺炎衣原体是1989年确立的衣原体属新种,相对分子质量(Mr)为53×103的蛋白是高度保守的肺炎衣原体主要的种特异性抗原〔1〕,位于病原体表面,其全基因含1*!482个碱基对,推测编码493个氨基酸。Mr 53×103蛋白与肺炎衣原体慢性感染有关,可能用作感染慢性化的标志〔2〕;抗Mr 53×103单抗能中和肺炎衣原体的感染〔3〕,表明Mr 53×103蛋白还是一个理想的预防肺炎衣原体感染的分子疫苗候选者。本实验克隆和表达了肺炎衣原体Mr 53×103蛋白的全长基因,为进一步研究该蛋白是否参与肺炎衣原体毒力因子的构成,以及其在肺炎衣原体感染检测上的意义和能否作为预防肺炎衣原体感染的分子疫苗等打下基础。
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日本血吸虫再感染与人体获得性免疫关系研究
该研究为WHO/UNDP/World Bank/TDR和澳大利亚医学研究委员会(NHMRC)联合资助项目.旨在进一步了解日本血吸虫病洞庭湖疫区人群疫水暴露、感染和再感染规律,探索是否存在对日本血吸虫感染的年龄依赖获得性免疫及其与再感染的关系;以流行病学方法确定对再感染的易感者和拮抗者人群为研究对象,用多种目前重组日本血吸虫候选分子疫苗进行免疫学研究;评估有效治疗对血吸虫病亚临床发病的影响.
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083抗曼氏血吸虫模拟位肽分子疫苗的合成及特征
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血吸虫病DNA疫苗研究进展
血吸虫病疫苗研究已有60多年的历史,大体上经历了死疫苗、减毒活疫苗和分子疫苗这几个研究阶段.死疫苗的抗感染效果很差,几乎不能诱导机体产生保护性免疫力;减毒活疫苗虽能产生明显的保护性免疫力,但存在抗原大批量供应及潜在致病性等缺点,其实际应用受到一定限制;分子疫苗比较完全,是一种很好的血吸虫病疫苗,但它要经过基因克隆、表达和蛋白纯化等复杂过程,成本较高,因此尚需研制新型血吸虫病疫苗.
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复合抗原多肽及其在血吸虫病疫苗中的研究进展
人工合成肽是研制分子疫苗和免疫诊断抗原一种替代途径.以含有抗原表位的短肽为基础合成多肽疫苗或诊断抗原,相对于天然或重组的蛋白质抗原,分子结构更为明确,它既保留了诱导免疫保护性应答的活性,又除去了非特异性成分,也易于生产.因此合成多肽研究在近年来已取得了很大的进展[1,2].
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重组细菌-St疫苗研究进展
细菌性疫苗简称菌苗,在控制鼠疫、炭疽、破伤风和结核等细菌性疾病方面作出了重要贡献.传统菌苗种类包括活菌苗、纯化菌苗或亚单位菌苗、类毒素和联合菌苗,现代菌苗则包括分子疫苗、DNA疫苗和微胶囊疫苗等,这些菌苗均存在这样或那样的副作用,因此尚需研究新型菌苗.
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弓形虫ROP16Ⅰ/ⅢDNA疫苗不能诱导小鼠有效的保护性免疫
目的 利用ROP16Ⅰ/Ⅲ基因真核表达重组质粒免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠体液免疫和细胞免疫,评估ROP16Ⅰ/nⅢ作为潜在的分子疫苗的价值.方法 克隆Chinese 1型弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ,将其插入真核表达载体pEGFP-C2中构建重组质粒pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ,脂质体法转染T293细胞并观察体外表达.Western blotting分析鉴定.将36只SPF级小鼠随机均分为:①PBS组;②空质粒组;③pEGFP-ROP 16 Ⅰ/Ⅲ组.每2周肌注免疫1次(100 μg/只),共3次;于免疫前及每次肌注前1d和末次免疫后2周收集小鼠血清,间接ELISA法检测血清抗弓形虫IgG.于末次免疫2周后取小鼠脾脏,分离淋巴细胞培养测细胞因子.剩余小鼠腹腔注射Chinese 1型弓形虫Wh3株速殖子1 000个/只,观察小鼠攻击感染后的存活时间和存活率.结果 真核表达载体构建成功,体外见到重组质粒pEGFP-ROP 16Ⅰ/Ⅲ在T293细胞的表达;pEGFP-ROP 16 Ⅰ/Ⅲ末次免疫后血清中IgG水平及脾淋巴细胞细胞因子均无明显升高(P>0.05);攻击感染后,免疫组小鼠比对照组的存活时间无延长(P>0.05);生物信息学分析发现ROP16Ⅰ/Ⅲ缺乏线性B细胞表位.结论 Chinesel型弓形虫的ROP16Ⅰ/Ⅲ由于其分泌的定位和结构特点,不能诱导小鼠产生有效的抗Wh3株攻击感染的免疫保护.
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重组Sj14-3-3,SjGST及mIL-12/聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)缓释微球对小鼠免疫保护性的研究
目的 研究聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球给药系统在血吸虫病分子疫苗中的应用,并探讨rSj14-3-3,rSjGST及mIL-12作为疫苗的协同作用,及mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th)在抗血吸虫病中的作用.方法 从pET28a/Sj14-3-3和GST重组质粒中诱导表达rSj14-3-3及rSjGST,过柱纯化.构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)mIL-12,并共同包入PLGA缓释微球.对制备的微球进行体外释放,观察其释放速度.分组免疫BALB/c小鼠,进行尾蚴攻击感染实验.在攻击感染6w后,剖杀小鼠,计算各组的减虫率.结果 各组的减虫率:单独rSj14-3-3组为27.6%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12组34.9%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12 PLGA微球组37.5%,rSj14-3-3与rSjGST混合后+PcDNA3.1(+)mIL-12 PLGA微球组38.8%;各组减卵率分别为(按以上组序)35.3%,49.1%,50.5%,和43.1%.结论 PLGA微球给药系统可诱导并调节体液与细胞免疫从而增强了疫苗的抗感染,抗生殖作用.但rSj14-3-3和rSjGST抗原之间未表现出协同作用.mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th),在BALB/c鼠抗血吸虫攻击感染发挥作用,增强了疫苗保护作用.
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弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能及免疫原性研究的新进展
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)可引起严重的人兽共患弓形虫病,给全世界经济造成巨大的损失,给公共卫生安全带来巨大的隐患.致密颗粒(dense granule)分泌的致密颗粒蛋白(dense granule proteins,GRAs)参与调节纳虫泡(parasitophorous vacuole,PV)及纳虫泡膜(parasitophorous vacuole membrane,PVM)的形成并能维持其结构稳定性,部分GRAs可参与宿主细胞的转录.近几年来,不断发现了多种新的GRA蛋白家族新成员,并随着对该家族成员研究的逐步深入,发现GRAs是研制抗弓形虫疫苗的候选分子之一.本文综述了弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能和免疫原性研究的新进展,旨在为研究弓形虫致病机理和研发新的抗弓形虫疫苗提供思路.
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弓形虫棒状体颈部蛋白及棒状体蛋白研究的新进展
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性细胞内寄生原虫.因其复杂的生活史和致病机理,目前尚无有效的专用药物进行治疗.近年来,关于抗弓形虫免疫及疫苗的研究逐步深入,棒状体颈部蛋白(RONs)及棒状体蛋白(ROPs)作为重要的抗弓形虫疫苗的候选抗原分子,广泛应用于新型抗弓形虫疫苗的研究中.本文总结了近几年来弓形虫棒状体颈部蛋白及棒状体蛋白的研究新进展,尤其是这些RONs及ROPs作为新型DNA疫苗分子研究的新进展.
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细菌转基因植物疫苗研究进展
细菌性疫苗简称菌苗,在控制鼠疫、炭疽、破伤风和结核等细菌性疾病方面作出了重要贡献.传统菌苗种类包括活菌苗、纯化菌苗或亚单位菌苗、类毒素和联合菌苗,现代菌苗则包括分子疫苗、DNA疫苗和微胶囊疫苗等,这些菌苗均存在这样或那样的副作用,因此,尚需研制新型菌苗.
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卡氏肺孢子虫疫苗研究进展
卡氏肺孢子虫疫苗是预防和治疗卡氏肺孢子虫肺炎的一种途径.本文综述了卡氏肺孢子虫死疫苗、活疫苗和分子疫苗的研究进展.
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刚地弓形虫分子疫苗研究新进展
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性细胞内寄生的重要机会致病性原虫(Opportunistic protozoan),因其生活史和致病机理复杂,直至目前尚未找到理想的治疗药物[1].
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幽门螺杆菌分子疫苗研究进展
本文从动物模型几种保护性抗原及其基因结构和它们的免疫保护效果等方面,介绍了幽门螺杆菌分子疫苗研究进展.