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血吸虫核酸疫苗研究进展
血吸虫病(Schistosomiasis)对人畜危害极大,它的防治是当今血防工作中的一个急待解决的重要课题.目前不少学者倾向于寻求一种有效的血吸虫疫苗,作为综合防治中的主要措施之一,随着现代分子生物学及免疫学的发展,血吸虫疫苗已由灭活疫苗、减毒活疫苗和基因工程重组蛋白疫苗进展到核酸疫苗,这是一种新型疫苗,同分子疫苗一样,也属于一种亚单位疫苗.本文拟在核酸疫苗及其在血吸虫方面的研究进展方面做一综述.
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血吸虫致弱疫苗的发展现状及展望
血吸虫疫苗是当前国际血吸虫病防治研究热点.疫苗种类很多,但是,除致弱尾蚴或童虫免疫的动物模型诱导出较高的免疫保护力外,其它方法或途径诱导的保护性均未达到WHO规定的40%保护力的标准.致弱方式有多种,通常多用射线照射包括X线、60钴、紫外线等.本文就γ-射线致弱尾蚴感染的动物模型为例,将近年来致弱疫苗的研究进展、存在问题和发展方向作一综述.
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肝门型童虫免疫血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库
近年来,血吸虫疫苗研究进展迅速,国内外学者克隆表达了一系列血吸虫抗原基因,但至今它们在动物宿主体内诱导的保护性免疫未达到降低虫荷40%或更多预期的研究目的[1].因此继续筛选新的血吸虫疫苗候选分子成为当前血吸虫病研究的热点之一.我们用日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原(SjHmAg)免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,以期发现特异的具有保护作用的日本血吸虫抗原基因,为血吸虫疫苗的研究提供新的候选分子.
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血吸虫种群基因结构:群体中不可忽视的个体基因细微差异
为研制曼氏血吸虫疫苗,已利用一系列候选抗原分子制备成疫苗.尽管作了大量艰苦研究,但是,对于在自然种群中,这些抗原分子的遗传变异及变异程度仍缺乏充分研究.本文作者建议:要将研究重点瞄准血吸虫种群遗传变异领域,大力开展种群遗传学探讨,这将有利于揭示疾病进程的本质和提高防治措施的效率.
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日本血吸虫DNA疫苗的构建
血吸虫病是一种严重危害人类及家畜的寄生虫病,据WHO估计患病人数达2亿,每年死亡人数约20万.血吸虫疫苗虽然种类较多,但由于保护性免疫力较差,至今未能实际应用.DNA疫苗是新近发展起来的一种新型疫苗,由于它自身的特点使其在抗寄生虫感染中意义重大,与其它疫苗相比,DNA疫苗简单方便易于组建多价疫苗[1].
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我国血吸虫疫苗研究进展和展望
疫苗是控制传染性疾病的有效手段,20世纪初人们曾设想研制血吸虫疫苗来预防和控制血吸虫病.血吸虫疫苗研究的历史,经历了从死疫苗、致弱活疫苗、亚单位疫苗到基因工程疫苗等的探索过程.
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日本血吸虫病核酸疫苗研究进展
血吸虫病是严重危害人类健康的寄生虫病,寻找新的杀虫药物和开发研制有效抗血吸虫疫苗已成为刻不容缓的工作.随着现代分子生物学及免疫学的发展,血吸虫病疫苗已由减毒活疫苗、基因重组抗原疫苗发展到核酸疫苗等阶段[1-2].疫苗是20世纪重要的公共卫生成就之一[3].
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血吸虫病防治药物研究概况
血吸虫病是一种广泛流行于热带和亚热带地区的人兽共患寄生虫病,给人们的健康带来严重威胁.在大规模的彻底灭螺和血吸虫疫苗的临床应用实现之前,血吸虫病治疗药物在很长一段时间内仍将是防治血吸虫病的主要手段.本世纪以来,出现过许多治疗及预防血吸虫病的药物,这些药物一般疗效较差、疗程长、毒性大,自广谱抗蠕虫药--吡喹酮问世以来,这些药物已很少应用.现将目前应用的及有应用前景的药物作一综述.
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我国抗血吸虫疫苗研究的成绩及展望
研制抗血吸虫疫苗,将为血吸虫病综合防治添加一个有力武器,是当前血吸虫病防治研究工作的一个难点.日本血吸虫病有多种储存宿主,而且家畜尤其是牛在血吸虫病传播中起了十分重要的作用.因此,研制兽用(牛用)抗血吸虫疫苗,以减少主要传染源,减少人畜感染,具有重要意义.我国已将日本血吸虫基因工程疫苗研究纳入了国家863高科技计划.自1995年起,国家以总理储备金专项拨款500万元,资助血吸虫病疫苗研究,全国有10个专业研究所与医学院校协作攻关,取得了较好的成绩.
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用表达序列标签(EST)法发现日本血吸虫新基因的研究
日本血吸虫基因组计划的研究有助于我们从多方面了解血吸虫这种复杂的多细胞生物,以促进抗血吸虫疫苗的研制,寻找新的杀虫药物以及研究血吸虫与宿主的关系.表达序列标签法(EST)是一种快速筛选生物新基因的常用方法.本文运用这种技术对日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA文库进行随机挑选,提取噬菌体DNA作模板,进行PCR反应,将产物大于500 bp cDNA插入片段测序,得到115个表达序列标签(EST),其中有75个新基因,并得到一些有重要功能cDNA的克隆.
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血吸虫疫苗研究进展和展望
据统计,目前全球有74个国家6亿左右的人受到血吸虫病的威胁,尽管已有不少血吸虫病的防治经验,但要把人畜共患的血吸虫病危害减至少,仍有相当长的一段路要走.在我国血吸虫病广泛流行于长江沿岸及其以南的湖南、湖北、江西、安徽、江苏省和大山区的四川、云南省等地.建国50多年来的血吸虫病防治工作虽然取得一定成效,但并未得到彻底控制,究其原因,主要由于中间宿主钉螺的广泛存在,终宿主种类繁多,杀虫药物吡喹酮不能防止再感染等.
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日本血吸虫pVAX1/SjRPS4·CB多价疫苗免疫对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响
目的 观察血吸虫pVAX1/SjRPS4·CB多价疫苗诱导免疫对小鼠肝脏虫卵肉芽肿大小的影响.方法 55只昆明小鼠随机分成5组.PBS对照组、pVAX1空质粒组、pVAX1/SjRPS4单价疫苗组、pVAX1/SjCB单价疫苗组、pVAX1/SjRPS4·CB多价疫苗组,每组小鼠在左后腿股四头肌肌注100 μg相应质粒或等量PBS.每隔2周加强免疫1次,共3次.末次免疫后2周经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴.感染后第6周剖杀小鼠,取出肝脏,常规切片染色,光镜下进行组织学观察及单个虫卵肉芽肿大小的测量.结果 与对照组相比,pVAX1/SjRPS4·CB多价疫苗免疫组虫卵肉芽肿平均周长和面积明显减小(P<0.05).形态学观察免疫小鼠肝脏虫卵肉芽肿周围仅有少量的嗜酸性粒细胞聚集,很少见到胶原纤维. 结论 pVAX1/SjRPS4·CB多价疫苗具有明显抑制肝脏血吸虫卵肉芽肿的效果.
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血吸虫糖蛋白研究进展
有关血吸虫疫苗的研究迄今已有70余年的历史.90 年代中期WHO/TDR 选定了6 种曼氏血吸虫候选疫苗分子,它们是28kDaGST、97kDa 副肌球蛋白、62kDaIrv-5、28kDa磷酸丙糖异构酶(TPI)、23kDa表膜抗原和14kDa脂肪酸结合蛋白.但这些候选疫苗分子单独免疫尚不足诱导40%以上的免疫保护力.因而,对血吸虫疫苗保护性抗原及其效应机制的研究还需要进行大量的基础性工作.糖蛋白是血吸虫主要抗原物质,大量存在于童虫和虫卵阶段,在血吸虫免疫应答及免疫调节方面起着十分重要的作用.现已证明,血吸虫糖蛋白不仅可以诱导保护性抗体,亦可诱导封闭性抗体的产生[1].因此,研究血吸虫糖蛋白的结构、功能及免疫机制,可为血吸虫疫苗的发展提供新的策略.本文就血吸虫糖蛋白及其在疫苗研究中的进展概述如下.
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致弱尾蚴感染血清对日本血吸虫尾蚴和成虫抗原免疫识别初步研究
众所周知,血吸虫减毒尾蚴可诱导宿主产生较高免疫保护力,但是,刺激宿主免疫系统的究竟是哪些目标抗原,目前仍未定论.血清被动转移实验证明减毒尾蚴多次免疫后血清可诱导宿主产生针对幼虫期的免疫保护,因此我们用多次免疫兔血清初步筛选日本血吸虫可溶性尾蚴中的保护性抗原,以期为血吸虫疫苗的研制提供一些新的线索.
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血吸虫疫苗的研究进展
人畜共患的血吸虫病的危害是人所共知的.长期以来,人们一直在寻找能够控制与消灭血吸虫病的有效途径.血吸虫疫苗的研究,给人类带来了新的曙光,疫苗的研究仍然是当前的研究热点与难点.湘雅医学院血吸虫病研研室在疫苗的研究方面取得了可喜的成绩,30多个新基因的发现,及对部分新的基因的进一步研究,为血吸虫疫苗的研制提供了大量的科学依据.下面主要从核酸疫苗、表位疫苗和蛋白质疫苗三方面来阐述该研究室血吸虫疫苗的研究进展.
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CpG协同Calpain DNA疫苗诱导BALB/c鼠Th1免疫应答和抗日本血吸虫感染
探讨含非甲基化CpG单核苷酸(CpG-ODN)协同Calpain DNA疫苗抗日本血吸虫感染的保护性作用、诱导的免疫应答类型及其免疫机理.Calpain基因从原核表达载体PGEX-2TK亚克隆到含小鼠IL-2基因启动序列的真核表达载体pVAC,构建含日本血吸虫疫苗候选分子Calpain基因的真核表达体系pVAC-calpain的DNA疫苗,构建的DNA疫苗与CpG ODN免疫BALB/c小鼠,在不同阶段采血测定免疫鼠抗体的动态变化、RT-PCR分析免疫鼠细胞因子IFN-γ,IL-4,IL-12的表达,加强免疫一周后用日本血吸虫尾蚴攻击感染免疫鼠,用减虫率、减卵率及其病理组织学指标考核保护性免疫的效果.pVAC-calpain的DNA疫苗体系诱导了IgG抗体的产生,免疫3周后细胞因子IFN-γ,IL-4,IL-12的表达表现出差异.特别是在CpG-ODN和pVAC-calpain免疫组IFN-γ,IL-12有高度表达,而IL-4的表达受到相对抑制,对攻击感染的日本血吸虫表现出了45%的减虫效果,虫卵肉芽肿的面积显著性的减少.CpG ODN协同日本血吸虫Calpain DNA疫苗诱导了Th1为主的免疫应答,并能部分抵抗日本血吸虫感染和减轻感染鼠由于Th2免疫应答所导致的虫卵肉芽肿反应,提示CpG ODN能够协同Calpain DNA疫苗抗日本血吸虫感染和缓解日本血吸虫免疫病理反应.
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华中科技大学成功构建出血吸虫DNA疫苗等8则
华中科技大学同济医学院石佑恩教授将DNA疫苗技术应用于血吸虫病疫苗研究,近成功构建出了可迅速应用于动物的血吸虫DNA疫苗.国家卫生部和全国血吸虫病专家咨询委员会组织评审,并对国内现有的10多种各类型血吸虫疫苗进行双盲测试表明:该DNA疫苗的免疫保护效果列前三名.
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血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠肝脏虫卵
目的检测血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠肝虫卵肉芽肿细胞内TNF-mRNA表达的影响.方法用106CFU疫苗皮下注射和腹腔注射分别免疫BALB/C鼠,免疫后8W用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后6W剖杀小鼠,分离肝脏,运用原位杂交技术检测TNF-αmRNA表达.结果疫苗免疫,尾蚴攻击后小鼠肝虫卵肉芽肿细胞内TNF-α mRNA表达显著加强.结论血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗能促进宿主Thl反应,加强宿主抗血吸虫感染的保护性免疫力.
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日本血吸虫疫苗候选分子的研究进展
日本血吸虫病是一种威胁6亿人身体健康的严重寄生虫病,感染人口2亿,患者2千万左右.据2001年调查,我国现有9千万人口受日本血吸虫病的威胁,有82.1万日本血吸虫病患者,其中慢性患者79.5万.目前治疗日本血吸虫病的主要方法是化疗药物吡喹酮的应用,但药物虽能降低感染率和发病率,却不能阻断传播,对已经形成的虫卵肉芽肿没有作用,再次接触疫水后会再感染.由于药物的频繁应用,尚不能排除血吸虫有潜在抗药性的危险,加上重复化疗和长期的监测措施需要昂贵的费用和大批专业技术人员.为此,促成人们开展寻找控制血吸虫病的辅助或替代方法-血吸虫疫苗的研究.
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血吸虫DNA疫苗的研究进展
血吸虫病是由复殖寄生吸虫引起的以虫卵肉芽肿和肝纤维化为主要特征的免疫性疾病,呈全球性分布,在74个国家大约2亿人受到不同程度的感染,6亿人受到潜在的威胁[1].血吸虫病的治疗已取得突破性进展,但是由于反复感染发生迅速,需要重复治疗,血吸虫病仍难以控制.故发展血吸虫疫苗是血吸虫病防治中的重要手段.