首页 > 文献资料
-
SELEX技术及其应用研究进展
SELEX技术是一类在体外筛选能与各种配体特异结合的寡聚核苷酸片段的一项新组合化学技术,具有靶分子范围广,筛选出的配体亲和力和特异性高等特点.筛选出的特异寡聚核苷酸片段,不仅在疾病的诊断、治疗与药物的快速开发等方面起着重要作用,也为核酸结构和功能的研究提供了一个有效的方法.
-
老年痴呆流行病学进展
我国对老年痴呆的流行病学研究已经做了不少工作.据卫生部信息研究所报道自1983~1996年我国研究老年精神状态的文献810篇,自1981年至今,仅老年痴呆有关的流行病学文献91篇.美国国立卫生院(NIH)PubMed文库1999年有40多篇老年痴呆研究论文,老年痴呆是世界关注的重大医学课题之一.
-
推荐《中国公共卫生与健康新思维》一书
由中国疾病预防控制中心流行病学首席专家曾光研究员主编的<中国公共卫生与健康新思维>于2006年5月出版,是人民出版社<资政文库>系列丛书之一.该书的出版体现了我国广大人民在党的领导下战胜SARS以后,公共卫生学术与事业的发展已经成为全国上下关注的亮点.人们对该书的出版深表赞赏.我谨向读者推荐.
-
日本各地收藏中医古籍的图书馆(三)——静嘉堂文库
静嘉堂文库位于日本东京世田谷区称为冈本的地方,从东京站附近的大手町坐地下铁半藏门线25 min至二子玉川站后,再换乘东急公交车,约10 min的路程,便可抵达静嘉堂文库美术馆.这是一座英国式的建筑,它的外表非常幽静,给人一种肃穆感.
-
日本各地收藏中医古籍的图书馆(八)——蓬左文库
日本中部城市名古屋,位于东京和京都之间,是中部地区工业、商业、交通中心,又称之为中京.名古屋城历史不太悠久,400多年前的1610年建城.因由尾张藩藩主居城统治,故日本历史上称之为尾张,本文所介绍的著名公立机构——蓬左文库就诞生在这里.蓬左文库位于名古屋市东区德川町,其交通便利,从名古屋站前第2号乘车口坐基干2号,抵达“德川园新出来”站下车后,步行3分钟即可到达.蓬左文库的外观黑白相间,颇似中国唐代建筑.灰黑色三角形宽大的房檐,配合同色的窗框和门框,使人感觉非常简明清爽.
-
SELEX技术及其在医学中的应用
指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一类新的组合化学技术,应用人工合成的随机寡核苷酸文库,通过筛选、分离、富集获得能与各种配体特异结合的寡核苷酸适配子(Aptamer),且具有高亲和力.目前涉及多种疾病治疗的适配子,包括感染性疾病,肿瘤,心血管疾病,免疫系统疾病等已被筛选出来,并且疗效已经通过体外实验或动物模型得到证实.两个适配子已进入药物Ⅲ期临床实验阶段,还有很多适配子正处于预临床实验阶段,其中部分将很快进入临床实验.本文综述了SELEX技术及寡核苷酸适配子在治疗领域的新进展,并且对其前景进行了分析和预测.
-
基因芯片技术及其在药学领域的应用
1 引言1995年,Schena[1]在
杂志上发表文章,他把拟南芥菜植物的cDNA文库中的48个cDNA用PCR方法扩增后,把PCR产物固化在玻璃片上,制成基因芯片(DNA microarray,也称DNA芯片).然后从拟南芥菜的不同组织中提取mRNA 反转录得到带荧光标记的cDNA,把不同组织来源的 cDNA混合后与玻璃片上的DNA进行杂交,用荧光双通道扫描系统对杂交点的荧光信号进行扫描分析,得到了拟南芥菜不同组织中基因的表达情况.自Schena的成功报道后,短短四﹑五年时间,有关基因芯片技术的研究与应用的报道已大量出现在多种新闻与学术媒体中. -
灭蚊真菌-贵阳腐霉Pythium sp.GY1938菌株cDNA文库的构建及鉴定
目的 构建灭蚊真菌-贵阳腐霉Pythiumsp.GY1938菌株cDNA文库,为进一步筛选和克隆GY1938菌株特异表达基因奠定基础. 方法 以GY1938菌丝体为材料,液氮研磨法制备总RNA并分离纯化mRNA,应用SMAR-Ter技术将LD-PCR法合成并分级纯化的dscDNA连接至pSMART2IFD载体,电穿孔法转化至大肠埃希菌HST08,构建GY1938菌株cDNA文库,进行滴度、重组率和重组片段大小等文库质量检测. 结果 检测GY1938菌株cDNA文库滴度达1.36×106 cfu/ml,重组率为98%,插入片段长度约为300~2 500 bp. 结论 成功构建了较为理想的贵阳腐霉GY1938菌株cDNA文库,该文库可用于新基因的筛选、克隆和功能研究.
-
定向进化技术在蛋白质开发中的应用进展
定向进化技术是一种利用实验室手段通过反复改造遗传多样性,结合文库高通量筛选而获得理想性状生物体的过程,现已成为在基础生物学和应用生物学领域应用广泛和有效的技术之一。目前已成功应用于蛋白质的研究和开发。蛋白质在生物催化、生物医药等领域具有广泛的应用。如何提高目的蛋白的产量、改善蛋白质的理化特性以及构建具有新催化活性的蛋白质以满足日益增长的需求是亟待解决的问题。而定向进化技术的发展为实现这样的目的提供了强有力的技术支持。本文就定向进化技术在蛋白质开发中的应用进行了综述。
-
荧光原位杂交技术在组织芯片中的应用
荧光原位杂交( FISH)是原位杂交技术的一种,不仅可以检测多个靶序列存在与否,还可以显示其存在的位置,它具有敏感度高、特异性强、无创性等优点。组织芯片技术具有体积小,信息含量大,一次性实验即可获得大量的结果,因此在建立疾病特别是肿瘤生物分子文库方面是一个强有力的工具,具有广阔的应用前景[1]。我们以检测HER2基因为例将FISH检测技术应用在组织芯片中,希望能为科研及临床工作者提供一些参考价值。
-
鉴别病毒受体方法的研究进展
病毒与易感细胞上的受体分子相结合,是病毒进入细胞的第一步,也是病毒嗜性的基础。这些受体分子介导的病理过程很可能与病毒的致病机制相关,鉴别病毒的受体对于了解其组织嗜性和病理机制,制定预防和治疗措施有着重要的意义。而且也为了解病毒与细胞的相互作用,病毒的感染周期等有趣的问题提供了基础的切入点。本文谨就识别病毒蛋白受体的几种方法的研究进展综述如下。1 筛选易感细胞的cDNA文库鉴别受体蛋白 这是一种既经典又在不断发展的方法。易感细胞的易感性来源于细胞内编码受体蛋白基因的表达,建立所有表达基因的cDNA文库,采用适当的方法筛选cDAN文库,则可直接找到编码受体蛋白的基因。一般的设计是:将易感细胞cDNA文库转染拮抗细胞,转染后获得编码受体蛋白克隆的拮抗细胞也获得了对病毒的易感性,就可以有病毒结合和进入,借助一些筛选标志可筛选出这些细胞从而分离出编码受体的克隆。其中筛选标志和策略的确定是关键,它依不同的病毒“量身定做”,有很强的针对性。
-
核糖体展示技术的原理与应用
通过构建分子文库(cDNA文库、随机肽库、抗体库及其它蛋白文库),采用合适的筛选技术可以非常方便、有效、快速地筛选生物活性物质.目前分子文库技术已经广泛应用于抗原表位分析、功能小肽分子(如肽类拮抗剂和激动剂)或功能蛋白分子(如抗体)的筛选和改造等领域.筛选技术主要有两类:1. 体内筛选技术,如噬菌体展示技术[1]、选择性感染噬菌体技术[2]等.
-
肝门型童虫免疫血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库
近年来,血吸虫疫苗研究进展迅速,国内外学者克隆表达了一系列血吸虫抗原基因,但至今它们在动物宿主体内诱导的保护性免疫未达到降低虫荷40%或更多预期的研究目的[1].因此继续筛选新的血吸虫疫苗候选分子成为当前血吸虫病研究的热点之一.我们用日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原(SjHmAg)免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,以期发现特异的具有保护作用的日本血吸虫抗原基因,为血吸虫疫苗的研究提供新的候选分子.
-
猪囊尾蚴保护性抗原cC1的疫苗研究
囊虫病是由猪带绦虫幼虫-囊尾蚴寄生于人和猪体引起的人、畜共患病,在我国囊虫病也有广泛的流行区域.抗原cC1是以囊虫病患者、病猪血清为探针从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选出的具有高度特异性的人、猪共同抗原[1].以抗原cC1为目的基因构建了含有全长cC1 cDNA的重组质粒p3-cC1,同时制备并纯化了重组抗原cC1,以p3-cC1为DNA疫苗,cC1蛋白加弗氏佐剂为抗原佐剂疫苗,用这两种不同形式的疫苗免疫接种小鼠观察免疫应答.
-
书讯
《特殊儿童教育与康复文库》已由南京师范大学出版社出版。本文库系国家出版基金项目、国家“十二五”重点图书出版规划项目,由南京特殊教育师范学院丁勇任总主编,励建安、李晓捷、陈小娟、许家成、杜晓新、黄冬、盛永进、何侃等任分册主编。
本文库分为“特殊儿童教育系列”与“特殊儿童康复系列”两个子系列共20分册。“特殊儿童教育系列”包括《残疾儿童权利与保障》《特殊儿童教育导论》《特殊儿童教育评估》《特殊儿童早期发展支持》《特殊儿童沟通与交往》《特殊儿童认知训练》《特殊儿童行为管理》《特殊儿童生活教育》《特殊儿童体育与运动》《特殊儿童生涯发展与转衔教育》。“特殊儿童康复系列”包括《特殊儿童康复概论》《特殊儿童物理治疗》《特殊儿童作业治疗》《特殊儿童语言与言语治疗》《特殊儿童心理治疗》《特殊儿童艺术治疗》《特殊儿童舞动治疗》《特殊儿童功能性视力训练》(附DVD光盘)《特殊儿童定向行走训练》《特殊儿童辅助技术》。 -
书讯
《特殊儿童教育与康复文库》已由南京师范大学出版社出版。本文库系国家出版基金项目、国家“十二五”重点图书出版规划项目,由顾明远、张海迪任总顾问,朴永馨、林宝贵、方俊明、励建安、贝维斯、卓大宏等任各分册学术顾问,南京特殊教育师范学院丁勇任总主编,励建安、李晓捷、陈小娟、许家成、杜晓新、黄冬、盛永进、何侃等任分册主编。
-
PCR技术在快速筛选DNA文库中的应用
目的探讨运用PCR(polymerase chain reaction)方法快速筛选DNA文库的可行性.方法以猪α-1,3GT cDNA片段为探针,用cDNA上的特异性序列合成的引物,采用噬菌斑原位杂交和PCR相结合的方法,对猪的gDNA文库进行α-1,3GT基因筛选,经酶切、Southern Blot、测序和荧光原位杂交定位.结果经过两次杂交和一次PCR即得信号很强的7个阳性单克隆,插入子均在8kb以上,且包含第三内含子,其中3个片段测序证实含第三、第四外显子;荧光原位杂交证实该基因位于染色体1q2.10-q2.11.结论PCR可以应用于快速筛选DNA文库.
-
噬菌体随机展示肽库及其应用
噬菌体随机展示肽库是一类利用丝状噬菌体发展起来的多肽文库.通过噬菌体展示技术,目前人们已能借助此类文库研究包括抗原决定簇的鉴定、疾病的诊断与治疗等许多领域的诸多关键性问题.本文简介此类文库的基本作用原理及应用.
-
大鼠肝再生相关基因LRRP1的克隆化
目的:利用抑制性消减杂交技术构建大鼠肝脏部分切除术后差异表达基因的cDNA文库,并通过同源引物反转录PCR的方法克隆大鼠肝再生相关基因LRRP1的全长序列.方法:分别提取肝脏部分切除术后24h以及对照大鼠肝脏mRNA,以之为模板合成cDNA,称为测试和驱动.酶切消化后将测试分成两组,分别与不同的接头连接,分别与驱动进行杂交,然后混合两份杂交液,加入过量的驱动不经变性进行第二次杂交即消减杂交.之后进行两次PCR扩增,将产物克隆入质粒载体,构建差显文库,测序后以生物信息学技术进行序列同源性比较.通过同源引物反转录PCR的方法克隆基因全序列,并用软件分析其蛋白结构.结果:成功构建大鼠肝脏部分切除术后的cDNA差显文库,消减效果良好.将所得的部分基因进行测序分析,选择一个未知序列,通过同源引物反转录PCR的方法克隆到大鼠肝再生相关基因LRRP1的全长序列,并初步分析了其蛋白结构.结论:确定了大鼠肝再生相关蛋白LRRP1的基因序列,并证明其在大鼠肝再生过程中高度表达.
-
HBeAg肝细胞结合蛋白基因的筛选与克隆
目的:HBeAg被认为与HBV引起免疫耐受、免疫系统功能障碍有关.筛选并克隆人肝细胞cDNA文库中与乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)相互作用蛋白的基因,明确其具体作用机制.方法:应用酵母双杂交系统3,将多聚酶链反应(PCR)法扩增的HBeAg基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠杆菌,接种在氨苄青霉素-LB平板上选择并测序,结果在GenBank中进行生物信息学分析.结果:成功克隆出HBeAg基因并在酵母细胞中表达,与肝cDNA文库配合后选出既能在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-gal的四缺培养基上生长,并变成蓝色的真阳性菌落39个,其中有5个未知基因,3个含金属硫蛋白2A基因的菌落,8个补体8 α基因,1个补体因子H,1个补体1q,1个维甲酸受体应答元件2基因、2个细胞色素b基因、3个铁蛋白轻链,2个NAD(P)H脱氢酶亚基,1个3-羟基类固醇表位酶,1个3-羟基,3-甲基戊二酰辅酶A合成酶,1个双-特异性酪氨酸-Y-磷酸化调节激酶1A转录子突变体,1个Syndecans-1,3个2胺氧化酶,4个醛缩酶B,1个CD81,1个ATP合成酶6基因.结论:成功克隆出乙型肝炎病毒e抗原的结合蛋白,为进一步研究HBeAg在病毒装配、分泌、影响宿主免疫系统功能等方面的具体作用提供了新线索.