首页 > 文献资料
-
pai猪血清防腐剂浓度选择及保存时间的探索
根据动物猪血清各项生化测定值与人类血清生化测定值相近似,我们在医学检验实验课中运用猪血清替代人血清制作实验标本,既保证了医学检验实验的要求,又保证了实验教学质量,达到了预期的实验效果,同时避免了来自临床病理标本的污染,及对学生可能造成感染而引发的伤害.在几十年的临床检验实验教学课中,我们对猪血清的保存条件进行了摸索,确定在医学检验实验课中用0.2%硫柳汞防腐的猪血清替代人血清制作实验标本是完全可行的.
-
猪血清肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响
目的:研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制.方法:猪血清腹腔复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后ig下瘀血汤的流浸膏,用药4周后和在造模过程中的1、2、4、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标.结果:MMP-2/9的高活性和TIMP-1的高表达贯穿于本模型的始终.MMP-9/13蛋白表达在肝纤维化发生发展过程中有先抑制后升高,再次抑制而后升高的反复过程,并受TIMP-1/2表达影响;下瘀血汤可以提高MMP-9活性,促进MMP-9/13而抑制TIMP-1,2表达.结论:该模型有MMP-9/13和TIMP-I/2表达的失衡;下瘀血汤可通过调控MMp-9/13和TIMP-1/2的表达,降解过度沉积的细胞外基质而发挥抗肝纤维化的作用.
关键词： 肝纤维化 猪血清 组织基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶且织抑制因子 细胞外基质 -
十二味穿甲片对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响
目的:研究十二味穿甲片对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响,并探讨其相关的作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性药组(秋水仙碱,0.1 mg·kg-1),中药十二味穿甲片2.8,1.4,0.7 g·kg-1剂量组.除正常组外,其余各组采用猪血清制备大鼠免疫性肝纤维化模型,造模同时给药进行抗肝纤维化干预,共6周.通过计算体重、肝脏指数,检测肝功能丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),球蛋白(GLO)水平和白球比(A/G),酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清透明质酸(HA)含量.苏木素-伊红(HE)染色以观察肝组织病理变化及马松(Masson)三色染色观察胶原纤维增生情况,评价药物的抗纤维化作用.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT,HA水平明显升高,肝指数明显升高(P＜0.01),ALB,A/G明显降低(P＜0.01),模型组肝组织的病变较明显;与模型组比较,十二味穿甲片除对血清AST,GLO的变化无明显影响外,能够显著降低肝纤维化大鼠血清ALT和纤维化指标HA水平(P＜0.01),不同程度地升高血清TP,ALB和A/G,并能显著地减轻肝组织的病变,尤以十二昧穿甲片2.8 g·kg-1剂量效果显著.结论:十二味穿甲片可明显改善模型大鼠肝纤维化程度,显示出一定的抗肝纤维化作用.
-
余甘子抗大鼠免疫性肝纤维化作用(Ⅰ)
目的:探讨余甘子对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化的影响.方法:采用大鼠ip猪血清,造成大鼠肝纤维化,ig余甘子提取物,采用放射免疫分析法测定其血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(P Ⅲ NP)、层黏连蛋白(LN)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、L-羟脯氨酸(Hyp)的含量,检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、软化性因子(TGF-β),探讨余甘子抗免疫性肝纤维化的作用机制.结果:余甘子提取物能减少TNF-α,TGF-β的含量,减少HA,PⅢNP,LN,MDA,Hyp含量,升高SOD活性,其作用呈剂量依赖性.结论:余甘子对猪血清致大鼠肝纤维化模型具有较好的抗肝纤维化作用.
-
两头尖提取物抗猪血清诱导大鼠肝纤维化的作用研究
目的:观察两头尖提取物对猪血清免疫诱导大鼠肝纤维化模型的干预作用.方法:SD大鼠68只随机分为5组,即空白组、模型组、两头尖提取物组(以下简称提取组)、两头尖原药组(以下简称原药组)、扶正化瘀组(以下简称扶正组).采用猪血清腹腔注射法制备大鼠肝纤维化模型,0.5mL/只,每周2次,连续注射15周.第15周模型成功后,开始灌胃给药,扶正组给予扶正化瘀胶囊(0.525g·kg-1),原药组给予两头尖煎液(0.7g·kg-1),提取物组给予两头尖提取物(0.071g·kg-1),模型组与空白组灌服等量生理盐水,日1次,疗程8周.大鼠于第23周末处死取材,分别测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),白蛋白(Alb),透明质酸(HA),层黏蛋白(LN),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),Ⅳ型胶原(CⅣ)含量与肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量.HE染色与Masson法检测肝组织病理；免疫组化法(SABC法)测定肝组织中Ⅰ型胶原(col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(col-Ⅲ)表达.结果:提取组、原药组血清ALT,AST,Alb,HA,PCⅢ,CIV水平,肝组织Hyp含量分别为(79.77 ±14.68),(75.20±11.21),(168.22±19.46),(173.72±18.52)U·L-1,(27.40±1.78),(26.95±2.14)g·L-1,(52.36±5.12),(43.29±3.56),(51.63±6.41),(52.18±4.79),(14.92±2.26),(13.93±1.88)μg·L-1,(1.04±0.12),(1.15±0.06) mg·g-1.与模型组相比,提取组、原药组可显著降低血清ALT,AST,HA,PCⅢ,CIV水平与肝组织Hyp含量(P＜0.05),升高血清Alb水平(P＜0.05).与模型组相比,提取组、原药组炎症活动度、纤维化程度显著减轻.Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达面积和强度明显为弱,纤维间隔染色淡,无典型假小叶形成.显色指数结果显示,提取组、扶正组肝组织中col-Ⅰ,col-Ⅲ表达均明显减少.结论:采用猪血清免疫法可成功制备肝纤维化大鼠模型,两头尖原药及其提取物具有良好的抗肝纤维化作用,且提取物抗肝纤维化作用基本等同于两头尖原药,推测其作用机制为抑制ECM合成并促进ECM降解有关.
-
德都红花-7味散对实验性肝纤维化大鼠肝功能和纤维化的影响
目的 研究德都红花-7味散对四氯化碳(CCl4)和猪血清(PS)诱导的肝纤维化的作用及其机制. 方法 120只大鼠随机分为CCl4造模组和PS造模组各60只,CCl4造模组采用腹腔注射30％ CCl4橄榄油溶液,PS造模组采用腹腔注射0.5ml PS.CCl4造模组和PS造模组再随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、德都红花-7味散高剂量组、德都红花-7味散低剂量组各12只,正常对照组和模型组给予蒸馏水每次2ml/100g,秋水仙碱组灌胃秋水仙碱0.2mg/kg,德都红花-7味散高、低剂量组灌胃德都红花-7味散0.52g/kg、0.31g/kg,按2ml/100g每日灌胃2次,共7周.观察各组大鼠肝功能和纤维化指标变化,并用HE、Masson、Gomori法染色,观察肝组织病理学变化,对炎症活动度及纤维化程度进行评分. 结果 与正常对照组比较,CCl4造模组和PS造模组肝功能、纤维化各项指标及炎症活动度、纤维化程度评分差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,秋水仙碱组和德都红花-7味散高、低剂量组均能改善大鼠肝功能、纤维化指标和病理学改变(P＜0.05).与模型组比较,德都红花-7味散高、低剂量组及秋水仙碱组炎症活动度及纤维化程度均降低(P＜0.05).结论 德都红花-7味散可能是通过减轻炎症反应,抑制免疫损伤和胶原合成,促进胶原的降解而起到抗肝纤维化作用.
-
猪囊尾蚴保护性抗原cC1的疫苗研究
囊虫病是由猪带绦虫幼虫-囊尾蚴寄生于人和猪体引起的人、畜共患病,在我国囊虫病也有广泛的流行区域.抗原cC1是以囊虫病患者、病猪血清为探针从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选出的具有高度特异性的人、猪共同抗原[1].以抗原cC1为目的基因构建了含有全长cC1 cDNA的重组质粒p3-cC1,同时制备并纯化了重组抗原cC1,以p3-cC1为DNA疫苗,cC1蛋白加弗氏佐剂为抗原佐剂疫苗,用这两种不同形式的疫苗免疫接种小鼠观察免疫应答.
-
蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠肝组织TLR4,TLR9表达的影响
目的:探讨蓝莓抗氧化作用对猪血清免疫性肝纤维化大鼠肝组织Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)和Toll样受体9(TLR9)蛋白表达的影响.方法:60只♂Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、蓝莓低、中、高剂量防治组(C、D、E组)、复方鳖甲软肝片防治组(F组).除A组外,其余各组均腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型.C、D、E、F组在造模同时分别给予蓝莓原浆或复方鳖甲软肝片灌胃,1次/d,共12 wk.第12周末处死大鼠,计算大鼠肝脏指数,行肝脏病理组织学检查,测定各组大鼠血清ALT和AST水平、肝组织匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,免疫印迹法(western blot,WB)和免疫组织化学法检测TLR4和TLR9蛋白质在肝脏组织中的表达.结果:各组大鼠血清ALT、AST水平无明显差异(F=4.274,0.917,P＞0.05)；与B组比较,D,E组肝组织匀浆SOD活性、GSH含量明显升高(F=6.662,61.472,P＜0.05)；肝脏指数、MDA及Hyp含量明显降低(F=3.972,42.755和41.265,P＜0.05)；肝纤维化程度明显减轻(F=63.339,P＜0.05),胶原表达减少；E组大鼠肝组织TLR4和TLR9蛋白质表达明显减少(F=6.932和7.534,P＜0.05).结论:TLR4和TLR9蛋白质表达增加可能与免疫性肝纤维化的发生发展有关.蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化有一定的预防作用.
-
四氯化碳和猪血清肝纤维化模型组织病理比较
目的:比较四氯化碳和猪血清染毒诱导的大鼠肝纤维化模型肝组织病理表现的异同.方法:四氯化碳组、猪血清组大鼠分别于每周一、四腹腔注射400 mL/L CCl4(2 mL/kg)、猪血清0.5 mL/鼠,连续7 wk.实验末取肝组织,常规切片,HE染色后光镜下观察肝组织病理改变;Masson三重染色、James染色后光镜下分别观察胶原纤维、网状纤维的增生情况,并采用病理图像系统进行半定量分析;另取部分肝组织,常规处理后电镜下观察超微结构变化.结果:猪血清组肝组织纤维间隔纤细,包含明显的胶原沉积,间质细胞成分多,胶原沉积并不弥散,仅限于纤维间隔,偶见细胞损伤.四氯化碳组纤维间隔粗大,弥散分布,纤维间隔内细胞成分多;肝细胞损伤严重且广泛,脂肪变性明显.病理图像分析系统半定量分析显示四氯化碳组胶原纤维和网状纤维面密度、数密度、周密度均显著高于猪血清组(P＜0.05或P＜0.001).结论:四氯化碳诱导的肝纤维化程度较猪血清严重.
-
甘泰康对抗大鼠免疫性肝纤维化的实验研究
目的:探讨甘泰康对大鼠免疫性肝纤维化的影响.方法:采用猪血清腹腔注射(0.5 ml/鼠)建立大鼠免疫性肝纤维化模型,造模同时给予甘泰康(0.27 g/kg@bw)灌胃,观察甘泰康对实验大鼠血清、肝匀浆透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCIII)含量的影响;HE、Masson染色、James染色后光镜下观察肝组织病理改变;病理图像系统定量分析,观察胶原纤维、网状纤维的增生情况;电镜下观察肝组织的超微结构变化.结果:甘泰康可有效对抗猪血清所致大鼠血清、肝组织HA、LN、PCIII含量升高,显著减少胶原纤维、网状纤维的增生,明显减轻猪血清所致肝组织病理变化.结论:甘泰康对猪血清致大鼠肝纤维化有一定的预防和减轻作用.
-
大鼠四氯化碳和猪血清肝纤维化模型比较
目的:比较四氯化碳和猪血清染毒复制肝纤维化模型的效果及其对大鼠血生化指标的影响.方法:正常对照组、四氯化碳模型组、猪血清模型组大鼠分别分别于每周一、四腹腔注射蒸馏水、40%CCl4、猪血清0.5ml/鼠,连续7wk.实验末测定肝功能(血清ALT、AST、TP、ALB、Tbili、Dbili)、血脂(TG、CHOL、HDL)及肝纤维化指标(血清、肝匀浆HA、LN、PCIII含量).结果:四氯化碳染毒大鼠一般状况差,体重增长速度明显减慢,肝功能、血脂显著异常,肝纤维化指标不但显著高于正常对照组,且较猪血清组有升高趋势;而猪血清除了引起肝纤维化指标显著升高外,对大鼠的一般状况、血生化指标均无明显影响.结论:四氯化碳诱导肝纤维化的程度或成功率较猪血清高,而猪血清法较四氯化碳造模法对动物的整体损伤要轻微得多.
-
老鼠簕生物碱A及其衍生物对免疫性肝纤维化大鼠的保护作用
目的 研究老鼠簕生物碱A及其2个乙酰化衍生物对免疫性肝纤维化大鼠的保护作用.方法 采用腹腔注射0.5ml的猪血清制备大鼠免疫性肝纤维化的模型,分别给予老鼠簕生物碱A、单乙酰化物(AcO-BOA)、双乙酰化物(TC-3),检测血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶的活性,以及用酶联免疫吸附测定法检测血清透明质酸和层粘连蛋白的含量,同时观察肝组织的病理变化.结果 与空白对照组相比,模型组的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、透明质酸和层粘连蛋白均有明显升高(P＜0.05);与模型组相比,3个化合物均能不同程度地降低丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶的活性和透明质酸和层粘连蛋白的含量(P＜0.05);病理结果显示,给药组均能减轻猪血清造成的肝损伤.结论 3个化合物具有不同程度抗肝纤维化形成的作用,且有保肝的作用,其机制可能与抑制细胞外基质的胶原合成有关.
-
山茶花总黄酮抗大鼠肝纤维化作用的实验研究
目的 观察山茶花总黄酮对腹腔注射猪血清诱导大鼠肝纤维化形成的抑制作用.方法 采用腹腔注射猪血清诱导大鼠肝纤维化模型,血生化分析仪检测大鼠肝功能、酶联免疫吸附(ELISA)法测血清中透明质酸(HA)、TGF-β1 含量,测定组织中羟脯氨酸(HYP)含量,并行肝脏组织病理学检查.结果 与模型组比较,TFC 注射液可明显降低大鼠天冬氨酸、丙氨酸转氨酶水平,明显提高血清总蛋白和白蛋白含量,表明其对肝功能的损伤有一定保护作用;明显降低血清透明质酸、TGF-β1 含量和肝组织中羟脯氨酸的水平,组织病理检查显示,对肝组织纤维化病变有一定程度改善的作用.结论 山茶花总黄酮对腹腔注射猪血清诱导大鼠肝纤维化形成具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β1 产生有关.
-
VetTest 8008半自动生化仪和Hitachi 7600-110全自动生化仪检测猪血清结果比对分析
目的:探讨实验动物用爱德士VetTest 8008半自动生化仪与人用Hitachi 7600-110全自动生化仪对健康蕨麻小型猪血清检测结果的差异.方法:利用2种生化仪对6个血清样品的12项指标进行双份平行测定.结果:12项指标中,ALT(丙氨酸转移酶)、Ca(钙)、CREA(肌酐)、GLOB(球蛋白)、PHOS(磷)、TBIL(总胆红素)6项指标之间具有显著差异(P＜0.05或P＜0.01),并且其回归方程线性关系也具有较大偏倚,其他指标的回归方程线性关系良好.结论:动物血清的生化指标检测应采用动物用爱德士VetTest 8008半自动生化仪,以便获得与实际更为相符的准确结果.
-
高胸段硬膜外阻滞对急性心肌缺血/再灌注损伤猪血清cTnI及CK-MB的影响
体外循环(CPB)下心脏直视手术及经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)都不可避免地存在着不同程度的急性心肌缺血/再灌注损伤(MIRI).
-
清肝胶囊对猪血清所致大鼠慢性肝损伤肝纤维化的保护作用
清肝胶囊(Qing Gan Jiao Nang,QGJN)为一中药复方制剂.属临床经验方,由龙胆、茵陈、黄芩、栀子、大黄等中药组成.具有清热解毒,疏肝理气等作用.经初步临床验证对各型急慢性肝炎、肝纤维化等肝病具有较好疗效.本研究采用由猪血清所致大鼠慢性肝损伤、肝纤维化模型观察其疗效及其作用机制报道如下.
-
猪血清联合ConA建立Balb/c小鼠肝纤维化模型及评价
肝纤维化(hepatic fibrosis, HF)是诸多致病因素导致肝硬化的前期病理过程.我国每年由乙型肝炎病毒等病毒感染引起的肝硬化患者众多.免疫法造模致肝纤维化与临床上慢性肝炎所致的肝硬化在发病机制上较为接近,有利于对肝纤维化的发病机制进行深入研究,为筛选抗肝纤维化药物提供客观依据[1].
-
高脂饲料和异种血清联合诱导小鼠肝纤维化模型的实验研究
利用高脂饲料和异种血清诱导建立肝纤维化模型,检测炎性因子的表达情况.将BALB/c小鼠随机分为正常小鼠组、高脂饲料饮食组、腹腔注射异种血清组、高脂饲料联合腹腔异种血清注射组.6周后,比较4组小鼠体重以及肝重指数,收集肝脏标本经HE和Masson染色后光镜观察肝组织的结构变化以及胶原纤维状况,并提取肝组织的总RNA,RT-PCR检测白介素-17A(IL-17A)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)、Ⅰ型胶原蛋白(COLL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等基因mRNA水平的改变.结果显示与正常对照组体重及肝重指数(26.7±2.5g,5.24±0.81)相比显示,高脂饲料饮食组(30.4±3.7g,5.44±0.32)和高脂饲料联合腹腔异种血清注射组(30.3±1.8g,6.51±1.13)体重及肝重指数明显升高(P＜0.05); HE和Masson染色显微镜下也观察到肝细胞脂肪变性,大量的胶原纤维产生;RT-PCR检测TIMP,IL 17A,COLL以及TNF-α的mRNA,相比于正常对照组,实验组肝组织mRNA表达均有升高且具有统计学意义(P＜0.05).本实验应用高脂和异种血清联合处理建立了小鼠肝纤维化模型,并发现炎性因子IL-17A及TNF-α参与了小鼠肝纤维化的形成过程.
-
罗格列酮对免疫性肝纤维化大鼠转化生长因子β1表达的影响
我们采用猪血清诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,观察罗格列酮对免疫性肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.
-
复方甘草酸苷对大鼠免疫性肝纤维化的干预作用
目前认为早期肝纤维化进程是可以控制甚至逆转的[1].但至今对于慢性肝炎、肝纤维化的治疗尚缺乏有效措施.复方甘草酸苷在临床病毒性肝炎治疗中取得了肯定疗效.本研究以猪血清腹腔内注射制作的肝纤维化模型大鼠作为观察对象,探讨复方甘草酸苷(SNMC)对免疫性肝纤维化的影响并分析其作用机制.
