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免疫法联合法检测粪便隐血在消化道出血诊断中的应用
目的:分析化学法联合免疫法检测粪便隐血在消化道出血诊断中的应用价值;方法:用联合免疫法和化学法分别对110例消化道出血患者和120例阴性对照粪便标本进行检测.结果:患者组110例中免疫法检测阳性结果为77例,阴性结果为33例,而化学法检测结果为:阳性为94例,阴性结果为16例.对照组120例免疫法检测阳性结果为3例,阴性结果为117例,而化学法检测结果为:阳性为10例,阴性结果为120例.单用免疫法时的灵敏度为70.0%,特异度为97.5%,与内镜诊断(金标准)符合率为84.35%;单用化学法的灵敏度为85.5%,特异度为91.7%,与内镜检查相比,诊断符合率为88.7%.当两者联合检测,与内镜检查结果对比,灵敏度为94.5%,特异度为90.0%,联合诊断的符合率为92.2%.结论:免疫法联合化学法在辅助诊断消化道出血性疾病时与单用免疫法和单用化学法相比较,既能减少免疫活性丧失所致的免疫法假阴性,又能减少化学法对少量出血的漏检,提高诊断的灵敏度,也提高了和内镜检查结果的一致度,值得临床推广使用.
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ACL-ADVANCE凝血分析仪常见故障的检修
ACL-ADVANCE全自动凝血分析仪是由贝克曼库尔特公司新设计的一款代表当前先进的血凝检测水平的凝血分析仪,它集凝固法、发色底物法和免疫法检测于一身,检测项目多达200项,涵盖当前所有血凝检测范围.是国内大中型医院实验室使用比较广泛的凝血分析仪.因此ACL-ADVANCE凝血分析仪的工作原理及其故障维修是广大使用、维修以及相关人员非常关注的问题.本文探讨了ACL-AD-VANCE凝血分析仪的常见故障的分析和检修方法.
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全自动血凝仪技术探讨和临床应用
本文论述了全自动血凝仪的技术特点;分析了仪器的检测原理和结构功能;简述了临床常规项目及应用,便于大家了解血凝仪.
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主动免疫法治疗不明原因复发性流产效果观察
复发性自然流产(RSA)是指临床上连续2次或2次以上的自然流产,发生率占妊娠总数的0.4%~0.8%[1].导致RSA发生的原因很多,约有40%~70%为原因不明[2,3].近来大量研究表明,不明原因的RSA可能与免疫有关[4].本文对原因不明的RSA行主动免疫治疗,现将治疗结果报告如下.
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日本血吸虫DNA疫苗的构建及其保护性免疫
目的制备日本血吸虫裸露DNA疫苗(pBK-Sj14-3-3),观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用.方法以RT-PCR方法扩增Sj14-3-3基因,并将其亚克隆入真核表达载体pBK;提取、纯化重组质粒pBK-Sj14-3-3,肌肉注射法接种BALB/c小鼠;日本血吸虫尾蚴攻击感染后,剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察pBK-Sj14-3-3对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响.结果 1%琼脂糖凝胶电泳显示,RT-PCR扩增产物与EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切重组质粒得到的插入片段大小相同,约为765 bp,核苷酸序列测定证实插入片段为Sj14-3-3;免疫注射pBK-Sj14-3-3后,14-3-3组平均每只小鼠获检成虫数为22.9±9.6,与对照组成虫数(31.3±7.3)比较,14-3-3组小鼠平均成虫负荷下降了27%.经5%氢氧化钾消化后,14-3-3组平均每克肝组织虫卵数为16 600±5 904,每对成虫平均虫卵数为4 769±1 156,与对照组平均每克肝组织虫卵数(77 875±4 326)和每对成虫平均虫卵数(9 723±2 074)比较,减卵率为79%,每对成虫减卵率为51%.肝脏虫卵肉芽肿平均直径下降了29%.结论 DNA疫苗pBK-Sj14-3-3构建成功,且在小鼠抗血吸虫感染中有一定的免疫保护作用,是日本血吸虫病潜在的疫苗候选分子.
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尖锐湿疣患者血清IL-2检测的临床意义
尖锐湿疣(CA)是一种常见的性病,由人类乳头瘤病毒(HPV)感染所致,是我国性病发病率较高的病种之一。目前,国内外学者对CA患者T淋巴细胞亚群的研究发现,患者存在着明显的细胞免疫缺陷,并发现其细胞免疫功能的变化与疾病的发生、转归有关。我们对CA患者血清IL-2水平进行放射免疫检测,以期进一步观察CA患者细胞免疫状态,为临床运用免疫法治疗CA患者提供试验依据。现将结果报道如下。材料与方法 1 对象 选择CA患者28例,均来自本院皮肤科门诊,并经临床病理确诊,其中男22例,女6例,年龄20—62岁。
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血凝仪运动轨道偏移导致机器报错
血凝仪是根据凝固法、底物显色法、免疫法等对血栓/止血成分中的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)等进行实验室检查的仪器[1].利用血凝仪进行血栓与止血的实验室检查,对出血性和血栓性疾病的诊断、溶栓以及抗凝治疗的疗效观察具有重要的临床价值.
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精子特异性乳酸脱氢酶研究进展
特异性乳酸脱氢酶( sperm-specific lactatedehydrogenase,LDH-C4)特异地存在于鸟类和哺乳类动物的睾丸和精子中,与体细胞乳酸脱氢酶A4(LDH-A4)和B4(LDH-B4)同属于乳酸脱氢酶家族,它们都以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶催化丙酮酸和乳酸的转化,在能量代谢中发挥重要作用,但LDH-C4 与体细胞LDH 相比又具有一些独特性质.近来,在研制新型避孕药的过程中,免疫避孕疫苗逐渐引起人们的重视[1],免疫法控制生育具有无药物的毒副作用、管理使用方便、低价、作用相对持久且可逆等优势,但找到理想的精子特异性抗原是制备免疫避孕疫苗的关键[2].用不育患者血清中提取的抗精子抗体(AsAb)来寻找睾丸cDNA 文库表达的抗原候选对象,结果发现特征性强且免疫效果可靠的免疫原为LDH-C4[3].本文主要针对近年来LDH-C4 的研究进展及其应用做一综述.
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人乳头状瘤病毒(HPV)16L1病毒样颗粒蛋白与HPV16L1基因联合免疫的体液免疫反应及其抗体的体外中和实验
目的用含有编码人乳头状瘤病毒(HPV)16L1和HPV16L1病毒样颗粒(VLP)蛋白联合免疫小鼠,与用HPV16L1重组表达质粒比较,观察VLP蛋白免疫对免疫小鼠产生抗体的增强作用,以及抗体的体外中和作用,寻找研制HPV16感染的预防性疫苗的有效途径.方法将C57BL/6小鼠,随机分为4组:Ⅰ组:pcDNA-L1(100 μl/鼠), Ⅱ组:pcDNA-L1(70 μl /鼠)+HPV16L1 VLP,Ⅲ组:pcDNA3.1(100 μl/鼠)空质粒,Ⅳ组:PBS缓冲液.质粒免疫3次,间隔3周.ELISA法检测其血清抗体,红细胞凝集实验和HPV16病毒样颗粒结合抑制实验体外检测抗体的中和活性.结果pcDNA-L1+ HPV16L1 VLP较pcDNA-L1免疫组,3次免疫后的抗体水平均增高,尤其以第2次和第3次免疫后的抗体水平增加更显著.pcDNA-L1+ HPV16L1 VLP联合免疫组血清的抑制活性高于pcDNA-L1免疫组,且HeLa细胞结合抑制实验染色呈阴性.结论 HPV16L1 VLP联合免疫可以增加目的抗原的中和抗体产生,可能是HPV16有效预防性疫苗研制的更有希望的策略.
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循环酶法测定血清同型半胱氨酸的临床应用研究
目的探讨循环酶法(Enzymatic cycling assay)测定血清同型半胱氨酸水平的临床应用价值.方法将循环酶方法与荧光偏振免疫法测定结果进行比较;首先利用高低值质控血清评价循环酶方法测定同型半胱氨酸的稳定性,并收集在我院住院且明确诊断的各20例糖尿病患者、高血压患者、冠心病患者、心梗脑梗患者、慢性肾功能不全患者及20名健康查体者的血清标本;另收集53例不同疾病患者血清标本,利用循环酶法与荧光偏振免疫法(FPIA)同时平行测定血清同型半胱氨酸水平.结果本方法的批内变异系数为3.07%(低值),3.99%(中值),4.21%(高值);批间变异系数分别为4.00%(低值),4.79%(中值)与4.58%(高值).本法与荧光偏振免疫法相关性良好(r=0.994,n=53).循环酶法测定不同疾病患者血清同型半胱氨酸水平分别为健康人(8.15±1.89)μmol/L,糖尿病组(8.88±1.36)μmol/L,高血压组(10.66±1.60)μmol/L,冠心病组(14.02±3.42)μmol/L,心梗或脑梗组(14.45±3.83)μmol/L,慢性肾功能不全组(15.21±3.50)μmol/L,结果与FPIA法测定值差异无统计学意义.结论循环酶法测定不同疾病患者血清同型半胱氨酸结果与临床上常规应用的FPIA法结果一致,但循环酶法可利用全自动生化分析仪快速、简便测定血清同型半胱氨酸.
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德国小蠊过敏原化学发光免疫法的建立及应用
国内外学者发现40%的支气管哮喘患者对蟑螂过敏原过敏,因而认为蟑螂是仅次于屋尘和尘螨过敏原的主要室内过敏原[1].德国小蠊是主要的引起变态反应的蟑螂之一,我国各大城市均有分布,主要分布在北方.
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几种检测尿红细胞方法的价值与互补关系
尿红细胞检测对肾脏及泌尿系统疾病诊治有重要意义,现用的有显微镜检查(镜检)、干化学分析、流式细胞仪及单克隆抗体免疫法等技术,如何正确选用,合理分析和评价试验结果,对疾病诊断至关重要.
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化学发光微粒子免疫法检测乙型肝炎病毒核心抗体IgM的临床应用
乙型肝炎病毒感染的诊断主要依据荧光定量PCR方法检测HBV DNA和乙型肝炎病毒免疫学指标,常规检测血清抗HBc总抗体主要是血清抗HBc-IgG,也包含抗HBc-IgM,这已是公众皆知的问题。已有的文献报道抗 HBc-IgM 在HBV感染的急性期产生,大约5周后渐退,它的存在提示乙型肝炎病毒复制;抗HBc-IgG大约在乙型肝炎病毒感染后1~2个月产生;抗HBc-IgM已被认为是一种有价值的诊断急性乙型肝炎(acute hepatitis B,AHB)标记[1-2],但是20%的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者活动期及乙肝表面抗原携带者有时抗HBc-IgM也可呈阳性。而这些患者可被误判为AHB[3-4],而AHB更有可能被诊断为CHB。为此,抗HBc-IgM诊断对于HBV感染的患者区分AHB和CHB有较高意义。
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血红蛋白增多症合并糖尿病患者糖化血红蛋白测定一例分析
糖化血红蛋白作为糖代谢长期监测指标日益受到临床的重视,目前实验室常用的测定方法有离子交换树脂微柱法、免疫法、电泳法以及亲和色谱微柱法.我们对1例合并遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症(HPFH)的糖尿病患者进行糖化血红蛋白检测时,发现一些问题,讨论如下.
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神经元特异性烯醇化酶对中枢神经系统感染诊断价值的研究
神经元特异性烯醇化酶(NSE)是存在于神经细胞中的一种糖酵解酶,神经细胞受损后,随细胞崩解而进入脑脊液或血液中,脑脊液或血清中NSE升高是神经细胞损伤的重要标志[1].我们用电化学发光免疫法检测化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎患儿脑脊液NSE含量,并探讨NSE在中枢神经系统感染诊断中的应用价值.
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P38、ERK1/2信号通路对病毒性心肌炎的作用
目的:观察p38、ERK1/2信号通路的动态变化并探讨其对病毒性心肌炎小鼠的作用。
方法:75只清洁级近交系4~6周龄雄性Balb/C小鼠,随机分为2组,心肌炎组(E组)60只,观察各时间点(第1、3、7和14天)心肌细胞磷酸化p38MAPK、ERK1/2含量、心肌组织病理学改变及血清cTn-I水平的动态变化。对照组(C组)15只作总体对照。E组小鼠腹腔接种0.1 ml柯萨奇病毒B3复制心肌炎模型;C组小鼠腹腔注射不含病毒的1640培养液0.1 ml。病毒接种后第1、3、7、14天留取小鼠血清及心脏标本, Western-blot法检测心肌磷酸化p38MAPK、ERK1/2含量,化学发光免疫法检测血清cTn-I水平。 -
标准化屋尘螨疫苗免疫治疗对变应性支气管哮喘的疗效
目的 评价标准化屋尘螨疫苗治疗变应性支气管哮喘(简称哮喘)的临床疗效和安全性.方法 按照多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照的方法,2001年10月至2002年3月将来自广州医学院第一附属医院、沈阳军区总医院、苏州儿童医院的轻至中度变应性哮喘患者132例分为治疗组和对照组,每组66例.治疗组皮下注射标准化氢氧化铝吸附的缓释型屋尘螨疫苗,对照组皮下注射二盐酸组胺,治疗时间为1年.从各组药物的起始浓度开始,按4个以10倍递增的浓度每周注射1次(治疗组:100、1 000、10 000、100 000 SQ-U/ml,对照组:0.01、0.1、1.0、10μg/ml.100 000 SQ-U/ml的屋尘螨疫苗含9.8μg/ml主要致敏蛋白Der P1).前3个浓度的每种浓度每周依次注射剂量为0.2、0.4、0.8 ml,共9周,第10~14周每周依次注射高浓度的0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 ml,第15周达1 m1,并以此剂量渐延长注射间隔,按每2、4、6周各注射1次,1至26周末为剂量递增阶段(第1阶段,简称H1),之后保持每6周注射1次至治疗结束,进入剂量维持阶段(第2阶段,简称H2).患者在每次注射后,必须在诊室留观30 min.结果 132例患者入选,129例(治疗组64例,对照组65例)完成1年的治疗,其中3例中途退出.两组基线期的所有临床及实验室指标具有可比性.对每4周计算的日均哮喘症状计分观察,从第29~32周开始两组患者症状计分开始出现差异,治疗组日均哮喘症状计分为(0.17±0.33)分,对照组为(0.39±0.74)分,两组比较差异有统计学意义(Z=2.031,P<0.05),至治疗结束.治疗组H2的症状计分为(0.19±0.27)分,与H1[(0.29±0.39)分]比较差异有统计学意义(Z=2.923,P<0.01),而对照组H2的症状计分为(0.40±0.68)分,与H1[(0.45±0.62)分]比较差异无统计学意义(Z=1.885,P>0.05).哮喘总体病情、发作严重程度、发作频率的自我评估改善率,治疗组分别为96.9%、95.3%、95.4%,对照组分别为80.0%、75.4%、83.1%,两组比较差异有统计学意义(x2分别为13.246、11.576、16.204,P均<0.01).治疗组H2每周日均用药计分为(0.20±0.36)分,与H1[(0.33±0.67)分]比较差异有统计学意义(Z=3.344,P<0.01);而对照组H2计分为(0.35±0.96)分,与H1[(0.32±0.95)分]比较差异无统计学意义(Z=0.744,P>0.05).治疗1年后的晨间和夜间大呼气流量占预计值百分比(PEF占预计值%)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%)、用力肺活量占预计值百分比(FVC占预计值%)、第一秒用力呼气容积/肺活量比值(FEV1/FVC)及FEV1下降20%时吸入组胺的累积剂量(PD20-FEV1),治疗组分别为(97±17)%、(98±18)%、(91±11)%、(98±9)%、(82±10)%、2.35(7.9)μmol,对照组分别为(99±19)%、(100±19)%、(90±14)%、(99±13)%、(82±9)%、1.80(7.8)μmol,两组比较差异无统计学意义(t值为0.170~0.630,Z=0.264,P均>0.05).经治疗后,屋尘螨皮肤指数(SI)在治疗组为1.2±0.5,对照组为1.5±0.6,两组比较差异有统计学意义(t=2.395,P<0.05);血清屋尘螨sIgE在治疗组为76.80(97.0)kU/L,对照组为66.50(99.3)kU/L,两组比较差异无统计学意义(Z=0.232,P>0.05).按欧洲变态反应和临床免疫学会(EAACI)标准分级的全身不良反应发生率治疗组为5.7%,对照组为1.8%,两组比较差异有统计学意义(x2=4.705,P<0.05),但大部分反应发生于注射后30 min内,且症状轻微,并对治疗反应良好,未出现一例严重不良反应.结论 采用标准化屋尘螨疫苗进行1年的特异性免疫治疗,可以显著改善轻至中度变应性哮喘患者的症状,减少合并用药量,降低屋尘螨皮肤敏感性.遵守EAACI免疫治疗指南要求,治疗安全.
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粪便潜血试验的临床应用
粪便潜血试验(fecal occult blood test,FOBT)是测定消化道出血的一种方法,主要用于检验肉眼不可见的少量出血,是临床诊断和检测消化道出血性疾病的一项重要常规检查,也是普查和筛选消化道肿瘤的有效手段.临床应用的FOBT主要有化学法和免疫法两种.过去一直采用化学法检测粪便潜血,其中邻甲苯胺法为1983年中华医学会全国临床检验方法学术讨论会推荐的方法,但易出现假阳性.近年采用 了免疫法,其中血红蛋白单克隆抗体免疫法与传统的化学法相比,灵敏度及特异性都有很大提高,且不受相关食物及药物的影响,但也存在假阴性现象;转铁蛋白单克隆抗体免疫法可避免血红蛋白单克隆抗体免疫法(胶体金法)的后带现象和血红蛋白被消化而出现的假阴性,是将来的发展方向.
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右心室流出道室性心动过速伴连续正负阶梯手风琴现象
在行心电图运动平板检查中,患者并发了室性心动过速(室速)伴融合呈连续正负阶梯"手风琴"样改变,现报道如下.患者,男54岁,因活动后胸闷心悸数日来我院就诊.身高173 cm,体重70 kg.血压130/80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),心率95次/min.甘油三酯(TG)2.5 mmol/L,总胆固醇(TC)7.1 mmol/L,心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)5 mmol/L,心肌肌钙蛋白T(TnT)0.02μg/L,肌钙蛋白I(Tn1)0.01μg/L(免疫法).
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脂肪抽吸术吸出物中利多卡因的浓度测定及其意义
肿胀麻醉是脂肪抽吸术的一大改进,其特点是大剂量的利多卡因随同肿胀液注入抽吸部位脂肪层,文献报道的大用量达100 mg/kg[1],一次大用量达到4.8 g[2],但均未出现毒副作用.为了解脂肪抽吸术吸出物中利多卡因含量,我们采用荧光偏正免疫法分别检测了吸出物中脂肪组织与液体中利多卡因的浓度,为准确评价脂肪抽吸术中肿胀麻醉的安全性提供依据.