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日本血吸虫DNA疫苗的构建及其保护性免疫
目的制备日本血吸虫裸露DNA疫苗(pBK-Sj14-3-3),观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用.方法以RT-PCR方法扩增Sj14-3-3基因,并将其亚克隆入真核表达载体pBK;提取、纯化重组质粒pBK-Sj14-3-3,肌肉注射法接种BALB/c小鼠;日本血吸虫尾蚴攻击感染后,剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察pBK-Sj14-3-3对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响.结果 1%琼脂糖凝胶电泳显示,RT-PCR扩增产物与EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切重组质粒得到的插入片段大小相同,约为765 bp,核苷酸序列测定证实插入片段为Sj14-3-3;免疫注射pBK-Sj14-3-3后,14-3-3组平均每只小鼠获检成虫数为22.9±9.6,与对照组成虫数(31.3±7.3)比较,14-3-3组小鼠平均成虫负荷下降了27%.经5%氢氧化钾消化后,14-3-3组平均每克肝组织虫卵数为16 600±5 904,每对成虫平均虫卵数为4 769±1 156,与对照组平均每克肝组织虫卵数(77 875±4 326)和每对成虫平均虫卵数(9 723±2 074)比较,减卵率为79%,每对成虫减卵率为51%.肝脏虫卵肉芽肿平均直径下降了29%.结论 DNA疫苗pBK-Sj14-3-3构建成功,且在小鼠抗血吸虫感染中有一定的免疫保护作用,是日本血吸虫病潜在的疫苗候选分子.
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母婴Rh血型不合胎儿和新生儿溶血病相关临床问题研究
母婴Rh血型不合胎儿和新生儿溶血病(Rh-HDFN),是胎儿或新生儿同种被动免疫溶血性贫血常见原因之一.Rh-HDFN导致的胎儿或新生儿病情危重,可引起胎儿严重贫血、水肿、心力衰竭、死胎,或导致新生儿核黄疸及死亡等,而幸存Rh-HDFN新生儿,则可能遗留智力发育不全、运动功能障碍等神经系统后遗症.临床对于Rh-HDFN的早期诊断、及时治疗与胎儿及新生儿预后的关系紧密相关.Rh-HDFN的产前预防,越来越受到产科临床的关注.笔者拟针对Rh-HDFN临床相关问题的新研究进展进行阐述.
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致龋性变形链球菌的分离及其卵黄抗体的抑龋作用
目的 筛选致龋性变形链球菌并研究其卵黄抗体的抑龋作用,以期为龋齿的防治提供参考.方法 从四川省自贡市富顺县某幼儿园5～6岁的儿童龋病患者牙菌斑中分离变形链球菌菌株,并通过形态、生化和分子生物学方法鉴定菌株,分析菌株的血清型、产酸和黏附能力.以灭活变形链球菌为抗原免疫产蛋鸡,提取其鸡蛋特异性卵黄抗体(immunoglobulin Y,IgY).用e型变形链球菌感染12只SD大鼠,待第16周大鼠形成稳定龋齿后分为两组,实验组大鼠(6只)饲料中添加特异性IgY,对照组大鼠(6只)饲料中添加普通IgY.继续饲喂、观察8周后处死大鼠,使用Keyes计分法评价大鼠的龋损程度.结果 从儿童牙菌斑中分离出7株变形链球菌,其中c、e、f、k血清型分别有3、2、0和2株.所有菌株均表现出与UA159标准菌株相似的形态及生化特征,具有较强的产酸和黏附能力;但同为c型的菌株其产酸和黏附能力不同.应用e型变形链球菌感染大鼠16周后,其下颌牙齿均出现龋洞,给予特异性IgY治疗后,实验组大鼠Keyes计分分值[(16.4±2.0)分]显著低于对照组大鼠[(30.2±9.3)分](P＜0.05).结论 本研究筛选得到的7株不同血清型变形链球菌菌株具有相似的形态和生化特性,但在产酸和黏附能力方面,即使是同一血清型也有显著差异;e型变形链球菌具有独立的致龋能力,应用抗变形链球菌IgY作为被动免疫治疗剂可有效抑制龋齿的发展.
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拉米夫定联合用药治疗慢性乙型肝炎
临床研究发现[1-5]:拉米夫定可迅速抑制慢性乙型肝炎患者体内HBV的复制,使血清HBV DNA转阴,同时还可促进HBeAg血清转换,血清ALT正常,肝组织学改善和延缓肝纤维化进程,是一种安全有效的抗HBV感染药物,也是目前治疗慢性乙型肝炎新和有前途的药物之一.但在其临床应用过程中,人们同时也发现由于拉米夫定对HBVDNA复制的原始摸板cccDNA无效,持久HBeAg血清转换率较低,停药以后有相当部分患者血清HBVDNA阳转,甚至出现撤药性肝炎或使原病情加重[6-8 ];另外,由于拉米夫定需要长期服用,而长期服用的副作用和病毒发生变异的概率也会随之增加[9-10];因此,近几年来,人们利用拉米夫定联合其他抗病毒药物治疗慢性乙型肝炎,希望能通过联合用药来缩短疗程,减少药物的副作用和病毒变异株的产生,进一步提高拉米夫定的临床效果.本文就此方面的研究情况综述如下.
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主动接受无痛分娩对提高妊娠结局及产妇满意度价值分析
目的:探讨主动接受无痛分娩对提高妊娠结局及产妇满意度的临床价值情况.方法:选取2012年1月~2013年10月在本院采取硬膜外阻滞分娩方式镇痛的产妇共计258例,按照患者接受硬膜外阻滞分娩镇痛的情况分成观察组、对照组,对照组产妇均被动接受无痛分娩,观察组产妇均主动接受无痛分娩,对比两组妊娠结局、护患满意度的差异性.结果:与对照组对比,观察组产妇护患满意度较高,观察组与对照组比较,产妇剖宫产率较低,新生儿窒息率低,差异有统计学意义(P<0.05),观察组与对照组比较,产程明显缩短.结论:主动接受无痛分娩方法,不但有助于顺利经阴道分娩,缩短产程,提高护理质量,增进护患关系.
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羊膜移植联合自体血清治疗职业性眼烧伤
目的 观察羊膜移植联合自体血清对职业性眼烧伤的治疗效果.方法 通过查阅病例回顾性分析2008年6月至2012年6月在金华市中心医院眼科就诊的29例(42眼)高温金属溶液热烧伤患者,将患者按照治疗方法分为:羊膜治疗组10例(14眼)、血清治疗组9例(12眼)、羊膜移植联合自体血清治疗组10例(16眼).观察各组患者治疗后症状改善程度、视力、上皮愈合时间、角膜水肿及透明度等情况.结果 羊膜移植联合自体血清治疗组术后3、14、21d的角膜水肿及透明度评分均明显低于自体血清治疗组和羊膜移植治疗组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 羊膜移植联合自体血清疗法对职业性高温金属溶液热烧伤有较好的效果.
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羊膜移植联合自体血清治疗眼高温水泥烧伤的观察
目的 观察羊膜移植联合自体血清对职业性眼烧伤的治疗效果.方法 将高温水泥烧伤患者36例随机分为:羊膜治疗组、自体血清组及羊膜移植联合自体血清治疗组,观察不同疗法治疗后的患者症状、视力恢复情况、上皮愈合情况、炎症反应情况等.结果 羊膜移植联合自体血清治疗组术后1、7、14d的炎症反应评分均明显低与自体血清治疗组和羊膜移植治疗组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 羊膜移植联合自体血清疗法对职业性眼碱烧伤与热烧伤有较好的效果.
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静脉注射免疫球蛋白对重症系统性红斑狼疮的疗效及安全性
目的：探讨静脉注射免疫球蛋白(IVIG)联合糖皮质激素、免疫抑制剂治疗重症系统性红斑狼疮(SLE)的疗效及安全性。方法采用前瞻性随机对照研究,重症 SLE 患者60例,随机分为对照组及 IVIG 组,两组患者均接受激素及免疫抑制剂治疗,IVIG 组同时接受 IVIG(400 mg·kg-1·d-1,连用5天)治疗。观察两组患者 SLE 疾病活动指数(SLEDAI)、平均住院日、院内感染率及不良反应发生率。结果治疗后12周,IVIG 组 SLEDAI 为4.0(3.0,6.3),对照组 SLEDAI 为5.5(4.0,8.5),两组比较差异具有统计学意义(Z =-2.420,P <0.05)；IVIG 组完全缓解率56.7%(17/30),对照组完全缓解率26.7%(8/30),两组比较差异具有统计学意义(χ2=4.389,P <0.05)；IVIG 组平均住院日较对照组缩短2.3天,平均(14.0±3.9)d vs (16.3±3.3)d(t =2.436,P <0.05)；两组患者院内感染发生率差异无统计学意义(χ2=0.647,P >0.05)；治疗过程中无严重不良反应发生。结论 IVIG 联合激素、免疫抑制剂治疗重症 SLE 具有良好的疗效及安全性。
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妊娠期被动吸烟量对新生儿脐血有核红细胞数量的影响
目的 检测妊娠期孕妇被动吸烟的适于胎龄儿脐血有核红细胞(NRBC)数量,并探讨柯替宁水平与NRBC数量关系.方法 通过问卷方式,随机选择孕妇94例,分为被动吸烟组(53例)和对照组(41例),观察记录2组新生儿发育情况并采集新生儿脐静脉血进行血细胞参数、NRBC数量和柯替宁水平检测.结果 被动吸烟组新生儿体重低于对照组(P＜0.05),脐血NRBC数量较对照组多(P＜0.05).脐血柯替宁与被动吸烟量呈正相关(r=0.04,P＜0.01);脐血NRBC数量与被动吸烟程度无相关性(P＞0.05).结论 孕妇妊娠期被动吸烟可引起新生儿脐血NRBC数量增加,增加程度与被动吸烟量无关.
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如何做好临床实习中的“主动”和“互动”
医学的教育和应用讲究理论与实践结合，后达到融会贯通的境界，而临床实习正是达到这一终极目标的必经之路，因此其重要性不言而喻。传统的教学模式是以老师教授为中心的“单向”和学生接受为结果的“被动”方式，此外，医学是一门被公众认为相对枯燥乏味的学科，这样的情况下大多数的结果是老师授完、学生听完，知识成为学生面前的匆匆过客，甚至没有留下一丝痕迹。从众多资深教师和学校总结出来的教学经验无非就是将“被动”和“单向”的学习变为“主动”和“互动”。
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乙型肝炎免疫球蛋白联合泰来肽对感染HBV孕妇血清和初乳HBV-DNA含量的影响
目的 研究乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)和泰来肽(TLT)对感染HBV孕妇血清和初乳HBV-DNA含量的影响.方法 选择感染HBV的孕妇(HBsAg、HBeAg、HBV-DNA阳性)162例,分为:治疗Ⅰ组50例,于妊娠20周起肌肉注射HBIG 200 IU,1次/月,至分娩为止;治疗Ⅱ组40例,在治疗Ⅰ组肌注HBIG的基础上自妊娠28周起肌注TLT 2 ml,1次/d,至分娩为止;对照组72例,自然观察.分别采集孕妇治疗前、后血清和初乳,检测HBV-DNA含量.结果 治疗前3组孕妇血清HBV-DNA含量间差别无显著性意义(P＞0.05);治疗后3组孕妇血清和初乳HBV-DNA含量间差别均有显著性意义(P＜0.05),而治疗后治疗Ⅰ、Ⅱ组孕妇血清和初乳HBV-DNA含量间差异均无显著性意义(P＞0.05).结论 HBIG联合TLT与单独使用HBIG对孕妇血清和初乳中HBV-DNA的含量无差别.
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2009—2015年深圳市宝安区居民烟草相关行为和认知的变化情况
目的 了解2009年与2015年深圳市宝安区居民吸烟、被动吸烟及其健康危害认知的变化情况.方法 利用宝安区2009年和2015年慢性病及其相关危险因素流行病学调查数据,对比分析宝安区18~69岁常住居民吸烟、被动吸烟及其危害认知6年间的变化情况.结果 相比2009年,总体上2015年现在吸烟率和曾经吸烟率降低,经过标化后其现在吸烟率和曾经吸烟率基本持平.分层分析显示18~24岁和45~64岁组、未婚和离异、丧偶人群和脑力劳动者吸烟情况变化不明显.然而,现在吸烟人群的每日吸烟量由(6.4±1.6)支/d升高至(14.4±9.3)支/d.同时,常住居民每天吸入二手烟的比例由25.4%降低至16.2%.常住居民认为吸烟和被动吸烟导致脑卒中风险增加的比例由35.5%上升至41.5%,但对于增加肺癌和心血管疾病风险认知比例有所下降.结论 继续加强控烟工作,尤其是针对青、中年人、未婚和离异、丧偶人群和脑力劳动者的控烟教育,进一步做好相关场所的禁烟工作,降低居民二手烟的暴露比例,提高全民对吸烟和被动吸烟导致脑卒中和心血管疾病风险增加的认知.
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慢性HBV感染的天然免疫与获得性免疫应答
HBV感染人体后,宿主的抗病毒免疫应答是决定感染结局的关键因素.目前普遍认为,在慢性HBV感染过程中宿主的天然免疫及获得性免疫功能受损,从而导致病毒持续无法清除.要实现对HBV感染持久免疫控制,需要更加全面地理解HBV感染慢性化引起的机体天然免疫和特异性免疫应答功能障碍的机制.总结了国内外研究团队在HBV感染慢性化免疫应答参与机制中取得的进展.
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原发性胆汁性肝硬化发病机制研究的应用前景
原发性胆汁性肝硬化是一种以肝内小胆管损伤为特征的自身免疫性肝病,该疾病的发生发展是极其复杂的自身免疫反应过程,众多的免疫细胞和免疫分子参与其中.从天然免疫以及适应性免疫两个方面,在细胞以及分子层面对PBC发病机制的研究进展进行总结,并对该发病机制研究的临床应用前景进行评述,以期能够为该疾病研究领域的科研及临床工作者提供参考方向并为临床诊断和治疗新方案的提出提供理论依据.
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艾灸血清对背根神经节神经突起影响的体外观察
目的观察艾灸后老年大鼠血清对体外培养背根神经节的保护作用.方法艾灸老年大鼠,采集血清,加入体外培养背根神经节中.在光镜下观察背根神经节的神经突起长度的生长情况,并用图象分析仪测量分析.结果艾灸组血清培养的神经节40 h内突起生长较非艾灸组好并有显著差异(P<0.001).结论艾灸法对因衰老而致的机体功能减退可能有着积极的治疗作用.
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免疫学方法治疗烟草依赖的现状
动物实验显示,疫苗和尼古丁特异性抗体可以显著减轻尼古丁的行为效应,而后者与烟草依赖密切相关,这为免疫学方法治疗烟草依赖提供了依据.迄今为止,尼古丁疫苗的Ⅰ期临床试验结果证实,疫苗可以诱生相应的抗体,抗体水平呈剂量依赖性升高,而且不会引起严重的不良反应.这表明免疫学方法治疗烟草依赖有着很大的前景.本文主要就以上研究内容和相关进展进行简要综述.
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婴幼儿呼吸道合胞病毒感染的预防与治疗的新进展
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是一种可导致高致病率与死亡率的重要病原体,尤其在早产儿和患慢性肺病或先天性心脏病的婴幼儿中.RSV感染的治疗基本上是支持疗法.因此,在高危婴幼儿中用免疫预防以防御严重RSV疾病显得很重要.人源化抗RSV单克隆抗体palivizumab可以显著降低高危婴幼儿的住院率与住院时间.一种新的人源化单克隆抗体(MEDI-524)在动物体内显示出比palivizumab更强的效果,正在接受临床评价.RSV疫苗包括亚单位疫苗、减毒活疫苗、基因重组病毒和多肽疫苗的研发已取得重大进展.编码F和G糖蛋白的质粒DNA疫苗和痘苗载体疫苗正在评价中.母体免疫也有预防新生儿RSV疾病的潜力.本文就过去十年的RSV治疗与预防工作进展进行了综述.
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应用微阵列技术研究免疫调节治疗剂
静脉注射用免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)越来越广泛地作为免疫调节剂进行使用,但有关IVIG免疫调节作用的研究却很少.人们在采用微阵列技术研究IVIG免疫调节作用方面进行了一些尝试,此文就该领域的研究进展作一介绍.
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乙型肝炎病毒母婴传播产前免疫阻断的研究
目的 评价不同方案乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)预防HBV宫内感染的疗效,探讨其作用机制,并了解其对病毒变异的影响.方法 以无症状HBV携带孕妇及其新生婴儿为研究对象,将无症状HBV携带孕妇在产前检查时随机分为HBIG A组:26例孕妇于产前3、2、1妊娠月和分娩前分别肌肉注射HBIG 200～400 U(HBsAg阳性者注射HBIG 200 U、HBsAg和HBeAg双阳性者注射HBIG 400 U);HBIG B组:29例孕妇于产前3、2、1妊娠月分别肌肉注射HBIG 200 U;对照组:26例孕妇产前未接受任何特殊治疗.3组均留取孕中期产检时(应用HBIG前)和临产日使用HBIG前后的静脉血标本,新生儿于生后联合免疫前留取外周血,酶免疫测定法(EIA)检测HBV标志,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA以及PCR扩增HBV DNA S基因区片段并测序.结果 55例新生儿为HBIG组(A和B)母亲所生,宫内感染率为14.5%,对照组为35.7%(χ2=4.896,P=0.027).HBIG A组HBsAg和HBeAg双阳性母亲所生的8例新生儿有3例宫内感染,对照组8例新生儿均有宫内感染(χ2=7.273,P=0.007);HBIG B组7例新生儿有5例宫内感染,但差异无统计学意义(χ2=2.637,P=0.104).3组孕妇孕中期血清HBsAg与HBV DNA水平相当,但分娩前HBIG A组孕妇HBsAg及HBV DNA均低于HBIG B组和对照组.HBIG A组新生儿血清抗-HBs检出率为38.5%.3组产妇分娩前均未检测到抗-HBs.HBV S区碱基替代突变率和氨基酸变异数在HBIG组(A和B)和对照组之间差异均无统计学意义.18例宫内感染儿,HBV S区碱基替代突变率和氨基酸变异数在HBIG组(A和B)和对照组之间差异均无统计学意义.结论 孕妇产前注射HBIG阻断HBV母婴传播的免疫效果肯定,按HBV携带不同状态使用两种不同剂量HBIG,并于分娩前加用一次,效果更佳;经胎盘使胎儿获得被动免疫是HBIG重要作用机制;无症状携带HBV孕妇产前使用HBIG并未增加HBV S区的变异,HBV S区变异并非是发生宫内感染的主要原因.
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不可逆电穿孔消融技术治疗兔肌肉VX2移植瘤的研究
目的:通过观察不可逆电穿孔(irreversible electroporation,IRE)消融技术应用于治疗兔肌肉VX2移植瘤的疗效及安全性,以期为该技术应用于临床提供可靠的实验依据.方法:建立兔肌肉VX2移植瘤模型(10只),随机分为IRE治疗组(8只)和对照组(2只,不予以IRE治疗).分别于IRE治疗的当日处死对照组的兔子、治疗后第1、3、5和14天时分批处死IRE治疗组的兔子(每组2只),同时收集血浆和血清;肿瘤组织行HE染色,并采用免疫组织化学法检测Bcl-2、热休克蛋白70 (heat shock protein 70,HSP70)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肌肉VX2移植瘤中的表达情况;应用TUNEL法检测移植瘤组织中细胞凋亡的情况;ELISA法检测血浆中caspase 3、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和VEGF的分泌情况,以及血清中实验兔肝肾功能指标、肌酸激酶-MB同功酶(creatine kinase-MB isoenzyme,CK-MB)及心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,CTn Ⅰ)的表达水平.结果:HE染色结果显示,IRE治疗组中治疗区域和正常组织区域边界清晰,IRE治疗后第3天时,移植瘤组织的边缘区可见大量红细胞以及炎性细胞的浸润,第14天时术区肌肉组织出现纤维化.ELISA法检测结果显示,IRE能有效地增加兔子机体中caspase 3和TNF-α的分泌水平(P值均＜ 0.01),而降低VEGF的分泌水平.同时IRE治疗后,能够降低术区肿瘤组织中Bcl-2和VEGF的阳性表达率(P值均＜0.01),但HSP70的表达水平不一.TUNEL检测结果显示,IRE治疗组移植瘤组织中细胞的凋亡率明显增加.术后实验兔的肾功能未见明显异常,谷草转氨酶(aspartateaminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)以及CK-MB的表达水平有不同程度的升高,但CTn Ⅰ的水平未见升高.结论:IRE能够通过诱导细胞凋亡、产生特异的抗肿瘤免疫效应及抑制血管生成来抑制肌肉移植瘤的生长,是一种安全且有效的肌肉肿瘤局部治疗的微创手段.
