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建立胃癌高发区胃癌血清蛋白指纹图谱诊断模型的探讨
目的 应用表面加强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析胃癌血清蛋白质指纹图谱,筛选胃癌特异性血清蛋白组合,建立胃癌诊断模型.方法 利用强阴离子交换芯片(Q10)分别对山东省临朐县胃癌高发区36例胃癌患者和46例浅表性胃炎患者的血清蛋白指纹图谱进行检测,采用ZUCIPDAS蛋白芯片数据分析系统,建立高发区胃癌血清蛋白指纹图谱诊断模型,并利用盲筛法验证模型的正确性.结果 通过对26例胃癌患者及37例浅表性胃炎患者血清蛋白指纹图谱进行检测,筛选出差异具有统计学意义的6个蛋白质峰,质荷比分别为8587、6945、8243、3899、7035和9943,并建立胃癌蛋白指纹图谱诊断模型,该模型诊断胃癌的灵敏度达88.5%,特异度达97.3%.在完成建模后,选择19例患者血清进行盲筛,其中胃癌患者10例,浅表性胃炎患者9例.通过盲筛验证,该模型诊断胃癌的灵敏度为80.0%,特异度为88.9%.结论 初步建立了胃癌高发区胃癌血清蛋白指纹图谱诊断模型,该模型诊断胃癌的灵敏度和特异度均达到80%以上,该方法为胃癌的诊断提供了新的思路.
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多肿瘤标志物蛋白芯片对胆管癌诊断的临床评价
目的 探讨多肿瘤标志物蛋白芯片(C-12)对胆管癌的诊断价值.方法 用C-12同时检测26例胆管癌初治患者、52例消化系统良性疾病初治患者和65例健康体检者血清中CA199、CEA、AFP、CA125、Ferritin、β-HCG、HGH、CA153、CA242、PSA、f-PSA和NSE共12项标志物的表达,筛选出与胆管癌相关性强的肿瘤标志物及肿瘤标志物佳联合检测组合,并盲法验证佳检测组合的诊断价值.结果 胆管癌组中CA199、CEA、CA242、Ferritin、AFP、CA125和CA153检测阳性率显著高于良性疾病组和正常对照组(P＜0.01),CA199、NSE、CA242、Ferritin、β-HCG、AFP、CA125、HGH和CA153的表达水平显著高于良性疾病组和正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),与胆管癌诊断相关性强的肿瘤标志物是CA199,检测敏感性、特异性和准确性分别为69.2%、96.9%和89.0%,胆管癌的佳3项组合与C-12相比,敏感性稍低,特异性和准确性稍高,但差异均无统计学意义,盲法验证佳3项组合CA199+CA125+CEA对于胆管癌诊断的敏感性、特异性和准确性分别为91.7%、87.5%和89.6%.结论 C-12对胆管癌具有较高的诊断价值,佳3项组合CA199+CA125+CEA足以替代C-12的12项肿瘤标志物联合检测,可能是一种既经济又有效的胆管癌诊断标志物组合.
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肝细胞生长因子和表皮生长因子联合体外诱导大鼠肝卵圆细胞分化的研究
目的 探求卵圆细胞向成熟肝细胞分化的演变规律,并对其分化调控的分子机制作初步探讨.方法 联合应用肝细胞生长因子和表皮生长因子体外培养大鼠肝脏卵圆细胞OC3,运用电镜、免疫细胞化学、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等技术,检测OC3在分化过程中形态及相关分子标记物的改变,并运用蛋白芯片技术观察细胞蛋白表达谱的变化.结果 诱导10周后,卵圆细胞胞质变丰富,细胞器增多,表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST-P)和丙酮酸激酶(M2-PK)减弱,而表达白蛋白(ALB)、CK18增强,同时诱导后期的细胞较之诱导前主要出现了8种表达差异蛋白.结论 在肝细胞生长因子与表皮生长因子的共同作用下,体外培养的卵圆细胞可逐步分化为成熟肝细胞.8种主要的结构蛋白或功能蛋白可能参与了对该过程的调控.
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多肿瘤标志物蛋白芯片在胃癌手术前后中的应用价值探讨
作者2003-05～2005-10采用多肿瘤标志物蛋白芯片检测技术,对健康体检者、胃癌患者的12种肿瘤标志物进行检测,旨在探讨蛋白芯片诊断系统在诊断胃癌中的临床应用价值.
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多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肿瘤的筛查价值
目的:探讨多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对于肿瘤诊断的临床应用价值.方法:使用多肿瘤标志物蛋白芯片检测仪检测46例健康体检者、63例已知的各期各种肿瘤患者和39例良性疾病患者的12种肿瘤标志物.结果:63例肿瘤患者中,51例结果异常,阳性率为80.95%,显著高于健康体检者与良性疾病患者(P＜0.05).被检测46例健康体检者中,一项以上超出参考值范围的结果有9例,占19.57%.结论:多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统具有较高灵敏度和特异性,对肿瘤的早期诊断具有一定的价值.
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检测子宫内膜异位症患者血清中差异表达蛋白的研究
目的:检测子宫内膜异位症(内异症)患者血清中差异表达的蛋白.方法:采用表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,选用WCX2蛋白质芯片对50例内异症及48例对照组血清标本进行检测以筛选内异症血清中差异表达的蛋白.结果:在Mr 0～50 000范围内,检测出106个蛋白峰.内异症患者血清中差异表达的蛋白峰有4个.将发现的差异蛋白峰在Swiss蛋白数据库中搜索,发现Mr 9 280蛋白峰与玻璃粘连蛋白Vitronectin相符.Vitronectin属于整合素家族,在内异症的粘附、侵袭、血管形成过程中起重要作用.其他的蛋白峰没有发现与之相匹配的蛋白,提示可能为新的蛋白质.结论:内异症患者血清中存在差异表达的蛋白,其对内异症的早期诊断具有一定的临床意义.SELDI蛋白芯片技术是一种快速、简单易行、样本用量少、高通量、重复性好的分析方法,具有广阔的临床应用前景.
关键词： 子宫内膜异位症/血液 蛋白质阵列分析 玻连蛋白/血液 -
多激素平行测定法的建立及其在垂体腺瘤筛查中的初步研究
目的建立激素抗体组合微阵列检测方法，为垂体腺瘤患者及无症状高风险人群提供血清学早期筛查的新方法。方法通过对微阵列芯片制备条件进行摸索，选择出泌乳素、生长激素和促甲状腺素的单克隆抗体作为芯片反应时的佳制备条件及检测体系后，将其合理组合固定在固相载体的表面而制备出低密度激素抗体蛋白微阵列，建立激素抗体组合微阵列芯片检测法，并对该方法的特异性、灵敏度、重复性、精密度和交叉反应进行初步评价，比较其与AxSYM全自动免疫分析仪的相关性。结果成功确定了激素抗体组合微阵列的制作条件，包括选择琼脂糖凝胶玻片作为点样载体，确定3种激素抗体包被浓度、点样缓冲液、固定时间等；优化了反应体系中的各种条件；得出了多种激素抗体组合微阵列检测方法从制作到反应结果分析的完整体系。结论本研究初步建立了多种激素抗体组合微阵列检测方法，并对其进行了方法学评价，该方法学的建立不仅为临床激素检测提供了一种新途径，也为以后将更多的相关检测项目纳入研究创造了条件。
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孕20周前血浆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体与妊娠期高血压疾病的关联性研究
目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与妊娠期高血压疾病（HDCP）的关联性；评估孕20周前TRAIL对HDCP发生的预测效率。方法采用巢式病例对照研究，收集2011年4月至2013年7月在广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心产检和分娩的孕妇3000例。外周血血浆采自妊娠8～20周，病例追踪至分娩后。入选HDCP 孕妇73例、正常妊娠孕妇126名。采用蛋白抗体芯片技术检测20例HDCP孕妇和年龄孕周相匹配的20名正常孕妇的507个血浆蛋白的表达，应用DAVID软件和GO数据库对差异蛋白进行功能注释和富集分析。采用酶联免疫法检测53例HDCP孕妇和年龄孕周相匹配的106名正常孕妇的血浆TRAIL水平，结合62个临床高危因素调查数据，通过多因素Logistic回归分析，ROC曲线评价孕20周前TRAIL与HDCP发生的关联性和临床预测效率。结果从507个血浆蛋白中筛选出HDCP发病前表达差异蛋白23个。对表达显著下调的TRAIL进一步定量检测验证，表明孕20周前HDCP组TRAIL水平（45.7±13.1） pg／ml低于正常妊娠组（51.2±14.7） pg／ml，t＝2.334，P＝0.021。对该159例孕妇的多因素回归分析显示后进入Logistic模型的3个因素分别为：贫血（ OR＝4.87，95％ CI：1.05～24.26）、孕前BMI （ OR＝1.72，95％CI：1.35～2.19）和TRAIL（OR＝0.96，95％ CI：0.92～0.99）。 Logistic模型的预测正确率为81.8％，AUC为0.81（95％CI：0.73～0.87，P＜0.05）。 HDCP孕妇组中TRAIL下调的独立预测意义：ROC曲线下面积0.59（95％CI：0.51～0.67，P＜0.05）。结论孕20周前HDCP组孕妇血浆中23个蛋白表达存在差异，证明HDCP是一组具有不同生物学改变的异质性疾病；TRAIL与HDCP发生具有关联性；孕20周前应用TRAIL联合传统高风险因素（贫血和孕前体重指数）预测HDCP发生有较高的临床应用价值。（中华检验医学杂志，2015，38：522-527）
关键词： 高血压 妊娠性 受体 TNF相关凋亡诱导配体 蛋白质阵列分析 -
结核蛋白芯片法检测结核分枝杆菌的临床评价
目的：采用结核蛋白芯片法检测结核分枝杆菌感染，分析重庆市永川地区的结核感染现状以及流行病学趋势。方法2014年7月至2015年6月来重庆医科大学附属永川医院感染科门诊就诊患者，对635例疑似结核分枝杆菌感染患者采用临床常用结核分枝杆菌检测方法进行检测，通过结核蛋白芯片法检测永川地区结核分枝杆菌感染情况。共计215例患者被临床确诊为结核分枝杆菌感染，其中肺结核162例，肺外结核53例。采用卡方检验，对检测结果进行统计学分析。结果162肺结核患者，蛋白芯片法阳性率为81.5％，T-SPOT.BT为90.7％，DNA微阵列芯片89.5％，金标法为63.5％，抗酸染色法为38.3％。5种检测方法在临床肺结核诊断上差异有统计学意义（ P＜0.05）。53例肺外结核患者，蛋白芯片法阳性率90.6％、T-SPOT为94.3％、金标法为47.2％。3种检测方法在阳性率比较上差异有统计学意义（ P＜0.05）。蛋白芯片法、T-SPOT.BT在肺外结核阳性率上差异无统计学意义（ P＞0.05）。结核蛋白芯片法LAM抗体阳性出现概率大为94％。结论结核蛋白芯片法对肺结核和肺外结核的诊断较为可靠。（中华检验医学杂志，2016，39：780-782）
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激光共聚焦扫描仪检测丙型肝炎蛋白芯片的临床应用
目的对LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪的性能进行评估及对其与丙型肝炎蛋白芯片的临床应用进行研究.方法对LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪性能进行评估;采用已获国家食品药品监督管理局批准的以酶联免疫吸附法(ELISA)为原理的丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒检测临床样本,判断丙型肝炎病毒抗体阴、阳性.对样本编盲后,样本与丙型肝炎蛋白芯片进行反应.芯片反应后,针对编号样本用LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪和GenePix 4000B微阵列扫描仪分别进行检测.解盲,统计临床确诊阳性、阴性样本的检测情况,检测结果用SPSS11.0软件统计分析.结果LuxScan 10K扫描仪的检测能力能达到0.1荧光分子/μm2;动态范围＞103;具有较高的检测重复性、一致性.LuxScan 10K扫描仪与GenePix 4000B扫描仪扫描丙型肝炎蛋白芯片的结果与ELISA方法检测丙型肝炎病毒抗体的阳性符合率均为90.3%,检测结果差异无统计学意义;阴性符合率分别为83.9%和90.3%,检测结果差异无统计学意义.结论我国研制的LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪性能已达国际同类产品水平,配合适用的生物芯片LuxScan 10K微阵列扫描仪可用于临床样本检测.
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流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体
目的 建立流式免疫微球芯片技术(FCIBA)分析特异性血小板自身抗体的新方法.方法 使用不同红色荧光强度的微球,包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体(抗GPⅡb/Ⅲa、抗GP Ⅰ a/Ⅱa、抗GPIV、抗GP Ⅰ b/Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体),制备特异性血小板自身抗体检测微球,用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物,检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA(MACE)进行比较,并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体.结果 FCIBA分析抗GP Ⅱ b/Ⅲ a、抗GP Ⅰ a/Ⅱa、抗GPⅣ、抗GP Ⅰ b/Ⅸ和抗HLA-ABC 5种特异性血小板自身抗体,批内重复性变异系数(CV)分别为4.82%、6.09%、5.04%、5.73%、5.30%;稀释试验呈对数线性相关,相关系数(r)分别为0.997 2,0.996 6、0.998 8、0.996 5、0.998 2;新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关,r值分别为0.928 9、0.922 4、0.889 4、0.910 0、0.913 4(P均＜0.01).新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本,血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51.69%;其中,抗GPⅡb/Ⅲ a为40.82%,抗GP Ⅰa/Ⅱa为24.45%,抗GP Ⅳ为19.39%,抗GP Ⅰ b/Ⅸ为32.65%,抗HLA-ABC为17.35%.新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本,阳性率为0.结论 本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法,可同时分析抗血小板GPⅡb/Ⅲa、GP Ⅰ a/Ⅱa、GP Ⅳ、GP Ⅰ b/Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体.
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尿蛋白标志物模型早期诊断糖尿病肾病的临床应用
目的 寻找基于蛋白质组学技术早期、快速诊断糖尿病肾病的尿蛋白标志物模型,并探讨其临床应用价值.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser dosorption-ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术及Au芯片(proteinehip gold array)检测292例患者尿蛋白质谱,包括129例糖尿病肾病和163例对照者(61例糖尿病及102名健康体检者).获得的蛋白质谱数据用Biomaker Wizard 3.1软件筛选差异蛋白,通过生物标志模型软件(biomarker patterns software,BPS)建立决策树辨别分析模型,评价其临床诊断价值.对部分筛选的差异蛋白通过比对标准蛋白质谱数据,根据分子量大小进行初步鉴定.结果糖尿病肾病患者与对照者尿液中差异表达的蛋白质峰有40个,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-9.81～24.52,P均<0.05),通过BPS自动筛选66 916质荷比(m/z)蛋白建立的模型诊断糖尿病肾病敏感度为98.7%(78/79),特异度98.2%(111/113).对糖尿病和糖尿病肾病患者尿蛋白质谱图分析后得到24个差异蛋白质峰,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-6.95～14.45,P均<0.05),BPS筛选4 008、11 619、66 916 m/z蛋白建立模型区分糖尿病与糖尿病肾病的敏感度(129/129)和特异度(61/61)均为100%.通过比对标准蛋白质谱数据,糖尿病肾病患者尿差异蛋白中m/z11 619、23 529、66 916和79 378,可能为β_2-微球蛋白、α1-微球蛋白、白蛋白和转铁蛋白.结论 基于SELDI-TOF-MS及Au芯片技术检测尿蛋白质谱在鉴别蛋白尿来源、糖尿病肾病的早期快速诊断及肾脏损害评估具有重要应用价值.
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结核病患者与健康人血清蛋白质谱的比较研究
目的 比较结核病患者与健康人血清蛋白质谱,寻找结核病相关特异血清蛋白质,以期发现新型结核病血清学诊断标志物.方法 应用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX)和表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对包括54例菌阳肺结核(菌阳组)、45例菌阴肺结核(菌阴组)、18例肺外结核(肺外组)共117例结核病患者(结核组)及62例健康对照者(对照组)进行了血清蛋白质谱检测,并应用ClinProTools分析软件进行分析,找出差异蛋白质.结果 菌阳组-对照组、菌阴组-对照组、肺外组-对照组和结核组-对照组间分别存在19、14、26和30个差异血清蛋白质,其中分别有11、9、15和15个蛋白质在患者血清中表达上调；相对分子质量分别为1060、1944、2081和3954的4个血清蛋白质为各患者组与对照组间共同存在的差异血清蛋白质,其中相对分子质量为1060的蛋白质在患者血清中表达下调.结论 结核病患者与健康人之间血清蛋白质谱存在差异,有望通过血清蛋白质谱的比较分析,寻找到结核病相关特异血清蛋白质而发现新型结核病血清学诊断标志物.但尚需大样本量、多对照系的进一步研究予以确证.
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血清蛋白质指纹图谱对晚期结直肠癌一线化疗效果的预测作用
目的：寻找能预测晚期结直肠癌一线化疗疗效的血清蛋白标记物。方法选择2008年8月至2010年7月在浙江大学医学院附属第二医院的70例从未接受过治疗的晚期结直肠癌患者，其中44例患者接受FOLFOX方案化疗，26例患者接受FOLFIRI方案化疗，进行4个疗程治疗后使用RECIST评价标准区分化疗受益者（ R）和化疗无效者（ NR）。留取化疗前患者血清标本，采用SELDI-TOF-MS和人工神经网络对一线化疗的疗效进行预测分析。结果根据RECIST标准，42例患者为化疗受益者，28例患者为化疗无效者，分析两组患者血清蛋白质指纹图谱的差异，筛选出10个蛋白质峰在化疗受益组的表达明显高于化疗无效组；并由这10个峰构建出结直肠癌一线化疗疗效的预测模型。经交叉验证，该模型的总准确率为90．0％（63/70）。结论蛋白质指纹图谱模型是预测晚期结直肠癌患者一线化疗方案治疗效果的有效方法之一。
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应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱蛋白质芯片技术筛选前列腺癌血清标志物的研究
目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测前列腺癌患者的血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性诊断标志物.方法 以病理确诊的45例前列腺癌患者血清和45例BPH患者血清为研究对象.采用SELDI蛋白质芯片技术检测血清的蛋白表达图谱.用BiomarkerWizard软件分析差异蛋白,对所得蛋白进行初步诊断分析.结果 应用IMAC-CU固相金属亲和芯片在未经治疗的前列腺癌和BPH患者血清中检测到9个差异蛋白质峰,其蛋白质含量差异有统计学意义(P＜0.01),其中7个差异蛋白(3771.14,3968.26,4050.39,4279.20,4464.03,4481.59,8919.34)在前列腺癌患者血清中呈高表达,2个差异蛋白(5440.68,6102.82)呈低表达.联合相对分子质量为3771.14和4481.59的2个羞异蛋白诊断前列腺癌,其敏感性为86.7%(39/45),特异性为88.9%(40/45).经蛋白质数据库搜索,找到6种与差异蛋白相对分子质量接近的蛋白质,分别为Pepeide YY、Apolipoprotin C-II、Glueagon like peptide(7-37)、uncharacterized protein C14orf128、Medin、Neuropeptide Y.结论 SELDI蛋白质芯片技术可筛选出前列腺癌中相对特异的潜在标志蛋白,具有较好的临床应用前景.
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蛋白质芯片技术在乳腺癌新辅助化疗敏感与耐药差异蛋白筛查中的应用
目的 探讨蛋白质芯片技术在乳腺癌新辅助化疗敏感与耐药相关蛋白筛查中的价值.方法 提取10例TA方案(蒽环类+紫杉类)新辅助化疗患者术前空芯针穿刺标本的总蛋白;根据Miller & Payne分级将患者分为两组,将grade 4～5合并为化疗敏感组,grade 1～2合并为化疗耐药组,每组各有5例患者;应用抗体芯片与提取蛋白进行杂交,检测656种肿瘤相关蛋白表达水平;运用上述10例新辅助化疗患者的蛋白质表达结果筛选差异蛋白,并进行聚类分析.结果 空芯针穿刺活检可以为蛋白质芯片研究提供足够量的蛋白;分析化疗敏感组与化疗耐药组患者的蛋白表达谱差异,筛选出差异蛋白61个;以此差异蛋白为基础的聚类分析可将此两组乳腺癌标本聚成两类,准确率100%.结论 以蛋白质芯片技术为基础的分子分型对于预测乳腺癌新辅助化疗的敏感性有潜在的临床应用价值,但我们需要进一步的大样本研究验证此模型的稳定性和准确性.
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运用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术建立结直肠癌预测诊断模型
目的 寻找与结直肠癌相关的蛋白质并建立结直肠癌血清蛋白指纹图谱诊断预测模型.方法 随机选取结直肠癌病例36例(结直肠癌组)和疝或行胆囊择期手术的患者36例(对照组),术前静脉采血,采用弱阳离子交换蛋白质芯片(CM10),经表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定,建立结直肠癌的血清蛋白指纹图谱诊断预测模型;选取88例结直肠癌患者和44例正常对照进行盲法验证.结果 通过两组比较,得到5个差异蛋白峰,并以此建立诊断预测模型,其敏感性为100%,特异性为97.2%.盲法验证显示敏感性为71.6%,特异性为72.7%.其中质荷比为8908与13707的蛋白均存在于结直肠癌组和正常组的比较中,提示上述蛋白质与结直肠癌相关.结论 运用SELDI-TOF-MS技术建立的血清蛋白指纹图谱模型对诊断结直肠癌具有较高的敏感性与特异性.质荷比为8908与13707的蛋白可能成为结直肠癌的肿瘤标记物.
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应用飞行时间质谱技术结合蛋白芯片筛选卵巢恶性肿瘤患者的血清标志物
目的 应用飞行时间质谱技术结合蛋白芯片筛选卵巢恶性肿瘤患者的血清标志物.方法 选择广西医科大学附属肿瘤医院自2003年1月-2005年5月间收治的卵巢恶性肿瘤患者99例(恶性肿瘤组),卵巢良性肿瘤患者21例(良性肿瘤组);另取体检中心健康妇女87例(正常组)作为对照.分别采用IMAC3型固定金属亲和芯片和WCX2型弱阳离子交换芯片检测各组血清标本,应用Ciphergen蛋白芯片3.2.0软件采集3组标本的蛋白峰进行比较,蛋白峰强度相差0.5倍以上者定义为差异蛋白.同时应用Biomarker Pattern 5.0软件建立由IMAC3和WCX2型芯片筛选结果 共同组成的诊断模型,扩大样本量,对该诊断模型进行盲法验证.应用本诊断模型筛选出潜在的卵巢恶性肿瘤血清标志物.结果 将恶性肿瘤组(随机选取其中41例)与正常组(随机选取其中39例)血清标本比较,其中31个蛋白为差异蛋白(P＜0.05).建立诊断模型后,扩大样本量,分别取恶性肿瘤组中另外58例卵巢恶性肿瘤患者的术前血清和正常组中另外48例健康妇女的血清进行盲法验证,结果显示,其敏感度为100%,特异度为98%.将恶性肿瘤组与良性肿瘤组血清标本比较,发现质荷比为7769的蛋白为卵巢恶性肿瘤的潜在标志物.结论 应用飞行时间质谱技术结合固定金属亲和芯片和弱阳离子交换芯片,可有效筛选血清中特异性蛋白标志物,为建立卵巢恶性肿瘤的诊断模型提供可靠的技术平台.
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卵巢癌铂类耐药细胞株与敏感株间差异蛋白的筛选
目的:筛选卵巢癌铂类耐药细胞和敏感细胞间的差异蛋白质.方法:提取卵巢癌耐卡铂细胞SKOV3/CB和亲本细胞SKOV3的总蛋白,用二维液相色谱技术(ProtemeLabTM PF-2D)分离、筛选差异蛋白,用电喷雾离子化串联质谱(ESI-MS/MS)分析鉴定蛋白质.结果:共分离筛选出差异蛋白54个,其中SKOV3/CB表达上调的34个,SKOV3表达上调的20个.初步鉴定出5个SKOV3/CB表达上调的差异蛋白,即硫氧还原蛋白(thioredoxin,Trx)、Myosin regulatory light polypeptide 9(MYL9)、AX887247 NID、stanniocalcin homolog、human regulator ofG-protein signaling 5(RGS-5).这些蛋白涉及氧化还原、凋亡调控、甲基化及信号传导等多方面.结论:卵巢癌铂类耐药细胞和敏感细胞间存在蛋白表达差异,这些差异蛋白可能通过多种机制介导了卵巢癌对铂类的耐药.
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肺癌组织SKP2和p53蛋白表达临床意义的探讨
目的:探讨SKP2、p53蛋白在肺癌组织中的表达和关系及其对预后的影响.方法:组织芯片和免疫组化技术检测SKP2、p53蛋白在89例非小细胞肺癌(NSCLC)、13例小细胞肺癌(SCLC)和10例肺良性病变组织中的表达.结果:NSCLC、SCLC及肺良性病变组织中SKP2和p53蛋白的表达差异均有统计学意义,P值均为0.000.SKP2蛋白在肺癌组织中的表达水平与细胞分化程度、病理类型、TNM分期及淋巴转移密切相关,P值均为0.000.p53蛋白在肺癌组织中的表达水平与细胞分化程度、病理类型密切相关(P值均为0.000).肺癌组织中SKP2、p53蛋白表达呈正相关(r=0.448, P=0.000),两者同时高表达与细胞分化程度及病理类型密切相关(P值分别为0.001和0.022).多因素分析显示,肺癌患者5年生存率与SKP2蛋白表达水平、TNM分期、淋巴转移及术后放/化疗密切相关.结论:SKP2和p53蛋白在肺癌的发生发展中可能存在某种协同作用,对肺癌患者的预后可能有一定影响.
关键词： 肺肿瘤 S期激酶相关蛋白质类 蛋白质p53 蛋白质阵列分析 免疫组织化学
