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精子特异性乳酸脱氢酶研究进展
特异性乳酸脱氢酶( sperm-specific lactatedehydrogenase,LDH-C4)特异地存在于鸟类和哺乳类动物的睾丸和精子中,与体细胞乳酸脱氢酶A4(LDH-A4)和B4(LDH-B4)同属于乳酸脱氢酶家族,它们都以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶催化丙酮酸和乳酸的转化,在能量代谢中发挥重要作用,但LDH-C4 与体细胞LDH 相比又具有一些独特性质.近来,在研制新型避孕药的过程中,免疫避孕疫苗逐渐引起人们的重视[1],免疫法控制生育具有无药物的毒副作用、管理使用方便、低价、作用相对持久且可逆等优势,但找到理想的精子特异性抗原是制备免疫避孕疫苗的关键[2].用不育患者血清中提取的抗精子抗体(AsAb)来寻找睾丸cDNA 文库表达的抗原候选对象,结果发现特征性强且免疫效果可靠的免疫原为LDH-C4[3].本文主要针对近年来LDH-C4 的研究进展及其应用做一综述.
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人精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的构建及免疫效果的初步研究
目的:构建人精子特异性乳酸脱氢酶 DNA疫苗,并免疫雌雄两性BALB/c小鼠,以观察特异性抗体的产生.方法:采用分子克隆的方法构建pVAX1-hLDHC DNA疫苗.双酶切及正反向测序对该DNA疫苗进行鉴定.肌肉注射方法免疫雌雄两性BALB/c小鼠,ELISA和Western blot方法检测小鼠血清中的特异性抗体,常规病理学方法检测雄性实验小鼠的睾丸组织.结果:双酶切及正反向测序结果表明:插入片段的序列以及插入的位置和方向均正确.肌肉注射免疫BALB/c小鼠后可诱导明显的体液免疫反应,且在雄性实验小鼠中未观察到睾丸炎的发生.结论:成功构建了具有一定免疫效果的hLDHC DNA疫苗,为今后进行更深入的研究奠定了基础.
关键词: 精子特异性乳酸脱氢酶 DNA疫苗 基因免疫