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拟除虫菊酯类农药人工抗原的合成与鉴定
目的 合成拟除虫菊酯类农药人工抗原并对其进行鉴定.方法 采用功夫菊酸和3-间苯氧甲酸2种拟除虫菊酯类农药中间体,与四碳"间隔臂"--γ-氨基丁酸反应合成2种半抗原,经质谱鉴定合成成功.以牛血清蛋白为载体,采用活化酯法制备拟除虫菊酯的2种免疫原;以卵清蛋白为载体,采用混合酸酐法制备了3种包被原;经紫外光谱鉴定,粗略计算了偶联物终浓度及结合比.结果 制备的免疫原免疫Balb/c小鼠后得到的小鼠多抗血清经ELISA检测效价达1:50 000以上,IC<,50>达200 ng/ml.结论 拟除虫菊酯人工抗原的制备成功.
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抗独特型抗体的研究现状
在目前的免疫技术中,抗独特型抗体的研制是一种可行的免疫原替代技术.抗体的独特型是指存在于抗体分子上的独特型抗原决定簇的总称,它反映抗体分子的多样性.独特型抗体(Ab1)是指具有独特型抗原决定簇的抗体,而抗独特型抗体(Ab2)是指针对抗体的独特位产生的抗体.该技术首次出现于1974年,Jerne在Burnet的细胞克隆选择学说的基础上提出了著名的免疫网络学说,在Jerne提出免疫网络学说的基础上,Nisonoff和Lamoyi明确指出,抗独特型抗体实质上能替代抗原诱导特异性免疫应答,是近年来生物技术研究的一个热点,尤其作为人、畜疾病防治的一种新制剂,已展示出十分诱人的前景[1].
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AI免疫原制备及应用
血管紧张素I(angiotensin,AI)为10肽结构.AI正常生理浓度下没有生理活性,若在血浆浓度很高时,能刺激肾上腺髓质释放儿茶酚胺,作用于脑中枢神经,引起周围血管收缩,使血压升高,还对钠、水的重吸收产生影响[1].AI分子量为1295.69,属于半抗原,必须与大分子载体蛋白相结合制成免疫原,才能免疫动物诱发抗体的产生.本文对AI免疫原制备作一探讨.
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间皮瘤相关特异性抗体的研究进展
自1979年Singh等[1]用培养的人反应性间皮细胞悬液作免疫原制备多克隆抗间皮细胞抗体以来,陆续用人恶性间皮瘤(MM)细胞株研制了MAb45,anti-MS和ME1等抗体.另外,识别卵巢肿瘤抗原的抗体OV632和K1及抗维尔姆斯瘤抗体anfi-WF1,在MM中亦有较高的敏感性和特异性.
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犬细小病毒VP2蛋白在家蚕/昆虫细胞中表达
目的 犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)能够引起犬急性出血性肠炎,在幼犬中的死亡率很高,为我国养犬业和经济动物养殖业带来巨大的经济损失.因而,寻找一种新型、安全、高效的疫苗为细小病毒性肠炎的防控具有重要意义.方法 本研究利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达CPV VP2蛋白的重组杆状病毒rBV-D-VP2.该重组病毒感染昆虫细胞和家蚕后,表达CPV VP2蛋白.体外表达的VP2蛋白自动装配成病毒样粒子.随后用蚕蛹中大量组装成的病毒样粒子分别通过口服和肌注两种途径免疫豚鼠.结果 经电镜检测,观察到直径为25 nm大小的球形病毒样粒子,表明重组杆状病毒表达的VP2能形成病毒样粒子,且在大小、形态上与天然病毒相似.间接免疫荧光检测表明成功构建了表达VP2的病毒样粒子.口服和肌注两种途径免疫豚鼠,均产生了血凝抑制效价.结论 本研究为CPV新型亚单位疫苗的研究提供了依据.
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精子特异性乳酸脱氢酶研究进展
特异性乳酸脱氢酶( sperm-specific lactatedehydrogenase,LDH-C4)特异地存在于鸟类和哺乳类动物的睾丸和精子中,与体细胞乳酸脱氢酶A4(LDH-A4)和B4(LDH-B4)同属于乳酸脱氢酶家族,它们都以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶催化丙酮酸和乳酸的转化,在能量代谢中发挥重要作用,但LDH-C4 与体细胞LDH 相比又具有一些独特性质.近来,在研制新型避孕药的过程中,免疫避孕疫苗逐渐引起人们的重视[1],免疫法控制生育具有无药物的毒副作用、管理使用方便、低价、作用相对持久且可逆等优势,但找到理想的精子特异性抗原是制备免疫避孕疫苗的关键[2].用不育患者血清中提取的抗精子抗体(AsAb)来寻找睾丸cDNA 文库表达的抗原候选对象,结果发现特征性强且免疫效果可靠的免疫原为LDH-C4[3].本文主要针对近年来LDH-C4 的研究进展及其应用做一综述.
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体外免疫原快速激活全血细胞固有免疫反应系统模式的应用
血液循环的血液固有免疫系统由血浆补体固有免疫子系统、红细胞固有免疫子系统、血小板固有免疫子系统和白细胞固有免疫子系统构成~([1]).若采用系统生物学的复杂理论和数学公式计算探讨这些子系统之间的网络关系,则必须通过在体外建立系统模式进行系统免疫学实验研究~([2]).
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崭新的系统血液固有免疫学研究
系统免疫学是新的免疫学研究领域,指在系统生物学更广阔的范围,从复杂系统工程的角度,对免疫系统的不同子系统与组成之间,研究在对免疫原的系统免疫反应中各自如何发挥免疫功能以及相关的网络调控机制的一门学科,可用多种相应的数学公式与相关软件进行深入探讨~([1-3]).
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免疫原快速激活系统血液固有免疫反应研究思路的演变与创新
1953年Nelson发现人类红细胞可与特异调理过的梅毒螺旋体及肺炎双球菌结合,称为免疫黏附,并推测红细胞膜表面可能存在免疫黏附受体,免疫复合物与该受体结合可促进白细胞的吞噬作用,是宿主防御机制的一部分.后来证明此黏附受体即为C3b受体(CR1、CD35).
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壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米免疫原肌注BALB/c鼠所致树突状细胞分布与功能变化
壳聚糖是一种来源广泛、价格低廉、具有良好生物相容性及降解性、安全无毒的阳离子天然高分子聚合物,以纳米颗粒或微球形式与DNA结合后形成聚电解质复合体,后者可优化DNA疫苗的免疫效果.研究证实壳聚糖是一种有效介导DNA疫苗进行皮肤及黏膜免疫的载体物质.
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血小板/T细胞活化抗原1
1985年Burns等以活化T细胞为免疫原制备了抗活化T细胞表面抗原的单克隆抗体,并将其中1株单克隆抗体Leo-A1识别的抗原命名为人T细胞系特异性活化抗原1(T lineage-specific activation antigen1, TLiSA1),实验证实TLiSA1参与了CTL细胞的活化与分化[1-3].随后的实验发现TLiSA1也高表达于血小板表面,并与血小板的活化和凝集功能有关,遂将此抗原重新命名为血小板/T细胞活化抗原1(platelet and T cell activation antigen 1, PTA1)[4].1997年我实验室与澳大利亚Newcastle大学癌症研究中心合作成功克隆了人PTA1 cDNA[5].随后,我室又成功克隆了长臂猿和猴PTA1全长cDNA.PTA1基因的克隆为进一步深入探讨PTA1的功能打下了良好的基础.
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两性霉素B免疫作用的研究
本研究的目的是发展一种简便快速的检测两性霉素B(Amphotericin B,AMB)血药浓度的酶联免疫吸附试验(ELISA).以AMB与小牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)连接物作为免疫原,AMB与中国鲎血蓝蛋白(TTH)的连接物作为检测抗原,用弗氏完全佐剂乳化抗原,分别免疫日本大耳兔、新西兰大白兔和BALB/c小鼠.大白兔的体重为2.5kg/只,BALB/c小鼠为6~8周龄.
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肿瘤坏死因子α基因转导的疫苗对小鼠肝癌移植瘤的影响
应用我院已构建的肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为免疫原,进行小鼠免疫接种,观察接种后小鼠对移植的肿瘤细胞的免疫排斥作用,探索其能否作为一种肝癌疫苗.
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脓毒症时线粒体损伤的研究进展
脓毒症(sepsis)是指各种微生物及免疫原性物质引起的全身炎症反应.线粒体是细胞的动力工厂,其损伤与脓毒症的发病机制有关.
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不同免疫原淋巴细胞进行主动免疫治疗原因不明复发性流产的有效性
目的 探讨不同免疫原的淋巴细胞进行主动免疫治疗原因不明复发性流产的有效性.方法 选取我院2012年8月-2013年8月收治的43例URSA患者为研究对象,采用丈夫或者男性第三者淋巴细胞给予皮内注射主动免疫方法治疗.结果 43例患者中有37例接受了丈夫的淋巴细胞,妊娠成功率为86.5%(32例),有6例患者接受了男性无关第三个体淋巴细胞,妊娠成功率是83.3%(5例)(P>0.05).结论 接受丈夫或者男性第三者淋巴细胞在主动免疫治疗原因不明复发性流产中均具有较高的应用价值,妊娠成功率高,安全可靠,可以大力推广应用.
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人甲状旁腺激素多肽抗体制备及纯化方法研究
人甲状旁腺激素(hPTH)是维持机体钙磷平衡等生命活动的重要激素, hPTH 1-84、1-34、1-37、44-68、54-84是人体中重要的免疫活性片段[1].HPTH 1-84的分子量为9 500,介于完全抗原和半抗原之间.由于抗hPTH 1-84抗体可测定任何具有免疫活性的hPTH片段, 因此具有重要应用价值.本研究用基因工程表达hPTH 1-84制成3种免疫原,分别免疫家兔后制备抗体,并对特异抗hPTH 1-84抗体和载体BSA抗体的效价进行比较.同时,分别用盐析、Q膜、蛋白A和免疫亲和层析纯化方法对抗hPTH 1-84抗体的纯度、活性和回收率进行研究.
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乙肝病毒表面抗原基因启动子Ⅱ的结构及调节研究
0引言乙型肝炎病毒(HBV)为含有一段单股区的双链环状DNA病毒,属嗜肝DNA病毒科,其基因组结构紧密,可分为结构基因序列和调节基因序列两部分,二者可具有相互重叠的特点.HBV基因的负链核苷酸序列中,至少有4个开放读码框(open reading frame,ORF),包括编码外膜蛋白的S基因区,编码核衣壳蛋白的C基因区,编码聚合酶的P基因区和调节病毒基因转录水平的X基因区,4种ORF分别有各自的启动子.HBV的外膜蛋白能使病毒由感染的细胞分泌,并能附着和侵入新的细胞;同时其也是引起宿主保护性应答的免疫原表位[1-6].因此,作为指导S基因组RNA转录的SP启动子序列,在HBV的生活周期中,具有较为重要的作用.
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防龋疫苗主动免疫的现状与未来
防龋疫苗的研究已有近40年的历史,多种防龋疫苗经证实确有防龋效果,然而防龋疫苗进入临床应用前必须解决使用安全性、防龋高效性、成本经济性等问题.近年来,随着免疫学、分子生物学和基因工程技术的飞速发展,从分子水平对变形链球菌 (Mutans Streptococci,以下简称变链菌)主要毒力因子表面蛋白抗原 (surface protein antigen,PAc,又称为抗原B、I/II、IF、P1)和葡糖基转移酶 (glucosyl~transferaes, GTFs)的认识逐步深入,极大地推动了防龋疫苗的研究.国内外学者就防龋疫苗的免疫原、免疫佐剂和免疫途径进行了大量的研究,取得了许多新的进展.
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国际艾滋病疫苗会议介绍
国际艾滋病疫苗会议于2004年8月30日至9月1日在瑞士洛桑召开,会期3天,参加会议的有1000余人.会议内容包括细胞免疫、体液免疫、载体与佐剂、免疫原的设计、动物模型和临床试验等内容.