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戴安使糖类化合物色谱分析更上一层楼
糖类化合物和多元醇由于挥发性和热稳定性较低,沸点较高,因此需经过衍生化后才能进行气相色谱分析,但是由于衍生化操作麻烦,容易引入较大误差,使气相色谱法在实际应用中受到了很大的限制.毛细管电泳法虽然在分离带电荷的糖类方面具有独特的优势,但是由于大部分糖类为中性化合物,必须首先通过络合、解离或衍生使糖呈带电状态,然后再用电化学法、紫外法或荧光法检测,因而也存在操作过程复杂、容易引入误差的缺点.
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柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌抑菌作用机理的研究
目的 观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其抑菌作用机理.方法 采用纸片法和稀释法进行抑菌试验;采用电泳法和生化检验法观察抑菌作用机理.结果 柠檬提取物原液对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环>30 mm,小抑菌浓度为柠檬提取物1∶6400稀释度.在不同浓度凝胶电泳图谱中,耐药金黄色葡萄球菌经柠檬提取物作用后发生较明显变化的蛋白质条带共有5条,说明有明显的菌体蛋白电泳图谱的改变;没有观察到柠檬提取物作用后细菌酶活性的改变.结论 柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,该提取物作用后的耐药金黄色葡萄球菌菌体蛋白合成量有明显改变.
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131 毛细管电泳法检测吴茱萸中昔奈福林的含量
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杏仁组织中蛋白质实验室提取方法优化
目的:优选杏仁组织中蛋白质的实验室提取方法.方法:采用盐析法、分离蛋白法、反胶束法、碱溶酸沉法、盐碱法提取杏仁组织蛋白,通过凯氏定氮法测定杏仁组织蛋白含量,对比分析蛋白含量和蛋白提取率,应用一维SDS-PAGE电泳对提取蛋白的种类进行测定.结果:盐析法、分离蛋白法、反胶束法、碱溶酸沉法、盐碱法提取的组织蛋白提取率分别为39.41%,25.63%,0.326%,40.02%,41.85%,蛋白质量分数分别为75.667%,44.986%,5.372%,60.056%,51.379%,蛋白粉质量分别为8.6,9.1,0.823,9.8,6.259 g,盐析法提取杏仁组织中蛋白质含量和提取率高.SDS-PAGE电泳图谱显示碱溶酸沉法、分离蛋白法、反胶束法的电泳条带均为4条,盐析法有5条,盐碱法只有3条,说明盐析法提取的蛋白质种类多.结论:在实验室条件下采用盐析法从杏仁组织中提取蛋白质效果佳.
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RP-HPLC测定消异胶囊中芍药苷的含量
消异胶囊由三棱、莪术、赤芍、当归等药味组成,具有对抗垂体后叶素、前列腺素E1引起的子宫平滑肌痉挛及内分泌调节作用,临床用于治疗子宫内膜异位症.方中主要药味赤芍的有效成分为芍药苷,具有解痉、镇痛、镇静、降温解热、抗氧化等作用.芍药苷的含测方法主要为薄层色谱-紫外分光光度法[1]、薄层色谱法[2]、高效液相色谱法[3]、毛细管电泳法[4].本研究采用HPLC测定消异胶囊中芍药苷的含量,获得较理想的结果.
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血红蛋白增多症合并糖尿病患者糖化血红蛋白测定一例分析
糖化血红蛋白作为糖代谢长期监测指标日益受到临床的重视,目前实验室常用的测定方法有离子交换树脂微柱法、免疫法、电泳法以及亲和色谱微柱法.我们对1例合并遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症(HPFH)的糖尿病患者进行糖化血红蛋白检测时,发现一些问题,讨论如下.
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毛细管电泳法检测肝细胞癌微卫星不稳定性的影响因素
目的:探索适用于肝癌大规模基因组扫描的自动化微卫星不稳定性基因分型实验方法.方法:应用6对高度多态性微卫星标记物对56例肝细胞癌基因组进行PCR扩增,产物通过MegaBACE 500毛细管电泳测序仪进行电泳,采用Genetic Profiler软件进行基因分型,摸索不同PCR条件以及PCR体系残留混合物对分型结果的影响.结果:通过1次PCR和电泳能得到48个样品的分型结果,常见的等位基因表型包括杂合子、纯合子、杂合子丢失、微卫星不稳定性和等位基因失衡等几种模式,其中微卫星不稳定性基因表型呈多种特征;MSI的频率为32.1%(18/56),10例(18.2%)出现高频MSI;PCR反应体系残留混合物(dNTP、引物和盐离子的浓度等)对基因分型的结果有明显不利影响,可使等位基因片段大小分析结分错误导致结论错误;样品浓度对分析结分影响较小,在50 mg/L时比较合适.结论:少数肝细胞癌存在MSI,表明其在HCC发生中作用较小.应用MegaBACE 500毛细管电泳测序仪和GeneticProfiler分析软件进行微卫星基因组扫描效率高,结果可靠,但测序体系中必须维持佳盐离子的浓度和样品浓度.
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荧光定量聚合酶链反应技术检测结核分支杆菌的临床应用
我们采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测了115例结核患者高度疑有结核分支杆菌的标本和30例非结核病的患者标本,并与培养法、抗酸染色法和PCR-电泳法进行了比较,现报告如下.
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凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率
建立siRNA含量测定方法,用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定.利用荧光染料SYBRGold和Ribogreen与siRNA结合后能发出强烈荧光的原理,分别采用电泳法和荧光分光光度法测定脂质体中的siRNA含量,计算阳离子脂质体的包封率.SYBR Gold电泳法的检测线性范围为0.2~2.0μmol·L-1(R=0.9930),高、中、低3个浓度的回收率分别为96.35%、96.92%和100.74%(n=3);日内日间精密度的RSD均小于5%(n=5).Ribogreen荧光分光光度法的检测线性范围为10~50 nmol·L-1(R=0.9971),高、中、低3个浓度的回收率分别为98.22%、99.88%和99.64%(n=3);日内日间精密度的RSD均小于5%(n=5).利用这两种方法所测得3批阳离子脂质体中siRNA平均含量分别为98.52%和97.85%,平均包封率分别为99.20%和96.45%,经方差分析,两种方法无显著性差异.两种方法准确可靠、稳定性高和方便实用,均可用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定.
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肝素钠乳膏鉴别(1)的改进
<国家食品药品监督管理局国家药品标准>WSi-(X-027)-2003Z肝素钠乳膏的鉴别(1)取本品2g,加水5ml振摇溶解离心,取上清液作为供试品溶液;另取肝素钠标准品适量,加水制成每1ml含100单位的溶液作为标准溶液.吸取上述溶液各4μl,照电泳法(中国药典2000年版二部附录V F第三法)试验,供试品与对照品所显斑点的迁移距离的比值为0.9~1.1.
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醋酸纤维素薄膜电泳法测定蛋白纯度
目的:应用醋酸纤维素薄膜电泳法测定免疫球蛋白的纯度.方法:采用pH=8.6,离子强度0.06的缓冲系统,电泳时间80分钟以上.结果:电泳谱显示γ球蛋白与其它球蛋白完全分离,光密度计扫描显示主峰中不混有杂峰.结论:该方法用于测定蛋白纯度,方法准确、可靠,可用于该类制品的质量控制.
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三磷酸腺苷二钠及其制剂含量测定方法的改进
目的:测定三磷酸腺苷二钠及其制剂的含量.方法:采用改进电泳法.结果:经统计分析,与电泳法比较差异无显著性(P>0.05)且操作方便,误差小.结论:改进电泳法可作为测定三磷酸腺苷二钠及其制剂含量的方法.
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生物检材中美沙酮及其代谢产物的检测
美沙酮维持治疗自20世纪60年代初首先在美国开展以来,在降低因吸毒引发的公共卫生(HIV/AIDS和乙、丙肝的感染、传播)和社会问题等方面取得了显著的效果.我国政府为降低因吸毒引发的HIV/AIDS及其相关危害,于2003年2月启动了海洛因成瘾者社区药物(美沙酮)维持治疗试点工作.几年来,我国的美沙酮维持治疗工作在覆盖地区、接受治疗人群数量和降低毒品相关危害等方面取得了重要的进展和成效[1].美沙酮及其代谢产物的检测,对美沙酮维持治疗者特别是同时接受抗HIV、抗结核治疗的病人具有重要的意义.检测美沙酮及其代谢产物常用的生物检材包括:头发、血液、尿液、汗液、唾液等.常用的检测方法包括:免疫分析法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、气相-质谱联用法、液相-质谱联用法等.随着萃取、分离、检测技术的不断发展,各种检测方法用于生物检材中美沙酮及其代谢产物的检测也取得了较大的突破.
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电泳在中药方面的应用及发展
1概述带电颗粒在电场作用下,向着与其所带电荷相反的电极移动,称为电泳.电泳法是利用各种物质电荷性质,大小及性状的差异而进行分离的方法,此外具有相同电荷的分子(颗粒),由于它们在分子量上的差异而有不同的荷质比,促使其溶液中的离子在电场中有不同的迁移率,在一定时间内各自移动的距离不同,因此达到分离鉴定之目的.
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034 卵子受精、卵裂和囊胚发展能力与卵子体外成熟时间相关/035 Ems对ⅣF/ICSI结局的影响:Ⅲ/Ⅳ期Ems影响累积妊娠率和活产率/036 电泳法分离人类精子
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电泳法测定大鼠血浆中骨特异性碱性磷酸酶活性
目的建立一种简便灵敏准确的测定大鼠血浆中骨特异性碱性磷酸酶(BALP)活性的方法.方法采用聚丙烯酰胺凝胶(PA)电泳法检测BALP活性.以纯化的BALP作为标准品,进行回收率测定和精密度测定.结果此方法测定大鼠血浆中BALP可得到满意的结果:(1)以标准BALP加入量对实际测定吸光度值回归统计,可见有良好的线性关系(r=0.9986,P<0.05).(2)标准回收率范围为93.83%~100.34% .(3)对同一样品进行10次测定,其变异系数为4.4%.(4)实际样品测定中缺锌组BALP显著低于对喂组和对照组,而缺锌组与对照组和对喂组的总ALP也有差别.结论建立的电泳方法检测大鼠血浆中的BALP,经实验证实,该方法操作简便,具有良好的准确性和精密度.
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RP-HPLC法测定白柳皮提取物中水杨苷的含量
白柳皮提取物是杨柳科植物白柳Salix alba L.的树皮经提取后喷雾干燥而成,主要含有水杨苷等成分[1].水杨苷具有解热、镇痛等功效,用于退热和治疗关节炎等疾病.水杨苷的测定方法有薄层色谱法、电泳法、电化学法、紫外光谱法,但这些方法操作繁琐.高效液相色谱法亦有报道,采用缓冲盐为流动相[2].本实验对白柳皮提取物中水杨苷含量的HPLC测定方法进行了改进,建立了白柳皮提取物中水杨苷含量的RP-HPLC测定方法.该方法不需要在流动相中添加缓冲盐就能达到很好的分离.
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高效毛细管电泳法在药物分析中的应用
高效毛细管电泳法(HPCE)是样品中各组分以高压电场为驱动力,在毛细管中按其淌度和分配系数不同进行高效快速分离分析的一种新技术.HPCE根据不同的分离模式,主要可分为:毛细管区带电泳(Capillary zone electrophoresis,CZE)、胶束电动毛细管色谱(Micellar electrokinetic capillary chromatography ,MECC)、毛细管凝胶电泳(Capillary gel electrophoresis,CGE)、毛细管等速电泳(Capillary isotachophoresis,CITP)及毛细管等电聚焦(Capillary isoelectrofocusing,CIEF)5种类型.HPCE具有高效、快速、进样体积小和溶剂消耗少等优点,因此得以迅速发展,在化学、生命科学和药学领域都有广泛的应用.本文仅对HPCE在药物分析中的应用作简要综述.
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尿蛋白检测不一致,M 蛋白阴性,血沉接近正常为首发表现--3例多发性骨髓瘤分析并文献复习
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是克隆性浆细胞异常增生性疾病,既往的病例报道常伴血中免疫固定电泳法 M蛋白检测阳性,血沉较高,血中球蛋白较高,而我们报道的3例病人与之相反,临床上颇为隐匿,主要是体检或是其他疾病诊疗时发现肾功能所损,尿蛋白检测结果不一致,从而进一步检查诊断的,有的还一度误诊为原发性肾脏疾病,为此提出讨论,以利进一步诊治。
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免疫比浊法与高效液相色谱法检测糖化血红蛋白结果的对比分析
糖化血红蛋白(HbA1 c)是糖尿病的重要检测指标,对糖尿病患者血糖控制方案及血糖控制水平的评价具有重要的临床意义[1]。目前检测HbA1 c 方法有很多,一般为色谱法、电泳法、免疫法和化学法。色谱法主要包括离子交换层析法、高效液相色谱法(HPLC)和亲和法、免疫比浊法、胶乳免疫凝集法(LIAA)等[2]。目前,临床采用较多的是免疫比浊法和 HPLC 法,本研究对两法的结果进行对比分析,探讨2种方法的准确性和精密度,报告如下。