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人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺中样品浓度对纯化效果的影响
经过Sepharose 4FF凝胶柱层析法纯化的人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗,其杂蛋白去除率可达99%以上,副反应率较现行的3~5倍浓缩疫苗明显降低,免疫效价可达3.50IU/ml以上,值得大力推广并终取代浓缩疫苗.在深入研究纯化工艺佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗蛋白浓度的高低直接影响纯化后疫苗的质量,要达到理想的纯化效果,样品蛋白浓度应在40mg/ml以下.
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抗癌药物与DNA相互作用的共振拉曼光谱研究
用激光辐射样品时,会发生散射.在散射光谱中,有些光的频率与入射光频率不同,强度要弱得多,这些光谱中就有拉曼光谱.共振拉曼效应(Resonance Raman effect)即当激发激光波长落入分子电子吸收峰附近时,分子振动的拉曼信号强度得到极大的增强,约是普通拉曼光强度的104~106倍,因共振增强了这些带有物质结构信息的光强度,所以大大降低了所需要的样品浓度,提高了检测灵敏度,能够得到更准确的物质结构信息[1].
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毛细管电泳法检测肝细胞癌微卫星不稳定性的影响因素
目的:探索适用于肝癌大规模基因组扫描的自动化微卫星不稳定性基因分型实验方法.方法:应用6对高度多态性微卫星标记物对56例肝细胞癌基因组进行PCR扩增,产物通过MegaBACE 500毛细管电泳测序仪进行电泳,采用Genetic Profiler软件进行基因分型,摸索不同PCR条件以及PCR体系残留混合物对分型结果的影响.结果:通过1次PCR和电泳能得到48个样品的分型结果,常见的等位基因表型包括杂合子、纯合子、杂合子丢失、微卫星不稳定性和等位基因失衡等几种模式,其中微卫星不稳定性基因表型呈多种特征;MSI的频率为32.1%(18/56),10例(18.2%)出现高频MSI;PCR反应体系残留混合物(dNTP、引物和盐离子的浓度等)对基因分型的结果有明显不利影响,可使等位基因片段大小分析结分错误导致结论错误;样品浓度对分析结分影响较小,在50 mg/L时比较合适.结论:少数肝细胞癌存在MSI,表明其在HCC发生中作用较小.应用MegaBACE 500毛细管电泳测序仪和GeneticProfiler分析软件进行微卫星基因组扫描效率高,结果可靠,但测序体系中必须维持佳盐离子的浓度和样品浓度.
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基因芯片技术及其在体育科研中的应用展望
基因芯片是指应用原位合成或微量点样等方法,将大量cDNA片段、肽核苷酸或寡核苷酸探针有序地固化于支持物(如玻璃片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等)的表面,组成密集二维分子排列,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过激光共聚焦扫描或电荷偶联摄影像机等特定仪器对杂交信号的强度扫描分析,从而获得大量的基因序列或表达信息[1].基因芯片的突出特点在于高度并行性、多样性、微型化和自动化.高度的并行性不仅可以大大提高实验的进程,并且有利于基因芯片技术所展示图谱的快速对照和阅读;多样性是指单个芯片中可以进行样品的多方面分析,从而提高分析的精确性,避免因不同的实验条件产生的误差;微型化是当前芯片发展的趋势,其优势是减少试剂用量和减少反应体积,从而提高样品浓度和反应速率.高度自动化可以降低制造芯片的成本和保证芯片的制造质量不易波动.另外,与计算机相连的图像分析系统使研究结果更客观、准确.同时由于生物信息学的迅速发展,为基因芯片的研究提供了物质基础[2].目前,该技术已应用于基因表达分析、新基因发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断和预测、药物筛选、基因测序、个体化医疗等.此技术为"后基因组计划"时期基因功能的研究及现代医学科学及医学诊断学的发展提供了强有力的工具[1,3].
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药品微生物限度检查方法学验证试验及其相关的技术问题
微生物污染的监控是药品质量和安全性评价的重要指标.微生物试验结果易受试验条件的影响,特别是药品中含有对微生物生长有抑制作用组分时,影响尤为突出.进行微生物限度检查时,应保证在检验条件下的样品浓度不足以抑制污染微生物的生长,确保检验结果的有效和准确.也就是说,任何产品的微生物限度检查法均需经方法学验证,确认所采用的方法适合于该样品的微生物限度检查方可使用.为此,<中国药典>2005年版[1]附录微生物限度检查法增加了方法学验证试验的要求.如果拟定方法不能消除样品的抑菌作用,方法学验证结果不符合要求,需试验出适宜处理方法,消除抑菌作用后,再行重新验证,直至验证结果符合要求.本文对微生物限度检查方法学验证试验及其主要技术问题,以及相关解决方法进行了总结归纳.
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样品浓度对VERO细胞狂犬病疫苗纯化效果的影响
接种疫苗可以有效防治狂犬病,但疫苗的纯度对防治效果具有决定性作用.基于此,本研究主要针对样品浓度和VERO细胞狂犬病疫苗纯化效果的相关性进行研究,结果显示样品浓度对杂蛋白去除率有明显的影响.样品浓度高于35 mg/ml时,狂犬病毒峰拖尾现,杂蛋白含量明显增加,纯化效果严重下降.因此,凝胶柱层析纯化狂犬病疫苗的样品浓度不能高于35mg/ml.
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ICE3500原子吸收光谱仪维修案例
原子吸收光谱法(Atomic Absorption Spectroscopy, AAS)又称为原子吸收分光光度法。原子吸收光谱分析是基于试样蒸气相中被测元素的基态原子对由光源发出的该原子的特征性窄频辐射产生共振吸收,其吸光度在一定范围内与蒸气相中被测元素的基态原子浓度成正比,以此测定试样中该元素含量的一种仪器分析方法[1]。通过测定吸收特定波长的光量求出待测元素的含量。其特点是灵敏度高、精密度好、选择性好、方法简便、准确度高及分析速度快。原子吸收光谱分析法的定量关系可用郎伯-比耳定律A=abc来表示。式中,A是吸收度,a是吸光系数,b是吸收池光路长度,c是被测样品浓度。
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BH5100型原子吸收光谱仪原理及维修
1 原子吸收光谱分析原理所谓原子吸收光谱法(Atomic Absorption Spectroscopy)又称为原子吸收分光光度法,通常简称原子吸收法(AAS),其基本原理为:从空心阴极灯或光源中发射出一束特定波长的入射光,在原子化器中待测元素的基态原子蒸汽对其产生吸收,未被吸收的部分透射过去.通过测定吸收特定波长的光量大小,来求出待测元素的含量.原子吸收光谱分析法的定量关系可用郎伯-比耳定律,A-abc来表示.式中,A是吸收度,a是吸光系数.b是吸收池光路长度,c是被测样品浓度.该法具有灵敏度高、精确高;选择性好、干扰少;速度快,易于实现自动化;可测元素多、范围广;结构简单、成本低等特点,也正因为如此,该法的发展也相当迅速.