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高效毛细管电泳仪在临床微生物学检验中的应用
高效毛细管电泳(High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE)技术是一种新型高效液相分离技术,具有快速、高效、高灵敏度、重复性好、易定量、非同位素操作、可实时监测及全自动化等优点[1],广泛应用于化学、生物学、医学、环境卫生等各个方面,尤其是用于生物医学,如甄别人类遗传性基因缺陷、对基因进行定量分析、微生物学和病毒学分析、法医分析、基因治疗[2]等.目前,在临床检验中HPCE主要用于检测糖、蛋白质、核酸等.
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四种分析技术检测血清单克隆免疫球蛋白的比较
单克隆免疫球蛋白( monoclonal immunoglobulin)即M蛋白,是由单克隆浆细胞分泌的异常免疫球蛋白,常在浆细胞病如多发性骨髓瘤、Waldenstr(o)n巨球蛋白血症和原发性淀粉样变性等患者血中出现.目前,免疫固定电泳被认为是分析和鉴定M蛋白的灵敏的方法.高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)是20世纪80年代迅速发展起来的一种新技术,与传统的凝胶电泳相比,其分辨率高,结果重现性好,分析快速.
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高效毛细管电泳的临床应用及进展
高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)是在传统电泳基础上继现代高效液相色谱技术之后发展起来的一种新型高效分离技术.由于它具有无法比拟的高效和快速性,因而受到越来越多科学家们的青睞.
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毛细管电泳法检测肝细胞癌微卫星不稳定性的影响因素
目的:探索适用于肝癌大规模基因组扫描的自动化微卫星不稳定性基因分型实验方法.方法:应用6对高度多态性微卫星标记物对56例肝细胞癌基因组进行PCR扩增,产物通过MegaBACE 500毛细管电泳测序仪进行电泳,采用Genetic Profiler软件进行基因分型,摸索不同PCR条件以及PCR体系残留混合物对分型结果的影响.结果:通过1次PCR和电泳能得到48个样品的分型结果,常见的等位基因表型包括杂合子、纯合子、杂合子丢失、微卫星不稳定性和等位基因失衡等几种模式,其中微卫星不稳定性基因表型呈多种特征;MSI的频率为32.1%(18/56),10例(18.2%)出现高频MSI;PCR反应体系残留混合物(dNTP、引物和盐离子的浓度等)对基因分型的结果有明显不利影响,可使等位基因片段大小分析结分错误导致结论错误;样品浓度对分析结分影响较小,在50 mg/L时比较合适.结论:少数肝细胞癌存在MSI,表明其在HCC发生中作用较小.应用MegaBACE 500毛细管电泳测序仪和GeneticProfiler分析软件进行微卫星基因组扫描效率高,结果可靠,但测序体系中必须维持佳盐离子的浓度和样品浓度.
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高效毛细管电泳在临床检验中的应用
高效毛细管电泳(high perfomance capillary electrophoresis,HPCE)是八十年代发展起来的分离分析技术,其具有分离效率高(理论塔板数105~106)、灵敏度高(可达fmol水平)、应用范围广(从无机离子、有机分子到生物大分子蛋白质、核酸),分离时间短(一般不超过40min)、需要样品体积小(一般为nL级)、柱子成本低、分离模式多等诸多优点.
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毛细管区带电泳法分离测定当归中阿魏酸的含量
高效毛细管电泳(High performance capillary electrophoresis,PHCE)是近10年来迅速发展的一种新型分离分析技术,具有高效、快速、低耗、样品用量小等特点[1].毛细管区带电泳法(Capillary zone electrophoresis,CZE)是HPCE的一种分离模式,由Jorgenson[2]等于1981年提出,它是根据带电组分在外加电场下电泳淌度的差异而进行分离的,其在中药分析中得到较为广泛的应用[3].当归是临床为常用的中药之一,阿魏酸是其中抑制血小板凝集的主要有效成分,故多采用薄层扫描法[4]和高效液相法测定[5,6]其含量作为评价当归及其制剂质量的指标之一.本文采用CZE法测定当归中阿魏酸的含量,取得满意的结果.
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高效毛细管电泳及其在药物监测中的应用
高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)是近年来发展较快的一种分离、分析技术,是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物.HPCE和高效液相色谱法(HPLC)相比,相同处在于都是高效分离技术,仪器操作均可自动化,且均有多种不同分离模式.差异在于,HPCE用迁移时间取代HPLC中的保留时间,分析时间通常不超过30 min,比HPLC速度快;对HPCE而言,从理论上推得其理论塔板高度和溶质扩散系数成正比,对扩散系数小的生物大分子而言,其柱效就要比HPLC高得多;HPCE所需样品为nl级,低可达270 fl,流动相用量也只需几毫升,而HPLC所需样品为μl级,流动相则需几百毫升乃至更多;但HPCE仅能实现微量制备,而HPLC可作常量制备.
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非水毛细管电泳技术在药物分析中的应用
非水毛细管电泳法(Nonaqueous capillary electrophoresis,NACE)是一种新型高效、快速的分离分析方法,首次报道于1984年.它是毛细管电泳(CE)的一个分支,是指以有机溶剂完全替代水作电解液的情况.
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毛细管电泳及其在法医DNA分析中的应用
毛细管电泳(Capillary electrophoresis, CE),又称高效毛细管电泳(High performance capillary electrophoresis, HPCE),是泛指在极细的毛细管(直径约20~100μm)内实现的一大类电泳技术.其自70年代末80年代初创立以来[1~3],已成为近20年发展快的分离分析技术之一.它综合了高效液相色谱和传统平板凝胶电泳二者的优点,具有快速、高效、高分辨率、重复性好、易于自动化等特点,已广泛应用于生命科学研究的各领域,尤其是对生物大分子核酸的研究,并取得了迅速进展.