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Bactec 9120血培养仪用于活菌计数的初步研究
临床微生物检验和抗生素药效动力学研究过程中,经常会用到活菌计数技术,经典的浇注MH琼脂过夜培养后计数菌落的方法,耗时、费力、且难以标准化[1].Bactec 9120血培养系统(简称Bactec 9120)系利用荧光增强的原理快速检测血液及无菌体液标本中细菌的生长,该系统配套使用的培养瓶内有微生物生长的各种营养物质,而微生物在生长过程中的代谢产物之一CO2会激活瓶内底部荧光感应物质而发出荧光,荧光信号变化与CO2变化成正比,该荧光信号的变化经一组运算公式的运算,得出荧光信号变化的各种参数,从而判断培养瓶内是否有微生物生长.Bactec 9120设定瓶位探测器检测与计算时间间隔为每10min一次,可以准确提供标本阳性报警时间,并保存在联机计算机内供实验室人员查询[2].过去,国内外学者只关心报警时间长短对标本诊断周期的影响,本研究旨在探讨报警时间长短与初始接种菌量的关系及其临床活菌计数中的潜在应用价值.
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胃液固有荧光光谱在胃癌诊断中的应用进展
针对胃癌诊断方法的探索,已历经数十年的研究[1]. 我课题组前期研究[2,3]表明,胃癌患者的胃液荧光光谱荧光强度较胃良性病变患者显著增强,并建立了通过胃液荧光光谱区别胃癌与胃良性病变的方法. 针对荧光增强现象机制的研究,先后从胃液中分离提取并鉴定出3个有价值且可用于胃癌及早期胃癌诊断和筛查的候选肿瘤标志物,即3种芳香族氨基酸(aromatic amino acids,AAAs)[4,5]. 本文对胃液荧光光谱及胃液荧光物质在胃癌诊断和筛查中的应用进展作一综述,以期对提高我国早期胃癌的诊治水平有所帮助,对广大临床和科研工作者有所启发.
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双眼Stargardt病一例
患儿何某某,男,10岁.因双眼视力下降2年伴眼前黑影半年就诊,曾在外院诊为"近视散光,弱视",行穿针精细训练治疗弱视1年,视力无提高,于2005年7月到我院就诊.否认家族中有同类病史,父母非近亲婚配.眼部检查:视力右眼0.1,J7,左眼0.1,J7,.双眼眼前段无异常,屈光间质清晰,眼底镜下见,双侧视盘边界清,动静脉比例正常,黄斑部视网膜变薄,色素率乱,黄斑中心凹光反射消失,可见灰黄色小点.1%阿托品眼膏散瞳3天,每天2次,检影验光,右眼-0.50DS→0.1,左眼+0.50DS→0.2.眼底荧光照影:A期见黄斑区4PD大细点样圆形透见荧光,V期黄斑区透见荧光增强,随循环时间延长黄斑区透见荧光较前减弱(见图).双眼VEP检查:LP100在正常范围,AP100偏低.诊断:双眼Stargardt病.
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β-环糊精及其衍生物对金丝桃素增溶及荧光增强作用
目的 研究β-环糊精(β-CD)及其衍生物对金丝桃素的增溶作用及荧光增强作用.方法 通过测定金丝桃素在不同浓度CD衍生物中的溶解度,绘制相溶解度曲线及荧光谱图.结果 随着CD浓度的增加金丝桃素的溶解度也增加,荧光强度也随着增强,金丝桃素与交联环糊精包结比为1∶2.结论 β-CD及其衍生物对金丝桃素均有增溶作用,其中交联环糊精的增溶效果为显著,且对金丝桃素具有较强的荧光增强作用.
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盐酸黄酮哌酯在碱溶液中的荧光增强反应及其分析应用
研究了盐酸黄酮哌酯(FX)在强碱溶液中的荧光增强反应,探讨反应机制,建立了药物样品中FX的荧光分析新方法.FX无内源荧光,其强碱水溶液可缓慢产生荧光,加热促进荧光增强反应.FX分解产物的三维荧光图谱中呈现2个荧光峰,激发波长(λex)分别位于223 nm和302 nm,发射波长(λex)均为410 nm.以硫酸奎宁为参比,测得分解产物的荧光量子产率为0.50.FX分解产物的结构表征和光谱解析表明,FX强碱溶液在加热过程中首先发生酯键水解反应,生成3-甲基黄酮-8-羧酸,然后发生γ-吡喃酮环裂解反应,生成α,β-不饱和酮.该产物包含邻羟基苯甲酸结构,在碱性条件下形成分子内氢键,共轭程度增加,刚性增强,因而产生荧光.基于这一荧光增强反应,建立了测定FX的荧光分析方法.在0.0203 ~0.487 μg·mL-1内,荧光强度与浓度之间的回归方程为IF=23.9+5 357.3 c,r=0.9997 (n=8),检出限D=1.1 ng·mL-1.本法用于盐酸黄酮哌酯片中FX的测定,加标回收率为100.2%,测定结果与紫外分光光度法一致,表明方法可靠.
关键词: 盐酸黄酮哌酯 3-甲基黄酮-8-羧酸 荧光增强 三维荧光 荧光分析法 -
水中小诺霉素的碲化镉量子点增强荧光测定法
目的 建立水中小诺霉素的碲化镉(CdTe)量子点荧光增强测定法.方法 向1 ml小诺霉素溶液中加入1.0 ml的CdTe量子点溶液,用PBS缓冲溶液(pH 6.5)定容到5ml,混合均匀后在室温下反应30 min,测定其荧光强度(F).结果 当小诺霉素在0.28~4.17 mg/L线性范围内,所得线性方程为F/Fo=0.074 6c+0.9844,r=0.9954,呈良好的线性关系.该方法的检出限为0.27 mg/L,平均回收率为102.0%~106.3%,RSD为1.1%4.2%.结论 该方法具有快速简便,灵敏度和精密度较高的优点,适用于水样中小诺霉素的检测.
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β-环糊精及其衍生物对姜黄素的增溶和荧光增强作用
研究了β-CD、HP-β-CD及取代位置不同的环糊精硫酸酯(2-β-CDS、6-β-CDS和随机取代的β-CDS)对姜黄素的增溶和荧光增强作用.采用荧光光谱滴定法测定了姜黄素在pH 2缓冲液中与上述5种环糊精主体分子形成超分子包合物的稳定常数(K).结果表明,HP-β-CD对姜黄素的增溶作用显著.β-CD-与姜黄素形成1:1包合物,而HP-β-CD及2-β-CDS、6-β-CDS和β-CDs与姜黄素能形成1:1和2:1包合物,且包合常数远大于β-CD.其中HP-β-CD与β-CDS的包合作用强,当两者的浓度为0.03mol/L时,荧光分别增强17和19倍.
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金属离子对牛蒡子苷与牛血清白蛋白结合的影响
目的 研究金属离子对牛蒡子苷与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)结合的影响.方法 采用同步荧光光谱法,在拟生理pH条件下考察不同的金属离子(Cu2+、Mg2+、Zn2+)对牛蒡子苷与BSA结合作用的影响.结果 在金属离子(Cu2+、Mg2+、Zn2+)存在下,随着体系中牛蒡子苷浓度增大,BSA荧光增强,两者间的结合力仍以静电作用力为主.金属离子存在时,牛蒡子苷与BSA的结合常数在25℃时,分别为7.899×104(无金属离子)、8.557×104(Cu2+)、6.724×104(Zn2+)、7.062×104(Mg2+);在37℃时,结合常数分别为5.962×104(无金属离子)、6.096×104(Cu2+)、5.915×104 (Zn2+)、5.612×104(Mg2+).结论 金属离子的存在会影响牛蒡子苷与牛血清白蛋白的结合.Cu2+存在下,牛蒡子苷与BSA之间的结合常数增大;锌离子和镁离子存在下,两者的结合常数减小.
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遗传性视锥细胞营养不良三例
例1 女,19岁,自幼白天视力差,羞明.查体:一般情况正常.眼科检查:右眼视力0.04,左眼0.05,均不能戴镜矫正.双眼前节及眼底均无异常,全色盲.视网膜电流图(ERG)检查:明视ERGb波降低,暗视ERG正常,EOG正常.视野呈环形暗区.眼底荧光素血管造影示背景荧光增强.诊断为视锥细胞营养不良.父母非近亲婚配,母孕期无异常情况.家系调查:该家系3代16人,先证者之父、之兄及一侄女,也为患者.
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荧光增强法测定美洛昔康新体系的研究
目的:建立一种测定美洛昔康的荧光分析新方法.方法:10-烯丙基-3-氯磺酸基-吖啶酮(ACACR)为强荧光物质,激发波长为258 nm,发射波长为420 nm,美洛昔康的加入对其荧光强度有显著的增强效应.结果:荧光增强值△F与美洛昔康的浓度在1.0×10-6~2.0×10-3g·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9993,检出限为9.54×10-7g·L-1.回收率为96%~103%.结论:本法用于测定美洛昔康片剂的含量,灵敏度高,检测范围宽,结果令人满意.