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浅谈生物化学检验技术在医学领域中的运用
生物化学是研究生物体化学组成、结构及生命中各种化学变化的一门生物学分支学科[1].内容主要包含了从蛋白质、核酸、酶、维生素、激素到无机离子等一系列常见的化学成分以及物质组成、物质代谢、结构与功能和繁殖与遗传等研究内容[2].其目的是阐明疾病发生过程中的生物化学变化为临床上帮助医师对患者治疗提供依据.而生物化学技术是对组成人体的生物活性物质及其代谢产物,如蛋白质(氨基酸)、核酸(核苷酸)酶、维生素、糖类、脂类物质等进行分离提取、含量测定、活性鉴定、生化分析、制备与改造的技术.生物化学技术的发展在推动生物科学理论和应用方面取得了惊人的进展.掌握生物化学技术不仅是生物化学专业人员从事研究、生产和检验工作必不可少的手段,也是其他相关学科实际生产和检验的重要工具.
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传统凝胶电泳与Experion全自动电泳系统的比较
凝胶电泳作为一种技术出现,已有近百年的历史,但真正被视为一种在生命科学中有重要意义的技术,是由1937年A.Tiselius首先提出.传统凝胶电泳由于存在操作步骤烦琐和重复性不好的缺点,经历了向预制胶、高通量电泳槽的发展过程,但并未从根本上改变传统凝胶电泳的不足.人们认识到只有采用完全全新的电泳技术才有可能克服其不足.
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毛细管电泳技术在中医药研究中的应用及展望
毛细管电泳技术(capillary electrophoresis,CE)是80年代后期在全球范围内迅速崛起的一种分离分析技术,具有高效、快速、经济的特点,是电色谱法的一个重要的分支[1].笔者查阅了近30篇关于毛细管电泳的文献,现将其研究进展作一综述.1毛细管电泳应用领域及优势毛细管电泳技术是以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种液相分离技术,广泛应用于各类化合物的分析.但与传统电泳技术一样,主要应用领域是生命科学,分离对象为氨基酸、多肽、蛋白质、核酸等生物大分子.
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全国毛细管电泳技术在检验医学中的应用专题研讨会议暨培训班征文通知
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微流控芯片电泳技术检测肿瘤患者血浆中p16基因甲基化的应用
p16基因甲基化是癌症诊断的标志物之一.目前检测p16基因甲基化的甲基化特异性聚合酶链反应法(MSP)[1]灵敏度有限,对血浆中脱落肿瘤细胞少的标本易报告为假阴性.而微流控芯片电泳技术具有高灵敏度、成本低、分析速度快等特点[2].本研究用微流控芯片电泳技术检测肿瘤患者血浆中p16基因异常甲基化,并探讨其临床应用价值.
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电泳技术的现状和发展
早期的电泳技术是由瑞典Uppsala大学物理化学系Svedberg教授提出了荷电的胶体颗粒在电场中移动的现象称其为电泳(electrophoresis).于1937年,由Arne Tiselius教授--诺贝尔奖金获得者,利用此电泳现象,发明了早期的界面电泳(moving boundary),用于蛋白质分离的研究,开创了电泳技术的新纪元.此后,各种电泳技术及仪器相继问世,先进的电泳仪和电泳技术的不断发展,使它在生物化学实验技术中占重要地位,按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:原则上按电泳的原理来分,即移动界面电泳(moving boundary electrophoresis)、区带电泳(zone electrophoresis)和稳态电泳(steady state electrophoresis)或称置换(排代)电泳(displacement electrophoresis).在自由移动界面电泳,是带电分子的移动速率通过观察界面的移动来测定,该方法已成为历史.代之以采用支持介质的区带电泳.
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电泳技术的临床应用
电泳是一种带电分子在电场中向着电性相反的电极移动的现象.利用电泳现象进行物质分离的技术,称电泳技术.早在1809年俄国物理学家Rcoss就进行了世界上第一次电泳实验.1937年,Tiselius教授利用界面电泳将血清蛋白成功地分离成5种成分,开创了电泳技术的新纪元.20世纪60~70年代,当滤纸、聚丙烯酰胺凝胶等介质相继引入电泳以来,电泳技术得以迅速发展.
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电泳技术在临床检验中的应用
自从1946年瑞典物理化学家Tiselius教授研制的第一台商品化移界电泳系统问世以来,在近半个多世纪的时间里,电泳技术发展极其迅速.
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全国毛细管电泳技术在检验医学中的应用专题研讨会暨培训班通知
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热休克蛋白70与IL-2对小鼠肝癌移植模型的治疗比较
目的:比较分析肿瘤热休克蛋白70(HSP70)与IL-2对小鼠肝癌移植模型的治疗作用,评价HSP70的疗效,为应用HSP70治疗人类恶性肿瘤提供有重要参考价值的实验依据.方法:细胞培养、蛋白质纯化技术、电泳技术、Western-blot法、动物实验等.结果:IL-2及HSP70对小鼠肝癌移植模型均有治疗作用,其中IL-2 10万U、HSP70 10μg效果佳,IL-2 5万U及HSP70 5μg有部分治疗作用,10万U的IL-2与5μgHSP70治疗效果相当,HSP70 10μg治疗后有40%小鼠移植肿瘤全部消退,长期生存790 d,与对照组及其他各组相比,差异具有显著性(P<0.01,P<0.05).结论:HSP70具有良好的抗肿瘤免疫活性,其疗效明显优于IL-2,本研究对于应用HSP70治疗人类的恶性肿瘤有十分重要的借鉴意义.
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慢性乙型肝炎治疗的过去、现在和未来
Blumberg博士在1963年通过蛋白电泳技术,在来源于澳大利亚的一份血样中发现了一种新型的抗原,并命名为澳大利亚抗原(Australia antigen, AuAg),后来证实这种AuAg与乙型肝炎(hepatitis B,HB)相关,事实上属于乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的表面抗原,从而开启了乙型肝炎研究的新时代[1]。也正是因为这一重要发现,Blumberg博士获得了诺贝尔医学奖。在此后的50多年里,乙型肝炎研究领域出现了许多重要发现和进展,包括一系列的诊断技术的应用。上个世纪80年代出现的杂交瘤技术和分子克隆技术,促进了乙型肝炎病原学研究的不断进步。酵母细胞表达的重组乙肝疫苗在HBV感染高流行区的预防控制方面发挥了重要作用。同时,临床医师对乙型肝炎患者自然史的研究,也成为医学界临床疾病研究的一个典范[2]。
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竞争性逆转录-聚合酶链反应和毛细管电泳定量检测慢性髓系白血病患者bcr/abl mRNA
bcr/abl融合基因绝大部分融合方式为b3a2或b2a2型.我们根据竞争性逆转录-酶合酶链反应(RT-PCR)的原理,设计和构建了该基因的竞争性参照物,并利用毛细管电泳技术对竞争性RT-PCR的产物进行分离分析,建立了对该基因精确的定量分析方法.
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血清蛋白醋纤膜电泳实验课的体会
血清蛋白醋纤膜电泳实验以下简称电泳实验.因为它集技能性和验证性为一体.使学生通过该实验既培养了掌握电泳技术基本技能,又对血清中几种蛋白成分、含量、携带电荷情况及等电点、电泳等概念加深了认识和理解.尽管该实验耗时长,需3个~4个学时完成,成功率低,影响因素太多,但我们还是开设这项实验.我们根据多年的实践分析和总结对如何上好这一实验课有以下几点体会.
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毛细管电泳技术对多发性骨髓瘤的免疫学分型分析
电泳法分析血清或尿液中蛋白质,辅助临床诊断的重要性已被广泛认可.随着电泳技术和仪器的发展,毛细管电泳技术(capillary electrophoresis,CE)逐渐受到重视.CE技术是一类以毛细管为分离通道、以高压电场为驱动力的分离分析技术,近年来该技术在科研和临床领域得到广泛应用[1,2].
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检验医学与循证检验医学
随着科学技术的发展,基因表达调控技术、各种电泳技术、细胞和器官培养技术,DNA合成技术等逐渐应用到临床的诊断方面,临床医学的发展是与实验医学的飞速进步密不可分,检验医学在疾病预防、病程观察和治疗评估中的作用愈来愈重要,科学的检验结果有利于临床医生的救治工作.但由于检验医学逐渐发展成一个系统的专门的科学,在医院中是个独立的科室,接触患者的机会越来越少,又因为临床的基本知识已经有了很大的变动,所以,出具一份真实可靠的实验报告需要检验医师加强临床知识的学习,对于特殊结果的报告要力求熟悉患者的病情,积极与临床医生沟通.
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中药鉴定中电泳技术的应用
传统的中药鉴定主要依靠形态分类学和解剖学特征从药材来源、性状、显微及理化鉴别等方面进行药材品种的鉴别.然而有些药材经过加工炮制后,已经失去其原本性状而难辨真伪尤其是一些贵重的动物药材,传统方法很难加以很好的鉴别,粉碎后的药材就更难以区分.
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毛细管电泳技术在微生物学研究中的应用
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是当前发展快的分析技术之一.近年来,CE已被广泛应用于核酸、蛋白质、多肽、药物等大分子物质的分析,核酸序列测定等生命科学的各个领域.目前,在微生物学领域,CE除了在微生物基因测序等方面得到广泛应用外,在微生物学检测方面,CE也得到了广泛的应用.本文对近年来CE在细菌、真菌、病毒等微生物颗粒及基因检测方面的应用加以综述.
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免疫固定电泳技术对多发性骨髓瘤的诊断价值
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是以浆细胞异常增生为特征的一种恶性肿瘤性疾病.瘤细胞分泌大量单克隆免疫球蛋白(M蛋白)于血中,同时正常多克隆免疫球蛋白合成受到抑制使机体免疫力减低,从而引起多组织器官功能障碍.多发性骨髓瘤的临床表现多种多样,骨髓细胞学、X线、免疫球蛋白和血清蛋白的定量检测等是诊断MM的重要方法,但这些方法特异性欠佳,可能对部分无症状或临床症状不典型的患者造成漏诊或误诊.而免疫固定电泳的应用则使MM的诊断及分型更趋完善,可及时纠正临床的误诊和漏诊.我们对91例MM患者进行免疫球蛋白定量、轻链定量,再进行血清蛋白电泳和血清免疫固定电泳检测,现将结果报告如下.
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免疫固定电泳在多发性骨髓瘤单克隆球蛋白检测中的应用
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)以单克隆浆细胞进行性增生并产生大量单克隆免疫球蛋白(M蛋白)为特征.以往临床上测定M蛋白一般采用蛋白电泳法,但需要M蛋白定量大于2g才有阳性结果.免疫固定电泳技术可以检测小于2g的M蛋白,敏感性较高.本研究选择免疫固定电泳法检测多发性骨髓瘤患者M蛋白,并与蛋白电泳法作了比较,现报道如下.
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电泳技术在药物分析中的应用
本文概述了电泳技术产生的背景以及发展历程,简要介绍了几种常用的电泳技术的原理、特点以及在药物分析中的应用,尤其是高效毛细管电泳法在许多科学试验中被广泛应用并取得了卓越的成效.