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树突状细胞抗病毒抗肿瘤临床应用探讨
树突状细胞(DC)是功能强大的抗原呈递细胞,它具有激活初始型T细胞和诱导初级免疫应答的特殊能力.近年来有关DC体外分离、培养和纯化技术、合理选择细胞因子激活;选择病毒或肿瘤抗原导入DC诱发细胞免疫等技术均有很大进展,将为临床上抗病毒、抗肿瘤的治疗开辟新的途径.本文综述了近几年有关DC在此领域方面的研究进展.
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清华大学材料系粉体工程研究室研究的《工业矿物原料微细改性及高纯化技术》项目通过部级鉴定
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芫花酯甲的快速TLC纯化技术与鉴定
目的:制备高纯度、低成本的芫花酯甲对照品.方法:采用硅胶柱-制备TLC制备芫花酯甲单体,通过HPLC分析纯度,NMR确定结构.结果:硅胶柱-制备TLC比制备液相成本低,未发现可见杂质斑点,所得单体纯度较好.结论:该方法解决了本品在分离纯化方面高消耗低产出的难题,为芫花萜类化合物的研究与开发提供参考.
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细胞免疫功能诊断的现状和趋势
近年来,随着蛋白质多肽纯化技术的日臻完善,单克隆抗体技术日趋完美,分子生物学技术的迅速发展及其与免疫学的结合,推动了细胞免疫功能和细胞因子研究的进程,大量新的细胞表面标志和细胞因子不断被发现,并向分子、受体、基因水平拓展.目前,细胞免疫和细胞因子的检测作为辅助诊断的方法,已被用于自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤患者治疗前后细胞免疫功能的检测,骨髓移植和器官移植过程中的免疫功能监护,感染性疾病和变态反应性疾病的免疫功能监测,以及揭示一些疾病的发病机理等方面,因而促使这些疾病的研究和防治提高到一个新的阶段[1,2].
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热休克蛋白70与IL-2对小鼠肝癌移植模型的治疗比较
目的:比较分析肿瘤热休克蛋白70(HSP70)与IL-2对小鼠肝癌移植模型的治疗作用,评价HSP70的疗效,为应用HSP70治疗人类恶性肿瘤提供有重要参考价值的实验依据.方法:细胞培养、蛋白质纯化技术、电泳技术、Western-blot法、动物实验等.结果:IL-2及HSP70对小鼠肝癌移植模型均有治疗作用,其中IL-2 10万U、HSP70 10μg效果佳,IL-2 5万U及HSP70 5μg有部分治疗作用,10万U的IL-2与5μgHSP70治疗效果相当,HSP70 10μg治疗后有40%小鼠移植肿瘤全部消退,长期生存790 d,与对照组及其他各组相比,差异具有显著性(P<0.01,P<0.05).结论:HSP70具有良好的抗肿瘤免疫活性,其疗效明显优于IL-2,本研究对于应用HSP70治疗人类的恶性肿瘤有十分重要的借鉴意义.
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人胰岛分离和纯化技术要点以及移植后主要问题
胰岛移植是胰岛素依赖型糖尿病的一种有效的治疗方法[1],分离胰岛的数量和质量决定着胰岛移植的成败.虽然胰岛的分离和纯化是在Ricordi等[2]所建立的胰岛分离方法的基础上发展起来的,并被认为是一种比较成熟的技术,但是目前真能很好掌握这项技术的胰岛移植中心为数不多,以至于埃德蒙顿胰岛移植方案并不能在大多数胰岛移植中心得到完美的重复[3-4].因此,进一步完善胰岛分离和纯化技术是每个胰岛中心需要不断探索的课题.
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神经科神经系统变性疾病的蛋白质病理学
近年来,随着蛋白质分离、纯化技术,免疫组织化学技术的进步,蛋白质病理学已成为研究神经变性疾病的重要领域.我们主要概述与神经变性疾病的病理诊断和发病机制有关的三种蛋白质(tau蛋白、突触共核蛋白、泛素蛋白).
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枸杞子多肽的MALDI-TOF-MS定性分析
多肽类化合物广泛存在于自然界中,应用这些活性肽可作为药物、疫苗、导向药物、诊断试剂、酶抑制剂及药物先导化合物等[1,2],随着分离、纯化技术和结构鉴定等研究方向的飞速发展,越来越多的具有某种生物活性及药用价值的天然多肽类化合物被分离鉴定出来.
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大叶白麻化学成分研究
大叶白麻又名大花罗布麻,为夹竹桃科白麻属大叶白麻 Pocyrtum hendersonii(Hook.f.)Woodson的干燥叶,主要分布于我国的青海、新疆和甘肃等省区.近年来,大叶白麻已经作为罗布麻的代用品入药.对罗布麻中化学成分的研究已经很多,而对大叶白麻中化学成分的研究相对较少,因此,本实验对后者的化学成分进行研究,通过多种色谱分离与纯化技术,从大叶白麻中得到了12个化合物.
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腺病毒-BMP7载体的包装与纯化
腺病毒(Adeno)基因组为线状双链DNA,长度大约36 kb,适合于容纳较大片段外源基因.与逆转录病毒载体相比,腺病毒载体能有效地将外源基因转染到各种靶细胞中.其宿主范围广,感染性强,尤其能感染分化后的非分裂期细胞.在Adeno生活周期中,其基因不整合到宿主细胞DNA中,故无插入突变激活癌基因的危险,外源基因能游离地表达.商品化的腺病毒载体一般剔除了其基因组的E1区,经体外重组后,产生可复制缺陷型腺病毒.再经过293细胞的包装过程,得到具有感染能力的腺病毒用以转染靶细胞.2002年,我室构建了腺病毒-BMP7(简称AV-BMP7)表达载体,用于组织工程化骨的修复实验,取得实效.现将该病毒包装、纯化技术分述如下.
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AC133抗原研究进展
造血干祖细胞的高效选择对干祖细胞移植的基础和临床研究,以及基因治疗具有重要意义.过去10年,由于CD34 表面抗原普遍用于造血干祖细胞的筛选,进而产生了更精确的细胞纯化技术和新颖的临床血液治疗措施.近几年的研究表明,CD34表达只是造血干祖细胞活化状态的标志,在CD34-细胞中尚存在较CD34+细胞更为原始的造血干细胞.因而,迫切需要寻找更为早期的造血干祖细胞的新标志.AC133,1个新的早期干祖细胞表面抗原有可能担当这一角色.本文就AC133的分子结构、表达、功能及其与CD34抗原和凸素(prominin)的关系等研究进展作一综述.
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结核快速诊断免疫色谱卡评价活动性肺结核的作用
近年来,结核病在世界范围内再流行已引起人们日益关注,而及时准确诊断、早期抗痨化疗对此病预后十分重要,传统应用痰抗酸杆菌检测、X线影像和临床诊断往往敏感性或特异性差,不能满足临床需要.近年随着对结核分支杆菌特异性抗原的不断发现及纯化技术的提高,通过测定血清中结核抗体来诊断结核病已发挥较大作用.本文采用层析免疫色谱法检测系统,观察其对评判活动性肺结核作用.
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胰岛移植进展
近年来,随着胰岛分离、纯化技术的不断改进以及新型免疫抑制剂的问世和应用,临床同种胰岛移植已取得令人瞩目的进展[1-2],有可能在今后数年内得以广泛开展.本文对这些方面的进展作一综述.
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不同纯化技术对麦冬皂苷水提液物理化学性质的影响
目的::探讨不同纯化技术对麦冬总皂苷水提液物理化学性质的影响。方法:采用正交试验优选麦冬总皂苷的水提工艺;采用大孔树脂吸附及膜分离等不同技术对麦冬皂苷水提液进行纯化,并测定其电导率、pH、黏度、浊度等理化参数及蛋白质、鞣质、多糖、总皂苷等物质的含量。结果:麦冬总皂苷的佳水提工艺条件为:每次加6倍量水,煎煮3次,每次90 min;麦冬总皂苷不同纯化液的电导率、pH、黏度无显著影响,但总皂苷及3种大分子物质含量有显著差异。结论:大分子物质的含量可作为考察麦冬总皂苷水提液纯化工艺的参考指标;膜分离技术比大孔树脂吸附更适用于麦冬总皂苷水提液的分离纯化。
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基因工程HBsAg纯化技术的研究进展
乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)是乙肝疫苗(hepatitis B vaccine)的重要组成部分,注射乙肝疫苗是目前预防乙型肝炎感染有效的方法.血源性乙肝疫苗因成本、来源和潜在其他病毒的感染已被淘汰,取而代之的是基因工程技术生产的第2代重组乙肝疫苗.主要介绍了国内外重组HBsAg在样品净化捕获、中度纯化和精纯3个阶段的主流纯化技术.
关键词: 基因工程 乙型肝炎病毒表面抗原 纯化技术 -
一步酶法制备药物中间体7-氨基头孢烷酸
目的 主要介绍一步酶法制备7-ACA较两步酶法的优势,重点探讨一步酶法制备7-ACA的酶解条件、纯化技术、结晶工艺.方法 7-ACA一步酶法和两步酶法的优势对比分析,酶的选择、一步酶法酶解反应条件、裂解液纯化技术、裂解液结晶技术的筛选.结果 确定了酶解条件一反应温度20~25℃、PH8.5、时间60min,烷烃类萃取纯化条件、结晶条件.结论 该方法制备的7-ACA质量好,收率高.
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临床胰岛移植研究进展
伴随现代医学技术的迅猛发展,全球糖尿病的发病率和死亡率在逐年升高。20世纪60年代由于临床胰腺移植技术的发展,外科手术成为治疗糖尿病的一种新方法。在随后的几十年里,胰岛分离及移植部位的研究取得重大突破。胰岛移植减少了外源性胰岛素的使用、降低了低血糖的发病率及手术的死亡率。然而,胰岛移植仍然不能达到胰腺移植的效果。直到Edmonton方案的出现,该方案证实胰岛移植可以替代胰腺移植。由此胰岛移植成为全球的研究热点,胰岛细胞纯化技术及新型免疫调节剂也得到不断发展。但是,胰岛移植仍然面临很多严峻挑战,例如:胰岛的缺乏、移植器官的缺乏、免疫抑制剂对胰岛的损害等。本文就胰岛移植的历史及新研究进展作一综述。
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电膜微萃取在样品前处理中的研究进展
随着待测样品种类的增多,基质越来越复杂,而样品前处理在整个样品分析过程中又是不可缺少非常重要的环节.传统方法如液液萃取、固相萃取,由于萃取时间长,有机溶剂用量大,实验设备昂贵等不足,在样品分析领域具有一定的局限性.近年来,一系列的前处理方法不断地被开发,成为样品分析过程的新选择.其中,电膜微萃取方法由于具有萃取时间短,有机溶剂用量少,高富集纯化等优势,应用日益广泛;它是在液相微萃取的基础上发展起来的,主要以电场力为驱动力,带电离子在电场力的作用下穿过支持液膜发生快速的定向移动,萃取时间大大的缩短.本文主要介绍了近几年电膜微萃取的发展模式、应用范围,且对其优缺点做了详细的概述.
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多基原秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的纯化技术探讨
目的:对于多基原秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的纯化技术进行探究.方法:采取D101C大孔树脂作为分离以及纯化载体,指标为秦皮甲素和秦皮苷的含量,构建起有关的工艺参数并进行评价.结果:依据构建起的工艺,将三种基原的秦皮药材为材料,以明确好的工艺展开相应处理,提取物中秦皮甲素和秦皮苷的转移率超过80%,同时质量分数提升五倍.结论:在本研究中的工艺,能够满足多种基原的秦皮中秦皮甲素以及秦皮苷的纯化.