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COULTER EPICS XL型流式细胞仪激光电源特殊故障维修分析
流式细胞仪是 80年代迅速发展起来的快速定量、定性分析细胞的高新技术的仪器。它集中了计算机技术,流体力学,激光技术,光学,电子学和单克隆抗体技术等各项先进科技,对单个细胞行多参数分析。现已广泛应用于临床和科研。 故障现象常规开机系统软件检测报: laser start error(激光启动错误 )。流式细胞仪无激光输出。
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流式细胞技术在毒理学研究中的应用
流式细胞仪(FCM)是在上世纪70年代发展起来的一种测量细胞荧光染色强度,定量测定细胞和亚细胞成分(微粒)的细胞分析仪.它也是在单细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质进行快速测量并可分选高纯度细胞亚群的一项新技术[1].近年来,随着细胞和分子生物学技术尤其是单克隆抗体技术的发展和分子探针的开发,流式细胞技术日见成熟,它以快速、灵活、灵敏和定量的特点,在国内外被广泛应用于医学基础研究和临床实践多方面.目前,流式细胞技术在毒理学多个分支研究领域已得到广泛应用,在研究外源化合物的细胞毒性和致癌分子机理方面显现出重要价值.笔者就目前FCM技术在免疫毒理、生殖和遗传毒理、发育毒理、环境以及神经毒理学方面的应用作一综述.
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囊虫病免疫诊断研究进展
囊虫病是一种呈世界性分布、危害严重的寄生虫病之一.在囊虫病,尤其是脑囊虫病的诊断中,免疫学检查起着越来越重要的作用,弥补了病原学诊断、物理诊断、影像学诊断的不足.免疫学检查在囊虫病的流行病学调查、治疗效果的评价等方面也起着明显的作用,因此近年来取得较快进展.单克隆抗体技术、DNA重组技术和抗原分离纯化技术等新技术的出现,以及一些新的免疫学方法的建立,对囊虫病的免疫诊断起到了极大的推动作用.
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流式细胞免疫分型在B细胞淋巴瘤诊断中的应用
随着流式细胞术及单克隆抗体技术的发展,流式细胞术以其快捷、敏感并能同时对多个参数进行定量分析等优点被广泛应用于淋巴造血系统疾病诊断及鉴别诊断中.目前在我国部分医院,该技术也被常规应用于白血病的诊断与鉴别诊断,但在淋巴组织增生性疾病诊断及鉴别诊断中的应用还没有得到应有的重视.我院自2000年初开展了淋巴组织增生性疾病流式细胞术免疫分型,积累了一定的经验,下面结合我院4例淋巴结活检病理及流式细胞免疫分型资料,探讨流式细胞术在B细胞淋巴瘤诊断中的应用价值.
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正确认识流式细胞术在血液肿瘤诊断中的价值与作用
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是在近代单克隆抗体技术、激光技术、流体力学和计算机技术发展的基础上,结合细胞生物学、分子免疫学等而发展起来的一种快速、高通量、可同时检测单个细胞多种参数的技术,在血液肿瘤的诊断和预后判断、微小残留病( mini-cal residual disease ,MRD)监测、造血干细胞计数、细胞内成分测定等方面发挥着重要作用。特别是近几年来,FCM技术逐渐向大中型医疗机构推进和普及,按照WHO 2008年出版的新的血液肿瘤的分类方法,一些血液肿瘤的终确诊必须要明确其病变细胞的表型特征和分化、发育阶段,这就要求从事该项工作的人员对FCM技术的内涵有深入的认识,特别要熟悉在血液肿瘤方面的应用和注意事项,正确、客观理解FCM技术在血液肿瘤诊断中的价值和作用。
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细胞免疫功能诊断的现状和趋势
近年来,随着蛋白质多肽纯化技术的日臻完善,单克隆抗体技术日趋完美,分子生物学技术的迅速发展及其与免疫学的结合,推动了细胞免疫功能和细胞因子研究的进程,大量新的细胞表面标志和细胞因子不断被发现,并向分子、受体、基因水平拓展.目前,细胞免疫和细胞因子的检测作为辅助诊断的方法,已被用于自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤患者治疗前后细胞免疫功能的检测,骨髓移植和器官移植过程中的免疫功能监护,感染性疾病和变态反应性疾病的免疫功能监测,以及揭示一些疾病的发病机理等方面,因而促使这些疾病的研究和防治提高到一个新的阶段[1,2].
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应用单克隆抗体技术研究淋病奈瑟菌外膜蛋白
淋病奈瑟菌细胞的外膜蛋白I(outer membrane protein I,PI)是淋病奈瑟菌抗原的重要组成部分,也是其血清学分类的重要物质基础,PI可分为低分子量的PI-A和较高分子量的PI-B两类. 本研究应用单克隆抗体分型技术对2000年1月-2001 年10月门诊分离的淋病奈瑟菌进行了外膜蛋白抗原性测定.
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对肿瘤标志物的再认识
肿瘤是严重威胁人类健康的高发病率和高死亡率性疾病,大量研究和防治资料证实,早期诊断和早期治疗是防治肿瘤与降低死亡率的有效办法.因此,长期以来寻找能早期诊断的肿瘤标志物(TM)成为了人们关注的焦点.从1846年Bence-Jones发现本周蛋白作为多发性骨髓瘤的实验室诊断依据以来,TM的研究已有100多年的历史,但直到1963年Abelev发现甲胎蛋白(AFP),1965年Gold和Freeman发现癌胚抗原(CEA)以后,TM测定才在临床广泛应用.20世纪70年代,随着单克隆抗体技术在TM研究中掀起的高潮的到来,人类发现的特异性较强,灵敏度较高,有一定临床价值的TM已达100多种.但经过10多年的临床实践发现,目前使用的TM并没有想象的那么理想,它能否早期诊断?能否对人群进行普查?其临床意义有多大?TM的前途如何?引起了医学界的争议[1-3] .
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IgA类和IgM类单克隆抗体血型定型试剂的比较研究
自从单克隆抗体技术建立以来,发达国家的血型定型试剂大多用抗血型单克隆抗体取代传统的标准血清.我国经过近几年的努力,也基本普及使用单克隆抗体血型定型试剂.
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经输血传播疾病的实验室检测及其进展
目前,已知的输血传播疾病有十几种,其中主要有乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病(AIDS)、梅毒、人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HTLV-Ⅰ/Ⅱ)感染和巨细胞病毒感染(CMV)等。目前,大多数国家已规定必须对献血者及血液筛查这6种病原体。现就目前这几种主要输血传播疾病的实验室检测及其新进展情况作一概述。 一、血清免疫学检测 1.乙型肝炎病毒(HBV)感染检测[1]: 对献血者HBV感染的检测,大多数国家通常只检测HBV表面抗原(HBsAg)。检测HBsAg方法有间接免疫凝集试验,如间接血凝试验(IHO)、乳胶凝集试验等,敏感性为10~100 μg/L,不适合对献血者的筛查。随着敏感性可达0.1~1.0 μg/L的酶联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫试验(RIA)的建立,尤其是ELISA具备试剂稳定、无危险无污染、可自动化等优点,现已经成为各国规定的用于献血者检测的标准方法。由于单克隆抗体技术的发明、基因工程表达抗原、人工合成多肽和新的标记技术的应用,以及自动化检测设备的发展,ELISA检测的敏感性和特异性得到极大提高。
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脐血免疫功能研究进展
免疫系统是机体重要的防御系统,免疫功能低下与多种疾病的发生发展密切相关,故一直是基础医学和临床医学的研究重点.由于在新生儿时期免疫系统并未完全发育成熟,故其功能与儿童及成人有较大差别.近年来,有关新生儿脐血免疫功能的研究取得了很大进展,现对此作一综述.一、脐血的T淋巴细胞亚群脐血的T淋巴细胞数及亚群与成人和儿童有明显不同.早期应用单克隆抗体技术研究人类T淋巴细胞发育,发现随着T淋巴细胞成熟其表面抗原呈规律性表达,功能也随之变化.根据其表型,把T淋巴细胞的发育分为胸腺内和外周血两个阶段.胸腺内的发育分为三个时期,早期胸腺细胞(Ⅰ期)表达T9、T10抗原;普通胸腺细胞(Ⅱ期)丢失T9,获得T6,保留T10,共同表达T4和T8;成熟胸腺细胞(Ⅲ期)则T6消失,获得成熟T淋巴细胞抗原T3,并开始分化为T3+T4+T10+和T3+T8+T10+两个不同功能的细胞群,然后T10丢失进入外周血成为T3+T34+和T3+T8+两个成熟的T淋巴细胞亚群.脐血T3+细胞数较成人外周血少,T6+细胞占10%~15%,T10+细胞数则高达50%以上;成人外周血几乎无T6+细胞,T10+细胞《10%,T4+和T8+细胞的总和基本上等于T3+细胞数.Rabian-herzog等[1]研究表明,脐血淋巴细胞多属幼稚细胞或为处于抑制状态的淋巴细胞.表现为脐血T淋巴细胞白细胞介素2(IL-2)受体及HLA-DR表达明显
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双特异性抗体治疗恶性肿瘤
在肿瘤治疗学中,利用抗体进行肿瘤生物治疗是一个比较活跃的领域.自20世纪70年代中期Kohler和Milstein成功地建立单克隆抗体技术之后,这一疗法得到广泛的研究与探讨.用单抗治疗实体瘤的疗效不明显;治疗恶性血液病,可取得一定效果,但缓解时间相对较短.目前在肿瘤治疗方面,单抗主要用于急性淋巴细胞白血病与恶性淋巴瘤患自身骨髓移植的骨髓净化.由于单抗直接应用抗癌疗效较差,能导向药物和介导免疫细胞的双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)成为近年来抗癌治疗的热点之一.
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基因芯片在内耳基因功能与突变检测中的应用
基因芯片又称DNA芯片,寡核苷酸微阵列等,是在人类基因组计划实施过程中出现并发展起来的.它融合了多领域的各项技术,具有高通量、高集成、微型化和自动化的特点,能够高效平行地处理和应用日益庞大的基因组信息,被称为继单克隆抗体技术和PCR技术之后生命科学中的又一重大技术创新[1],在序列分析、新基因的发现、基因表达谱分析、基因诊断及构建单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)图谱等方面发挥着日益重要的作用.
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口腔粘膜扁平苔癣的细胞免疫功能观察
口腔粘膜扁平苔癣(OLP)是一种常见的口腔粘膜病变,病因尚不清楚.近年来,由于免疫学的发展和单克隆抗体技术的应用,人们开始用免疫学的方法研究其发病过程中的免疫功能变化,我们应用单克隆抗体桥联酶标技术,对OLP患者外周血中T淋巴细胞亚群及B淋巴细胞亚群进行初步研究,以求从免疫学角度对其发病机制作出解释.
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加强基层医院检验科建设
近年来,我国检验医学发展迅速,许多医院检验科实验室更新了仪器与设备,改善了工作环境,增加了检验项目,在疾病的诊断、治疗、预防和健康检查方面发挥了重要作用.随着分子生物学、单克隆抗体技术、计算机技术的迅速发展,实验技术向小型化、简单化、"床旁化"发展,大大地方便了病人和临床,提高了实验室的工作效率.作为基层医院检验科,在新的形式下如何抓住机遇,发展优势,加快发展,是摆在我们面前的重要课题.作者经过多年的观察与思考,对基层医院检验科的建设提出以下看法:
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流式细胞技术的临床应用与分析
流式细胞技术是激光为光源,集流力学技术,电子物理技术,光电测量技术,计算机技术以及细胞荧光化学技术,单克隆抗体技术为一体的新型技术仪,应用流式细胞仪对处于快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒经行快速的,多参数的,定量分析和分选技术称为流式细胞技术(FCM)[1].其中生物颗粒包括大的免疫复合物,DNA,RNA,蛋白质,病毒颗粒,脂质体,细胞器,细菌,染色体,真核细胞,杂交细胞,聚集细胞等,所检测的生物颗粒理化性质包括大小,细胞形态,胞浆颗粒化程度,DNA含量,总蛋白含量,细胞膜的完整性和酶活性学.由于融合了单克隆抗体技术,定量细胞化学和定量荧光化学,流式细胞技术作为一门生物检测技术已经日臻完善,流式细胞或在生物学,免疫学,胞瘤学,血液学,病理性,遗传学,临床检验等学科中都得到广泛的应用,并将为医学科学研究发挥更大的作用.
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CA125的临床应用进展
随着单克隆抗体技术和免疫标记技术的发展,诊断癌症所检测的相关抗原越来越多,但敏感性和特异性均不够理想.
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肿瘤标志的基础与临床应用(三)
4肿瘤标志生物学和临床意义4.1肿瘤标志生物学意义:目前应用单克隆抗体技术已经发现了许多的肿瘤标志,可用来限制、追踪、控制肿瘤细胞生长,有助于更深入地研究肿瘤生长、分化和发生的机制.一些肿瘤标志与人胚胎组织和细胞发生和生长有关,具有一定生物学意义.
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流式细胞术在细胞凋亡检测中的应用
流式细胞仪(flow cytometer,FCM)是一项集激光、电子物理、光电测量、计算机、细胞荧光化学以及单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器.
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流式细胞术在临床检验中的应用
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学、流体力学、激光技术、电子计算机技术等高度结合和发展的结晶,是一种在功能水平上对单细胞或其他细胞粒子、抗原物质进行快速检测分析和分选的技术[1].FCM结合现代单克隆抗体技术,可同时鉴别单个细胞上的多种参数定量定性分析,具有速度快、精度高、准确性好等特点.使用FCM能够快速分析单个细胞或粒子的多种特性,既可以定性也可以定量,尤其适用于大量样品检测,已在临床检验工作中得到广泛应用.