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流式细胞技术在毒理学研究中的应用
流式细胞仪(FCM)是在上世纪70年代发展起来的一种测量细胞荧光染色强度,定量测定细胞和亚细胞成分(微粒)的细胞分析仪.它也是在单细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质进行快速测量并可分选高纯度细胞亚群的一项新技术[1].近年来,随着细胞和分子生物学技术尤其是单克隆抗体技术的发展和分子探针的开发,流式细胞技术日见成熟,它以快速、灵活、灵敏和定量的特点,在国内外被广泛应用于医学基础研究和临床实践多方面.目前,流式细胞技术在毒理学多个分支研究领域已得到广泛应用,在研究外源化合物的细胞毒性和致癌分子机理方面显现出重要价值.笔者就目前FCM技术在免疫毒理、生殖和遗传毒理、发育毒理、环境以及神经毒理学方面的应用作一综述.
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流式细胞技术的临床应用与分析
流式细胞技术是激光为光源,集流力学技术,电子物理技术,光电测量技术,计算机技术以及细胞荧光化学技术,单克隆抗体技术为一体的新型技术仪,应用流式细胞仪对处于快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒经行快速的,多参数的,定量分析和分选技术称为流式细胞技术(FCM)[1].其中生物颗粒包括大的免疫复合物,DNA,RNA,蛋白质,病毒颗粒,脂质体,细胞器,细菌,染色体,真核细胞,杂交细胞,聚集细胞等,所检测的生物颗粒理化性质包括大小,细胞形态,胞浆颗粒化程度,DNA含量,总蛋白含量,细胞膜的完整性和酶活性学.由于融合了单克隆抗体技术,定量细胞化学和定量荧光化学,流式细胞技术作为一门生物检测技术已经日臻完善,流式细胞或在生物学,免疫学,胞瘤学,血液学,病理性,遗传学,临床检验等学科中都得到广泛的应用,并将为医学科学研究发挥更大的作用.
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不同强度静磁场对成骨细胞细胞骨架改建的影响
背景:静磁场对成骨细胞增殖活性、细胞因子分泌及碱性磷酸酶表达等功能活性影响的机制尚不清楚.目的:观察不同强度静磁场加载对成骨细胞骨架改建和细胞骨架蛋白表达的影响.方法:取新生24 h内SD大鼠颅骨进行成骨细胞的培养和鉴定.采用静磁场加载装置对体外培养的成骨细胞进行0,8,50,160 mT的静磁场加载,分别于静磁场加载24,48,72 h应用BODYPY-Phaloidin进行成骨细胞骨架染色,激光扫描共聚焦显微镜和图像处理软件Image J测定细胞骨架蛋白的荧光强度.结果与结论:8,50,160 mT静磁场加载24,48,72 h,荧光标记的成骨细胞骨架蛋白向细胞核周围集中,荧光强度增强(P < 0.05),其中经50 mT静磁场加载的成骨细胞骨架蛋白的荧光强.说明一定强度的静磁场可以影响成骨细胞骨架的改建和重组.
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胆红素对SysmexUF-50尿沉渣自动分析仪管型计数的影响
SysmexUF-50尿沉渣分析仪具有操作规范化、检测的自动化、速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点被临床广泛应用.它采用的是流式细胞荧光散射强度和电阻抗变化的原理,能对尿液中的管型自动计数,能将管型区分为病理性管型和非病理性管型.但在实际工作中,自动化分析仪往往会受到诸多因素的影响[1],用SysmexUF-50尿沉渣分析仪检测非黄疸尿液标本时,经常会遇到检测管型时存在着较高的假阳性率;可当遇到高尿胆红素、高黏、伴胆红素管型尿时,会随着胆红素的不断增高而检测管型的阳性率出现变化,如果对此不予重视,有可能导致漏检、误诊、误治的发生.