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养血升白口服液的免疫增强和保肝作用
养血升白口服液是以当归补血汤为主的中药复方制剂,药理研究已表明是在显著的升白细胞作用和与抗肺病药合用协同抗肿瘤作用.本文在实验动物上探讨其对免疫功能的影响,对肝功能的保护作用及对血清总蛋白含量的影响,以对其作为抗肿瘤辅助用药提供实验依据.
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复方中药抗氧化剂对局部60Co照射荷瘤大鼠肝氧化损伤的保护作用
目的:研究荷瘤大鼠局部放疗引起的肝脏氧化损伤以及复合抗氧化剂的保护作用.方法:采用Walker-256肿瘤细胞株接种大鼠皮下,得到实体瘤,摘除实体瘤分割成小块植入大鼠的右后腿皮下,制成大鼠荷瘤模型,将荷瘤大鼠随机分成3组,分别为肿瘤模型组、单纯放疗组和抗氧化剂保护组,同时选取正常大鼠作为阴性对照组.抗氧化剂保护组每日给予复合抗氧化剂灌胃,分次对单纯放疗组和抗氧化剂保护组的荷瘤大鼠进行60Co γ射线局部照射4次,每次间隔1 wk,累计剂量为47Gy,后一次照射后7 d,处死大鼠,取血清和肝脏分别测定谷胱甘肽硫转移酶(GST)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、含锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化力(TAC)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)活性、NOS表达和总蛋白含量.结果:与阴性组相比,单纯放疗组GST活性和MDA含量显著升高(479±17 vs 427±59,50.3±1.0 vs46.8±2.3,33.7±8.8 vs 21.4±7.2,P<0.05,P<0.01,P<0.01),抗氧化剂保护组GST活性和MDA较单纯放疗组显著降低(421±36 vs 479±17,47.5±1.0 vs50.3±1.0,21.7±6.8 vs33.7±8.8,P<0.05,P<0.01,P<0.01).单纯放疗组T-SOD、Mn-SOD活性和GSH含量以及TAC显著低于非照射组(39.3±7.0 vs 48.8±2.8,18.7±6.2 vs 28.8±2.5,0.44±0.13vs0.57±0.06,20.7±5.3vs26.5±3.3,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),而抗氧化剂保护组T-SOD、Mn-SOD活性和GSH含量以及TAC显著高于单纯放疗组(47.7±4.3vs39.3±7.0,28.2±7.7vs18.7±6.2,0.61±0.22 vs 0.44±0.13,26.3±1.7ys 20.7±5.3,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05).单纯放疗组NO含量和NOS活性显著高于对照组(1.22±0.08vs 0.98±0.15,4.92±0.94 vs 3.63±0.77,P<0.01,P<0.05),抗氧化剂保护组NO含量和NOS活性及表达显著低于单纯放疗组(0.77±0.22vs1.22±0.08,3.62±0.49vs 4.92±0.94,P<0.01,P<0.05).结论;:荷瘤动物局部照射可以引起放疗部位以外的肝脏的氧化损伤,而高效的复合抗氧化剂可以通过提高抗氧化酶活性以及降低NO含量、NOS活性及表达等起到有效的保护作用,这为临床放疗中大限度减少放疗副作用,根治肿瘤提供了一条新的研究思路.
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流式细胞技术的临床应用与分析
流式细胞技术是激光为光源,集流力学技术,电子物理技术,光电测量技术,计算机技术以及细胞荧光化学技术,单克隆抗体技术为一体的新型技术仪,应用流式细胞仪对处于快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒经行快速的,多参数的,定量分析和分选技术称为流式细胞技术(FCM)[1].其中生物颗粒包括大的免疫复合物,DNA,RNA,蛋白质,病毒颗粒,脂质体,细胞器,细菌,染色体,真核细胞,杂交细胞,聚集细胞等,所检测的生物颗粒理化性质包括大小,细胞形态,胞浆颗粒化程度,DNA含量,总蛋白含量,细胞膜的完整性和酶活性学.由于融合了单克隆抗体技术,定量细胞化学和定量荧光化学,流式细胞技术作为一门生物检测技术已经日臻完善,流式细胞或在生物学,免疫学,胞瘤学,血液学,病理性,遗传学,临床检验等学科中都得到广泛的应用,并将为医学科学研究发挥更大的作用.
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白细胞介素-17A与急性呼吸窘迫综合征肺泡炎症和不良预后相关
?白细胞介素-17A(IL-17A)是一种促炎细胞因子,在肺损伤小鼠模型中已证实了其宿主防御和在病理性炎症中发挥了重要作用。然而在人类肺损伤时IL-17A与炎症的关系尚不明了。为此,有研究者对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者进行了一项多中心观察性研究,旨在评价IL-17A水平是否与ARDS患者的肺泡炎症和损伤有关,并评估IL-17A水平是否与ARDS预后有关。该研究纳入北美6个医疗中心共226例ARDS患者,其中86例来自5个中心参与ω-3脂肪酸临床试验的患者(ARDS1组),在ARDS发病48?h内获取血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)标本;另140例因ARDS入住同一个重症加强治疗病房(ICU)的患者(ARDS2组),在入ICU?24?h内获取血清标本。检测两组患者的血清IL-17A水平,并测定ARDS1组BALF中IL-17A、中性粒细胞百分比及蛋白含量。结果发现,ARDS1组BALF中IL-17A水平与较高的中性粒细胞百分比及总蛋白含量密切相关(均P<0.01)。在ARDS1、ARDS2两组中,IL-17A水平与序贯器官衰竭评分(SOFA)呈正相关(均P<0.05)。该研究者据此得出结论:在ARDS患者中,血清及肺泡分泌的IL-17A升高与肺泡中性粒细胞百分比上升、肺泡通透性增加及器官功能障碍密切相关。
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盐藻素对小鼠免疫调节作用的影响
盐藻属于光合自养生物,能利用简单的培养基进行培养,富含β胡萝卜素、甘油、蛋白质等,其中β胡萝卜素高可达其干重的10%左右[1],总蛋白含量占细胞干重的50%~60%,具有很高的营养价值,加上资源极其丰富和易加工等特点备受关注.用盐藻制做的干粉胶囊可以直接口服,增强机体的免疫能力[2,3].本文对盐藻素的免疫调节作用进行分析.
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OGP和IGF-1对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响
目的 探讨成骨生长肽(OGP)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养的人牙周膜细胞(PDLC)增殖及其总蛋白含量的影响.方法 体外培养人PDLC与不同浓度的OGP和IGF-1单独或联合应用,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察人PDLC增殖的情况,用考马斯亮蓝染色法检测细胞内总蛋白含量的变化.结果 OGP明显促进人PDLC增殖,第3天大显效浓度为10-9mol/L,小显效浓度为10-11mol/L.IGF-1也促进人PDLC增殖,第3天大显效浓度为100ng/ml,小显效浓度为1ng/ml.在第1、3、6天,OGP与IGF-1大显效浓度联合和小显效浓度联合,对人PDLC增殖活性和细胞内总蛋白合成的促进作用均较对照组增加.结论 OGP和IGF-1均可促进人PDLC增殖和细胞内总蛋白含量的提高,在一定范围内呈浓度时间依赖关系,二者联合具有协同效应.
关键词: 人牙周膜细胞 成骨生长肽 胰岛素样生长因子-1 增殖 总蛋白含量 -
应用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量
目的应用考马斯亮蓝法检测总蛋白含量.方法应用考马斯亮蓝法与凯氏法和Lowry法同时进行不同生物制品的总蛋含量检测.结果考马斯亮蓝法操作简便,灵敏度高,重复性好,测定蛋白的线性范围为5~25μg,r=0.9995,n=5,平均回收率为101.3%.结论考马斯亮蓝法是检测生物制品总蛋白含量的理想方法.
关键词: 考马斯亮蓝(CBB) 总蛋白含量 凯氏法 Lowry法 -
热应激诱导的HSP70在肝脏缺血再灌注损伤中的作用
热休克蛋白(HSP)是70年代由美国学者Tissieres等发现的一类蛋白质家族,现证明HSPs广泛存在于各种原核和真核细胞中.在正常生长条件下,各种细胞中HSPs占细胞总蛋白含量的5%~10%,当细胞处于高温及其他应激条件,HSP表达明显增高.
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热休克蛋白70肿瘤疫苗的研究进展
热休克蛋白(HSP)与免疫治疗的关系是近年来的研究热点之一.许多研究结果证实,从肿瘤组织提取HSP后免疫动物,可以诱导特异的抗肿瘤细胞CTL(cyto-toxicityT lymphocyte)反应,产生强大的杀瘤效应.HSP广泛存在于各种原核和真核细胞中.在正常生长条件下,各种细胞中HSP占细胞总蛋白含量的5%~10%,当细胞处于高温和应激情况时,HSP表达明显增高.人类各种肿瘤细胞比其相应的正常组织表达更高水平的HSP.HSP在各种属中高度保守,并与一些基本的细胞功能,如蛋白质转运、折叠和装配有关,又叫分子伴侣(molecular chaperone).根据分子量大小和氨基酸同源性可将HSP分为4组,即HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族和低分子量HSP家族.不同的HSP存在于细胞的不同区域,因此在协助蛋白多肽的运送过程中,往往有多个HSP参与,形成一条级联传递路线.Udono H等[1]比较了Meth A瘤来源的gp96、HSP90、HSP70的免疫原性,认为gp96、HSP70的免疫原性比较高,而HSP90的免疫原性只是它们的10%.本文主要综述HSP70与肿瘤免疫的研究进展.1 HSP70的结构与作用机理
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中药黄芩苷对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响
目的:探讨在不同浓度的黄芩苷作用下,人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的变化.方法:运用细胞生物学方法,MTT法和考马斯亮蓝染色法,观察黄芩苷对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响.结果:黄芩苷浓度在1×10-5~1μg/ml,明显促进人牙周膜细胞增殖,且1×10-2μg/ml作用效应大.黄芩苷浓度在1×10-3~1μg/ml,明显增加人牙周膜细胞总蛋白的合成,且1×10-1μg/ml作用效应大.黄芩苷的作用显示出一个明显的浓度依赖效应和时间依赖效应.结论:黄芩苷明显促进牙周膜细胞增殖及增加细胞总蛋白,作为一种中药有效成分,有望用于辅助牙周病的防治.
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骨钙素与牙槽骨变化
骨钙素(osteocalin)也叫γ-羧基谷氨酸蛋白,是代表骨代谢瞬间变化的一种灵敏、特异、准确而简便的生化指标.血清骨钙素放射性免疫方法测定已广泛用于骨病、骨代谢疾病和内分泌疾病的临床诊断、预后观察及基础研究中,并具有重要意义.近年来骨钙素亦被引入到口腔医学研究领域,用来反映牙槽骨的变化.本文就骨钙素的结构、生理功能及其与牙槽骨吸收和牙槽骨形成的关系作一综述.1 骨钙素的结构和生理功能骨钙素主要存在于骨组织和牙本质中,约占骨总蛋白含量的1~2%.它是矿化组织中含量为丰富的非胶原蛋白,分子量为5800道尔顿,由49个氨基酸组成,其中有三个(17、21和24位)是依赖于维生素K的γ-羧基谷氨酸,这是骨钙素特异地与羟磷灰石结合并发生骨沉积的基础.骨钙素由成骨细胞合成和分泌,约50%沉积于骨基质,50%进入血循环[1,2].虽然骨钙素在骨代谢中确切的生理功能尚不清楚,但一般认为其主要作用是维持骨的正常矿化速率,抑制异常羟基磷灰石的形成,抑制生长软骨的矿化速度[3].在骨代谢过程中,当骨吸收和骨形成相偶联时,骨钙素为骨转换的标志;当两者失偶联时,骨钙素为骨形成的一项特异性指标[4].因此有学者认为,伴有骨转换或骨形成增加者,血清骨钙素水平升高;不伴骨代谢改变者,血清骨钙素在正常范围;骨转换和骨形成低下者,血清骨钙素含量降低[5].近来也有研究表明骨钙素可以激活前破骨细胞,而且在维生素D3的作用下形成能抑制成骨细胞胶原合成的浓度,加速诱导骨吸收细胞的分化[6],促进骨吸收[7].
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一氧化氮在防止内皮素-1诱导心肌细胞肥大中的作用
目的在培养的新生大鼠心肌细胞上,探讨一氧化氮(NO)在防止内皮素-1诱导的心肌细胞肥大反应中的作用.方法用Bradford法测定心肌细胞总蛋白含量,用血红蛋白分光分度法测定心肌细胞NOS活性,用硝酸还原酶-Griess试剂显色法测定培养液中NO浓度,用RT-PCR技术检测心肌细胞原癌基因c-fos的表达(以GAPDH为内标).
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脑红蛋白与脑损伤研究现状
脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)由德国Burmester等[1]于2000年首先报道,研究发现Ngb只占全脑组织总蛋白含量的0.01%,与氧有很高的亲和力,有利于氧转运通过血脑屏障和提高脑组织氧的利用率等.近几年国内外已有不少相关研究,包括Ngb对脑组织的正常供氧机制,以及脑缺血缺氧性损伤等病理状态下对脑组织的保护作用.现对此方面的研究进展做一简要综述.
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成骨生长肽对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响
目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对体外培养的人牙周膜细胞增殖和细胞总蛋白含量的影响.方法:在体外培养的人牙周膜细胞中加入不同浓度的OGP(10-11~10-7mol/L),用MTT法检测细胞的增殖率;考马斯亮蓝染色法检测细胞内总蛋白含量的变化.结果:OGP在该浓度范围内时,对人牙周膜细胞的增殖率有明显的促进作用(P<0.05),并且在该浓度范围内时,能叫显增加人牙周膜细胞总蛋白的合成(P<0.05),佳作用浓度为10-9mol/L.结论:OGP可促进人牙周膜细胞的增殖活性,同时可以增强细胞总蛋白的合成,提示OGP在牙周组织再生领域中具有良好的应用前景.
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抗凝剂对测定蛋白质影响的探讨
了解用血浆测定血液中蛋白含量与用血清做标本测定血液中总蛋白含量二者之间有否区别,其结果有否差异.我们通过对116例患者标本同时平行测定血浆、血清的总蛋白质含量,进行对比分析得知,其采用血清为标本测定总蛋白质含量比用血浆做标本,测定血液中总蛋白质含量要明显偏低,约低3~5g/L,究其原因,是因为血浆中含纤维蛋白原所致.
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冻融对血浆总蛋白含量的影响
作者发现单采血浆站是在原料血浆采集出来后立即检测血浆总蛋白,而血液制品厂家通常将原料血浆放置于冰库里冷冻一周甚至更长时间后才进行检测,由于原料血浆经过冻融后大多数会产生纤维蛋白损失,所以检测有原料血浆总蛋白不合格的一个重要原因.
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贵州省2008年单采血浆站万份血浆总蛋白检测结果分析
为了缓解目前我国血液制品供应紧张的现状,重新评估我国单采血浆站供浆员供浆周期,为卫生行政部门有关决策提供参考意见,贵州省临床检验中心受卫生部医政司委托,于2008年一季度对我省部分单采血浆站共10 000人份供浆员的血浆总蛋白含量进行了检测,现将有关情况介绍如下.
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中药双黄补对人牙周膜细胞总蛋白含量和超微结构的影响
目的:探讨中药双黄补对人牙周膜细胞总蛋白含量和超微结构的影响.方法:采用组织块法体外培养人牙周膜细胞,取第5 代培养细胞随机分为实验组和对照组,实验组加不同浓度的双黄补,对照组只加培养液.通过考马斯亮蓝法测定牙周膜细胞总蛋白含量,透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化.结果:不同浓度的中药双黄补对人牙周膜细胞的总蛋白含量均有提高作用,其中尤以100 μg/ml效果佳.电子显微镜下可见胞质内粗面内质网、线粒体等细胞器数量增多.结论:中药双黄补可促进人牙周膜细胞的蛋白质合成,使细胞代谢更旺盛,功能更活跃.
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大蒜素对人牙周膜成纤维细胞的生物学作用
目的:探讨在不同浓度大蒜素作用下对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs),增殖和总蛋白含量的变化.方法:体外培养人牙周膜成纤维细胞,分别经0(对照组),10-2,10-1,1,10,102,103 mg/L浓度的大蒜素作用后,采用MTT法、考马斯亮蓝染色法,观察大蒜素对HPDLCs增殖、总蛋白含量影响.结果:大蒜素浓度在10-2、10-1、1 mg/L时对人牙周膜成纤维细胞增殖和总蛋白含量无明显影响;10、102、103 mg/L时明显抑制人牙周膜成纤维细胞增殖和总蛋白含量,且其抑制作用随浓度增大而增强,103 mg/L效应大,呈明显的浓度依赖性(P<0.05).结论:大蒜素能浓度依赖性抑制人牙周膜成纤维细胞的增殖和蛋白合成.