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动态监测血清热休克蛋白70在早发型重度子痫前期中的价值
本研究通过动态监测早发型重度子痫前期患者血清热休克蛋白70(HSP70)含量,并与同孕龄健康妊娠对照组和140例>32孕周子痫前期患者进行比较分析,旨在探讨血清HSP 70在早发型重度子痫前期疾病中的价值.
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硫酸镍对大鼠睾丸生精细胞c-Fos和HSP70 mRNA表达的影响
目的 观察硫酸镍(NiSO4)对大鼠睾丸生精细胞c-Fos和HSP70 mRNA表达的影响.方法 健康性成熟Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组:正常对照组(NS组)、NiSO4 1.25、2.5、5.0 mg/kg组.腹腔注射染毒,1次/d,连续30d.采用原位杂交技术检测大鼠睾丸生精细胞c-Fos和HSP70 mRNA的表达水平.结果 NiSO4 2.5、5.0 mg/kg组睾丸精原细胞c-Fos mRNA阳性表达细胞数减少,主要见于生精周期Ⅰ～Ⅵ期、Ⅻ～ⅩⅢ期和ⅩⅣ期;精母细胞HSP70 mRNA阳性表达细胞数明显增多,主要见于生精周期Ⅰ～Ⅵ期和Ⅻ～ⅩⅢ期.结论 NiSO4引起大鼠睾丸生精过程障碍可能与其所致的精原细胞c-Fos mBNA表达下调和精母细胞HSP70 mRNA表达上调有关.
关键词： 硫酸镍(NiSO4) 生精细胞 c-fos HSP70 -
绿茶多酚对MPTP诱导的多巴胺能神经元损伤的保护作用
目的 探讨绿茶多酚(Green Tea Polyphenols,GTPs)对MPTP诱导的帕金森病(PD)模型小鼠中多巴胺能神经元损伤的保护作用.方法 C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组.模型组和治疗组小鼠连续腹腔注射MPTP 5 d制作PD模型,治疗组自造模后第5天开始腹腔注射GTPs,共注射10d.GTPs治疗完毕后,以旷场实验检测各组小鼠的运动功能,以高效液相色谱法检测纹状体区多巴胺(DA)及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)及高香草酸(HVA)的含量,以Western Blotting检测黑质区HSP70蛋白的表达水平,并以比色法检测黑质区SOD和MDA的水平.结果 GTPs治疗后,PD小鼠的自发活动性显著升高(P＜0.05),同时也显著提高纹状体区DA及其代谢物DOPAC和HVA的表达(P ＜0.05);GTPs注射后,小鼠黑质区SOD活力明显升高(P＜0.05),MDA表达显著降低(P＜0.05),HSP70蛋白表达显著下降(P＜0.05). 结论 GTPs治疗可显著缓解PD小鼠的运动功能障碍,其多巴胺能神经元保护作用,可能与抑制脑内的氧化应激反应及提高神经元处理异常蛋白聚集的能力有关.
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蓝莓花色苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用初探
目的 观察蓝莓花色苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,初步探讨其作用机制.方法 将100只SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组和蓝莓花色苷给药低、中、高3个剂量组(50、100和200 mg/kg·d).假手术组只分离右侧的颈总动脉、颈内动脉和颈外动脉,但不阻断血流.实验组采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,观察蓝莓花色苷对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损评分、脑组织含水量的影响.取大鼠右侧脑组织,检测氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Elisa法检测脑组织中匀浆中核因子kappa B(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)和白细胞介素6(IL-6)水平,Western blotting法检测热休克蛋白70 (HSP70)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平.结果 与模型组比较,蓝莓花色苷各剂量组可降低大鼠神经功能缺损评分(P ＜0.01),减少脑组织含水量(P＜0.05),提高SOD活性,降低MDA含量(P＜0.05),降低NF-KB、TNF-α、IL-1和IL-6水平(P＜0.05);免疫印迹结果显示,蓝莓花色苷各剂量组均可增强p-Akt蛋白表达,其中中、高剂量组可明显增强HSP-70蛋白表达.结论 蓝莓花色苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有较好的保护作用,其作用机制可能通过上调p-Akt和HSP-70蛋白的表达,发挥其对神经细胞的保护作用.
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热应激对鲤鱼血清组织HSP 70诱导的影响
为了探讨热应激过程中热应激蛋白(heat stress proteins,HSPs)的诱导合成与机制,建立了鲤鱼血清组织HSP 70的双抗体夹心酶联免疫吸附检测方法(ELISA).
关键词： 鲤鱼血清 HSP70 热胁迫 双抗体夹心ELISA -
热灌注化疗序贯微波热疗治疗恶性胸腔积液临床研究
目的 探讨循环热灌注化疗序贯微波热疗治疗恶性胸腔积液近期疗效及毒副反应.方法 将75例恶性胸腔积液患者随机分为两组,试验组采用循环热灌注化疗序贯微波热疗,对照组采用循环热灌注化疗,4次治疗后评价两组疗效及毒副反应.结果 试验组有效率(85.71％)稍高于对照组(82.50％),差异无统计学意义(P＞0.05);试验组的血液学毒性应发生率(8.57％)大于对照组(5.00％),试验组的消化道反应发生率(11.43％)大于对照组(7.50％),差异均无统计学意义(P＞0.05);试验组的心肺毒性发生率(22.86％)大于对照组(5.00％),差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者之间OS对比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 循环热灌注化疗序贯微波热疗较单纯行循环热灌注化疗没有提高疗效和延长生存,其引发的心肺毒性增加.
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某健胎中药致畸作用及对HSP70表达的影响
目的保证新药某健胎中药(PAKRQAB)的临床用药安全,评价其毒理学和分子生物学效应.方法设3个剂量组:60、12和2.4 g/(kg·d),高剂量相当于临床拟用量的80倍,另设溶剂对照组和阳性对照组.于孕期6～15d经口给予受试物,第20天检查对孕鼠和胎鼠的毒性和致畸性,并用western Blot方法测定孕鼠和胎鼠肝组织HSP70水平.结果3个健胎液剂量组均未诱发畸形,但高剂量组妊娠率下降,与阴性对照组比较差异有显著性(P＜0.05).孕鼠各剂量组HSP70表达与阴性对照组比较有不同程度的降低,对胎鼠HSP70表达影响不明显,孕鼠表达量较胎鼠高.结论该健胎中药无致畸性,无母体毒性及发育毒性,但对高剂量组孕鼠妊娠率可能产生一定的影响.
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微波辐射对家兔心脏损伤及其机制的研究
目的 探讨不同强度微波辐射对家兔心脏的损伤作用及其机制.方法 分别以强度为50、100、150和200 mW/cm2,频率为2450 MHz微波照射家兔20 min,照射后6h,取家兔心脏,检测心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性,HE染色观察心脏组织结构的改变,Western blotting检测心肌细胞内Caspase-3和HSP 70蛋白表达量变化.结果 随着微波辐射强度的增加(100、150和200 mW/cm2),辐射组家兔心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性呈现降低趋势,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色结果显示,微波辐射组家兔心肌细胞轻度水肿,肌纤维排列不整,心肌细胞出现明显的损伤.Western blotting结果显示,微波辐射后心肌细胞内Caspase-3和HSP 70蛋由表达水平随着辐射强度的增加呈上升趋势(P＜0.05).结论 微波辐射对家兔心脏具有明显的损伤作用,其可能机制是通过改变心肌细胞内应激水平而引发细胞凋亡.
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稀有鮈鲫鱼热休克蛋白HSP70多态性分析
目的:建立稀有鮈鲫鱼热休克蛋白HSP70提取方法 ,进行双向电泳技术、western blot分析,为构建稀有鮈鲫鱼的蛋白质分析提供了科学依据.方法:提取稀有鮈鲫鱼的热休克蛋白HSP70,采用双向电泳技术、western blot技术进行分析.结果:样本里面HSP 70有两种等电点,约5和7左右,且片段大小主要位于50-100之间.结论:本研究获得了非常有价值的稀有鮈鲫鱼的热休克蛋白HSP70多态性分析结果,为构建稀有鮈鲫鱼的蛋白质分析提供了科学依据.
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TEPN对2型糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制
目的 研究替普瑞酮(TEPN)对2型糖尿病的降血糖作用及其机制.方法 给予2型糖尿病模型大鼠口服TEPN(75、150 mg/kg)和二甲双胍(45 mg/kg)4周,观察动物空腹血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸、热休克蛋白(HSP)70以及肝脏、胰腺、脂肪和肌肉组织HSP70与肝脏JNK、p-JNK的表达水平.结果 与模型对照组比较,TEPN给药组和二甲双胍组动物的空腹血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸明显更低,血清HSP70水平明显更高(P<0.05).与模型对照组比较,TEPN给药组动物的肝脏、胰腺和肌肉组织中HSP70的表达水平明显更高,肝脏组织中JNK和p-JNK的表达水平明显更低(P<0.05).结论 TEPN对2型糖尿病大鼠模型有降血糖作用,其机制可能与提高血清和组织HSP70水平、抑制JNK信号转导通路有关.
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中药复方对 ApoE 基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块的影响及机制
目的：观察搜风祛痰中药复方稳斑汤对 ApoE 基因敲除小鼠动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块的作用及机制。方法6～8周龄 ApoE 基因缺陷鼠，高脂饲料喂养13周后造出 AS 不稳定斑块模型，同时将正常 C57BL/6J 小鼠10只正常饲料喂养13周，设为空白对照组。各组分别给予相应药物干预1个月，麻醉处死小鼠取主动脉组织 HE 染色后在光学显微镜下进行病理学观察，然后采用免疫组化和 RT - PCR 技术检测 HSP70和 PPAR -γ的表达水平。结果与空白对照组比较，模型对照组 HSP70和 PPAR -γ明显下降（P ﹤0.01）；与模型对照组比较，中药低、中剂量组 HSP70和 PPAR-γ明显升增高（P ﹤0.05），中药高剂量组与西药组较模型对照组明显增高（P ﹤0.01），然而两者表达水平在中药高剂量组与西药组无明显差异（P ﹥0.05）。结论 ApoE 基因敲除小鼠 AS 不稳定斑块的形成与炎症因子密切相关，搜风祛痰中药复方稳斑汤可能通过调节 HSP70和 PPAR -γ的表达而干预 AS 斑块形成及破裂，为 AS 的防治开辟了一条新思路。
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电针对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中自由基及热休克蛋白70表达的影响
目的:探讨电针干预脑缺血再灌注损伤的作用机制.方法:成年Wistar大鼠63只,分为7组,脑缺血2 h/再灌注1 h组、脑缺血2 h/再灌注1 h+电针组、脑缺血2 h/再灌注3 h组、脑缺血2 h/再灌注3 h+电针组、脑缺血2 h/再灌注6 h组、脑缺血2 h/再灌注6 h+电针组和假手术组.建立局灶性脑缺血再灌注动物模型.电针取"水沟"、双侧"中冲"及"风府"穴,疏密波,4-60 Hz,强度2 mA左右,在大脑中动脉阻断1 h后给予电刺激15 min.分别用羟胺法和硫巴比妥酸盐反应法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法测定脑组织中热休克蛋白(HSP)70的表达.结果:与假手术组相比,各缺血再灌注组SOD活性明显下降,MDA含量显著增加,HSP70表达增加.与缺血再灌注组比较,各电针组SOD活性明显上升,MDA含量明显下降,HSP70表达进一步增加.结论:电针干预脑缺血再灌注损伤的作用机制与降低大鼠脑组织中自由基含量,增强SOD活性和HSP70表达有关.
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孤束核损毁对艾灸预处理调节大鼠胃黏膜EGF、SS含量及HSP-70表达作用的影响
目的:探讨孤束核在艾灸预处理保护胃黏膜机制中的作用.方法:健康SD大鼠40只随机分为4组,分别为:A正常对照组;B模型组;C艾灸+模型组;D艾灸+模型+孤束核损毁组,每组10只.运用脑立体定位及直流电损毁技术预先损毁大鼠双侧孤束核后进行足三里穴艾灸预处理,在无水乙醇灌胃法造模损伤大鼠胃黏膜后,进行大鼠胃黏膜损伤指数(UI)及病理切片观察,采用ELISA方法检测大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)和生长抑素(SS)含量,并采用W-B方法检验HSP70在大鼠胃黏膜组织中的表达.结果:①B组胃黏膜出现明显损伤,表明采用无水乙醇灌胃胃黏膜损伤造模法造模成功.C、D组UI指数较B组均有不同程度的下降(P＜0.01,P＜0.05);D组UI指数较C组高(P＜0.01).②光镜观察结果显示A组胃黏膜组织内丰富的毛细血管,上皮结构完整,细胞排列有序;B组胃黏膜结构破坏,胃黏膜腺体细胞大量坏死,胃黏膜损伤明显;C组胃黏膜表面有部分脱落,细胞内充血情况明显改善;D组胃黏膜细胞内充血情况改善,但仍可见充血.③C、D组胃黏膜组织中EGF含量较B组均有不同程度的上升,SS含量均有下调(P＜0.05,P＜0.01);D组胃黏膜组织中EGF含量C组低,而SS含量较C组高(P＜0.01).④C、D组胃黏膜组织中HSP70表达较B组均有明显上升(P＜0.01);D组较C组胃黏膜组织中HSP70表达低(P＜0.05).结论:艾灸预处理足三里穴对胃黏膜损伤有明显保护作用,而孤束核损毁对其保护效应有明显影响,证明孤束核是艾灸对胃黏膜损伤与保护因子表达与促进HSP70表达的重要调节部位,起到了重要的信号汇聚与整合的作用.
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参麦注射液对脑出血大鼠脑组织HSP70表达的影响及其神经保护作用机制的实验研究
目的:观察参麦注射液对脑出血大鼠血肿中心区、缺血半暗带区、术侧海马区和皮层区HSP70表达的影响.方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、参麦组共4组,模型组和参麦组内又分为1d、3d、5d、7d共4个时间点,立体定位仪定位注射胶原酶Ⅶ造大鼠脑出血模型.评估各组大鼠神经系统病态,并进行爬杆计分,电镜观察脑出血后的神经细胞的病理改变,免疫组织化学法检测各组大鼠脑出血后不同时间点血肿中心区、血肿周围区、术侧海马区及皮层区神经细胞HSP70的表达,以及参麦注射液对其的影响.结果:正常组及假手术组大鼠未见明显的病态,模型组和参麦组均出现不同程度的病态体征;电镜观察显示,正常组和假手术组神经细胞结构正常,模型组细胞器不完整,出现了凋亡小体,而参麦组细胞器较完整,凋亡小体较少;正常组和假手术组大鼠海马区和皮层区神经细胞有少量的HSP70阳性信号表达,模型组缺血半暗带区、术侧海马区和皮层区HSP70的表达1d时增多,3d时达到高峰,5d时表达下降,至7d时仍有少量表达,与模型组相比较,参麦组各时间点的HSP70表达增多,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:参麦注射液可能通过增加HSP70的表达,抑制细胞凋亡,增加神经细胞耐缺氧能力而发挥神经保护作用.
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通心络胶囊对大脑中动脉栓塞模型大鼠Caspase-3、P53、HSP70表达的影响
目的:观察通心络胶囊对大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO)模型大鼠Caspase-3、P53、HSP70表达的影响,探讨通心络胶囊在缺血脑保护中的作用及可能机制.方法:MCAO模型雄性SD大鼠随机分3组:MCAO模型组、MK-801组、通心络胶囊组.各组大鼠在缺血24h后冰冻切片机切各组大鼠大脑,分别行Caspase-3、P53、HSP70免疫组化染色,于高倍物镜下选择标记阳性细胞表达明显的区域,对其相邻5个视野区采用HP1000高清晰度彩色病理图像分析系统计算免疫阳性细胞.结果:缺血24h后,Caspase-3、P53值在通心络组、MK-801组的表达较模型组明显减少(P＜0.05),且通心络组较MK-801组表达更少(P＜0.05);HSP70在通心络组和MK-801组的表达较模型组明显增多(P＜0.05),且通心络组较MK-801组表达更多(P＜0.05).结论:通心络胶囊能够明显抑制Caspase-3、P53的表达,促进HSP70的表达.
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清热解毒中药诱导肝癌H22细胞HSP70表达的研究
中医认为,多数恶性肿瘤在病程一定阶段属于热证范畴,热毒蕴结是恶性肿瘤的主要病因病理之一,而采用清热解毒法治疗常可获得满意效果.我们以往的研究表明,HSP70在不同恶性肿瘤中以热证表达为明显,具有证的特异性[2].中药是否通过诱导HSP70的免疫效应而达到治疗肿瘤的目的尚不清楚.本文通过观察清热解毒类中药冬凌草、半枝莲对肝癌H22细胞HSP70免疫原性的诱导,而对此进行了初步探讨.
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葛根素对大鼠急性脑缺血损伤Hsp70表达的影响
目的:探讨葛根素对大鼠急性脑缺血损伤Hsp70表达的影响.方法:采用闭夹大脑中动脉造成局部脑缺血模型,对脑组织用免疫组化SP法作Hsp70染色,观察其Hsp70表达情况.结果:葛根素干预组Hsp70表达强度显著强于单纯缺血组(P<0.01).结论:葛根素有上调大鼠急性脑缺血损伤时Hsp70表达的作用.
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黄芪对蚂蟥生长和免疫及相关基因表达的影响
为了研究黄芪对蚂蟥生长和免疫影响及作用机制,在蚂蟥养殖水中添加黄芪,使养殖水中黄芪质量分数分别为0,0.01％,0.03％,0.05％,0.07％,0.09％.养殖60 d后测定生长性能、消化酶和抗逆酶活性、内在品质以及生长激素(growth hor-mone,GH)、胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor,IGF-1)和消化酶相关基因相对表达量;同时观察和统计热应激对蚂蟥生存状况的影响,测定热激蛋白HSP70和免疫相关基因相对表达量.结果表明:黄芪组终体质量、增重率和特定生长率、消化酶和抗逆酶活性以及GH,IGF-1和消化酶相关基因相对表达量均高于空白组,且随浓度的增加呈先升后降趋势,其中0.05％组显著高于其他组别(P＜0.05);黄芪组与空白组蚂蟥内在品质无显著性差异.蚂蟥存活率与热应激处理时间呈负相关;随着热应激处理时间的延长,蚂蟥HSP70和免疫相关基因相对表达量呈先升高后降低趋势,热应激24 h时高;黄芪组存活率、HSP70和免疫相关基因相对表达量均高于空白组,其中0.05％组显著高于其他组别(P＜0.05).综上,黄芪能提高蚂蟥消化酶、抗逆酶活性及相关基因的表达,促进蚂蟥生长、提高免疫能力、增加其抗热应激能力.建议在蚂蟥实际生产中添加0.05％黄芪以提高养殖效益.
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恶性肿瘤组织中HSP70、P53表达与中医热证的关系
目的探讨中医热证和非热证恶性肿瘤患者瘤组织中HSP70和P53的表达.方法采用S-P免疫组化法进行HSP70、P53阳性检测以及采用ELISA法和RT-PCR法检测恶性肿瘤组织中HSP70和HSP70mRNA表达含量.结果(1)结肠癌热证组、热证合计组HSP70、P53阳性率均明显高于各非热证组(P＜0.05);(2)结肠癌热证组、鼻咽癌热证组、肺癌热证组以及热证合计组中HSP70表达含量均高于各非热证组(P＜0.01);(3)结肠癌热证组、肺癌热证组以及热证合计组中HSP70mRNA的表达含量均高于非热证组(P＜0.01).结论在恶性肿瘤的热证阶段HSP70和P53阳性表达率以及HSP70表达含量显著高于非热证阶段.
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艾灸效应的HSP70机制研究进展
艾灸是一种以温热作为主要刺激形式的独特治疗方法,热休克蛋白70(HSP70)的表达与机体遭受热应激刺激密切相关.本文从艾灸的主要刺激形式、HSP70的主要生物学效应、艾灸效应与HSP70的关系等角度对艾灸效应的HSP70机制研究进展进行综述分析,并提出进一步深化艾灸作用机制研究的思路和途径.
