首页 > 文献资料
-
牛蒡子复方制剂对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响
目的:探讨牛蒡子复方制剂(WWZ)对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响.方法:采用改良线栓法制作右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,运用Zea-Longa法进行神经病学评分,用光镜观察脑组织形态学改变,用免疫组化法观察其对Caspase-3蛋白表达的影响.结果:WWZ治疗组脑组织变性坏死程度轻,神经功能缺损评分显著减少,Caspase-3阳性细胞减少(P<0.01).结论:WWZ能降低神经功能缺失评分、抑制Caspase-3的激活,提示对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,其脑保护作用可能与抑制缺血区Caspase-3蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关.
-
反式白藜芦醇（TR）对痴呆大鼠海马旁回iNOS、caspase3表达的影响及机制
目的：观察反式白藜芦醇（TR）对痴呆大鼠海马旁回的作用。方法：大鼠随机分为给药组和对照组。在大鼠海马内注射Aβ25-35后5天，采用TUNEL法检测5组大鼠海马细胞及周围皮质凋亡情况，采用real time RT-PCR法检测两组大鼠海马及皮质iNOS、caspase-3表达。结果：对大鼠海马以及周边区域的iNOS、caspase-3的表达进行分析结果，给药组的iNOS、caspase-3表达水平下调2.59%，明显低于对照组的9.33%，差异有统计学意义。结论：TR对损伤的大鼠海马周围皮层神经元有保护作用，其机制可能部分与下调iNOS、caspase-3表达有关。
-
硫酸镍诱导体外大鼠睾丸间质细胞凋亡及其对c-kit和caspase-3基因表达的影响
目的 观察硫酸镍( NiSO4)诱导体外培养大鼠睾丸间质细胞凋亡及其c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白表达的变化,探讨镍致睾丸间质细胞损伤的可能机制.方法 体外提取和纯化大鼠睾丸间质细胞,用0、250、500和1 000μmol/L NiSO4分别处理睾丸间质细胞,染毒时间分别为6、12和24 h.采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测睾丸间质细胞的凋亡发生率,实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平.结果 (1) AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测结果显示,间质细胞凋亡主要发生于NiSO41000 μmol/L染毒12 h和NiSO4 250、500、l 000 μmol/L染毒24 h组.(2)实时荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,染毒6 h NiSO4 250 μmol/L、染毒12hNiSO4 250和500 μmol/L c-kit mRNA相对表达量上调(P＜0.05)；染毒24 h NiSO4 500和l 000 μmol/L c-kit mRNA相对表达量下降(P＜0.05).NiSO4各浓度和各时间组caspase-3 mRNA相对表达量均上调(P＜0.05).(3)Western blotting结果显示:与对照组比较,NiSO4各浓度c-kit蛋白表达逐渐减弱,caspase-3蛋白表达逐渐上调,主要见于NiSO41 000 μmol/L染毒6h以及NiSO4各浓度分别染毒12和24 h.结论 NiSO4可诱导体外大鼠睾丸间质细胞凋亡,且与基因c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白异常表达有关.
-
甲基苯丙胺对大鼠心肌细胞线粒体结构及Cytochrome C、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的影响
目的 研究甲基苯丙胺(MA)对大鼠心肌线粒体结构及Cytochrome C、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的影响作用.方法 采用MA(3 mg/kg)急、慢性体内给药方式染毒大鼠,电子显微镜观察心肌细胞线粒体结构,RT-PCR检测心肌Cytochrome C、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达水平.结果 急性MA中毒引起大鼠心肌线粒体轻度肿胀及Caspase-9 mRNA表达水平的上升,慢性MA中毒导致心肌细胞线粒体结构严重损伤,明显上调Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达水平,而急、慢性MA中毒对大鼠Cytochrome C mRNA表达水平无明显影响.结论 长期反复使用MA可破坏心肌线粒体结构,上调Caspese-9、Caspase-3 mRNA表达水平.线粒体诱导的凋亡通路可能是MA诱导心肌损伤的重要机制之一.
-
五味子甲素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响
目的 初步研究不同浓度的五味子甲素(Schisandra A,SchA)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP+)引起的SH-SY5Y细胞凋亡的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,1 mmol/L MPP+染毒同时分别给予1、3和5μmol/L SchA处理48 h,MuseTM细胞分析仪检测凋亡细胞数的变化;hoechst 33342染色后激光共聚焦显微镜进一步观察各组细胞形态的改变;Western-blot检测各组细胞中cleaved caspase-3蛋白表达水平的变化.结果 与对照组相比,1 mmol/L MPP+染毒48 h可引起SH-SY5Y细胞凋亡细胞数明显增多;1、3和5 μmol/L SehA干预可明显抑制1mmol/L MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,且随着SchA浓度的升高,凋亡细胞数明显减少.Western-blot实验结果显示,MPP+组细胞中cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高,而SchA于预组cleaved caspase-3蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 1 mmol/L MPP+可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,而一定浓度的SchA能有效抑制MPP+引起的SH-SY5Y细胞凋亡,且该作用可能是通过抑制caspase-3蛋白活化实现的.
-
相对定量2-△△CT法分析Caspase-3和Caspase-9在氟诱导大鼠肾脏中的表达
目的 检测caspase-3和caspase-9基因在氟诱导大鼠肾脏组织中的表达.方法 48只雄性SD大鼠分为4组(对照组、低氟组、中氟组和高氟组),每组12只,分别加入不同浓度的氟化钠染毒(0、50、100和200 mg/L).120 d后,处死大鼠,提取各组大鼠肾组织总RNA,实时荧光定量PCR法检测各染氟组caspase-3、caspase-9基因的表达,选择β-actin作为内参基因,使用相对定量2-△△CT法分析.结果 对照组和3个染氟组(低、中和高氟组)caspase-3基因表达量分别是1.01 ±0.01、1.41 ±0.68、2.31 ±0.95和2.69±0.49,其中中氟组和高氟组表达显著增高(P＜0.05).caspase-9的基因表达量分别是1.01±0.01、1.30±0.26、2.63±0.56和3.97±0.60,中氟组和高氟组表达显著增高(P＜0.01).结论 氟诱导大鼠肾脏后caspase-3和caspase-9基因表达增高,为氟中毒发病机制的研究提供一定的理论依据.
-
丙烯酰胺染毒小鼠海马组织结构和Caspase-3、GFAP表达的变化
目的 探讨丙烯酰胺染毒对雄性小鼠海马组织结构和Caspase-3、GFAP表达的影响。方法 健康雄性昆明种小鼠40只，随机分为正常对照组和低、中、高浓度3个剂量实验组，每组10只。对照组小鼠腹腔注射生理盐水；实验组小鼠分别代以5、30和60mg/(kg·d)丙烯酰胺水溶液腹腔注射。在10d时分别处死各组小鼠，快速取出海马，Zamboni固定液固定，石蜡包埋，常规制片，苏木素-伊红(HE)染色，Caspase-3和GFAP免疫组织化学染色，光学显微镜观察。结果 实验组小鼠海马同对照组相比显微结构未见明显改变。与对照组比较，各剂量组小鼠海马神经元Caspase-3阳性表达明显增强(P＜0.01)，但各剂量组间未见明显改变(P＞0.05)；各剂量组小鼠海马胶质细胞GFAP阳性表达明显增强(P＜0.01)，高剂量组表达较低、中剂量组增强(P＜0.05)。结论 丙烯酰胺染毒可造成小鼠海马神经元和神经胶质细胞损伤。
-
八氯代二苯并二噁英致小鼠肝脏病理损伤及Caspase-3的影响
目的 研究八氯代二苯并二噁英(OCDD)对C57 BL/6j雄性小鼠肝脏结构及Caspase-3表达的影响,探讨其对肝脏的毒性作用.方法 将40只7～8周龄SPF级雄性C57BL/6j小鼠按体重随机分为4组,分别为对照组(玉米油)和低(1.25×10-6 g/ml)、中(1.25×10-5g/ml)、高(1.25×10“g/ml)剂量OCDD染毒组,每组10只.采取灌胃方式进行染毒,染毒容量为8 ml/kg,1次/d,连续染毒30 d,染毒结束后观察肝脏体重比值的改变；HE染色观察肝脏的光镜结构；免疫组化法(SP法)检测肝脏组织中Caspase-3的表达.结果 染毒30 d后,小鼠肝脏的结构发生了改变,染毒剂量越大结构改变越明显；与对照组比较,各染毒组小鼠肝脏体重比值增加显著(P＜0.05)；与对照组比较,Caspase-3蛋白在中剂量组和高剂量组表达均增高(P＜0.05),其中高浓度组差异有显著统计学意义(P＜0.01),且染毒剂量与Caspase-3表达存在剂量-效应关系.结论 在本实验条件下,OCDD可导致小鼠肝脏损伤.
-
二乙氧基乙醇对大鼠睾丸生精细胞中Bax、细胞色素C和Caspase-3表达的影响
目的 研究二乙氧基乙醇(2-Ethoxyethanol,2-EE)对大鼠睾丸生精细胞中Bax,细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)以及Caspase-3表达的影响,探讨其在生精细胞凋亡调控中的作用.方法 选择Wistar大鼠,分别给予剂量400、800和1 200 mg/kg的2-EE,连续灌胃7 d,对照组以等量生理盐水灌胃,分别于末次染毒后第1和29天处死动物.采用免疫组化法(SP法),观察不同剂量染毒后及自然恢复4周后生精细胞中Bax,Cyt C以及Caspase-3的表达情况.结果 400、800和1 200 mg/kg染毒7 d后,大鼠睾丸生精细胞中Bax,Cyt C以及Caspase-3的表达水平不同程度的上升,尤其以800 mg/kg组为明显.自然恢复4周后,生精细胞中Bax,Cyt C以及Caspase-3的表达基本接近对照组水平.结论 在本试验条件下,2-EE急性染毒可能通过影响大鼠睾丸生精细胞中Bax,Cyt C和Caspase-3的释放,调控生精细胞凋亡,与2-EE所致睾丸毒性的可恢复性高度相关.
-
Caspase-3 shRNA对染铝神经细胞凋亡的干预
目的 通过体外实验来研究铝的神经毒性,探讨慢病毒载体Caspase-3 RNA于扰对染铝神经细胞凋亡的干预效果.方法 原代培养神经细胞,用AlCl3·6H2O染毒,选用病毒为载体的Caspase-3 shRNA试剂感染神经细胞,荧光标记感染成功的细胞计算神经细胞的感染效率,荧光定量PCR技术检测干预后Caspase-3基因的表达情况计算慢病毒载体的Caspase-3 shRNA的抑制率.光学显微镜、荧光染色观察神经细胞的形态学变化,并检测细胞活力；AnnexinV-PI双染法检测神经细胞感染后的凋亡坏死率.结果 慢病毒载体的Caspase-3 RNA干扰试剂的感染效率大于90％,抑制率为66.47％.用慢病毒载体的Caspase-3 shRNA感染原代培养神经细胞后可见染铝神经细胞活力显著上升(P＜0.01);吖啶橙(AO)-溴化乙啶(EB)双荧光染色法可以清楚地观察到染铝细胞的早期凋亡和晚期凋亡现象明显减少;Annexin V-PI双染法检测结果显示,感染后染铝神经细胞凋亡率显著降低(P＜0.01).结论 馒病毒载体的Caspase-3shRNA感染细胞后,可以显著抑制Caspase-3基因的表达,神经细胞活力明显增高,凋亡细胞的数量显著降低.
-
氟化钠对大鼠睾丸生精细胞Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响
目的 研究氟化钠对大鼠睾丸生精细胞Caspase-3和Caspase-9表达的影响,探讨其在生精细胞凋亡调控中的作用.方法 雄性Wistar大鼠,随机分为4组,对照组、低氟组、中氟组和高氟组,对照组饮去离子水,低氟组、中氟组和高氟组饮用分别含50、100和200 mg/L氟化钠去离子水.染毒120 d后处死动物.采用免疫组化法(SP法),观察不同剂量染毒后睾丸生精细胞中Caspase-3和Caspase-9的表达情况.结果 所有染氟组均观察到生精细胞凋亡和Caspase-3及Caspase-9表达的变化,50、100和200 mg/L染毒120 d后,大鼠睾丸生精细胞中Caspase-3和Caspase-9的表达水平不同程度的上升,尤其以200 mg/L组为明显.结论 本试验条件下,氟化钠可能通过影响大鼠睾丸生精细胞中Caspase-3和Caspase-9的释放,调控生精细胞凋亡.
-
橡胶防老剂N-异丙基-N'-苯基对苯二胺对人胚肺成纤维细胞的毒性和致细胞凋亡机制的研究
目的 初步探讨橡胶防老剂N-异丙基-N '-苯基对苯二胺(4010NA)对细胞的毒性和致凋亡作用及对caspase-3、caspase-8蛋白表达的影响.方法 以不同终浓度的4010NA(0、3、6、12、15和18 μg/ml)处理正常人胚肺成纤维细胞( HELF)24 h后,应用MTT(噻唑蓝)比色实验、Hoechst 33258染色实验、western blotting法观察细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和caspase-3、caspase-8的表达变化.结果 4010NA处理正常人胚肺成纤维细胞后,与阴性对照组比较,各剂量组的细胞生长抑制率和细胞凋亡/坏死率明显上升,并随着剂量的增加呈现剂量-反应关系,caspase-3、caspase-8的表达变化随剂量增加呈先增强后降低的趋势.结论 橡胶防老剂4010NA对正常人胚肺成纤维细胞有细胞毒性,在低浓度时导致细胞程序性凋亡,其机制是启动细胞外凋亡信号通路；高浓度时则可直接导致HELF细胞的坏死.
-
微波辐射对人胰腺癌JF305细胞增殖的抑制作用及其机制
目的 探讨不同强度,频率为2450 MHz微波辐射对人胰腺癌JF305细胞增殖的抑制作用及其机制.方法 分别以强度为2.5、5.0、10.0、15.0和20.0 mW/cm2的微波处理JF305细胞20 min,24 h后采用MTT法检测微波辐射后对细胞增殖的抑制情况,Annexin V-FITC和PI双染检测细胞凋亡,Caspase-3活性检测试剂盒检测辐射后细胞Caspase-3活性;Western blotting法检测细胞内Caspase-3和HSP 70蛋白表达量.结果 微波辐射作用JF305细胞后,细胞增殖活性明显受到抑制,细胞发生凋亡,随着辐射强度的提高,细胞凋亡率明显增加.随着辐射强度的增加,细胞内Caspase-3活性同对照组细胞相比呈上升趋势,差异具有统计学意义;细胞内Caspase-3和HSP 70蛋白表达水平也随着辐射强度的增加呈上升趋势.结论 微波辐射对人胰腺癌JF305细胞增殖具有抑制作用,其可能机制是通过改变细胞内的应激水平而引起细胞凋亡.
-
微波辐射对家兔心脏损伤及其机制的研究
目的 探讨不同强度微波辐射对家兔心脏的损伤作用及其机制.方法 分别以强度为50、100、150和200 mW/cm2,频率为2450 MHz微波照射家兔20 min,照射后6h,取家兔心脏,检测心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性,HE染色观察心脏组织结构的改变,Western blotting检测心肌细胞内Caspase-3和HSP 70蛋白表达量变化.结果 随着微波辐射强度的增加(100、150和200 mW/cm2),辐射组家兔心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性呈现降低趋势,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色结果显示,微波辐射组家兔心肌细胞轻度水肿,肌纤维排列不整,心肌细胞出现明显的损伤.Western blotting结果显示,微波辐射后心肌细胞内Caspase-3和HSP 70蛋由表达水平随着辐射强度的增加呈上升趋势(P＜0.05).结论 微波辐射对家兔心脏具有明显的损伤作用,其可能机制是通过改变心肌细胞内应激水平而引发细胞凋亡.
-
内源性神经肽会导致心肌缺血再灌注引起心肌损伤
目的:内源性神经肽对于大鼠心肌缺血再灌注引起的心肌损伤所产生的影响进行研究分析,以此来探讨内源性神经肽用于心肌缺血再灌注损伤的治疗用途.方法 40只健康无疾病的雄性大鼠40只,将大鼠均分为5组:假手术组S(只穿线,不结扎冠状动脉)、缺血再灌注组IR(静脉给予生理盐水)、不同浓度[(10-11) mol/kg,(10-10)mol/Kg和(10-9)mol/kg]神经激肽-1(NK1)受体拮抗剂([D-Arg1,D-Phe5,D-Trp7,9,Leu11]-SubstanceP,D-SP)组.缺血再灌注组和各给药组均结扎冠状动脉左前降支30min,然后松开结扎线再灌120 min,按1μl/g剂量于再灌前5min给药.用分光光度法检测各组Caspase-3活性；用TTC法及BI-2000医学图像分析系统测定缺血面积和梗死面积.结果 (1)S组比IR组的Caspase-3活性要低,D-SP10-10组升高24％；(2)IR组缺血面积较少,其余组均呈现升高的状态.结论内源性神经肤能够对患者的心肌起到保护作用,降低因为缺陷损伤再灌注所导致的细胞凋亡和损伤.
-
茵栀黄口服液对昆明小鼠F1代的安全性实验
目的:探讨茵栀黄口服液对昆明鼠F1代仔鼠的安全性.方法:将昆明鼠随机分为3组,空白对照组(饮水中无茵栀黄口服液),15％茵栀黄口服液组(饮水中含有15％的茵栀黄口服液),30％茵栀黄口服液组(饮水中含有30％的茵栀黄口服液).分娩结束后,清点各组分娩仔鼠的数量,进行统计学分析.分离解剖仔鼠的主要组织脏器,制备石蜡切片,经染色后在显微镜下观察有无脏器畸形和病理学改变.用western blot方法检测分娩后胎盘组织的凋亡信号caspase-3是否改变.结果:研究发现茵栀黄口服液高剂量及低剂量组均不能引起仔鼠的数量改变和外观上的畸形,也不能引起仔鼠的心、肝、脾、肺、肾的结构改变或病理学改变.茵栀黄口服液处理各组胎盘组织凋亡酶caspase-3的表达与对照组相比没有统计学差异.结论:茵栀黄口服液无致流产的副作用,对昆明鼠孕鼠及F1代仔鼠安全.
-
米非司酮对人早孕不同时期绒毛组织病理结构及survivin、caspase-3表达的影响
目的:观察米非司酮对早期妊娠妇女绒毛组织病理结构改变及对凋亡抑制基因survivin和半胱氨酸蛋白酶家族成员caspase-3表达的影响,探讨米非司酮抗早孕作用的机制.方法:选取2011年5月1日～2011年6月30日在天津医科大学总医院计划生育门诊自愿要求终止早孕的妇女60例,其中妊娠40 ～ 49d 30例,随机分对照A组和观察A组,每组各15例；妊娠50 ～ 63d 30例,随机分对照B组和观察B组,每组各15例.两对照组常规行负压吸宫术终止妊娠,两观察组在行负压吸宫术前48h开始服用米非司酮50mg,间隔12h后服25mg,连服2d,总计150mg.收集4组绒毛组织,常规HE染色后镜下观察绒毛组织细胞增生结节数及免疫组织化学法检测survivin及caspase-3的表达情况.结果:①对照组绒毛细胞增生结节数高于观察组(P＜0.05),对照A组与对照B组比较,观察A组与观察B组比较,绒毛滋养细胞增生结节数无统计学差异(P均＞0.05).②对照组与观察组绒毛组织中滋养层细胞胞浆和胞核survivin均表达阳性,但观察组表达强度低于对照组(P＜0.05).对照A组与对照B组比较,观察A组与观察B组比较,survivin的表达强度无统计学差异(P均＞0.05).③对照组与观察组绒毛组织滋养层细胞胞浆中caspase-3均表达阳性,但对照组表达强度低于观察组(P＜0.05),观察A组与B组表达无统计学差异(P＞0.05).结论:米非司酮抑制绒毛组织滋养层细胞增生结节的形成,抑制survivin的表达,促进caspase-3的表达,使细胞促凋亡系统占优势,胎囊组织无法存活,从而实现抗早孕的目的.150mg米非司酮用于终止50 ～ 63d早孕与终止≤49d早孕效果相近.
-
复方血栓通胶囊对光损害模型大鼠的疗效观察
目的:探讨复方血栓通胶囊对实验性光损害大鼠模型的治疗作用.方法:32只SD大鼠随机分为四组:血栓通组、模型组,正常组和VitE组.采用手术显微镜光源(LUX为30,000±50)照射SD大鼠右眼,照射时间为30min,建立急性光损伤模型.血栓通组采用复方血栓通胶囊、VitE组采用VitE滴丸进行灌胃治疗,疗程7天,其余组灌服等量蒸馏水.观察指标为细胞凋亡率、Caspase-3活力、NO含量变化及视网膜外核层厚度改变.结果:经过治疗,相对于模型组而言,复方血栓通胶囊可以明显降低视网膜细胞的凋亡率,有效地抑制细胞凋亡中的关键酶-Caspase-3蛋白酶的活力,还可一定程度减缓视网膜外核层厚度的改变,对具有细胞毒性和氧化作用的N0也有较强的降低作用.与抗氧化剂VitE相比,复方血栓通胶囊的疗效要优于前者.结论:复方血栓通胶囊是一种治疗视网膜光损害性疾病的有效的中药复方制剂.
-
Livin、XIAP和Caspase-3在胃癌组织中的表达及临床意义
目的：研究凋亡相关蛋白Livin、XIAP和Caspase-3在胃癌中的表达水平，分析其与胃癌发生的相关性。方法：TUNEL染色检测细胞凋亡，免疫组化方法检测Livin、XIAP和Caspase-3蛋白的表达。结果：胃癌组织的凋亡指数明显低于正常组织和癌旁组织(P＜0.05)。Livin、XIAP 在胃癌组织的表达明显高于正常组织和癌旁组织(P＜0.05)，而Caspase-3的表达显著低于正常组织和癌旁组织(P＜0.05)。Livin、XIAP和Caspase-3的表达与胃癌的淋巴转移有关(P＜0.05)。结论：Livin、XIAP和Caspase-3与胃癌密切相关，可作为胃癌发展和预后判断的参考指标。
-
哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡与Caspase-3及Bcl-2基因家族的关系
目的:探讨哇巴因凋亡诱导Jurkat细胞凋亡的机制.方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用;应用流式细胞术、原位末端标记技术(TUNEL)等观察细胞凋亡;应用Western-blot测定Caspase-3的活性亚单位及Bcl-2、Bax蛋白表达水平;比色法检测Caspase-3活性.结果:哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡,细胞凋亡过程中,Bax蛋白表达增加,Caspase-3活性明显升高.结论:结论:哇巴因可能通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达从而激活Caspase途径诱导Jurkat细胞凋亡.
